全 文 ：步行功能障碍的影响。方法 采用雄性 SD 大鼠，体质量
280 ～320 g，110只，随机分为 5 组:假手术组;脑缺血模型组;
脑缺血模型 +开心散低剂量组(4 g·kg －1) ;脑缺血模型 +开
心散高剂量组(8 g·kg －1)。根据 Longa报道的线栓法建立大
鼠永久性脑缺血模型。造模手术结束，待动物完全清醒后灌
胃给药。假手术组和模型组均给予相应体积的纯净水;给药
组分别给予高剂量和低剂量的开心散中药复方，连续 5 周，
给药结束后处死动物并取材。动物造模给药后第 4w进行水
迷宫测试，动物造模给药后分别在 1，2，3，4 周和 5 周进行
步态实验。结果 水迷宫结果发现，模型组大鼠在定位航行
实验第 1 ～ 5 天总游程明显大于正常组，开低组总游程与模
型组相比无显著性差异，开高组第 4，5 天总游程较模型组明
显缩短;模型组大鼠在定位航行实验第 1 ～ 5 天总时间明显
大于正常组，开低组总时间与模型组相比无显著性差异，开
高组第 2 ～ 5 天总时间与模型组相比明显缩短;模型组大鼠
在定位航行实验第 1 ～ 5 天目标象限游程比率明显小于正常
组，开低组在实验第 4，5 天目标象限游程比率较模型组有明
显增加，开高组在第 5 天有所改善;模型组大鼠在定位航行
实验第 1 ～ 5 天目标象限时间比率明显小于正常组，开低组
第 4，5 天目标象限时间比率较模型组有明显增加，开高组在
第 5 天有所改善;模型组大鼠在空间探索实验中模型组大鼠
与正常组比较，总游程明显增加，目标象限游程、目标象限时
间明显缩短，目标象限游程比率、目标象限时间比率明显降
低;开低组与开高组目标象限游程、目标象限时间、目标象限
游程比率、目标象限时间比率与模型组比较明显增加。步态
分析结果发现与假手术组相比，模型组动物 97 种步态参数
中的 70 余种发生了显著性的变化，而给予开心散后可对其
中的 43 种指标产生明显的改善作用，比如模型组动物步行
速度在各观察点均显著下降，给予高剂量开心散 2，4，5 周，
低剂量开心散 2，3，5 周后均可显著增加其步行速度;模型
组在各观察点右前-左后对侧协调性指数均显著升高，给予
高低剂量开心散后第 2，3 周均可显著降低对侧协调性;模型
组动物左后足迹平均强度在各观察点均显著增加，开心散高
剂量组在给药后第 2，3，4 周，开心散低剂量组在给药后第
3，4，5 周均有明显的改善作用;模型组动物左后摆动时相
在前 4 周均显著下降，给予高剂量开心散后第 2，3，4 周均
可显著增加摆动时相，给予低剂量开心散后第 3，4 周可显著
增加摆动时相;模型组动物绝对值平均体转角在除第 3w 外
的各观察点均显著增加，尤其是在疾病前期(造模后 1 周)差
异非常显著，此时可以看到开心散高剂量组有显著的改善作
用，而在之后可能由于模型组的在此指标上自愈能力明显，
药物的改善作用则体现不明显，说明绝对值平均体转角是疾
病急性期及前期评价药物疗效较为敏感的行为学评价指标。
结论 局灶性脑缺血模型大鼠认知和步行功能均出现严重
障碍，中药复方开心散对两者显著的改善作用是其多途径发
挥复方药理作用的重要基础。
关键词:步态分析;水迷宫;脑缺血;开心散
“重大 新 药 创 制”科 技 重 大 专 项“十 一 五”课 题
(2009ZX09502-014 ) ;国 际 科 技 合 作 与 交 流 专 项
(2011DFA32730)
人参皂苷对传统抗癫痫药物的药效改良和减毒作用
乔 慧，郭 欣，陆梦莎，连晓媛
(浙江大学药学院，浙江 杭州 310058)
摘要:传统抗癫痫药物在控制癫痫发作中扮演着不可缺少
的角色，但具有多种本身无法避免的缺陷包括药效局限和毒
副作用，特别是毒副作用尤其是认知毒性严重降低患者的工
作和学习能力，可见弥补传统抗癫痫药物的药效局限并克服
其毒副作用对癫痫治疗具有重要意义。我们已有研究证明，
人参皂苷具有显著的抗癫痫和神经保护作用。本研究进一
步探索了人参皂苷与传统抗癫痫药物联合应用能否产生较
各自更优良的抗癫痫药效，并降低传统抗癫痫药物的毒副作
用。首先用戊四氮诱导的小鼠急性癫痫模型观测了人参皂
苷对常用一线抗癫痫药物包括拉莫三嗪、苯妥英钠、卡马西
平和丙戊酸钠的增效作用，结果发现人参皂苷可非常显著地
增强拉莫三嗪的抗癫痫活性，表现为延长癫痫发作潜伏期、
降低癫痫发作级别和大发作发生率，但对其它 3 种抗癫痫药
物的抗癫痫作用未见显著加强作用。用异烟肼小鼠急性癫
痫模型和硫代氨基脲小鼠急性癫痫模型进一步证实了人参
皂苷对拉莫三嗪的抗癫痫增效作用。具体表现为，对于主要
抗癫痫指标包括癫痫发作潜伏期、癫痫发作级别和大发作发
生率，人参皂苷联合拉莫三嗪组均显著优于模型组、人参皂
苷组和拉莫三嗪组;于硫代氨基脲小鼠急性癫痫模型，对人
参皂苷和拉莫三嗪的协同作用进行定量分析，发现二者协同
抗癫痫指数(CI值)为 0． 34302，表明人参皂苷和拉莫三嗪具
有非常显著的协同抗癫痫作用。在人参皂苷对拉莫三嗪和
苯妥英钠的减毒研究中获得预期研究结果:与临床上传统抗
癫痫药物的毒副反应高度一致，拉莫三嗪可导致显著的皮炎
和运动毒性，苯妥英钠和拉莫三嗪均能明显降低学习记忆能
力;人参皂苷对拉莫三嗪引起的运动毒性、学习记忆能力降
低和皮炎以及苯妥英钠引起的学习记忆能力降低均有非常
显著的改善作用。以上研究结果提示，人参皂苷在加强拉莫
三嗪的抗癫痫作用及降低传统抗癫痫药物的毒副作用方面
具有广泛的应用前景。
瓜子金皂苷丙对MPP +诱导 PC12 细胞凋亡的抑制作用
吴苗苗1，2，苑玉和1，胡金凤1，陈乃宏1
(1． 中国医学科学院药物研究所，北京 100050;2． 天津中
医药大学，天津 300193)
摘要:目的 观察瓜子金皂苷丙对 MPP +诱导的 PC12 细胞
凋亡的影响，并且探讨其作用机制。方法 采用 MTT 法检
测细胞存活率，碘化丙啶染色流式细胞术(FCM)检测 PC12
细胞凋亡，Western blotting检测 Bax和 Bcl-2 蛋白的表达，罗
丹明 123 染色 FCM检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm) ，荧光酶
标仪检测细胞内活性氧(R0S)的含量。结果 不同浓度
MPP +作用 PC12 细胞 24 h 后，细胞存活率显著下降(P ＜
0． 01) ，细胞凋亡明显，凋亡相关蛋白 Bcl-2 /Bax比之下降，线
粒体膜电位降低，细胞内 ROS显著增加。与 MPP +处理组相
·624· 中国药理学与毒理学杂志 2012 年 6 月第 26 卷第 3 期 Chin J Pharmacol Toxicol，Vol 26，No 3，Jun 2012
比，瓜子金皂苷丙 10 μmol·L －1组，细胞存活率显著升高
(P ＜ 0． 01) ;细胞凋亡率下降(P ＜ 0． 01) ;Bcl-2 /Bax 比率增
加(P ＜ 0． 01) ，线粒体膜电位上升(P ＜ 0． 01) ，ROS 含量减
少。结论 瓜子金皂苷丙可以抑制 MPP +诱导的 PC12 细胞
凋亡，其作用机理可能与上调 Bcl-2 和下调 Bax蛋白的表达，
维持线粒体正常膜电位，稳定线粒体功能，清除 R0S有关。
关键词:瓜子金皂苷丙;1-甲基-4-苯基-吡啶;细胞凋亡;活
性氧;帕金森病
国家创新药物重大专项 (2008ZX09101，2009ZX09303，
2009ZX09301 和 2009ZX09303) ;国家自然科学基金广东自
然科 学 联 合 基 金 (U0832008) ;国 家 自 然 科 学 基 金
(30973887，81073078 和 81073130)
陈乃宏，E-mail:chennh@ imm． ac． cn
奖励性操作条件反射在东莨菪碱致学习记忆障碍中的应用
陈铃铃1，2，石 哲1，何怡然1，2，金 剑1，3，刘新民1，
曾建国2
(1． 中国医学科学院药用植物研究所，北京 100193;2． 湖
南中医药大学，湖南 长沙 410208;3． 中国医学科学院实
验动物研究所，北京 100021)
摘要:目的 为学习记忆行为研究和益智药物筛选提供新
的实验方法。方法 采用不同剂量东莨菪碱腹腔注射制作
学习记忆障碍模型，分别对各组动物进行奖励性条件反射训
练、奖励性操作式条件反射测试和 Morris 水迷宫检测大鼠学
习记忆能力。结果 在奖励性条件反射训练中，东莨菪碱模
型组与对照组比较鼻触次数、踏板次数、鼻触正确率显著降
低(P ＜ 0． 01) ，东莨菪碱两剂量组间比较各指标无差异。在
奖励性操作条件反射测试中，腹腔注射东莨菪碱 1． 5 mg·
kg －1与对照组比较无差异，腹腔注射东莨菪碱 3． 0 ml·kg －1
模型组与对照组比较，踏板次数(LP)、奖赏获得次数(R)、踏
板正确率(P)显著降低(P ＜ 0． 01) ，鼻触次数无明显差异。
在 Morris水迷宫试验中，腹腔注射东莨菪碱 1． 5 和 3． 0 ml·
kg －1东莨菪碱模型组与对照组比较，逃避潜伏期和游程路程
明显延长(P ＜ 0． 01)。结论 LP，R，P 指标表明东莨菪碱
1． 5 mg·kg －1对动物操作条件反射记忆获得有影响，对已形
成的操作条件反射记忆巩固无显著影响，腹腔注射东莨菪碱
3． 0 mg·kg －1对大鼠学习记忆获得和巩固有显著影响;奖励
性操作式条件反射方法是一种较好的评价学习记忆的方法。
关键词:奖励性操作条件反射;东莨菪碱;水迷宫;学习记
忆;大鼠
国家自然科学基金面上项目(30973888) ;科技部对欧合作专
项(0901) ;国家航天医学与基础应用重点实验室开放课题
(SMFA12B05)
从两种促智药的研究结果看学习记忆信号转导途径的类型
和特点以及实验中应注意的几个关键问题
张均田，胡金凤
(中国医学科学院协和医科大学药物研究所，北京 100050)
摘要:本文报导了左黄皮酰胺和人参皂苷 Rg1 的促智信号
转导途径的研究结果，为两种药的促智作用提供了解释，并
了解了学习记忆信号转导途径的一些特点，得出以下几点看
法:① 找出靶受体十分重要，它决定信号转导的启动和导
向。② 明确核转录因子及其转录表达的基因产物是什么?
可否解释长记忆的形成和 LTP的诱导与维持。③ 药物作用
的靶受体大多是受体，也可能是离子通道或脑外酶。④ 药
物可直接作用于受体，也可能间接地，即通过释放神经递质
或其他内源性物质再作用于靶受体。⑤ 靶受体有可能是一
个，也有可能是两个互补发挥作用。⑥ 药物激活的信号转
导途径往往不只一种而可能是多种。这是因为脑内信使之
间的交流、对话十分广泛，已形成纵横交错的网络，上游一个
信号分子特别是蛋白激酶激活后，便可激活下游许多信号分
子。⑦ 信号转导研究中使用拮抗剂、抗体十分有用，不但可
反证信号转导途径的正确，有时用于寻找靶受体事倍功半。
本文最后分析了中枢神经系统疾病是如何干扰学习记
忆信号转导，引起认知障碍的，应采取什么样的防治策略也
进行了讨论。
CH03 对脑缺血再灌大鼠 BBB 的保护作用及其机制的初步
研究
牛 非，胡金凤，孙 凤，宋修云，宋连昆，陈乃宏
(1． 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所，北京
100050)
摘要:目的 探讨 CH03 对 MCAO 模型大鼠 BBB 的保护作
用及其机制，以期寻找有效的治疗中风的药物及相关靶点。
方法 采用大脑中动脉内线栓法建立 MCAO脑缺血模型，通
过伊文氏蓝渗漏法观察 BBB 通透性、利用电镜观察神经血
管单元的超微结构，从形态学和结构上考察了 CH03 对缺血
后 BBB 损伤的保护作用;采用 WB，RT-PCR 和免疫组化对
BBB组成中内皮细胞间的紧密连接、星形胶质细胞和基膜进
行检测;并采用 ELISA试剂盒对脑缺血后炎症级联反应及继
发的自由基进行检测。结果 EB 渗漏实验结果表明，模型
组 BBB通透性显著增加，CH03 各剂量组明显逆转这一作用
(P ＜ 0． 01) ;电镜观察皮层神经血管单元的超微结构表明，
CH03 中、高剂量组能够显著减轻神经元固缩，胞质、胞核电
子密度显著降低，星形胶质细胞足突的肿胀、内皮细胞的反
应性增大及毛细血管变形减轻;染色结果显示，CH03 中、高
剂量组显著降低水通道蛋白-4(AQP4)、增加闭锁小带蛋白
(ZO-1)和咬合蛋白的表达(P ＜ 0． 01) ;RT-PCR 和免疫荧光
技术观察到 CH03 各剂量组均可逆转脑缺血再灌引起的基
质金属蛋白酶-9(MMP9)的表达增加，并且 MMP9 与神经元
特异性核蛋白(NeuN)共定位。ELISA 检测炎性因子结果表
明，CH03 各剂量组可明显降低 TNF-α、增加 IL-10 的表达;增
加组织总谷胱甘肽过氧化物酶、总超氧化物歧化酶和总过氧
化物酶活性，降低丙二醛(MDA)的含量。提示 CH03 对 BBB
·724·中国药理学与毒理学杂志 2012 年 6 月第 26 卷第 3 期 Chin J Pharmacol Toxicol，Vol 26，No 3，Jun 2012