全 文 ：收稿日期:2011-06-03
基金项目:国家自然科学基金项目(30973940) ;江苏政府留学奖学金资助(JS-2009-061) ;江苏高校优势学科建设工程资助项目(YSXK-
2010)
作者简介:李征军，硕士生，研究方向:中药炮制。Tel:15250980738，E-mail:lizhengjun404@ 126． com
* 通信作者:张 丽(1971—) ，教授，硕士生导师，研究方向:中药炮制与质量控制。Tel:(025)85811519，E-mail:
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
zhangli@ njutcm． edu． cn
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［饮片炮制］
甘遂不同炮制品中二萜类成分的变化研究
李征军， 李 媛， 高 兰， 丁安伟， 张 丽*
(南京中医药大学 江苏省方剂研究重点实验室，江苏 南京 210046)
摘要:目的 比较甘遂炮制前后各炮制品中二萜类成分甘遂萜酯 B 和甘遂萜酯 A 含有量的变化，以期揭示上述成分与
甘遂醋炙减毒作用的关联性。方法 采用 HPLC法测定甘遂各炮制品中二萜类成分甘遂萜酯 A、甘遂萜酯 B，以 X Terre
RP C18色谱柱(4． 6 mm × 150 mm，5 μm)为固定相;流动相为甲醇(A)-水(B)二元梯度洗脱，体积流量 1． 0 mL /min，检测
波长 235 nm，柱温 38 ℃。结果 假白榄烷型二萜类成分甘遂萜酯 A和甘遂萜酯 B经炮制后均有所降低，其质量分数高
低顺序为生品 ＞清炒品 ＞醋润品 ＞醋炙品。结论 甘遂醋炙前后甘遂萜酯 A 与甘遂萜酯 B 的含有量变化与甘遂醋炙
减毒有一定的关联性。
关键词:甘遂萜酯 B;甘遂萜酯 A;二萜;甘遂;醋甘遂
中图分类号:R283 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2011)12-2122-04
Change of diterpenoids in different processed products of Euphorbia kansui
LI Zheng-jun， LI Yuan， GAO Lan， DING An-wei， ZHANG Li*
(Nanjing University of Chinese Medicine，Jiangsu Provincial Key Laboratory for Traditional Chinese Medicine Formulae Research，Nanjing 210046，China)
ABSTRACT:AIM To compare the contents change of kansuinine B and kansuinine A in Kansui Radix before
and after being processed with vinegar，and to reveal the correlation between the composition and detoxication of
Kansui Radix stir-frying with vinegar． METHODS HPLC was used to detect the contents of kansuinine B and
kansuinine A with X Terre RP C18 column (4． 6 mm ×150 mm，5 μm)． The mobile phase was gradient eluant of
methanol and H2O with the flow rate 1． 0 mL /min，and the detection wavelength was set at 235 nm and with col-
umn temperature of 38 ℃ ． RESULTS The contents of kansuinine A and kansuinine B decreased after being pro-
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cessed with vinegar，their contents from high to low was as follows:the crude Kansui Radix，simple stir-frying Kan-
sui Radix，Kansui Radix infiltrated with vinegar，Kansui Radix stir-frying with vinegar． CONCLUSION The
contents change of kansuinine A and kansuinine B may point out that there is a certain correlation between terpe-
noids contents and detoxication of vinegar-preparation．
KEY WORDS:kansuinine B;kansuinine A;diterpenoids;Kansui Radix;Kansui Radix stir-frying with vinegar
甘遂为大戟科大戟属植物甘遂 Euphorbia kansui
T． N． Liou ex T． P． Wang 的干燥块根［1］，具有泻水
逐饮的功效。其味苦，性寒，有毒，生品仅限外用，内
服必须炮制。历版中国药典均采用醋炙来降低甘遂
毒性，但有关其醋炙减毒的物质基础研究报道相对
较少。研究表明，甘遂中的二萜类成分为其毒效部
位［2-4］，其中的假白榄烷型二萜类成分甘遂萜酯 A
和甘遂萜酯 B除具有一定的抗癌［5］及镇痛作用［6-7］
外，尚具有一定的致炎毒性［8-9］，因此，本实验以假白
榄烷型二萜类成分甘遂萜酯 B 和甘遂萜酯 A 为指
标，考察甘遂醋炙各操作程序对上述二萜类成分的
影响，以期揭示上述成分与甘遂醋炙减毒作用的关
联性。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 Waters 515 高效液相色谱仪配 Waters
2996DAD检测器，Waters717 自动进样器，Empower
色谱工作站(美国沃特斯公司) ，AY220 型电子天平
(精确到 0． 1 mg)、Sartorius BP211D型电子天平(精
确到 0． 01 mg) ，高速万能粉碎机(天津泰斯特)。
1． 2 试药 甘遂药材采自陕西宝鸡赤沙乡，经南京
中医药大学王春根教授鉴定为大戟科 Euphorbiaceae
植物甘遂 Euphorbia kansui T． N． Liou ex T． P． Wang
的干燥块根。甘遂生品(取生甘遂数个，大小分档，
打粉) ;甘遂清炒品(取生甘遂数个，将炒锅加热到
260 ℃左右，不断翻炒，9 min 后出锅，放凉，打粉) ;
甘遂醋润品(取生甘遂数个，大小分档，加醋拌匀，
闷透，待醋被吸尽后，晾干，打粉) ;甘遂醋炙品(取
生甘遂数个，大小分档后，用 30 %量米醋拌匀，闷
透，待醋被充分吸尽后，晾干，置已加热到 260 ℃的
炒锅中，不断翻炒，9 min后取出，放凉，打粉)。
对照品甘遂萜酯 B(自制，纯度经 HPLC 归一化
法测定为 98． 35%)和甘遂萜酯 A(自制，纯度经
HPLC归一化法测定为 98． 28%) ，甲醇为色谱纯，水
为重蒸水。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 X Terre RP C18色谱柱(4． 6 mm ×
150 mm，5 μm) ;甲醇(A)-水(B)二元梯度洗脱;体
积流量 1． 0 mL /min;检测波长 235 nm;柱温 38 ℃;
进样量 20 μL。梯度流程见表 1，色谱图见图 1。
表 1 流动相梯度洗脱表
Tab． 1 The gradient elution
时间 /min 甲醇 /% 水 /%
0 57 43
23 57 43
28 95 5
37 95 5
42 57 43
48 57 43
图 1 甘遂萜酯 B和甘遂萜酯 A混合对照品与各样品 HPLC图
Fig． 1 HPLC Chromatograms of kansuinine B，kansuinine A and samples
A． 甘遂萜酯 B和甘遂萜酯 A对照品 B． 甘遂各样品 1． 甘遂醋润品 2． 甘遂醋炙品 3． 甘遂生品 4． 甘遂清炒品 a． 甘遂萜脂 B b．
甘遂萜脂 A
A． mixed standards B． samples 1． Kansui Radix infiltrated with vinegar 2． Kansui Radix stir-baked with vinegar 3． the crude Kansui Radix 4．
Kansui Radix stir-baked a． kansuinine B b． kansuinine A
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2． 2 对照品溶液的制备 取 50 °C 减压干燥至恒
定质量的甘遂萜酯 B、甘遂萜酯 A各约 10 mg，精密
称定，分别置 10 mL 量瓶中，加甲醇溶解并定容，得
质量浓度为 1． 056 mg /mL的甘遂萜酯 B、1． 078 mg /
mL的甘遂萜酯 A对照品贮备液。再分别精密吸取
上述对照品贮备液适量，加甲醇制成每 1 mL分别含
甘遂萜酯 B 为 0． 211 2 mg，甘遂萜酯 A 为
0． 215 6 mg的混合对照品溶液。
2． 3 供试品溶液的制备 取甘遂各炮制品中粉
(过 65 目筛)约 0． 5 g，精密称定，置 50 mL具塞锥形
瓶中，精密加入甲醇 10 mL，称定质量，超声处理(功
率 250 W，频率 50 kHz)30 min，再次称定，以甲醇补
足损失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2． 4 线性关系考察 精密吸取上述混合对照品溶
液 4、8、16、24、32、40 μL，按 2． 1 项下色谱条件进样
测定，以峰面积 Y 为纵坐标，对照品浓度 X 为横坐
标，绘制标准曲线。得甘遂萜酯 B 回归方程:Y =
136 351． 657X － 68 482． 043 8 (r = 0． 999 5) ;甘遂萜
酯 A回归方程为 Y = 84 086． 871 3X － 47 055． 175 34
(r = 0． 999 5)。结果表明甘遂萜酯 B 在 0． 844 8 ～
8． 448 μg范围内呈良好的线性关系;甘遂萜酯 A 在
0． 862 4 ～ 8． 624 μg范围内呈良好的线性关系。
2． 5 精密度考察 精密吸取混合对照品溶液 8
μL，重复进样 6 次，按 2． 1 项下色谱条件，测定峰面
积，结果甘遂萜酯 B、甘遂萜酯 A 的 RSD 分别为
2． 6%和 2． 8%，表明本法精密度良好。
2． 6 重复性试验 精密称取甘遂醋炙品约 0． 5 g，
平行 6 份，按照 2． 3 项方法制备供试品溶液，依法测
定，得甘遂醋炙品中甘遂萜酯 B 和甘遂萜酯 A 的
RSD分别为 2． 3%和 1． 9 %。结果表明该方法重复
性良好。
2． 7 稳定性试验 取同一甘遂醋炙品供试品溶液，
分别于 0、2、4、6、8 h进样 20 μL测定，得甘遂萜酯 B
与甘遂萜酯 A 峰面积的 RSD 分别为 0． 4% 和
0． 7%。表明供试液中甘遂萜酯 B与甘遂萜酯 A在 8
h内稳定性较好。
2． 8 加样回收率试验 精密称取已知含有量的醋
炙甘遂粉末 6 份，每份 0． 25 g，精密加入 1 mL 混合
对照品溶液，按 2． 3 项制成供试品溶液，依法测定，
计算回收率。得甘遂萜酯 B 的加样回收率为
100． 2 %，RSD为 0． 9%;甘遂萜酯 A 的加样回收率
为 102． 7%，RSD为 0． 6%。
2． 9 样品测定 取甘遂各炮制品，按 2． 3 项下供试
品溶液的制备方法依法制备，以平均峰面积，采用标
准曲线法利用回归方程计算甘遂萜酯 A 和甘遂萜
酯 B的量，测定结果见表 2。
表 2 甘遂各不同炮制品中甘遂萜酯 B和甘遂萜酯 A测定结果 (n =3)
Tab． 2 Determination of kansuininA and kansuinine B in different processed products of Euphorbia kansui (n =3)
炮制品
KB
/(mg /g)
KB平均量
/(mg /g)
RSD /%
KA
/(mg /g)
KB平均量
/(mg /g)
RSD /%
0． 836 6 0． 921 3
生品 0． 814 3 0． 827 2 1． 40 0． 910 3 0． 917 1 1． 54
0． 830 6 0． 919 7
0． 764 6 0． 837 6
加热品 0． 781 2 0． 780 7 2． 04 0． 862 6 0． 857 2 0． 64
0． 796 4 0． 871 3
0． 778 1 0． 806 1
醋润品 0． 752 9 0． 766 2 1． 65 0． 802 7 0． 804 9 0． 24
0． 767 5 0． 805 9
0． 688 0 0． 762 3
醋炙品 0． 714 5 0． 702 9 1． 93 0． 793 8 0． 780 3 1． 78
0． 706 1 0． 784 8
3 讨论
实验结果表明，假白榄烷型二萜类成分甘遂萜
酯 A和甘遂萜酯 B 经炮制后含有量均有所降低，其
高低顺序均为:生品 ＞清炒品 ＞醋润品 ＞醋炙品，结
合甘遂萜酯 A和甘遂萜酯 B 的致炎毒性，推测甘遂
醋炙前后二萜类成分的质量分数变化与甘遂醋炙减
毒有一定关联性。
甘遂因其毒性，所以历代及历版中国药典均炮
制以降低其毒性，亦有醋炙工艺的相关文献［10］及醋
炙减毒机理的初步探讨［11］，但其炮制减毒机制迄今
尚未完全清晰。文献研究表明［12-13］，甘遂醋炙前后
化学成分有所变化，但相关变化成分的具体量变尚
不十分清晰，本实验通过对甘遂各炮制品中假白榄
烷型二萜类成分甘遂萜酯 A 和甘遂萜酯 B 炮制前
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后量的差异分析，考察了甘遂醋炙过程中清炒和醋
润两个炮制程序对其所含假白榄烷型二萜类成分的
影响，实验结果表明清炒和醋润两个炮制程序均会
引起二萜类成分甘遂萜酯 A 和甘遂萜酯 B 含有量
的降低，二者在甘遂醋炙过程中可能起一定的协同
作用，上述实验结果为后续甘遂醋炙减毒物质基础
的深入研究奠定了基础。
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HPLC法测定茜草及不同炮制品中大叶茜草素
杨宇婷， 康文艺*
(河南大学中药研究所，河南 开封 475004)
收稿日期:2011-05-12
基金项目:河南省科技厅重点项目(102102310019)
作者简介:杨宇婷(1987—) ，女，硕士生，研究方向:中药化学与质量分析。Tel:15993336807，E-mail:beautyting324@ 126． com
* 通信作者:康文艺，副教授。Tel: (0378)3880680，E-mail:kangweny@ hotmail． com
摘要:目的 测定茜草及炮制品中大叶茜草素。方法 Purospher STAR RP-18 柱(4． 6 mm × 250 mm，5 μm) ;流动相为甲
醇-水-四氢呋喃(90 ∶ 9． 3 ∶ 0． 7) ;体积流量 1． 0 mL /min;检测波长 250 nm;柱温 25 ℃。结果 茜草生品中大叶茜草素的
质量分数为 0． 52%，炒茜草为 1． 07%，茜草炭为 0． 66%。结论 不同的炮制方法对大叶茜草素的量产生不同的影响。
关键词:HPLC;茜草;炮制;大叶茜草素
中图分类号:R284． 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2011)12-2125-03
Determination of rubimaillin contents in Rubia Cordifolia L and different pro-
cessed products by HPLC
YANG Yu-ting， KANG Wen-yi*
(Institute of Chinese Materia Medica，Henan University，Kaifeng 475004，China)
KEY WORDS:HPLC;Rubia cordifolia L．;processing;rubimaillin
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