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金柑总黄酮对小鼠胃肠吸收功能的影响



全 文 :第 27卷 第 2期 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 Vol. 27  No. 2
  2007年 4月 Journal o f Central South Univ er sity o f Fo rest ry& Techno log y Apr. 2007 

文章编号: 1673- 923X ( 2007) 02- 0079- 04
金柑总黄酮对小鼠胃肠吸收功能的影响
黎继烈 ,刘宗敏 ,钟海雁 ,李忠海
(中南林业科技大学 , 湖南长沙 410004)
摘 要: 以金柑总黄酮为原料 ,采用阿托品建立抑制胃肠吸收的动物模型 ,探讨不同产地 (湖南浏阳、江西遂川 )与不同剂量 ( 160
mg /kg、 80 mg /kg、 20 mg /kg)的金柑总黄酮对小鼠胃排空、小肠推进率和小肠吸收功能的影响 .结果表明:与模型对照组比 ,两个高剂
量组的小鼠胃酚红排空、小肠酚红推进率和对木糖的吸收具有极显著的影响 ( P < 0. 01) ,两个中剂量组有显著影响 ( P < 0. 05) ,两个
低剂量组无显著影响 .
关键词:  中药药理学 ;金柑 ;总黄酮 ;胃肠吸收
中图分类号:   R285. 5    文献标志码:   A
Effects of Kumquat Total Flavone on the Absorption Function of
Mice s Stomach and Intestine
LI Ji-lie, LIU Zong-min, ZHONG Hai-yan, LI Zhong-hai
( Cent ral Sou th Univ ersi ty of Forest and Tech nology, Changsha 410004, Hunan, China)
Abstract: In o rd er to study the ef fect s of kumquat total fl avone on the absorption function of mice s s tomach and intes tine, s ome
funct ion model for mice s stomach and intes tin e ab sorption was made by at ropine. Ef fects of kumquat f lavone on the small intes tine
absorption fu nction, on the rate of mov ement in th e small intes tine and on th e rate of vacuation in th e stomach, of mice, by di f feren t
local kum quats ( Hunan Liuyang and Jiangxi Suichuan ) and dif ferent dos es ( 160 mg /kg, 80 mg /kg , 20 mg /k g) , w ere measu red and
analy zed. Resul ts show that compared wi th th e model g roup, the tw o big-dose g roups ( 160 mg /kg) h ave g reatly remarkable ef fect s
on th e small in testine abso rp tion to x ylose, on th e rate of phenol red mov em ent in the smal l in tes tine and ph enol red vacuation in th e
stomach ( P < 0. 01) , that the tw o mid-dose g rou ps ( 80 mg /kg ) als o have remark able ef fect s (P < 0. 05) , but that the tw o low-d ose
groups have no remarkabl effect s.
Key words: Chines e medicine pharmacolog y; k umquat; t otal f lavon e; abs orption of stomach and in test ine
胃肠吸收功能障碍在临床上表现为呕吐、便秘、腹泻、胃炎、吸收不良和溃疡等症状 .有研究结果表明 , 60%
以上的病人存在胃肠排空障碍 [1 ] ,传统药物治疗对人体有较大的副作用 [ 2] .近年来 ,一些学者从天然产物中提
取分离得到能够改善胃肠吸收功能的有效成分 ,用来治疗胃肠吸收功能障碍 .有人用黄芩苷和黄芩素 [3 ]、黄藤
素 [4 ]、膳食纤维 [ 5]、车前子壳粉 [ 6]等提取物进行了小鼠的小肠吸收和小肠推进等功能实验 ,取得了一定的效果 .
金柑 (Fortunella japonica ( thumb. ) Swing le) ,为芸香科柑橘属 ,常绿灌木 ,主产湖南、江西、广西、福建 .中
医常用金柑制品治疗胸闷郁结 ,消化不良 ,咳嗽哮喘等症 .柑桔类果实富含类黄酮物质 ,对该类植物的成分及药
理研究曾有过一些报道 [7 ] ,但是未曾见到金柑活性成分对动物胃肠吸收功能影响的研究 .本文以新鲜金柑为原
料 ,提取金柑总黄酮 ,探讨其对阿托品所致的胃肠吸收功能低下小鼠的胃排空、小肠推进率和小肠吸收功能的
影响 ,旨在为金柑资源的开发利用提供参考 .
收稿日期: 2006-10-19
基金项目: 国家“十五”科技攻关专题 ( 2001BA535C) .
作者简介: 黎继烈 ( 1959- ) ,女 ,湖南华容人 .教授 ,博士生导师 ,主要从事农产品加工技术研究 .
DOI : 10. 14067 /j . cnki . 1673 -923x . 2007. 02. 017
1 材料与方法
1. 1 材料与仪器
实验药物 金柑于 2005年 11月采自湖南浏阳和江西遂川 .取新鲜金柑皮 ,进行真空冷冻干燥 ,将干燥后的
金柑皮粉碎过 40目筛 ,用石油醚脱脂回流 2 h,脱脂后按m金柑粉∶m酒精 ( 80% )= 1∶ 20物料比 ,用 MDS- 6压力自控
密闭微波萃取系统 60℃萃取 30 min,过滤 ,将滤液层析纯化 ,洗脱液经真空浓缩即为金柑总黄酮溶液 ,用紫外
分光光度计测定其含量 ,使用时配制成所需浓度 .
实验动物 昆明种小白鼠 ,雄性 ,体重为 18~ 22 g,湖南中医学院动物实验中心购买 ,医动字 20- 001号 ,按
每组 10只随机分为 8组 ,其中 1个空白对照组 , 1个模型对照组 , 6个金柑总黄酮给药实验组 (浏阳产金柑总黄
酮高、中、低剂量组和遂川产金柑总黄酮高、中、低剂量组 ) .
主要药品 硫酸阿托品注射液 (安阳九州药业有限责任公司 ,批号 060227, 15 mg /ml ) ,氢氧化钠 ,酚红 , D
- 木糖 ,间苯三酚 ,冰乙酸等均为分析纯 .
主要仪器  MDS- 6压力自控密闭微波消解系统 (上海新仪微波化学科技有限公司 ) , UV- 1700紫外分
光光度计 (日本岛津 ) .
1. 2 实验方法
1. 2. 1 小鼠胃排空及小肠推进率的测定 [8 ]
各组小鼠连续灌胃 20 d,灌胃量 0. 1 m L /10g ,空白对照组和模型对照组灌胃等量的蒸馏水 ,实验组灌胃不
同剂量金柑总黄酮溶液 ,末次灌胃前禁食 12 h,灌胃 1 h后除空白组外 ,其余各组小鼠皮下注射硫酸阿托品 0. 18
g /kg , 20 min后每只小鼠灌胃 0. 12 g /mL的酚红溶液 (含 10%明胶 ) 0. 25 m L, 20 min后处死动物 ,充分洗下胃
内容物 ,取 5 mL离心 ( 3 000 r· min- 1 , 10 min) ,吸上清液在 560 nm下测定吸光度 .计算胃内酚红残留率 ,以酚
红残留率为指标评价胃排空速度 ,小肠推进率以酚红在小肠中的移行距离与小肠总长的百分比来评价 .
  酚红残留率= 胃内酚红残留量灌胃总量 × 100%
  小肠推进率= 酚红在小肠中的移行距离小肠总长 × 100%
1. 2. 2 小鼠小肠吸收功能的测定 [9 ]
图 1  D-木糖浓度-吸光度标准曲线
Fig. 1  The standard curve of concentration of
xylose-absorbency
  各组小鼠连续灌胃 20 d,灌胃量 0. 1 mL /10 g ,空白
对照组和模型对照组灌胃等量的蒸馏水 ,实验组灌胃不
同剂量金柑总黄酮溶液 ,末次灌胃前禁食 12 h,灌胃 1 h
后除空白组外 ,其余各组小鼠皮下注射硫酸阿托品
0. 18 g /kg , 20 min后每只小鼠按 0. 3 mL /kg灌胃 4%的
木糖溶液 , 1 h后 ,经眼眶取血 ,用间苯三酚显色法 [ 10]测
血清中木糖的浓度 .
1. 2. 3  D-木糖标准曲线的制备
称取 0. 3078 g D-木糖 ,用饱和苯甲酸溶液溶解定容
至 200 ml ,分别取 0. 00 m l, 0. 50 m l, 1. 00 m l, 1. 50 m l,
2. 00 ml, 2. 50 ml , 3. 00 ml, 3. 50 m l, 4. 00 ml, 4. 50m l的
上述木糖溶液 ,用饱和苯甲酸溶液定容至 10 ml,摇匀 ,在
554 nm下测定吸光度 .制备标准曲线如图所示 .
1. 3 数据处理方法
实验数据用完全随机设计的独立样本 t检验 ,以均
匀数±标准差 (± s)表示 ,用 SPSS11. 0统计软件处理 .
80 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 第 27卷
图 2 金柑总黄酮对小鼠胃排空的影响 ( t-± s,n= 10)
Fig. 2  Effect of Kumquat total Flavone on rate of
vacuation in mice stomach ( t
-± s,n= 10)
注 模型对照组与空白对照组对比 ,# P < 0. 05显著差异 ,
实验组与模型组对比 ,* * P < 0. 01极显著差异 ,
* P < 0. 05显著差异 (下图同 )
图 3 金柑总黄酮对小鼠推进功能的影响 ( t-± s, n= 10)
Fig. 3  Effect of Kumquat total Flavone on themovement
function in mice small intent ine( t
-± s,n= 10)
图 4 金柑总黄酮对小鼠小肠吸收功能的影响 ( t-± s, n= 10)
Fig. 4  Effect of Kumquat total flavone on mice small
intestine absorption function( t
-± s,n= 10)
2 结果与分析
2. 1 金柑总黄酮对小鼠胃排空的影响
金柑总黄酮对小鼠胃排空的影响结果如图 2所示 ,
模型对照组与空白对照组对比差异显著 ,证明阿托品建
立抑制胃肠吸收的小鼠动物模型成功 .当摄入量为 80
mg /kg时 ,能显著降低浏阳金柑组和遂川金柑组的小鼠
胃内酚红残留率 ( P < 0. 05) ,提高胃排空速度 ;摄入量增
加至 160 mg /kg时 ,能极显著降低两个组小鼠胃内酚红
残留率 (P < 0. 01) .结果表明 ,随着金柑总黄酮摄入量的
增加 ,小鼠胃酚红残留率呈下降趋势 .
2. 2 金柑总黄酮对小鼠小肠推进功能的影响
金柑总黄酮对小鼠小肠推进功能的影响结果如图 3
所示 ,空白对照组和模型对照组的小鼠小肠推进率差异
显著 ;浏阳金柑组和遂川金柑组的小鼠小肠推进率随着
金柑黄酮摄入量的增加呈上升的趋势 ,当摄入量为
80 mg /kg时 ,能显著提高小鼠小肠推进率 ( P < 0. 05) ;摄
入量为 160 mg /kg时 ,两个组对小鼠小肠推进率均得到
了极显著的提高 (P < 0. 01) .各实验组的小鼠小肠推进
率均高于空白对照组 ,这和官福兰用橙皮苷所做实验结
果相符合 [8 ] .
2. 3 金柑总黄酮对小鼠小肠吸收功能的影响
金柑总黄酮对小鼠小肠吸收功能的影响如图 4所
示 ,空白对照组和模型对照组小鼠血清中木糖浓度差异
显著 ;实验组与模型对照组比较 ,小鼠血清中木糖浓度均
有提高 ,而且随着金柑总黄酮摄入量的增加 ,血清木糖浓
度呈上升趋势 . 与模型对照组相比 ,当摄入量为
80 mg /kg时 ,浏阳金柑组和遂川金柑组的小鼠血清中木
糖浓度得到了显著提高 (P < 0. 05) ;摄入量为 160 mg /kg
时 ,则有极显著的提高 ( P < 0. 01) .
3 讨 论
金柑总黄酮可以提高小鼠的胃排空功能 ,可能是因
为金柑总黄酮减少了阿托品与 M胆碱受体结合 ,减少竞
争性拮抗乙酰胆碱对 M胆碱受体的刺激作用 ,提高了胃
肠道蠕动的幅度和频率 ,减少胰液素的分泌 ,增加胃蠕
动 ,从而提高了胃的排空功能 .
金柑总黄酮可以提高小鼠小肠推进功能 ,是因为金柑总黄酮能增强平滑肌和环行肌的收缩 ,增加小肠的蠕
动 ,另外 ,由于加强副交感神经的兴奋从而增强了小肠的推进功能 .
金柑总黄酮能提高小鼠小肠的吸收功能 ,可能是金柑总黄酮改变了肠道的 pH值 ,刺激肠道粘膜 ,并且增
81第 2期 黎继烈等:金柑总黄酮对小鼠胃肠吸收功能的影响
加了消化液的分泌从而拮抗阿托品抑制小肠吸收的作用 ,从而提高了小肠的吸收功能 .
当金柑总黄酮摄入量为 80 mg /kg时 ,可以明显的改善小鼠胃排空功能、小肠推进功能和吸收功能 ;当摄入
量为 160 mg /kg时 ,对胃肠各项功能的影响继续增强 ,这表明金柑总黄酮具有改善小鼠胃肠功能的作用 .
浏阳金柑和遂川金柑都具有一定的生理活性 ,但是 ,其效果不完全相同 ,这是因为金柑产地不同 ,生长环境
有差异 ,从而影响了金柑中黄酮的种类和组成 ,这表明 ,地理位置和生长环境对其生理活性成分有一定的影响 .
参考文献:
[1 ] 萧树东 .开展对功能性消化不良的研讨 [ J] .中华消化杂志 , 1994, 14( 5): 249.
[2 ]  Mahn, ath arina, Bor rá s , Consu elo, et al. Dietary soy is oflavone induced increas es in ant ioxidant and eNOS gene expression lead to improv ed
endo th elial function and reduced blood pres su re in vivo [ J] . FASEB Journal, 2005, 19( 12): 1755- 1757.
[3 ] 刘太明 ,蒋学华 .黄芩苷和黄芩素大鼠在体胃、肠的吸收动力学研究 [ J ].中国中药杂志 , 31(12): 999- 1001.
[4 ] 周  ,蒋学华 .黄藤素在大鼠胃肠道中的吸收动力学 [ J] .华西药学杂志 , 2006, 21( 2): 168- 169.
[5 ] 李忠海 ,常银子 ,曹清明 ,等 .百合膳食纤维对小白鼠消化吸收功能的影响 [ J ].食品科技 , 2004, 9: 95- 97.
[6 ] 李玉伟 ,李燕俊 ,张宏元 ,等 .车前子壳粉对肠蠕动抑制模型小鼠小肠推进作用的研究 [ J] .海峡预防医学杂志 , 2005, 11( 2): 1- 3.
[ 7]  Lee Yoon-Bok, Lee Hyong Joo, et al. Kumquat is oflavones and cogni tiv e function [ J ]. Journal of Nut riti onal Bioch emist ry, 2005, 16( 11 ):
641- 649.
[8 ] 官福兰 ,王汝俊 .陈皮及橙皮甙对小鼠胃排空、小肠推进功能的影响 [ J ].中药药理与临床 , 2002, 18( 3): 7- 9.
[9 ] 郑建仙 .功能性食品 (Ⅲ ) [M ].北京:中国轻工业出版社 , 1999: 241.
[10 ] 黎君友 ,孙 丹 .微量快速测定木糖法检测创伤后肠道吸收功能的实验研究 [ J ].中国临床康复 , 2003, 32( 4): 29- 33.
[本文编校:邱德勇 ]
(上接第 65页 )
[4 ] 廉振民 ,梁 沛 .秦巴山区蝗虫群落多样性研究 [ J] .生物多样性 , 1999, 7( 2): 119- 122.
[5 ] 王 敏 ,黄国华 ,范晓凌 ,等 .石门台自然保护区蝴蝶物种多样性研究 [ J ].生物多样性 , 2003, 11( 6): 441- 453.
[6 ] 冯 磊 ,黄晓磊 ,乔格侠 .福建省蚜虫类昆虫多样性研究 [ J].动物分类学报 , 2004, 29( 4): 666- 674.
[7 ] 任珊珊 ,乔格侠 ,张广学 .甘肃省蚜虫类物种多样性研究 [ J].动物分类学报 , 2003, 28( 2): 221- 227.
[8 ] 陈尚文 ,潘晓芳 ,谢碧霞 .人心果吸汁昆虫群落及多样性初探 [ J ].中南林学院学报 , 2005, 25( 3): 45- 47.
[9 ] 朱 巽 ,黄向东 .南岳昆虫多样性研究 [ J] .中南林学院学报 , 2001, 21( 4): 64- 67.
[10 ] 姬兰柱 ,董百丽 ,魏春艳 ,等 .长白山阔叶红松林昆虫多样性研究 [ J ].应用生态学报 , 2004, 15( 9): 1527- 1530.
[11 ] 向昌国 ,李文芳 ,于德珍 .八大公山自然保护区森林土壤动物群落多样性的初步研究 [ J] .生物多样性 , 2000, 8( 3): 304- 306.
[12 ] 周 尧 .中国蝴蝶原色图鉴 [M ] .河南:河南科学技术出版社 , 1999.
[13 ] 中国科学院动物研究所 .中国蛾类图鉴 (Ⅰ ~ Ⅳ ) [M ] .北京:科学出版社 , 1981- 1983.
[14 ] 彭建文 .湖南森林昆虫图鉴 [M ] .长沙:湖南科学技术出版社 , 1992.
[15 ] 黄复生 .中国动物志昆虫纲 (第 17卷 )等翅目 [M ] .北京:科学出版社 , 2000.
[16 ] 童新旺 .湖南白蚁研究与防治 [M ] .长沙:湖南科学技术出版社 , 2004.
[17 ] 何俊华 .中国动物志昆虫纲 (第 18卷 )膜翅目茧蜂科 ( 1) [M ].北京:科学出版社 , 2000.
[18 ] 何俊华 ,陈学新 ,马 云 .中国动物志昆虫纲 (第 37卷 )膜翅目茧蜂科 ( 2) [M ].北京:科学出版社 , 2004.
[19 ] 何俊华 .浙江蜂类志 [M ].北京:科学出版社 , 2004.
[20 ] 马克平 ,刘玉明 .生物群落多样性的测度方法Ⅰ .α多样性测度方法 (下 ) [ J] .生物多样性 , 1994, 2( 4): 231- 239.
[21 ] 左家哺 .南岳森林生物多样性研究 [M ] .北京:中国林业出版社 , 1998.
[22 ] 张智英 ,李玉辉 ,柴冬梅 ,等 .云南石林公园不同蚁多样性研究 [ J ].生物多样性 , 2005, 13( 4) : 357- 362.
[23 ] 马世骏 .中国昆虫生态地理概述 [M ] .北京:科学出版社 , 1959.
[24 ] 章士美 .昆虫的分布区系 [ J ].江西农业大学学报 (农业昆虫地理学专辑 ) , 1986, 8( 1): 1- 7.
[25 ] 张国珍 ,杨道德 .湖南壶瓶山国家级自然保护区科学考察报告集 [M ].长沙:湖南科学技术出版社 , 2004.
[26 ] 查玉平 .后河国家级自然保护区昆虫资源调查及其多样性的初步研究 [ D].武汉:华中师范大学 , 2005.
[本文编校:胡曼辉 ]
82 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 第 27卷