全 文 :櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒
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(收稿日期:2013-03-05;修回日期:2013-03-12)
复方白鲜皮乳防治脱发作用机理研究
曾明辉1,朱九群2,陈 璐2
(1.四川省邛崃市医疗中心医院药学部,四川 成都 611530;2.四川省医学科学院·四川省人民医院药剂科,四川 成都 610072)
【摘要】 目的 研究复方白鲜皮乳防治脱发的作用及其相关机制。方法 通过环磷酰胺诱导大鼠脱发模型实验、石蜡
松香混合物脱发模型实验、醋酸诱导小鼠腹腔通透性实验,以及 2,4-二硝基氟苯(DNFB)迟发性超敏反应动物模型实验,探讨
复方白鲜皮乳防止脱发、促进毛发生长、对毛细血管通透性的影响以及免疫抑制等作用。结果 复方白鲜皮乳各剂量组不能
减少环磷酰胺诱导大鼠脱发,对正常小鼠毛囊数无明显影响;大、中剂量可增加环磷酰胺大鼠皮肤毛囊数,各剂量可显著降低
醋酸诱导小鼠腹腔通透性增高的作用,减少 DNFB增加小鼠耳肿胀的程度及 DNFB小鼠的胸腺指数,与赋形剂组比较差异有
统计学意义(P < 0. 05)。结论 复方白鲜皮乳各剂量组不能阻止环磷酰胺诱导大鼠脱发,但对环磷酰胺损伤毛囊的作用有一
定的对抗作用,对正常小鼠的毛发生长有一定促进作用,这些作用可能与该药具有一定的抗炎和免疫抑制作用有关。
【关键词】 复方白鲜皮乳;脱发动物模型;药理研究
【中图分类号】R758. 71 【文献标志码】A 【文章编号】1672-6170(2013)03-0053-04
The mechanism underlying preventing and curing alopecia of compound cortex dictamni
cream ZENG Ming-hui1,ZHU Jiu-qun2,CHEN Lu2 (1. Deptment of pharmacy of Qionglai municipal Medi-
cal Center Hospital of Sichuan Province,Chengdu 611530,China;2. Department of Pharmacy of Sichuan a-
cademy of medical science﹠ Sichuan Provincial Peoples Hospital,Chengdu 610072,China)
【Abstract】 Objective To study the mechanism underlying prevention of hair loss by compound cortex dictamni lotion.Meth-
ods In the current study,alopecia mouse models induced by cyclophosphamide or paraffin / rosin mixture,peritoneal permeability
mouse model induced by acetic acid and DNFB delayed hypersensitivity animal model were used to study the effects of the dictamni lo-
tion on preventing hair loss,promoting hair growth,capillary permeability and immunosuppressive function,respectively. Results Each
dose group of compound dictamni lotion cannot reduce cyclophosphamide-induced hair loss,and has no significant effect on the number
of follicles in normal mouse. The high and middle dose group can increase the number of hair follicles in cyclophophamide-induced
mouse. Each dose group can significantly reduce the peritoneal hyper permeability,and reduce DNFB induced mouse ear swelling and
thymus index. There was a significant difference between the treated and vehicle groups. Conclusions The compound dictamni lotion
dose group cannot prevent cyclophosphamide-induced alopecia,but it can somehow reduce the follicle damage of cyclophosphamide. To
the normal mouse,it can promote hair growth. These effects may be related to the anti-inflammatory and immunosuppressive effects of
the drug.
【Key words】 Compound Cortex Dictamni cream;Alopecia animal model;Pharmacological study
临床常见的脱发有斑秃和脂溢性脱发两种。斑
秃又称圆形脱发,中医称为“鬼剃头”,发病原因认
为与自身免疫情况[1]、遗传及精神因素有关。脂溢
型脱发多见于青壮年男性,又称雄激素性脱发,是皮
肤科常见病多发病,一般认为与遗传易感性和头皮
毛囊局部雄激素的代谢异常有关。目前市场上用于
防治脱发的药物[2]主要针对雄激素性脱发,而对其
他类型的脱发基本无效。复方白鲜皮乳是以白鲜
皮、蛇床子等中药的提取物为主药制成的乳剂,在临
床上试用于治疗各种类型的脱发均收到较好疗效。
2011 年 3 月 14 日至 4 月 26 日我们对该药防治脱发
的药理作用进行了研究,现报道如下。
1 材料与方法
1. 1 实验药物 ①复方白鲜皮乳:1 ml 相当于
0. 48 g 原生药,批号:20100921,临用前用赋形剂稀
释成所需浓度的乳剂备用。本实验剂量按原生药
g /kg 计算。②赋形剂:未加药物的乳剂,批号:
20100921。均由四川省医学科学院·四川省人民医
院药剂科提供。③醋酸地塞米松软膏:10 g:5 mg,
由芜湖三益制药有限公司出品,批号:20100316。本
实验剂量按软膏 mg /kg 计算。④注射用环磷酰胺:
每瓶 0. 2 g,江苏恒瑞医药股份有限公司出品,批号:
35实用医院临床杂志 2013 年 5 月第 10 卷第 3 期
20100218,临用前用注射用水新鲜配成所需浓度。
⑤伊文思蓝(Evans blue) :每瓶 10 g,中国医药(集
团)上 海 化 学 试 剂 公 司,进 口 分 装,批 号:
F20070918。⑥2,4-二硝基氟苯(DNFB) :BR,每瓶
100 g,金山县兴塔化工厂出品,批号:080708,临用
前用食用色拉油配成所需浓度备用。
1. 2 实验动物 SD大鼠、昆明种小鼠,均为 SPF级
动物,生产合格证号为 SCXK(川 2009-19)。由四
川省中医药科学院实验动物中心提供。C57BL /6 纯
种小鼠,一级动物,由成都中医药大学动物实验中心
提供,生产合格证号:川实动管第 7 号。
1. 3 方法
1. 3. 1 环磷酰胺诱导大鼠脱发模型实验 按文
献[3,4]所载方法,取 8 日龄大鼠,雌雄兼用,按随
机数字表法分为 7 组各 10 只,即正常对照组、模型
组、赋形剂组、地塞米松组及复方白鲜皮乳大(4. 8
g /kg)、中(2. 4 g /kg)、小剂量(1. 2 g /kg)组。除正
常对照组给予等量生理盐水外,其它各组均腹腔注
射环磷酰胺 25 mg /kg,1 次 /天,连续 2 次。模型组
不作任何处理,其它各组在第 1 次注射给药后,分别
在各组大鼠背部皮肤上作相应的处理,即复方白鲜
皮乳大、中、小剂量组,均匀涂抹不同浓度的复方白
鲜皮乳 10 ml /kg,地塞米松组给予醋酸地塞米松软
膏 0. 1 g /kg,赋形剂组给予等量的赋形剂,正常对照
组给予同体积的生理盐水,1 次 /天,连续 11 天,用
药后 4、6、8、12 日观察各组大鼠毛发脱落情况,并对
大鼠脱毛情况进行打分。未脱落:0 分;头顶、颈项
毛发脱落:1 分;头顶、颈项及背部毛发稀疏脱落:2
分;头顶、颈项及背部毛发大部分脱落:3 分;头顶、
颈项及背部毛发全部脱落:4 分。实验结束时取大
鼠背部皮肤,用福尔马林固定,做病理切片,观察、计
数毛囊个数。
1. 3. 2 石蜡、松香混合物脱发模型实验 取体重为
15 ~ 20 g 的 C57 BL /6 纯种小鼠,雌雄兼用,按文
献[5]所介绍的方法,在乙醚轻度麻醉下,用松香、
石蜡的混合物将小鼠背部毛发拔掉,面积约为 3 cm
×4 cm,将其分为 6 组各 10 只,即正常对照组、赋形
剂组、地塞米松组及复方白鲜皮乳大(4. 8 g /kg)、中
(2. 4 g /kg)、小剂量(1. 2 g /kg)组,方法同环磷酰胺
诱导大鼠脱发模型实验。于脱毛后次日,分别在各
组小鼠背部脱毛区皮肤上均匀涂抹不同浓度的复方
白鲜皮乳或醋酸地塞米松软膏及同体积生理盐水,
赋形剂组给予同体积的 60%乙醇,1 次 /天,连续 11
天,用药 4、6、8、12 日观察各组小鼠毛发生长情况,
按小鼠毛发生长情况进行打分。未生长,脱毛区皮
肤呈肉色:0 分;脱毛区皮肤呈灰色:1 分;脱毛区皮
肤呈黑色:2 分;脱毛区皮肤呈黑色并有少许毛发长
出:3 分。实验结束时取小鼠背部脱毛区皮肤,用福
尔马林固定,做病理切片,观察毛囊生长情况。
1. 3. 3 醋酸诱导小鼠腹腔通透性实验 取体重为
18 ~ 22 g小鼠,雄性,腹部去毛,面积约 3 cm×3 cm,
分为 5 组各 10 只,即赋形剂组、地塞米松组及复方
白鲜皮乳大(4. 8 g /kg)、中(2. 4 g /kg)、小剂量
(1. 2 g /kg)组,方法同环磷酰胺诱导大鼠脱发模型
实验。。在脱毛后次日,分别在各小鼠腹部脱毛区皮
肤上均匀涂抹不同浓度的复方白鲜皮乳或醋酸地塞
米松软膏及等量赋形剂,1 次 /天,连续 5 天,末次给
药后 30 min,尾静脉注射 0. 5%伊文思蓝生理盐水
0. 1 ml /10 g,同时腹腔注射 0. 6%醋酸 0. 1 ml /10 g,
20 min后处死小鼠,用 3 ml 生理盐水冲洗腹腔,将
冲洗液离心 5 min (3000 r /min) ,取上清液,在
UV730 比色计上(用生理盐水调零) ,测定 590 nm
波长处的吸收度值(A值)。
1. 3. 4 DNFB 迟发性超敏反应动物模型实验 取
体重为 18 ~ 22 g小鼠,雌雄各半,腹部去毛,面积约
3 cm×3 cm,随机分为 6 组,即正常对照组、赋形剂
组、地塞米松组及复方白鲜皮乳大(4. 8 g /kg)、中
(2. 4 g /kg)、小剂量(1. 2 g /kg)组,方法同石蜡、松
香混合物脱发模型实验。于脱毛后次日开始给药,
分别在各组小鼠腹部脱毛区皮肤上均匀涂抹不同浓
度的复方白鲜皮乳或醋酸地塞米松软膏及同体积生
理盐水,赋形剂组给予等量赋形剂,1 次 /天,连续 6
天;第一次给药后 2 h,在各小鼠腹部均匀涂布 1%
DNFB 50 μl /只,第 2 天加强 l 次(对照组除外) ;给
药后第 6 天,在小鼠左耳均匀涂布 1% DNFB 20 μl /
只激发,激发后 24 h,处死小鼠,取下耳片(用直径
为 8 mm的不锈钢冲子)称重,并同时取下胸腺、脾
脏称重并计算其脏器指数。
1. 4 统计学方法 使用 SPSS 13. 0 统计学软件,计
量资料以均数 ±标准差表示,采用 t 检验,以 P <
0. 05 为差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 对环磷酰胺诱导大鼠脱发模型的影响 从表
1 可见,幼年大鼠在注射环磷酰胺后 5 ~ 6 天其头部
即开始出现脱发,8 天后即出现背部大面积脱发,直
至背部毛发脱尽。复方白鲜皮乳各剂量组不能减少
环磷酰胺诱导大鼠脱发,与赋形剂组比较差异无统
计学意义(P > 0. 05) ;而醋酸地塞米松软膏可显著
对抗环磷酰胺致大鼠脱发,与赋形剂组比较差异有
统计学意义(P < 0. 01)。
45 实用医院临床杂志 2013 年 5 月第 10 卷第 3 期
表 1 对环磷酰胺诱导大鼠脱发模型的影响
组别
剂量
(g /kg)
动物数
(只)
脱发情况积分(分)
药后 4d 药后 6d 药后 8d 药后 12d
对照组
模型组
赋形剂组
复方白鲜皮乳小剂量组
复方白鲜皮乳中剂量组
复方白鲜皮乳大剂量组
地塞米松组
1. 2
2. 4
4. 8
0. 1
10
10
10
10
10
10
10
0
0
0
0
0
0
0
0. 0±0. 0**
1. 2±0. 6
1. 2±0. 6
1. 3±0. 5
1. 1±0. 6
0. 9±0. 7
0. 0±0. 0**
0. 0±0. 0**
3. 0±0. 0
3. 0±0. 0
3. 0±0. 0
3. 0±0. 0
3. 0±0. 0
1. 5±0. 7**
0. 0±0. 0**
4. 0±0. 0
4. 0±0. 0
4. 0±0. 0
4. 0±0. 0
4. 0±0. 0
1. 9±0. 9**
**与赋形剂组比较,P < 0. 01
2. 2 对环磷酰胺诱导脱发模型大鼠毛囊的影响
从表 2 可见,复方白鲜皮乳大、中剂量可增加环磷酰
胺大鼠皮肤毛囊数,与赋形剂组比较差异有统计学
意义(P < 0. 01)。
表 2 对环磷酰胺诱导脱发模型大鼠毛囊的影响
组别
剂 量
(g /kg)
动物数
(只)
毛囊数
/视野
对照组
模型组
赋形剂组
复方白鲜皮乳小剂量组
复方白鲜皮乳中剂量组
复方白鲜皮乳大剂量组
地塞米松组
1. 2
2. 4
4. 8
0. 1
10
10
10
10
10
10
10
181. 0±113. 7**
39. 1±23. 1
51. 4±27. 5
33. 2±10. 3
110. 1±84. 7**
76. 3±48. 0
52. 4±15. 7
**与赋形剂组比较,P < 0. 01
2. 3 对正常小鼠毛发生长的影响 从表 3可见,复
方白鲜皮乳大剂量和中剂量可促进正常小鼠毛发的生
长,与赋形剂组比较差异有统计学意义(P < 0. 01);而
醋酸地塞米松软膏可显著抑制正常小鼠毛发的生长,
与赋形剂组比较差异有统计学意义。从表 4 可见,复
方白鲜皮乳各剂量对正常小鼠毛囊数无明显影响,与
赋形剂组比较差异无统计学意义(P > 0. 05);而地塞米
松软膏可显著减少正常小鼠毛囊数,与赋形剂组比较
差异有统计学意义(P < 0. 01)。
2. 4 对小鼠毛细血管通透性的影响 从表 5 可见,
复方白鲜皮乳和地塞米松可显著降低醋酸诱导小鼠
腹腔通透性增高的作用,与赋形剂组比较差异有统
计学意义(P < 0. 01)。
表 3 对正常小鼠毛发生长的影响
组别
剂量
(g /kg)
动物数
(只)
毛发生长积分(分)
药后 4d 药后 6d 药后 8d 药后 10d
对照组
赋形剂组
复方白鲜皮乳小剂量组
复方白鲜皮乳中剂量组
复方白鲜皮乳大剂量组
地塞米松组
1. 2
2. 4
4. 8
0. 1
10
10
10
10
10
10
0
0
0
0
0
0
0. 4±0. 4
0. 3±0. 5
0. 6±0. 5
0. 7±0. 5
0. 8±0. 4
0. 0±0. 0*
0. 8±0. 8
0. 8±0. 8
1. 4±0. 7
1. 6±0. 5*
1. 5±0. 5*
0. 2±0. 4*
1. 6±0. 5
1. 4±0. 7
1. 9±0. 6
2. 4±0. 5**
2. 2±0. 6*
0. 6±0. 7*
与赋形剂组比较:* P < 0. 05,**P < 0. 01
表 4 对正常小鼠毛囊的影响
组别
剂量
(g /kg)
动物数
(只)
毛囊数
(个 /视野)
对照组
赋形剂组
复方白鲜皮乳小剂量组
复方白鲜皮乳中剂量组
复方白鲜皮乳大剂量组
地塞米松组
1. 2
2. 4
4. 8
0. 1
10
10
10
10
10
10
94. 9±34. 2
64. 7±33. 3
74. 3±41. 3
54. 8±32. 8
73. 8±39. 2
22. 6±16. 9**
**与赋形剂组比较,P < 0. 01
2. 5 对 DNFB 迟发超敏反应的影响 从表 6 可
见,复方白鲜皮乳和醋酸地塞米松软膏可显著减少
DNFB增加小鼠耳肿胀的程度,减少 DNFB 小鼠的
胸腺指数,与赋形剂组比较差异有统计学意义(P <
0. 01)。
3 讨论
目前,对于脱发的病因尚无满意解释,有人认为
该病可能与性激素分泌失调有关,也有人认为该病
可能与机体的免疫异常有关。国内市场上尚无有效
防治脱发症的药物。据文献报道[6],地塞米松局部
应用对毛发的生长有一定的调节作用:既可防止环
磷酰胺所诱导的脱发,又可抑制正常毛发的生长。
本文研究结果也证实了醋酸地塞米松软膏的这种调
节作用。
表 5 对小鼠毛细血管通透性的影晌
组别
剂量
(g /kg)
动物数
(只)
A值
赋形剂组
复方白鲜皮乳小剂量组
复方白鲜皮乳中剂量组
复方白鲜皮乳大剂量组
地塞米松组
1. 2
2. 4
4. 8
0. 1
10
10
10
10
10
0. 36±0. 24
0. 13±0. 09*
0. 07±0. 03**
0. 09±0. 03**
0. 13±0. 06*
* 与赋形剂组比较,P < 0. 05,**P < 0. 01
55实用医院临床杂志 2013 年 5 月第 10 卷第 3 期
櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒
表 6 对 DNFB迟发超敏反应的影响
组别 剂量(g /kg) 动物数(只) 耳片重差(mg) 胸腺(mg /10 g) 脾脏(mg /10 g)
对照组
赋形剂组
复方白鲜皮乳小剂量组
复方白鲜皮乳中剂量组
复方白鲜皮乳大剂量组
地塞米松组
1. 2
2. 4
4. 8
0. 1
10
10
10
10
10
10
2. 3±0. 24**
7. 8±4. 3
6. 8±3. 6
4. 1±1. 4
6. 9±2. 8
4. 8±2. 0*
44. 8±7. 4
48. 4±11. 3
50. 1±12. 0
41. 1±16. 9
46. 9±8. 4
25. 7±8. 8**
54. 1±8. 7
61. 2±10. 9
52. 0±11. 9
46. 4±11. 0*
61. 4±12. 4
48. 1±9. 9*
与赋形剂组比较:* P < 0. 05,**P < 0. 01
复方白鲜皮乳中的白鲜皮、蛇床子提取物、蛇床
子素和蛇床子总香豆素可使肾阳虚小鼠腹腔巨噬细
胞吞噬率和吞噬指数,脾淋巴细胞3H-TdR掺入数等
指标显著提高[7];能显著增加碳粒廓清指数、脾指
数,而对小鼠迟发性超敏反应有明显的抑制作用,增
强免疫功能,增加单核吞噬细胞的吞噬作用[8]。
本研究方白鲜皮乳各剂量组虽不能阻止环磷酰
胺诱导大鼠脱发,但对环磷酰胺损伤毛囊的作用有
一定的对抗作用,对正常小鼠的毛发生长有一定促
进作用,这些作用可能与该药具有一定的抗炎和免
疫抑制作用有关。
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(收稿日期:2012-11-15;修回日期:2012-12-05)
【基金项目】四川省卫生厅科研基金资助项目(编号:303. 005. 002. 280. 040) 【通讯作者】张晋琳
成人慢性免疫性血小板减少症与幽门螺杆菌 CagA
蛋白的临床相关性研究
吴良华1,2,李 慧1,万纯黔1,祝 彪1,王晓冬1,王春森1,张晋琳1
(1.四川省医学科学院.四川省人民医院血液科,四川 成都 610072;2.福建医科大学附属闽东医院血液科,福建 福安 355000)
【摘要】 目的 探讨幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,H. pylori)CagA蛋白(H. pylori-CagA)在慢性免疫性血小板减少症
(Chronic Immune thrombocytopenia,CITP)患者发病中的作用。方法 收集四川省人民医院 110 例伴有 H. pylori 感染的 CITP
患者,按就诊先后顺序编号后,应用随机数字表分为治疗组与对照组各 55 例,进行 CagA蛋白抗体定性、定量检测。治疗组接
受根除 H. pylori治疗,对照组不接受根除 H. pylori治疗,其他治疗方案两组相同。6 ~ 8 周后复查 14 碳尿素酶呼气试验(14C-
urea breath test,14C-UBT),3 ~ 5 个月随访监测患者治疗前后血小板计数、H. pylori-CagA-IgG浓度变化,比较两组间是否存在显
著差异,进而探讨 CITP 与幽门螺杆菌 CagA蛋白的临床相关性。结果 110 例患者中 46 例 CagA蛋白抗体阳性,CagA阳性率
41. 82%(46 /110);治疗组 23 例 H. pylori-CagA阳性病例根除 H. pylori治疗后血小板计数明显改善,H. pylori-CagA蛋白抗体滴
度较前降低,且有效率明显高于对照组,差异均有统计学意义(P < 0. 05);而 32 例 CagA蛋白抗体阴性病例治疗前后血小板数
量变化无统计学意义(P > 0. 05)。对照组 23 例 H. pylori-CagA阳性病例 H. pylori-CagA蛋白抗体滴度及血小板数量变化无统
计学意义(P > 0. 05);32 例 CagA蛋白抗体阴性病例,治疗前后血小板数量变化无统计学意义(P > 0. 05)。提示 H. pylori-CagA
蛋白与 CITP 的发生、发展密切相关。结论 对有 H. pylori感染的 CITP 患者增加血清抗体检测,对于临床上治疗 CITP 可能有
良好的预测作用且 H. pylori-CagA抗体阳性者进行根除 H. pylori治疗可作为一个新的非免疫治疗的方法,不良反应少。
【关键词】 慢性免疫性血小板减少症;幽门螺杆菌;幽门螺杆菌 CagA蛋白
【中图分类号】R593;Q51 【文献标志码】A 【文章编号】1672-6170(2013)03-0056-06
65 实用医院临床杂志 2013 年 5 月第 10 卷第 3 期