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金柑组培苗对外源精胺的响应



全 文 : [收稿日期] 2011-08-08;2011-11-19修回
 [基金项目] 国家自然科学基金项目“柑橘丛枝菌根共生体与多胺的交互作用研究”(30800747)
 [作者简介] 邹英宁(1978-),女,讲师,硕士,从事柑橘生物技术研究。E-mail:zouyingning@163.com
[文章编号]1001-3601(2012)02-0056-0017-03
金柑组培苗对外源精胺的响应
邹英宁,章燕芳
(长江大学 园艺园林学院,湖北 荆州434025)
  [摘 要]为了研究多胺对植物生长发育的调节作用,采用组织培养的方法,以金柑(Fortunella marga-
rita)为材料,研究了不同浓度(0mmol/L,0.5mmol/L,1mmol/L,2mmol/L,4mmol/L)的外源精胺(Spm)
对金柑组培苗植株生长、根系形态、碳水化合物含量的影响。结果表明,与其他精胺浓度相比较,1mmol/L
精胺处理条件下的金柑组培苗的株高(4.87cm)、茎粗(0.122cm)、叶片数(4.2片)、地下部鲜重(0.054 0g)、
叶片鲜重(0.087 9g)及植株鲜重(0.174 9g)最高,且其根系的长度(8.77cm)、投影面积(0.86cm2)、表面积
(2.70cm2)、平均直径(1.02mm)、体积(0.067cm3)以及其根系和叶片的可溶性糖含量、蔗糖含量均显著高
于对照。结论:1mmol/L外源精胺最适合金柑组培苗植株生长和根系的形态发育,这与其提高组织内碳水
化合物含量密切相关。
[关键词]金柑;精胺;根系形态;碳水化合物
[中图分类号]S666.1 [文献标识码]A
Responses of Exogenous Spermine to in vitro Kumquat
ZOU Ying-ning,ZHANG Yan-fang
(College of Horticulture and Gardening,Yangtze University,Jingzhou,Hubei 434025,China)
  Abstract:Using in vitro Kumquat(Fortunella margarita)as the material,the author studied the
effects of different concentrations(0,0.5mmol/L,1mmol/L,2mmol/L and 4mmol/L)of exogenous
spermine(Spm)on plant growth,root morphology,and carbohydrate content to research regulating roles
of polyamines on growth and development of plants.The results showed under the conditions of 1mmol/L
Spm,plant height(4.87cm),stem diameter(0.122cm),leaf number(4.2leaves),root fresh weight
(0.054 0g),leaf fresh weight(0.087 9g)and plant fresh weight(0.174 9g)of in vitro Kumquat were
higher than other treatments.And root length(8.77cm),root projected area(0.86cm2),root surface
area(2.70cm2),average diameter(1.02mm)and root volume(0.067cm3)of the in vitro Kumquat were
significantly higher than the control.Conclusion:1mmol/L Spm was the most suitable concentration for
growth and root morphology of the in vitro Kumquat,which may be related to increasing carbohydrates of
tissue by Spm.
Key words:Kumquat;spermine;root morphology;carbohydrates
  多胺(Polyamines,PAs)广泛存在于生物体内,
是生物体代谢过程中产生的一类具有生物活性的低
分子量脂肪族含氮碱,主要包括腐胺(Put)、亚精胺
(Spd)、精胺(Spm)等。已知多胺能影响植物体内
DNA、RNA和蛋白质的生物合成,促进生长和发
育,延迟衰老,提高抗逆性,甚至与植物的生存密切
相关[1]。
组织中的多胺含量与DNA的合成有关,不仅
DNA的代谢能影响多胺的合成,而且外源多胺也能
影响DNA的代谢和植物生长[2]。研究表明,在正
常和干旱条件下,外源多胺均能促进油松幼苗的生
长[3],0.1~1mmol/L的精胺能促进鹰嘴豆胚轴的
生长,但超过1mmol/L效果不明显[4]。目前,关于
多胺与植物根系形成的研究主要集中在主根生长、
侧根和不定根的形成方面[5]。精胺含量与细胞的分
化和伸长有关,甘蓝根系中内源精 胺 含 量 在
0.1μmol/L时,对根的长度影响最大
[6]。也有研究
认为,外源多胺处理可以改变植物内源多胺的水平,
进而起到影响根系的生长发育[7]。Lee用0.01~
1mmol/L外源多胺处理水稻幼苗根系时,Put明显
增加了其长度,Spd浓度大于0.1mM 时,可抑制根
系伸长,而精胺在此范围内可严重抑制根的生长[8]。
佘丽山等[9]、王秀红等[10]和王学[11]、覃凤云等[12-13]、
刘云国等[14]、王欣等[15]、薛贝贝等[16]和徐仰仓
等[17]分别研究了外源精胺对水稻幼苗、黄瓜幼苗和
叶片、小麦幼苗、苎麻、玉米叶片等的影响,任小林
等[18]、邱美欢等[19]、李志民等[20]、李建勇等[21]、郭
紫娟等[22]、刘顺枝等[23]、杨洪强等[24]和罗素兰
等[25]研究了多胺在果树生长发育中的应用。为了
研究多胺对金柑组培苗生长发育的调节作用,笔者
以金柑组培苗为试材,研究了添加不同浓度的外源
精胺对其产生的影响,以期筛选出适合金柑生长的
最适浓度,为金柑离体生长提供技术支撑和多胺调
节金柑生长发育提供理论依据。
 贵州农业科学 2012,40(2):17~19
 Guizhou Agricultural Sciences
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试水果 市售金柑果实,4℃冰箱保存备
用。
1.1.2 试剂 精胺试剂由Sigma公司提供,其他
所用的试剂均为国产,自制 MT培养基。
1.1.3 仪器设备 WinRHIZO根系分析仪(Re-
gent Instruments Inc.,Quebec,Canada),游标卡
尺,可见分光光度计(722N,上海精密科学仪器有限
公司),玻璃试管(规格:内径3cm,高15cm)。
1.2 试验设计
采用单因素试验设计,即1个因素(精胺)5个
水平〔浓度分别为0mmol/L(CK),0.5mmol/L,
1mmol/L,2mmol/L,4mmol/L〕进行试验,每个处
理重复6次,单粒为1小区,随机摆放。
1.3 试验方法
1.3.1 制作培养基 用 MT+30g/L蔗糖+7g/L
琼脂制作,pH 5.8;所有的精胺均是在培养基配制过
程中添加,然后装入试管进行高压蒸汽灭菌备用。
1.3.2 接种培养 2010年5月接种,在装有培养
基的玻璃试管中接种金柑种子,每试管接种1粒,共
30支试管。培养条件:光周期为16h(光照)/8h(黑
暗),光照强度2 500lx,温度(25±1)℃。
1.3.3 测定项目 精胺处理52d后取出植株测定
株高、茎粗、叶片数、茎鲜重、叶片鲜重、地下部鲜重、
植株鲜重,并使用 WinRHIZO根系分析仪测定根系
形态,采用张志良和翟伟菁的方法[26]测定根系及叶
片的蔗糖和可溶性糖含量。
1.3.4 数据统计分析 运用SAS(8.1)软件的单
因素方差分析(ANOVA)程序对所有数据进行统计
分析,采用LSD法进行多重比较分析。
2 结果与分析
2.1 植株生长
从表1可见,在1mmol/L精胺处理条件下,金
柑组培苗的株高、茎粗、叶片数、地下部鲜重、叶片鲜
重及植株鲜重显著高于对照(分别高14.58%、
16.00%、68.00%、17.39%、29.26%和18.18%),
而二者的茎鲜重无差异;在0.5mmol/L、2mmol/
L、4mmol/L处理条件下,金柑组培苗的株高、地下
部鲜重、茎鲜重、叶片鲜重、植株鲜重等均低于对照,
而茎粗、叶片数均高于对照,但各处理间差异不显
著。
2.2 根系形态
从表2可见,随着精胺浓度的升高,金柑组培苗
根长呈先升高后下降的趋势。在1mmol/L精胺处
理条件下,金柑组培苗的根系长度、根系投影面积、
根系表面积、平均直径及根系体积等均显著高于对
照(分别高12.87%、14.67%、14.89%、9.68%、
15.52%);而在0.5mmol/L、2mmol/L、4mmol/L
精胺处理下,根系长度无显著差异,根系投影面积、
根系表面积、平均直径、根系体积等则均低于对照,
但处理间差异不显著。
2.3 碳水化合物含量
如图所示,随着精胺浓度的增加,金柑组培苗可
溶性糖和蔗糖含量均呈先升高后降低的趋势。在
1mmol/L精胺处理条件下,金柑组培苗根系及叶片
的可溶性糖和蔗糖含量均显著高于对照(分别高
13.84%、12.95%和15.33%、22.27%),但处理间
差异不显著。根系可溶性糖含量略低于叶片可溶性
糖含量,叶片蔗糖含量明显高于根系蔗糖含量。
表1 不同浓度外源精胺处理金柑组培苗的植株生长状况
Table 1 Effect of different concentration of exogenous Spm on growth of in vitro Kumquat
精胺浓度/
(mmol/L)
Spm concentration
株高/cm
Plant
height
茎粗/cm
Stem
diameter
叶片数/片
Leaf
number
地下部鲜重/g
Fresh root
weight
茎鲜重/g
Fresh
stem weight
叶片鲜重/g
Fresh leaf
weight
植株鲜重/g
Fresh plant
weight
0  4.25b 0.105b 2.5b 0.046 0b 0.034 0a 0.068 0b 0.148 0b
0.5  3.30c 0.117a 4.0a 0.037 0d 0.023 2b 0.057 2c 0.117 4d
1  4.87a 0.122a 4.2a 0.054 0a 0.033 0a 0.087 9a 0.174 9a
2  2.92c 0.116a 3.8a 0.040 3cd  0.022 2b 0.065 1bc  0.127 6cd
4  2.87c 0.117a 4.3a 0.044 4bc  0.025 0b 0.060 1bc  0.129 5c
 注:同一列数字后的不同小写字母表示差异达0.05显著水平(下同)。
 Note:Different letters in the same column showed the significant level at 5%.The same below.
表2 不同浓度外源精胺处理金柑组培苗根系的形态特征
Table 2 Effect of different concentration of exogenous Spm on root morphology of in vitro Kumquat
精胺浓度/(mmol/L)
Spm concentration
根系长度/cm
Root length
根系投影面积/cm2
Root projected area
根系表面积/cm2
Root surface area
平均直径/mm
Average diameter
根系体积/cm3
Root volumn
0  7.77b 0.75b 2.35b 0.93b 0.058b
0.5  6.93b 0.61c 1.83c 0.85c 0.039d
1  8.77a 0.86a 2.70a 1.02a 0.067a
2  7.52b 0.65c 2.04c 0.91bc  0.046c
4  7.27b 0.66c 2.06c 0.90c 0.048c
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图示 不同浓度外源精胺处理金柑组培苗可溶性糖和蔗糖的含量
Fig. Effect of different concentration of exogenous Spm on soluble sugar content of in vitro Kumquat
3 结论与讨论
有研究报道[4-8],精胺对植物的植株生长和根系
生长有促进作用,其含量与细胞的分化和伸长有关。
笔者的试验结果表明:
1)精胺促进金柑组培苗植株生长和根系生长的
最佳浓度为1mmol/L,在1mmol/L处理条件下,金柑
组培苗的株高、茎粗、叶片数、地下部鲜重、叶片鲜重、
植株鲜重、根系长度、根系投影面积、根系表面积、平均
直径及根系体积等均显著高于对照,而二者的茎鲜重
无差异,这充分说明1mmol/L能促进细胞的伸长。低
于1mmol/L促进效果不明显,超过1mmol/L则有抑
制作用,其原因还有待于进一步研究。总之,精胺对金
柑组培苗生长影响因浓度而异。
2)与对照相比较,除了1mmol/L精胺能显著
提高叶片和根系可溶性糖和蔗糖含量外,其他浓度
处理条件下的精胺处理均未呈现显著的改变。更高
的碳水化合物为根系的生长和呼吸作用提供了碳
源。因此,可以推断,精胺浓度为1mmol/L时对促
进植株生长和根系形态最有效,这可能与其提高植
株组织内碳水化合物含量密切相关。精胺诱导植物
生长的改善与碳水化合物之间的关系还待进一步深
入研究。
[参 考 文 献]
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(责任编辑:王 海)
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 邹英宁 等 金柑组培苗对外源精胺的响应
 ZOU Ying-ning et al Responses of Exogenous Spermine to in vitro Kumquat