全 文 ：实用医学杂志 2013 年第 29 卷第 16 期
doi：10．3969 ／ j．issn．1006-5725.2013.16．023
基金项目：国家自然科学基金项目（编号：30970300）； 哈尔滨市
科技创新人才研究专项基金项目（优秀学科带头人：2010rfxxs031）
作者单位：150040 哈尔滨市， 黑龙江中医药大学药学院 （王振
月， 康毅华）；150525 哈尔滨市食品药品检验检测中心 （唐先明）；
276005 临沂市，鲁南制药集团股份有限公司（赵海鹏）； 050035 石
家庄市，河北以领医药集团医药研究院（王宗权）
毛脉酸模（rumex gmelini turcz．）为蓼科酸模属
植物。 在黑龙江省主产于大、小兴安岭及张广才岭
东部山区，民间以根入药，以治疗淋病、癣病、疮毒、
止血、癌症和调血脂等著称 ［1－2］。 毛脉酸模的自然资
源极为丰富，蕴藏量大。 从毛脉酸模根中已分离得
到酸模素、蒽醌类、二苯乙烯类等化合物 ［3－5］。 为明
确其药理作用，本实验研究了毛脉酸模 50％乙醇提
取物和水提取物对于小鼠 S180、H22 细胞株移植
性肿瘤动物模型的抑瘤作用，对于 L1210 细胞株移
植性肿瘤动物模型的生命延长率的影响，来研究毛
脉酸模提取物的抗肿瘤活性。
1 资料与方法
1．1 药材样品与试药 毛脉酸模样品： 采于黑龙
江中医药大学药用植物园。 环磷酰胺（CTX）：山西
普德药业有限公司生产，200 mg ／支，批号：国药准
字 H14023686。 用时以 0．9％生理盐水溶解，配成 3
mg ／ mL 的溶液。
1．2 实验动物 昆明种小鼠， 体重 （20 ± 2）g，雄
性，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，合格
证：黑动字第 P00101006 号；DBA ／ 2 小鼠，体重（20
± 2）g，雄性，由中国医学科学院实验动物研究所繁
育场提供，合格证：SCXK（京）2004－0001。
1．3 肿瘤细胞株 S180 细胞株： 由哈尔滨医科大
学肿瘤防治研究所提供； H22 细胞株：由哈尔滨医
科大学肿瘤防治研究所提供；L1210 细胞株： 由中
国医学科学院抗肿瘤实验室提供。
1．4 仪器设备 Mettler 电子天平 AE 240； 超净工
作台（苏州净化设备厂）细胞计数板 。
1．5 小鼠体内抑瘤实验
1．5．1 实验用药的提取制备 毛脉酸模 50％乙醇
提取液的制备 ［6］：取毛脉酸模药材干燥根 50 g，粉
碎后加入 8 倍量的 50％的乙醇， 热回流提取 2 次，
每次 4 h，趁热抽滤，合并滤液。 在 60℃减压干燥，
毛脉酸模提取物体内抗肿瘤作用的实验研究
王振月 唐先明 康毅华 赵海鹏 王宗权
摘要 目的：研究毛脉酸模提取物小鼠体内抗肿瘤作用。 方法：以 S180 肉瘤、H22 肝癌及 L1210 白血病
作为实验瘤株， 观察毛脉酸模 50％乙醇提取物和水提取物对于小鼠 S180、H22 细胞株移植性肿瘤动物模型
的抑瘤作用、对于 L1210 细胞株移植性肿瘤动物模型的生命延长率的影响。 结果：毛脉酸模 50％乙醇提取物
和水提取物对于小鼠 S180、H22 细胞株移植性肿瘤动物模型的抑瘤作用均大于 30％， 对于 L1210 小鼠的生
命延长率均在 50％以下。 结论：毛脉酸模 50％乙醇提取物和水提取物能明显抑制 S180 实体瘤和 H22 实体瘤
的生长，但是毛脉酸模 50％乙醇提物和水提取物对于 L1210 小鼠的生存时间无明显影响。
关键词 毛脉酸模； 体内抗肿瘤； S180； H22； L1210
Experimental study on antitumor effect of extracts from rumex gmelini turcz in vivo WANG Zhen-yue*，
TANG Xian-ming ， KANG Yi-hua， ZHAO Hai-peng， WANG Zong-quan． College of Pharmacy， Heilongjiang
University of Traditional Chines Medicine，Harbin 150040，China
【Abstract】 Objectives To investigate the antitumor effect of extracts from Rumex gmelini Turcz in vivo．
Methods The S180-mice models and the H22-mice models were used to study the tumor inhibition rate of Rumex
gmelini Turcz． The L1210-mice models were used to test the survival time after Rumex gmelini Turcz treatment．
Results Extracts from Rumex gmelini Turcz had obvious effects on inhibiting tumor growth at the rate over 30％．
The extracts of Rumex gmelini Turcz couldn＇t prolong the life span of mice bearing L1210 ascitic tumors， and the
rate of life-elongation of the mice bearing L1210 ascitic tumors was below 50％ ． Conclusions The extracts of
Rumex gmelini Turcz could inhibit tumor growth in mice bearing S180 and H22 tumors， but with no effect on
survival period in mice bearing L1210 tumors．
【Key words】 Rumex gmelini turcz； In vivo anti-tumor activity； S180； H22； L1210
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实用医学杂志 2013 年第 29 卷第 16 期
所得粉末作为供试品。 毛脉酸模水提取液的制备：
取毛脉酸模药材干燥根 50 g， 粉碎后加入 8 倍量
的水，热回流提取 2 次，每次 1h，趁热过滤，合并滤
液。 在 60℃水浴上蒸干，所得粉末作为供试品。
1．5．2 实验用药剂量的确定 ［7］
1．5．2．1 最大耐受剂量的确定 取小鼠 18 只，随
即分成 6 组，每组 3 只。 实验前动物禁食，但不禁
水。分别将毛脉酸模 50％乙醇提取物和水提取物用
水配制成浓度为 400、300、200 mg ／ mL 的溶液 ，于
禁食 6 h 的小鼠按上述剂量分别灌胃给药，每只给
药 0．8 mL，继续观察 6 h，此过程禁食，但不禁水。
然后再按上述方法灌胃给药 1 次， 正常给食给水，
观察 1 周。 如实验组的动物全部死亡，则剂量减半
再试。若仍全部死亡，再继续减量，直至在一组中有
1 只以上的动物存活。 然后取上述部分死亡剂量的
1 ／ 3 ～ 1 ／ 5 作为 1 次的治疗剂量。
1．5．2．2 实验用药的配制 根据 2．1．2．1 确定的用
药剂量， 用 0．9％的生理盐水将毛脉酸模 50％乙醇
提取物分别配成高剂量（250 mg ／ mL）、中剂量（125
mg ／ mL）、低剂量（62．5 mg ／mL）溶液，于 4℃冰箱中保
存备用； 用 0．9％的生理盐水将毛脉酸模水提取物分
别配成高剂量（300 mg ／mL）、中剂量（150 mg ／mL）、低
剂量（75 mg ／mL）溶液，于 4℃冰箱中保存备用。
1．5．3 小鼠实体瘤模型的建立 ［7］ 无菌条件下取
接种于昆明小鼠约 7 d 的腹水，加入适量的生理盐
水进行 1 ∶ 2 的稀释，配制成瘤细胞悬浮液，吹打混
匀，迅速接种于同种小鼠右前肢腋下皮下，每只接
种 0．1 mL。 每种肿瘤模型重复 3 次实验。
1．5．4 动物分组及给药方法 将接种肿瘤的昆明
小鼠按体重随机分为 10 组，每组 10 只，分别为毛
脉酸模 50％乙醇提取物高、中、低剂量组，CTX 阳
性对照组，阴性对照组；毛脉酸模水提取物高、中、
低剂量组，CTX 阳性对照组，阴性对照组。阳性对照
组按 0．1 mL ／ 10 g 体重，隔日腹腔注射给药。
各给药剂量组按 0．2 mL ／ 10 g 体重， 每日灌胃
给药，连续给药 10 d。 阴性对照组灌胃给与相同体
积的生理盐水。 停药次日将小鼠处死，分别称取小
鼠体重、 瘤重， 计算抑瘤率。 抑瘤率＝（C－T） ／ C ×
100％ （T 为实验组平均瘤重， C 为空白对照组平均
瘤重）
1．6 腹水型小鼠生命延长率试验
1．6．1 实验用药剂量的确定 具体方法参见 2．1．2。
1．6．2 实验用药的配制 根据 2．2．1 确定的用药剂
量， 用 0．9％的生理盐水将毛脉酸模 50％乙醇提取
物分别配成高剂量（200 mg ／ mL）、中剂量（100 mg ／
mL）、低剂量（50 mg ／ mL）溶液，于 4℃冰箱中保存备
用； 用 0．9％的生理盐水将毛脉酸模水提取物分别
配成高剂量（250 mg ／ mL）、中剂量（125 mg ／ mL）、低
剂量（62．5 mg ／ mL）溶液，于 4℃冰箱中保存备用。
1．6．3 小鼠腹水型肿瘤模型的建立 具体方法参
见 1．2，仅最后需将肿瘤细胞悬液注入清洁级 DBA
小鼠腹腔中，每只小鼠注射 0．2 mL。
1．6．4 动物分组及给药方法 将接种肿瘤的昆明
小鼠按体重随机分为 10 组，每组 10 只，分别为毛
脉酸模 50％乙醇提取物高、中、低剂量组，CTX 阳
性对照组，阴性对照组；毛脉酸模水提取物高、中、
低剂量组，CTX 阳性对照组，阴性对照组。阳性对照
组按 0．1 mL ／ 10 g 体重，隔日腹腔注射给药。
各给药剂量组按 0．2 mL ／ 10 g 体重， 每日灌胃
给药，连续给药 14 d。 阴性对照组灌胃给与相同体
积的生理盐水。记录各鼠生存时间，到第 30 天仍存
活者按 30 d 记。计算生命延长率。小鼠生命延长率
（ILS）＝（T ／ C－1） × 100％（T：给药组小鼠平均存活
时间；C：阴性对照组小鼠平均存活时间）
1．7 实验数据处理 所有结果均采用 SPSS 13．0
软件进行方差分析（ANOVA），检验差异显著性，结
果以 x ± s表示。
2 结果
2．1 实验用药的剂量 昆明种小鼠实验用药醇高
剂量组为 250 mg ／ mL、 醇中剂量组为 125 mg ／ mL、
醇低剂量组为 62．5 mg ／ mL；水高剂量组为 300 mg ／
mL、 水中剂量组为 150 mg ／ mL、 水低剂量组为 75
mg ／ mL。
DBA ／ 2 小鼠实验用药的高、 中、 低剂量分别
为：醇高剂量组为 200 mg ／ mL、醇中剂量组为 100
mg ／ mL、 醇低剂量组为 50 mg ／ mL； 水高剂量组为
250 mg ／ mL、水中剂量组为 125 mg ／ mL、水低剂量组
为 62．5 mg ／ mL。
2．2 毛脉酸模提取物的体内抑瘤作用
2．2．1 毛脉酸模提取物对 S180 移植性肿瘤的作用
毛脉酸模提取物醇高、醇中、醇低剂量组对 S180
实体瘤的体内抑瘤率分别为 77．0％、76．9％、78．1％，
但无明确量效关系；水高、水中、水低剂量组体内抑
瘤率分别为 55．3％、37．0％、45．1％均在 30％以上 。
见表 1。
2．2．2 毛脉酸模水提取物对 H22 移植性肿瘤的作
用 毛脉酸模提取物醇高、 醇中、 醇低剂量组对
H22 实体瘤的体内抑瘤率分别为 77．0％、76．9％、
78．1％；水高、水中、水低剂量组体内抑瘤率分别为
55．3％、37．0％、45．1％均在 30％以上，但无明确量效
关系。 具体数据见表 2。
2．3 毛脉酸模提取物对 DBA 腹水型小鼠模型生
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实用医学杂志 2013 年第 29 卷第 16 期
存期的影响 毛脉酸模提取物醇高、醇中、醇低剂
量组对 DBA 腹水型小鼠模型的生命延长率分别为
2．1％、8．1％、－10．5％； 水高、 水中、 水低剂量组对
DBA 腹水型小鼠模型的生命延长率分别为 0．4％、
4．5％、6．2％，均未能达到实验要求的 50％以上。 见
表 3。
3 讨论
毛脉酸模作为我国民间一味草药，国内外研究
报道较少， 其药学研究领域仅限于本课题组的研
究。 数年来课题组成员对毛脉酸模进行了资源调
查、生药学、化学成分等药学基本领域的研究，药理
活性研究进行的较少。通过毛脉酸模化学成分研究
表明，毛脉酸模根中含有白藜芦醇、白藜醇－3－0－
β－D－葡萄糖苷、 大黄酚－1－O－β－D－葡萄糖苷、大
黄素－1－O－β－D－葡萄糖苷、大黄酚、大黄素、胡萝
卜苷、蔗糖、樱草糖、葡萄糖、对羟基桂皮酸等化合
物［3－5］。 研究表明白藜芦醇、白藜芦醇苷等二苯乙烯
类化合物具有较强的抗肿瘤作用，为此，本项实验
进行了毛脉酸模根提取物的体内抗肿瘤作用实验
研究。
在体内抑瘤实验中发现， 毛脉酸模根 50％乙
醇提取物和水提取物的各剂量组与阴性对照组比
较差异均有显著性，且抑瘤率均在 30％以上，说明
毛脉酸模根 50％乙醇提取物和水提取物对实体瘤
S180、H22 生长具有明显的抑制作用， 为下一步药
物开发和进行深入的机理研究提供了思路。但是在
本实验中也发现， 实验药物的量效关系不是很理
想，与白藜芦醇、白藜芦醇苷纯化合物相比有差距，
表明其粗提物发挥药效的复杂性，其抗肿瘤作用不
能用单一的机理进行解释。
在生命延长实验中， 50％乙醇提取物的各剂
量组还是水提取物的各剂量组与阴性对照组比较
均无显著性差异， 且生命延长率均在 50％以下，说
明毛脉酸模的 50％乙醇提取物和水提取物都不会
明显增加荷瘤小鼠的生存时间，提示毛脉酸模的抗
肿瘤作用可能是具有选择性的。
通过本实验研究认为， 毛脉酸模根提取物对
肿瘤的生长具有一定的抑制作用，其抗肿瘤作用的
有效部位、有效成分及其结构修饰及其作用的机制
等有待进一步深入研究。
4 参考文献
刘慎谭． 东北草本植物志 ［M］． 第 2 卷． 北京： 科学出版社，
1959：24．
吉林省中医中药研究所 ． 长白山植物药志 ［M］． 吉林： 人民
出版社，1982：299．
王振月，蔡学勤，康毅华，等 ．毛脉酸模中两个化合物的结构
研究 ［J］． 中草药，1996 ， 21（12）： 741－742．
康毅华，王振月，李井坤，等 ． 毛脉酸模中两个蒽醌甙的分离
鉴定 ［J］． 中国中药杂志， 1996，21（12）： 741－742．
王振月，李彦冰，匡海学，等． 毛脉酸模中大黄酚、大黄素的分
［1］
［2］
［3］
［4］
［5］
表 1 毛脉酸模提取物对 S180 移植性肿瘤生长的影响
x ± s
组别
阴性对照组
阳性对照组
醇高剂量组
醇中剂量组
醇低剂量组
水高剂量组
水中剂量组
水低剂量组
实验前
10
10
10
10
10
10
10
10
实验后
10
8
8
9
10
10
10
9
瘤重（g）
1．3951 ± 0．1458＠＃￥□☆○△
0．1785 ± 0．0512*☆○△
0．3205 ± 0．0408*☆○△
0．3224 ± 0．0457*☆○△
0．3061 ± 0．0392*☆○△
0．6230 ± 0．1333*＠＃￥□○
0．8789 ± 0．0661*＠＃￥□☆
0．7657 ± 0．0893*＠＃￥□
抑瘤率（％）
－
87．2
77．0
76．9
78．1
55．3
37．0
45．1
注 ： *与阴性对照组比较 P ＜ 0．05，＠ 与阳性对照组比较 P ＜
0．05，＃ 与醇高剂量组比较 P ＜ 0．05，￥与醇中剂量组比较 P ＜ 0．05，
□与醇低剂量组组比较 P ＜ 0．05， ☆与水高剂量组比较 P ＜ 0．05，
○与水中剂量组比较 P ＜ 0．05，△与水低剂量组比较 P ＜ 0．05
动物数（n）
表 2 毛脉酸模提取物对 H22 移植性肿瘤生长的影响
x ± s
组别
阴性对照组
阳性对照组
醇高剂量组
醇中剂量组
醇低剂量组
水高剂量组
水中剂量组
水低剂量组
实验前
10
10
10
10
10
10
10
10
实验后
8
8
8
10
10
10
10
10
瘤重（g）
1．0000 ± 0．09391＠＃￥□☆○△
0．1705 ± 0．0394＊□△
0．3675 ± 0．0764＊△
0．2914 ± 0．0552＊△
0．4441 ± 0．0490＊＠
0．3252 ± 0．5128＊△
0．2775 ± 0．0746＊△
0．5947 ± 0．1284＊＠＃￥☆○
抑瘤率（％）
－
82．9
63．1
70．7
55．4
67．3
72．1
40．2
动物数（n）
注：与阴性对照组比较，*P ＜ 0．05；与阳性对照组比较，＠P ＜ 0．05；
与醇高剂量组比较，＃P ＜ 0．05；与醇中剂量组比较，￥P ＜ 0．05；与醇
低剂量组组比较，□P ＜ 0．05；与水高剂量组比较，☆P ＜ 0．05；与水
中剂量组比较，○P ＜ 0．05；与水低剂量组比较，△P ＜ 0．05
组别
阴性对照组
阳性对照组
醇高剂量组
醇中剂量组
醇低剂量组
水高剂量组
水中剂量组
水低剂量组
实验前
10
10
10
10
10
10
10
10
实验后
0
0
0
0
0
0
0
0
生存天数（d）
16．05 ± 3．124
22．42 ± 5．312*
16．39 ± 5．014
17．35 ± 4．215
14．36 ± 2．365
16．12 ± 2．867
16．78 ± 3．254
17．05 ± 0．1284
生命延长率（％）
－
39．7
2．1
8．1
－10．5
0．4
4．5
6．2
表 3 毛脉酸模提取物对荷 L1210 小鼠存活时间的影响
x ± s
动物数（n）
注：与阴性对照组比较，*P ＜ 0．05
2654
实用医学杂志 2013 年第 29 卷第 16 期
离鉴定 ［J］． 中医药学报，1996 ， 24（2）： 54．
唐先明， 王振月， 康毅华，等 ． 多指标综合评分法优选毛脉
酸模提取工艺 ［J］．中药材，2009，32（9）： 1460－1462．
徐叔云，卞如濂，陈修． 药理实验方法学 ［M］． 3 版 ． 北京： 人
民卫生出版社， 2001．
（收稿：2013－01－20 编辑：陈兵）
白细胞介素－17（IL-17）可诱导机体多种细胞
因子产生，成为一种强大的前炎症细胞因子，也是
炎症反应的微调因子， 可促进多种细胞的增殖 ［1］。
白细胞介素－10（IL-10）有很强的抗炎及免疫抑制
活性，除维持自身免疫耐受外，还抑制机体对多种
抗原的免疫反应 ［2］。 研究 ［1－2］发现它们与许多疾病
的发生相互关联。 本研究将通过建立人皮肤-裸鼠
嵌合模型， 采用析因设计研究 IL-17 及 IL-10 对人
表皮细胞 DNA 综合荧光值的影响， 以探讨它们对
人表皮细胞 DNA 增殖的作用。
1 材料与方法
1．1 主要设备与试剂 激光扫描共聚焦显微镜
（Meridian 公司），重组人 IL-17、重组人 IL-10、吖啶
橙（Sigma 公司）。
1．2 实验动物 BALB ／ c-nu 裸鼠 （南方医科大学
实验动物中心），4 ～ 6 周龄，体重 18～22 g，雄性，共
64 只，在 SPF 条件饲养。
1．3 皮肤标本收集 收集包皮环切术切下的包皮
组织， 取经快速病理检查正常者作为研究材料；每
块包皮组织切分成多份 8 mm × 8 mm 大小皮肤组
织，去除皮下组织，留其真皮与表皮，共收集 64 块。
1．4 人皮肤-裸鼠嵌合模型的建立 裸鼠常规消
毒、麻醉，切除背部靠近尾部处皮肤至筋膜层适当
［6］
doi：10．3969 ／ j．issn．1006-5725.2013.16．024
基金项目：2012 年广东省社会发展领域科技计划项目 （编号：
20120318087）
作者单位：510500 广州市白云区人民医院皮肤科（张宏宇）；
510630 广州市，南方医科大学第三附属医院皮肤科（毛祖豪）
通信作者：毛祖豪 E-mail：maozuhao＠126．com
白细胞介素－17及白细胞介素－10对人表皮细胞
DNA增殖影响的析因研究
张宏宇 毛祖豪
摘要 目的：探讨白细胞介素－17（IL-17）及白细胞介素－10（IL-10）对人表皮细胞 DNA 增殖的影响。 方
法：建立人皮肤－裸鼠嵌合模型 64 只，按析因设计要求，使用不同时间和浓度 IL-17 及 IL-10 注射于裸鼠移植
皮肤内，再以激光扫描共聚焦显微镜测试移植人表皮细胞 DNA 综合荧光值数据进行分析。 结果：随着 IL-17
使用浓度增加和使用时间加长可致人表皮细胞 DNA 综合荧光值显著增高（P ＜ 0．05），IL-10 使用浓度增加和
使用时间加长可致人表皮细胞 DNA 综合荧光值显著降低（P ＜ 0．05）。 结论：IL-17 对人表皮细胞 DNA 增殖有
促进作用，IL-10 对人表皮细胞 DNA 增殖有抑制作用。
关键词 白细胞介素－17； 白细胞介素－10； 人表皮细胞； DNA； 析因设计
Factorial study on the effects of IL-17 and IL-10 on the proliferation of DNA in human epidermal cells
ZHANG Hong-yu*， MAO Zu-hao．*The People′s Hospital of Baiyun District， Guangzhou 510500， China
Corresponding author： MAO Zu-hao E-mail：maozuhao＠126．com
【Abstract】 Objective To investigate the effects of IL-17 and IL-10 on the proliferation of DNA in human
epidermal cells． Methods 64 human skin-nude mice chimeric models were established． Then according to the
factorial design requirements， different times and different concentrations of IL-17 and IL-10 were injected into the
transplanted nude mice skin． DNA fluorescence values of the human epidermal cells were tested by laser scanning
confocal microscopy and then were analyzed． Results With the increase of the concentration and use of time of IL-
17， the DNA fluorescence values of human epidermal cells were significantly increased （P ＜ 0．05）； whilst with the
increase of the concentration and use of time of IL-10， those were significantly reduced （P ＜ 0．05）． Conclusion IL-
17 had a stimulatory effect on the proliferation of DNA in human epidermal cells， while IL-10 had an opposite effect．
【Key words】 IL-17； IL-10； human epidermal cells； DNA； Factorial design
［7］
2655