全 文 ：＊通讯作者
文章编号:1007-4287(2009)02-0208-03
小扁豆凝集素结合型甲胎异质体在肝癌诊断中的意义
卓传尚＊ ,柳丽娟 ,吴秋芳
(福州市传染病医院 ,福建 福州 350025)
摘要:目的　探讨小扁豆凝集素结合型甲胎蛋白异质体(AFP-L3)在良恶性肝病鉴别诊断的临床价值。方法　应
用装有耦联了小扁豆凝集素(LCA)的微量离心柱分离 185 例肝病患者的 AFP-L3 , 用时间分辨荧光免疫检测血清 AFP
和 AFP-L3 含量 , 计算AFP-L3%。结果　肝细胞癌患者的 AFP-L3%明显高于其他肝病患者(χ2=29.329 , P <0.001);
AFP、AFP-L3%检测肝细胞癌在 ROC 曲线下的面积 AUC 分别为 0.407和 0.841;以 AFP-L3%≥12.6%作为诊断标准 ,
AFP-L3 诊断肝细胞癌敏感性和特异性分别为 83.3%和 86.3%。结论　AFP-L3 对肝细胞癌诊断准确度明显高于 AFP,
微量离心柱法检测 AFP-L3在良恶性肝脏病变鉴别诊断中具有重要临床价值。
关键词:甲胎蛋白异质体;原发性肝细胞癌;鉴别诊断
中图分类号:R735.7 文献标识码:A
Significance of Lens culinaris agglutinin-reactive alpha-fetoprotein in the diagnosis of hepatocellular carcinoma　ZHOU
Chuan-shang , LIU Li-juan , WU Qiu-fang.(Fuzhou Municipal Infectious Disease Hospital , Fuzhou 350025 , China)
Abstract:Objective　To explore the clinical significance of Lens culinaris agglutinin-reactive alpha-fetoprotein in the differenti-
ation diagnosis between benign and malignant liver diseases , as well as the warning of hepatocellular carcinoma.Methods　Alpha-fe-
toprotein variants from 185 patients with liver diseases were isolated with micro-spin column equipped lens culinaris agglutinin
(LCA).The AFP and AFP-L3 were then detected by time-resolved fluorescence immunoassay , and the proportions of AFP-L3(AFP-
L3%)were calculated.Results　The AFP-L3% in patients with hepatocellular carcinoma(HCC)was significantly higher than that in
patients with other liver diseases(χ2=29.329 , P<0.001);the area under curve of Receiver-Operating Characteristic of AFP and
AFP-L3%were 0.407 and 0.841 respectively , and according as AFP-L3%≥12.6% being the diagnosis criteria , the sensitivity and
specificity of patients diagnosed with liver cancer was 83.3% and 86.3% respectively.Conclusion　The accuracy of AFP-L3 detec-
tion in the diagnosis of HCC was significantly higher than AFP detection.The detection of AFP-L3 by micro-spin column assay showed
great clinical value in the differentiation diagnosis of HCC , especially for identifying HCC with low level of a1pha-fetoprotein.
Key words:Alpha-fetoprotein variant;Hepatocellular carcinoma;Differentiation diagnosis
(Chin J Lab Diagn , 2009 , 13:0208)
　　甲胎蛋白(α-Fetoprotein ,AFP)是诊断肝细胞癌
(hepatocellular carcinoma , HCC)最常用的肿瘤标志
物。然而 ,一些良性肝病患者 ,如慢性肝炎(chronic
hepatotitis ,CH)、肝硬化(liver cirrhosis , LC)等 ,AFP 也
会有不同程度的升高 ,而且多呈现低浓度分布 ,与早
期肝细胞癌低浓度 AFP 呈重叠分布[ 1] ,使得高危人
群中HCC 的早期预警存在困难 。因此 ,寻找肝细胞
癌早期诊断高特异性的鉴别指标具有重要的临床意
义。研究发现 ,AFP 存在多种异质体 ,根据和小扁豆
凝集素(Lens culinaris lectin)亲合强弱程度不同 ,AFP
可以分为 AFP-L1 、AFP-L2 、AFP-L3 ,其中 AFP-L3 主
要存在于肝细胞癌病人血清中 ,血清中的 AFP-L3水
平随着肝细胞癌的生长成线性升高 ,对肝细胞癌的
诊断具有很高的特异性[ 2 ,3] 。本研究应用国内新研
制的微量凝集素亲和吸附离心管分离本院 185例肝
病患者AFP-L3 ,应用时间分辨荧光免疫定量检测血
清 AFP和 AFP-L3含量 ,旨在探讨AFP-L3 在鉴别良
恶性肝病中的临床价值 。
1　对象与方法
1.1　研究对象　185份血清标本来自我院 2007年
6月-12月之间门诊或住院患者 ,年龄在 20-70岁
之间 ,其中男性 162例 ,女性 23例 ,全部病例 20 ng/
ml≤AFP≤5 000 ng/ml ,其中肝细胞癌 24例 ,肝硬化
36例 ,慢性肝炎 125例。诊断标准符合 2000年中华
医学会传染病与寄生虫病学分会 、肝病学分会联合
修订的“病毒性肝炎防治方案”中病毒性肝炎诊断标
准及中华人民共和国卫生部医政司组织并由全国肿
瘤防治办公室与中国抗癌协会合编的《新编常见恶
性种瘤诊治规范》中有关原发性肝细胞癌的诊断标
准 。所有血清标本均采自患者诊断明确尚未接受介
—208— Chin J Lab Diagn , February ,2009 , Vol 13 , No.2
入或手术治疗之前 ,分离后保存在-80℃超低温冰
箱备用。
1.2　仪器　泰莱 П时间分辨荧光免疫分析仪 。
1.3　试剂　甲胎蛋白异质体(AFP-L3)亲和吸附离
心管装置由北京热景生物技术有限公司提供 ,时间
分辨荧光免疫定量检测试剂盒购自上海新波生物技
术有限公司。
1.4　方法 　以内装有耦联了小扁豆凝集素(LCA)
微球的微量凝集素亲和吸附离心管分离血清 AFP-
L3 ,应用时间分辨荧光免疫方法检测总AFP 和 AFP-
L3的含量 ,并计算 AFP-L3占 AFP总量的百分比 ,以
AFP-L3%≥10%作为 AFP-L3异常升高标准 。对临
床诊断为 CH 和 LC ,超声检查未发现异常且 AFP-
L3%≥10%的患者进行 CT检查。
1.5　统计　应用 SPSS13.0 软件进行统计分析 ,不
同组间 AFP 、AFP-L3 含量和 AFP-L3%的比较采用
Kruskal-Wallis H 检验 ,以 P<0.05有统计学意义;比
较 AFP 、AFP-L3 绝对值和 AFP-L3%诊断 HCC 的
ROC曲线下面积 。
2　结果
2.1　血清 AFP测定结果　本研究中HCC 患者血清
AFP浓度与 CH 和 LC 患者的差异无统计学意义(χ2
=2.207 , P =0.332),见表 1。32.9%非 HCC 血清
AFP≥400 ng/ml ,而 66.7%HCC 患者血清AFP <400
ng/m ,见图 1。以 AFP≥400 ng/ml为诊断标准 ,AFP
诊断肝细胞癌的敏感性和特异性分别为 33.3%和
65.8%,准确性为62.2%。
图 1　慢性肝炎 、肝硬化和肝细胞
癌患者血清 AFP 分布
2.2　AFP-L3检测结果　HCC 患者中血清 AFP-L3
绝对值和非 HCC患者(CH 和 LC)的差异无统计学
意义(χ2=2.820 , P=0.244),见表 2;但是 HCC患者
AFP-L3%与 CH 和 LC患者的差异有统计学意义(χ2
=29.329 , P<0.001),见表 3。不同肝病患者 AFP-
L3%分布见图2。
表 1　慢性肝炎 、肝硬化和肝细胞癌患者血清 AFP浓度比较
diseases n Median AFP(ng/ml) χ2 P
chronic hepatotitis 125 198.78(22.23-4890.00)
liver cirrhosis 36 194.18(20.03-4396.00) 2.207 0.332
hepatocellular
carcinoma
24 90.16(20.70-4026.20)
图 2　慢性肝炎 、肝硬化和肝细胞
癌患者血清 AFP-L3%分布
表 2　慢性肝炎 、肝硬化和肝细胞癌患者血
清 AFP-L3 绝对值比较
diseases n Median AFP-L3(ng/ml) χ2 P
chronic hepatotitis 125 12.95(0.25-1360.6)
liver cirrhosis 36 13.88(0.33-480.0) 2.820 0.244
hepatocellular
carcinoma
24 14.12(1.60-3763.2)
表 3　慢性肝炎 、肝硬化和肝细胞癌
患者血清 AFP-L3%比较
diseases n Median AFP-L3% χ2 P
chronic hepatotitis 125 5.84(0.46-34.04)
liver ci rrhosis 36 4.29(0.31-47.02) 29.329 0.000
hepatocellular carcinoma 24 22.40(0.33-92.80)
2.3　AFP-L3%诊断肝细胞癌的 ROC曲线分析　
与血清 AFP 和 AFP-L3 绝对值相比 ,AFP-L3%诊断
肝细胞癌 ROC 的曲线下面积(AUC)较大 ,误差较
小 ,可信区间较窄 , 见图 3 和表 4。以 AFP-L3%≥
10%为阳性判断指标时 ,AFP-L3诊断HCC 的敏感性
和特异性分别为 83.3%和 79.5%, 准确性为
80.0%;当阳性判断指标提高到 12.6%时 ,敏感性不
变 ,但特异性增高到 86.3%,此时准确性为 85.9%;
—209—中国实验诊断学　2009年 2月　第 13卷　第 2期
当提高诊断标准至 12.7%时 ,特异性不变 ,但敏感
性降至79.2%。
图 3　血清 AFP 、AFP-L3绝对值和 AFP-
L3%诊断 HCC的 ROC曲线
表4　血清 AFP、AFP-L3 绝对值和 AFP-L3%
诊断 HCC的 ROC曲线参数
项目 曲线下面积 标准误 95%可信区间
AFP 0.407 0.075 0.261-0.553
AFP-L3绝对值 0.606 0.059 0.490-0.723
AFP-L3% 0.841 0.059 0.725-0.957
2.4 　AFP-L3 在肝癌诊断中的预警作用 　10 例
AFP-L3%≥10%的 LC患者和23例AFP-L3%≥10%
的CH患者中 ,2例 LC患者 CT 检查阳性。
3　讨论
AFP是诊断 HCC的良好肿瘤标志物 ,但是研究
显示临床有相当多的 CH 和 LC 患者与早期 HCC 患
者血清中的低浓度 AFP 呈重叠分布[ 1] ,本研究中有
32.92%的非 HCC 患者血清 AFP ≥400 ng/ml 和
66.67%HCC患者血清 AFP<400 ng/ml。本研究显
示 ,以 AFP ≥400 ng/ml 为诊断标准 , AFP 诊断 HCC
的敏感性和特异性都比较低 , 仅为 33.3%和
65.8%,其原因是本研究对象为一特定群体 ,即 AFP
浓度在20-5 000 ng/ml的 CH 、LC和 HCC患者 。
虽然HCC 与CH和LC 患者血清中AFP-L3含量
并无差异(χ2 =2.820 , P =0.244),但是 HCC 患者
AFP-L3%明显高于 CH 和 LC患者(χ2=29.329 , P <
0.001)。与血清 AFP 和 AFP-L3 绝对值相比 , AFP-
L3%诊断肝细胞癌 ROC 的曲线下面积(AUC)较大 ,
误差较小 ,可信区间较窄 ,表明 AFP-L3%对良恶性
肝病的鉴别效果优于血清 AFP , 尤其适用于血清
AFP程中低度升高的肝病患者。
ROC 曲线分析显示 ,以 AFP-L3%≥10%为阳性
判断指标 ,AFP-L3诊断HCC的敏感性和特异性分别
为 83.3%和 79.5%,与文献报道略有差别[ 4 , 5] ,可能
与试验人群的选择标准不同有关;当阳性判断指标
提高至 AFP-L3%≥12.6%时 ,AFP-L3 诊断 HCC 的
敏感性和特异性最佳 ,分别为 83.3%和 86.3%,但
仍有 16.67%的 HCC 患者血清 AFP-L3%≤10%,提
示对 HCC的诊断尚应结合其它血清学指标或影像
学资料 。
本研究有 35 例临床诊断良性肝病患者 AFP-
L3%≥10%,随后作进一步影像学 CT 检查 ,其中 2
例 LC患者患者确诊为 HCC。根据AFP-L3%的预警
作用[ 4-6] ,不排除其余 33 例在近期发展成 HCC 的
可能 ,目前尚在临床密切观察中 。
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1995 , 22(3):802.
(收稿日期:2008-03-15)
—210— Chin J Lab Diagn , February ,2009 , Vol 13 , No.2