全 文 ：【实验研究】
九里香叶对去卵巢大鼠拟雌激素样作用的实验研究*
文 娱1 李晓晖2 尤文质1 郑启忠3 高 海4 张秋萍2 彭清华1
摘要:目的 探讨九里香叶对去卵巢大鼠的拟雌激素样作用。方法 以 2%戊巴比妥钠麻醉大鼠，切除大鼠双侧卵巢，对照大
鼠切除卵巢旁同样大小的脂肪团。术后 7 天分组、给药。分为模型组:生理盐水(0. 4 mg /kg /d);对照组:生理盐水(0. 4 mg /kg /d);
戊酸雌二醇组:0. 4 m g /kg /d;九里香高剂量组:200 mg /kg /d;九里香中剂量组:100 mg /kg /d;九里香低剂量组:50 mg /kg /d。连续给
药 90 天后，处死大鼠，测定子宫系数。放射免疫法测定血清雌二醇水平。结果 给药第 30 天、60 天、90 天，与对照组比较，模型组
大鼠体质量增幅较大，差异显著;与模型组比较，戊酸雌二醇组、九里香叶高剂量组大鼠体质量增幅较小，差异显著(P ＜ 0. 05)。与
模型组比较，戊酸雌二醇组、九里香叶高剂量组大鼠子宫质量和子宫系数明显增加，差异显著(P ＜ 0. 05)。与模型组比较，戊酸雌二
醇组、九里香叶高、中、低剂量组大鼠雌二醇明显增加，差异不显著(P ＞ 0. 05)。结论 九里香叶具有一定的雌激素样作用。
关键词:九里香叶;去卵巢大鼠;雌二醇;子宫系数
doi:10． 3969 / j． issn． 1003-8914． 2017． 04． 017 文章编号:1003-8914(2017)-04-0496-03
Experimental Ｒesearch on Estrogenic Effect of Murraya Paniculat Leaf on Ovariectomized Ｒats
WEN Yu1 LI Xiaohui2 YOU Wenzhi1 ZHENG Qizhong3 GAO Hai4 ZHANG Qiuping2 PENG Qinghua1
(1. Department of Pharmacy，Xiamen Hospital of Traditional Chinese Medicine，Fujian Province，Xiamen 361009，China;
2. GCP Office，Xiamen Hospital of Traditional Chinese Medicine，Fujian Province，Xiamen 361009，China;
3. Department of Pathology，Xiamen Hospital of Traditional Chinese Medicine，Fujian Province，Xiamen 361009，China;
4. Department of Science and Education，Xiamen Hospital of Traditional Chinese Medicine，Fujian Province，Xiamen 361009，China)
Abstract:Objective To investigate estrogenic effect of murraya paniculat leaf on ovariectomized rats． Methods Ｒats were narcotized with
2% pentobarbital sodium，and then were removed bilateral ovaries． Controlled rats by the rat ovaries removed the same size of cellulite．
Seven days after operation，all rats were divided into six groups and drug delivery:model group (normal saline，0. 4 mg /kg /d)，control
operation group (normal saline，0. 4 mg /kg /d) ，estradiol valerate group (0. 4 mg /kg /d) ，murraya paniculat leaf high dose group (200
mg /kg) ;murraya paniculat leaf middle dose group (100 mg /kg)and murraya paniculat leaf low dose group (50 mg /kg)． The drugs were
given once a day and last ninety days． The rats were executed and then uterine coefficient was determined． Serum estradiol levels were
determined with radioimmunoassay． Ｒesults For 30 days，60 days and 90 days，comparing with control group，model group rats’weight
gain was larger，and there was significant difference． Comparing with the model group，estradiol valerate group and murraya paniculat leaf
high dose group were less weight gain in rats，and there was significant difference (P ＜ 0. 05)． Comparing with the model group，estradiol
valerate group and murraya paniculat leaf high dose group of rats of uterine weight and uterine coefficient significantly increased，and there
was significant difference (P ＜ 0. 05)． Comparing with the model group，estradiol valerate group and murraya paniculat leaf high dose group
and murraya paniculat leaf middle dose group and murraya paniculat leaf low dose group of estradiol in rats increased significantly，and the
difference was not significant (P ＞ 0. 05)． Conclusions Murraya paniculat leaf has a certain estrogen-like effect．
Key words:Murraya paniculat leaf;Ovariectomized rats;Estradiol;Uterine coefficient
* 基金项目:福建省厦门市科技局科技计划项目(No． 3502Z20154056)
作者单位:1. 福建省厦门市中医院药学部(厦门 361009);2. 福建省
厦门市中医院 GCP办公室(厦门 361009);3. 福建省厦门
市中医院病理科(厦门 361009);4. 福建省厦门市中医院
科教科(厦门 361009)
九里香为芸香科九里香属植物，始载于《岭南采
药录》。主要分布于我国福建、广东、广西、海南等省
区，全年均可采收，具有行气活血、散瘀止痛、解毒消肿
等功效［1］。实验证实，黄酮是九里香的主要活性成分
之一，尤以叶子中的含量最高［2］。多项研究证明黄酮
类化合物具有明确的抗骨质疏松作用，其抗骨质疏松
作用与其类雌激素样作用有关［3］。九里香叶天然存
在的生物黄酮分子量小，能被人体迅速吸收。因此本
研究通过切除大鼠双侧卵巢复制骨质疏松模型，观察
九里香叶拟雌激素样作用。
1 材料与方法
1. 1 药物与试剂 九里香叶由厦门市中医院制剂室
主任尤文质鉴定。戊酸雌二醇片:拜耳医药保健有限
公司广州分公司分包装，批号:203A2，规格:1mg × 21
片;雌二醇试剂盒:美国贝克曼库尔特有限公司，批号:
529202，规格:2 × 50T。
1. 2 实验动物 SD 大鼠，2 月龄，体质量(250g ±
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20)g，SPF 级实验动物，由厦门大学实验动物中心提
供，合格证号 SYXK(闽)2013-0006。
1. 3 仪器 电子天平:HXW-Ⅱ(恒协电子有限公
司);电子精密天平:CP4202C(奥豪斯公司);全自动
化学发光仪:unicel dxi800(美国贝克曼库尔特有限
公司。)
1. 4 方法
1. 4. 1 复制去卵巢大鼠骨质疏松模型 取 SPF级 SD
雌性大鼠(2 月龄)60 只，大鼠予以 2%戊巴比妥钠
(0. 02ml /100g)腹腔注射(ip)麻醉，术前腹腔注射青
霉素(5 万 U /kg)，预防感染。无菌条件下摘除双侧卵
巢:在大鼠下腹部正中部位剃毛，碘酒消毒，酒精脱碘。
用手术剪刀切开皮肤、浅筋膜和深筋膜，到达肌肉层，
剥开肌肉寻找输卵管，沿输卵管在其末端找到卵巢，用
丝线在输卵管峡部结扎，用剪刀剪去卵巢，然后缝合肌
肉、深浅筋膜，最后缝合皮肤。对照组:手术步骤基本
同前，但找到卵巢后不切除，只切除卵巢旁同质量的脂
肪组织，然后逐层缝合关闭腹腔。
1. 4. 2 分组及给药 造模 7 天后，分组及给药。实验
动物共分为 6 个组，各组均为 10 只动物。灌胃给药，
每日 1 次，连续 90 天。模型组(OVX):生理盐水(0. 4
mg /kg /d);对照组(DZZ):生理盐水(0. 4 mg /kg /d);
戊酸雌二醇组(EVT):0. 4 mg /kg /d，(戊酸雌二醇用
0. 5% 的羧甲基纤维素钠溶液配制成 40 mg·L －1的混
悬液);九里香高剂量组(JLXY-H) :200 mg /kg /d;九里
香中剂量组(JLXY-M):100 mg /kg /d;九里香低剂量组
(JLXY-L):50 mg /kg /d。
1. 4. 3 雌二醇含量测定 断头取血，3000 r /min，离
心 15 min，分离血清。采用放射免疫分析法测定血清
雌二醇含量。
1. 4. 4 子宫重量测定 断头处死大鼠，从子宫与阴道
交接处剪断，仔细分离出子宫，并精确称湿质量。
1. 4. 5 子宫系数测定 按下列公式计算子宫系数:子
宫系数% =子宫质量(g)/体质量(g)× 100%。
1. 4. 6 统计学方法 采用 SPSS16. 0 统计软件进行统
计分析，统计学处理数据用(珋x ± s)表示，采用 t检验。
2 结果
2. 1 九里香叶对去卵巢大鼠体质量的影响 给药前
各组大鼠体质量差异无统计学意义。给药第 30 天体质
量增幅，OVX 组(P ＜ 0. 05)，大鼠体质量增幅显著高于
DZZ;给药第 60天体质量增幅，OVX 组(P ＜0. 05)，大鼠
体质量增幅显著高于 DZZ，EVT 组及 JLXY-H 组(P ＜
0. 05)，大鼠体质量增幅显著低于 OVX 组;给药第 90 天
体质量增幅，OVX 组(P ＜ 0. 05)，大鼠体质量增幅显著
高于 DZZ，EVT组及 JLXY-H组(P ＜0. 05)，大鼠体质量
增幅显著低于 OVX 组。结果见表 1。
表 1 各组大鼠体质量变化 (只，珋x ± s)
组别 样本数 给药前体质量(g)
给药第 30 天
体质量增幅(g)
给药第 60 天
体质量增幅(g)
给药第 90 天
体质量增幅(g)
SHAM 10 253. 01 ± 3. 87 53. 94 ± 5. 98 78. 94 ± 10. 26 91. 7 ± 17. 22
OVX 10 254. 94 ± 8. 85 77. 65 ± 20. 241) 111. 19 ± 32. 811) 117. 71 ± 27. 331)
EVT 10 255. 30 ± 13. 62 64. 95 ± 21. 50 83. 74 ± 23. 602) 92. 89 ± 25. 292)
JLXY-H 9 254. 46 ± 8. 12 67. 03 ± 13. 00 84. 68 ± 11. 462) 95. 72 ± 4. 952)
JLXY-M 10 256. 38 ± 8. 12 74. 64 ± 10. 06 110. 11 ± 17. 50 121. 92 ± 18. 31
JLXY-L 10 252. 06 ± 13. 12 81. 27 ± 21. 67 110. 11 ± 22. 82 121. 81 ± 23. 68
注:1)P ＜ 0. 05 vs SHAM;2)P ＜ 0. 05 vs OVX
2. 2 九里香叶对去卵巢大鼠子宫的影响 与 DZZ 比
较，OVX大鼠子宫质量和子宫系数明显减少，差异显
著(P ＜ 0. 001);与 OVX 比较，EVT 及 JLXY-H 大鼠子
宫质量和子宫系数明显增加，差异显著(P ＜ 0. 05)。
结果见表 2。
表 2 各组大鼠子宫质量及子宫系数 (只，珋x ± s)
组别 样本数 子宫质量(g) 子宫系数(%)
SHAM 10 0. 86 ± 0. 22 0. 24 ± 0. 11
OVX 10 0. 20 ± 0. 181) 0. 06 ± 0. 051)
EVT 10 0. 51 ± 0. 332) 0. 15 ± 0. 112)
JLXY-H 9 0. 79 ± 0. 572) 0. 22 ± 0. 162)
JLXY-M 10 0. 30 ± 0. 22 0. 07 ± 0. 05
JLXY-L 10 0. 34 ± 0. 31 0. 10 ± 0. 09
注:1)P ＜ 0. 001 vs SHAM;2)P ＜ 0. 05 vs OVX
2. 3 九里香叶对去卵巢大鼠血清雌二醇的影响 与
DZZ比较，OVX大鼠雌二醇明显减少，差异不显著;与
OVX 比较，EVT、JLXY-H、JLXY-M、JLXY-L 大鼠雌二
醇明显增加，差异不显著。结果见表 3。
表 3 各组大鼠血清雌二醇的变化 (只，珋x ± s)
组别 样本数 雌二醇(pmol /L)
SHAM 10 118. 57 ± 50. 58
OVX 10 88. 21 ± 34. 49
EVT 10 98. 80 ± 66. 59
JLXY-H 9 90. 99 ± 27. 31
JLXY-M 10 140. 17 ± 83. 20
JLXY-L 10 98. 60 ± 25. 85
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3 讨论
在女性更年期、卵巢功能早衰等雌激素分泌减少的
情况下，可用植物雌激素替代雌激素，植物雌激素对乳
腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌、结肠癌等激素依
赖性肿瘤有防治作用［4］。避免了雌激素增加子宫内膜
癌和乳腺癌的危险性［5］。植物雌激素应用前景广阔，九
里香药用历史较为久远，药用资源丰富。因此本研究模
拟女性绝经后骨质疏松，较好地模拟妇女绝经后由于雌
激素缺乏而出现的临床特征以及对雌激素替代疗法的
反应［6］，观察九里香叶是否具有雌激素活性。
本研究中 OVX 组大鼠体质量增幅较为明显，随着
时间的增加，增幅更加明显。可能由于大鼠去卵巢后，
雌激素的缺失使得骨髓间质干细胞转化为脂肪细胞，
使得体质量增加［7］。也是去卵巢后大鼠对抗骨质疏
松的一种保护性反应［8］。EVT 组、JLXY-H 组大鼠体
质量增幅明显低于 OVX组，差异显著。因戊酸雌二醇
补充了雌激素，可能与雌激素可促进前体细胞向成骨
细胞(OB)分化，阻止向脂肪细胞分化有关［9］。JLXY-
H组大鼠低体质量增长可能与九里香叶所含有植物雌
激素(黄体酮类)成分有关，植物雌激素与雌激素相似
的结构，具有雌激素样作用。
子宫增重实验是验证药物是否具有雌激素样作用
的经典实验。国内外均有学者通过整体动物子宫增重
实验评价药物的雌激素活性［10 ～ 13］。在影响动物体质
量增幅上雌激素具有维持末端靶器官组织结构的功
能，子宫是卵巢雌激素的主要靶器官［14］。切除大鼠卵
巢后，雌激素分泌减少，子宫内膜变薄，子宫缩小［15］。
OVX 组子宫质量及子宫系数明显减少。EVT 组由于
补充戊酸雌二醇对子宫有很强刺激作用，导致 EVT组
较 OVX 组子宫质量及系数明显增加。与既往研究报
道的补充雌激素改善子宫萎缩现象一致［16，17］。JLXY-
H组子宫质量及子宫系数较 OVX组明显增加，提示九
里香叶可能存在直接的性激素样作用，可以刺激子宫
内膜增生，且活性高于雌激素。
雌激素包括雌酮(E1)、雌二醇及雌三醇(E3)。E2
主要由卵巢组织的滤泡直接分泌，少部分由来自外周
E1 和睾酮的转化
［18］。大鼠卵巢切除后，雌二醇分泌
明显减少。EVT组雌二醇水平增加，与 OVX 组比较，
无显著性差异。戊酸雌二醇系长效雌二醇衍生物，具
有雌二醇的药理作用。九里香叶以中剂量组增加雌二
醇水平最为显著，高剂量组、低剂量组均较 OVX 组有
小幅度的增加雌二醇水平，与 OVX 组相比，均 P ＞
0. 05。提示九里香叶雌激素样作用没有随着剂量的增
加而增强，不呈现剂量依赖性，其具体机制还有待进一
步研究。
九里香叶具有药理活性，其雌激素样作用将为其
开发新药提供一定的科学依据。九里香叶是否具有更
多的药理作用，还需进一步的研究。
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(本文校对:许东伟 收稿日期:2016 － 11 － 17)
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