全 文 ：中国柑桔 1 9 9 4 . 2 3 ( 1 ) : 1 2~ 1 4
柑桔花叶病毒的一种新的鉴别
寄主— 构头橙周常勇 赵学源 蒋元晖
( 中国农业科学院柑枯研究所 重庆 6 3 0 7 1 2 )
提 要 在拘头橙上接种柑桔花叶病毒 (CI M V ) , 以后抽发的春梢幼嫩期表现黄化症状 , 随着
春梢叶片的伸展产生花叶症状 . 而在拘头橙上接种类似病毒温州蜜柑萎缩病毒 (S D V ) , 以后抽发
的春梢表现正常 。 故认为构头橙是 ic M v 的一种新的鉴别寄主 ,可以区分开 ic M v 和 S D v 。
关锥词 柑桔花叶病毒 ,温州蜜柑萎缩病毒 ;构头橙 .鉴别寄主
柑桔花叶病 ( C i t r u s m o s a i e v i r u s , C IM V )是 4 0 年代在 日本和歌山县有田市附近的温州蜜
柑上首次被发现的 ,催病温州蜜柑被称为虎蜜柑 lj[ 。 1 9 5 8 年 ,石谷 、 神野阁确认了此病为病毒
病 。 催病温州蜜柑产生雷同于温州蜜柑萎缩病 ( S at su m a d w a fr vi ur s , S D V )的船形叶和丛枝症
状 , 但比温州蜜柑萎缩病毒引起的症状稍轻 ,果实上产生的花斑为此病的特征性症状阁 。 本病
很长一段时间局限于和歌山县有田地 区 , 70 年代由于将新选宫本特早熟品系高接于带毒老系
温州蜜柑品系上 , 后随其推广而使此病蔓延开来 41[ 。 CI M V 的大小 、形态 、寄主范围及体外抗性
和 S n V 的几乎相同 [ ,〕 。 1 9 7 7 年 ,今田 [ ,〕报道 C IM v 的抗原性和 SD V 的相同 。 1 9 5 2 年 , 宇杉
等 sj[ 报道两者抗原性稍有不同 。 单凭草本指示植物反应很难 区分开 CI M v 和 s D v sj[ 。 1 9 8 2年 ,
小泉 、 久原闭以及宇杉等 sj[ 报道 , S D v 、 CI M V 两者抗血清都和本来的抗原反应强 , 而交叉反应
均较弱 ,他们认为两者的血清如果用于检测同一试材 ,有可能区分 S D V 和 CI M V 。 1 9 8 0 年 , 宇
杉川报道马叙葡萄袖可作为两者的鉴别寄主 , 因该寄主感染 CI M v 后 ,在新叶上表现典型的环
斑症状 。 1 9 8 6 年 , N oz u 等:a[ 制备 S D V 的单克隆抗体 ,该抗体专与 S D V 发生特异反应而不与
CI M V 发生反应 。 宫川经邦 ( 1 98 8 , 个人通信 )认为 ,根据在柑桔和草本植物上的症状看 , CI M V
是 S D V 的一个株系 ,除了用单克隆抗体法和果实花斑症状区别处 ,其他方法都 比较困难 。
我国不少桔区 田间温州蜜柑上有船形 叶 、 丛枝症状 , 我们采用草本指示植物接种配合
E L IS A 检测 ,发现 80 年代初四川奉节县和浙江黄岩市分别从日本引进的宫本特早熟温州蜜
柑品系带 S D V [ , , ` o 〕 。 为将 S D V 和 C IM V 区分开 , 我们 1 9 8 9 、 1 9 9 0 年用马叙葡萄抽作指示植物
对带 S D V 的材料进行鉴定 ,但所有材料包括 CI M V 正对照均未表现 出宇杉所描述的春叶环
斑症状 ,有部分植株表现了衰退病的苗黄症状 。 1 9 8 8 年将 CI M V 毒源材料嫁接于拘头橙砧木
上 , 1 9 9 1 年春 , 有部分植株发出的砧木萌葵 ,初期表现嫩叶黄化 , 随着 叶片的成熟表现严重的
花叶症状 。 当时认为有两种可能性 , 一为 CI M V 在构头橙上的反应 ,二为构头橙本身遗传性变
异 , 为明确此症是否系 CI M V 引起 , 故而进行了试验 。 此外 , 试验所用的部分毒源有柑桔衰退
病毒 ( C i t r u s t r i s t e az v i r u s , C T V )混合感染 , 为 T 明确 C T V 与此症 的关系 ,对 C T V 亦作了进
一步的测定 。
收稿 日期 : 19 9 2一 0 8一 2 2
DOI : 10. 13938 /j . i ssn. 1007 -1431. 1994. 01. 004
第 1 期 周常勇等 :柑桔花叶病的一种新的鉴别寄主— 拘头橙
材 料 与 方 法
柑桔花叶病毒源 CI M V 一 1 和 ci M V 一 2 均为 日本南九州大学宫川经邦博士 1 9 8 8 年 n 月寄
赠 ,其中 C IM V 一 1 为纯的柑桔花叶病毒毒源 , C IM V 一 2 中混有 C T V ; SD V 一 1 为 SD V 毒源 ( 1 9 8 6
年 4 月由宫川经邦寄赠保存于网室中 ) , S D V 一 2 为经鉴定带 SD V 的由四川奉节县从日本引进
的宫本温州蜜柑材料 , 二者均混有 C T V 。 鉴定用的构头橙为网室中生长的 2 年生实生苗 。 另外
还用 2 年生的锦橙和邓肯葡萄袖实生苗 , 在其上嫁接实生拘头橙芽作为鉴定植物 。 C T V 抗血
清为日本农林水产省广岛县果树试验场的佐佐木笃惠赠 。
嫁接接种试验
1 9 9 1 年 4 月 2 5 日将 C IM V 一 1 、 C IM V 一 2 、 S D V 一 i 和 S D V 一 2 毒源植株的 1 个枝段和 2 块枝
皮嫁接接种 2 年生的拘头橙实生苗 , 负对照植株嫁接实生无毒的温州蜜柑的枝段和枝皮 , 每一
种处理 3 株 。 1 9 9 1年 5一 6 月和 8 ~ 1 0 月以及 1 9 9 2 年 4 ~ 6 月进行症状观察 ,其中 1 9 9 1 年 6 月
24 日 、 1 9 9 2 年 3 月 8 日对各处理植株进行重剪促发新梢 。
1 9 9 2 年 4 月 7 日又将感染 CI M V 一 1 植株的 1 个枝段和 2 块枝皮接种至 2年生锦橙和邓肯
葡萄袖实生苗上各 2 株 , 同时在每株实生苗上嫁接 2 个实生拘头橙芽 , 负对照用锦橙实生苗 2
株 ,葡萄袖 1 株 , 同样处理 ,但嫁接实生无毒的温州蜜柑的枝段和枝皮 。 嫁接后重剪催发拘头橙
芽 。 5~ 6 月拘头橙芽发出后进行症状观察 。
C T V 的 D A S 一 E LIS A 检测
1 9 9 2 年 4 月 15 ~ 16 日对 1 9 9 1 年 4 月 25 日接种的各处理植株进行 C T V 的 D A S 一 E IL S A
检测 。 使用的 I g G 和碱性磷酸醋酶标记的 Ig G 浓度均约为 0 . 8 x 1 0 一 ` ,底物对硝基苯酚磷酸盐
浓度为 I 0 0 0 x 1-0 ` , 40 孔酶联板为美国进 口 ,将酶联板用 5 . 3m ol l/ 的氢氧化钠和乙醇混合液
处理 48 小时 。 待测样品均为幼嫩的春梢叶片 ,按 1 : 5 ( g /m l ) 加入 。 . 02 m ol l/ 的 PBS 一T w e n
(含 。 . 05 %的 T G A , 2 . 0 %的 P V P )研磨 , 低速离心后 , 每孔加样为 2 0 0川 ,每个样品重复 2 孔 ,
以被测样品孔在 D G 3 0 2 2 型酶联免疫检测仪 4 1 0n m 处测定的吸光度值 ( A )与阴性对照吸光度
值均值 (劝之比大于 2 . 1 为阳性反应 , 小于或等于 2 . 1为阴性反应 。
结 果 分 析
一 、拘头橙上的症状表现
1 9 9 1 年 4 月 25 日嫁接的材料在 1 9 9 1 年的春梢 、 夏梢和秋梢期均未观察到异常症状 , 至
1 9 9 2年 4 月 2 日 CI M V 一 1 和 CI M V 一 2 接种的 6 株构头橙发的幼嫩春梢严重黄化 ,叶片变小 、卷
曲 (见封底图版 ) , 4 月 16 ~ 21 日观察到 6 株拘头橙春叶表现花叶症状 (见图版 ) , 与 1 9 9 1 年春
梢期观察到的 CI M V 保毒株中拘头橙砧木发出的春叶症状相同 。 而用 S D V 一 1 、 SD V 一 2 接种和
负对照植株抽发的幼嫩春叶为绿色 、叶片大小正常且平直 , 由此说明春梢黄化 、变小卷曲 、春叶
花叶症状非拘头橙遗传变异性状 ,而属 ic M V 在构头橙上所致的特征性症状 ,而 S D V 不引起
这种症状 。 因此 , 构头橙可以试用于区分 CI M V 和 S D V 。 另外观察到 ,随着春叶的老熟变硬 , 气
温亦逐渐升高 ,有的带症叶片逐渐转绿 ,症状减轻甚至消失 ,这说明此症状仅表现于春梢叶片
上 , 以嫩叶期症状较清晰 。 另外 , 1 9 9 2 年 4 月 7 日接种 ic M V 一 1 的植株和负对照植株在 1 9 9 2
年春梢期间构头橙芽均抽发且生长正常 ,这说明拘头橙嫁接苗在接种 CI M V 后短时间 内不能
诱发症状 。
中 国 柑 桔 第 23 卷
二 、 C T V 的鉴定结果
C T v 的 D A s 一E L IS A 结果表明 , 用 CI M v 一 2 、 S D V 一 1 、 S D V 一 2 接种的植株均 混合感染
C T V
, 而用 CI M V 一 1 接种以及负对照植株没有感染 C T v 。 这进一步说明构头橙春梢叶片的黄
化 、 花叶症状与 C T V 无关 ,而系感染 CI M V 所致 。
参 考 文 献
〔z〕 T a an k a H . P r e s e n t s t a t u s o f in v e s t ig a t i o n 。 o n c i t r u s v i r 。 : d i s e a s e 。 in J a p a n . R e v P !a n t P r o r e e R e s , 1 9 7 1 ,生 : 匕1
〔2〕石谷敏夫等 . 柑橘内毛丫才夕病 忆。 办 乙 . 日植病权 , 19 58 ; 2 3 ( 1 ) : 2 9
〔3〕今田准 . 沮州萎缩病及梦须似病害内植 颊七研究力现状 . 植物防疫 , 19 7 , 31 (1 0) : 3”
〔4 ] Y a m a m o z o 5 e t a l . S p z e a d o f e i: r u o n 、 o s a i c t h or u g h d i s tr ib u t io n o f : n e , e l o n e o f s a t s u am m a n d ar in . p r o e s t h C o n f I n -
t e rn o 飞 a n C i t r u o V i r o l , l , 了8 : 2 3 0~ 2 3 1
【s] 宇杉富雄等 . E IL S A 法 :` 上石力 夕 午少毛子才夕今了斗 久 。 梭 出 . 日植病报 , 1 982 , 48 ( 3) : 3 30
【门 小泉铭册等 . E LI S A 法 忆上石 C IM V内梭定 . 果榭拭 口之津年粗 , 19 82 : 1 02
沙〕宇杉富雄 . 括题内植物 宁 / f 斗久 病 ( 2 2 ) 力 夕午 , 毛寸了夕 ( 卜于之力 夕 )病 . 晨案 书上挤 圃芸 , 19 80 , 5 5 ( 1 1 ) ; 卷头
〔s〕 N o甜 丫 e t a l . P r o d u e t i o n o f m o n o e l o n a l d n t iob d i e , t o s a t s u am d w a r f v iur s . A n n p h y t o p a t h S oc J a那 n . i , a 6 , 5 2 ( z ) : 8 6
〔g j 周常 勇等 . 温州蜜柑萎缩病的鉴定 . 西南农业大学学报 , 19 90 , 1 2( 4 ) : 3 4 6
〔l叼 周常勇等 . 温州蜜柑萎缩病的分布鉴定 . 植物保护 学报 (待发 )
C H IN A C r T R U S 19 9 4 一2 3 ( 1 ) : 1 2一 1 4
G o u t o u c h e n g
,
A N e w I n d i e a t o r P l a n t o f C i t r u s M o s a i c V i r u s
Z h o u C h an g y
o n g , Z h a o X u e y u a n
,
a n d J i a n g Y u a n h u i
( (二i t r u s R e s e ar e h in s t it u t e , C A A S , C I、 o n g q i n g , S i e h u a n 6 3 0 7 1 2 )
A b s t r a e t : G o u t o u e h e n g
,
p r o b a b l y a m a t u r a l h y b r id o f s o u r o r a xi g e
,
w a s i n o e u l a t
e
d w i t i
、 e i -
t r u s m o s a i e v i r it s ( C IM V )
, a n d d e v e l o p e d y o u n g l e a f y e l l o w i n g s y m p t o m o n t h e s u b s e q u e n t
s p r i n g f l u s l l e s a n d s h o w n m o s a i e s y s t e m a s t h e l e a f g r a d u a l l夕 m a t u r e d . H o w e v e r , t h e
s e e d l i n g s a P p e a r e d n o r m a l a f t e r b e i n g i n o e it l a t e d w i t h s a t s : l m a dw a r f v i r u s ( S D V )
.
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-
a t i n g C IM V f r o m S D V
.
K e y w o r d s : C i t r u s m o s a i e v i r u s , S a t s u m a d w a r f v i r u s ; I n d i e a t o r P l a n t
:
G o u t o u e h e n g
永春柑桔弓卜浅获 j 乙效
永春县位于福建省 中南 部 ,年平均气温 17 ~
2 1 ,C
,
1 月均温 7一 1 2 ,C ,年降雨 1 6 0 0 ~ Z l o o m m , 是
柑桔栽培最适宜 区 。在原福建省副省长 、 全国侨联副
主席尤扬祖先生等一批爱国华侨的倡导下 , 永春县
50 年代初就开始山地柑桔栽培试验 ,经多年示范推
广 ,到 1 9 7 7 年全县柑桔面积达 5 60 多 h m Z ,总产近
40 0 t
,跃居福建省第一位 。 十一届三中全会以后 ,水
春柑枯生产进入迅速发展时期 ,到 19 9 2 年底 ,柑桔
面积近 7 2 0 0 1: m 名 ,总产 5 . 7 7 万 t , 19 9 3年可达 6 . 5 万
t 以上 。
永春柑枯良种化程度极高 ,芦柑 (即桂柑 )占总
连换三二年举办芦柑节
面积的 90 % 以上 ,年产已超过 6 万 t ,是全国栽培碰
柑最多的县 。 永春芦柑品质优 良 ,驰名国内外 ,远销
加拿大 、 东南亚各国及全国各地 , 1 9 8 9 年参加全国
优质水果评比获桂柑类第一名 .
为庆祝水春县山地柑枯开发取得的平硕成果 ,
缅怀尤扬祖先生等开拓者的功绩 ,扩大永春芦柑的
影响 , 促进永春经济发展 ,永春县 19 91~ 1 9 9 3 年连
续 3年举办了三届芦柑节 。 李鹅总理亲笔为首届芦
柑节作了“ 愿永春芦柑远销四海 ”等题词 ,海内外客
商云集永春 ,芦柑节的举办取得圆满成功 。
( 陈跳飞 )