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ｂｅｔｅｓ　ｍｅｌｉｔｕｓ，ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｃａｒｄｉａｃ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｏｕｔｈ－
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［收稿日期］２０１３－０９－２９
［基金项目］国家自然科学基金项目（编号：３０８７０２４９，８１１７３５０９）　［作者简介］丁伟杰，学士，主任药师，电话：１３６５９８８２９６８　Ｅ－ｍａｉｌ：４６３６４５９６８
＠ｑｑ．ｃｏｍ　［通讯作者］楼一层，博士，教授，主任药师，电话：０２７－８７８５９０１９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｏｕｙｉｃｅｎｇ＠１６３．ｃｏｍ
Ｄ１０１型大孔吸附树脂分离纯化红蓼总黄酮工艺研究
丁伟杰１，胡盈１，陈娈１，印凯文１，赵祥２，楼一层２　 （１．武汉市普仁医院，湖北 武汉４３００８１；２．武汉理工大学，湖北 武
汉４３００７０）
［摘要］　目的：筛选出适宜红蓼总黄酮纯化的大孔树脂，研究影响分离纯化的主要因素，确定最佳工艺参数。方法：采用分光
光度法测定红蓼总黄酮含量，通过静态及动态吸附－解吸方法筛选最佳树脂，以总黄酮回收率为主要指标，优化工艺条件。结
果：回收率和解吸率最佳为Ｄ１０１大孔树脂，最佳工艺条件为：样品浓度２．２１３　ｍｇ·ｍＬ－１、ｐＨ＝４、用量１０３．３　ｍｇ·ｇ－１；３　ＢＶ水
洗、４　ＢＶ５０％乙醇洗脱，总黄酮回收率为５６．２％，纯度为７２．３％。结论：Ｄ１０１大孔树脂用于红蓼中总黄酮的提取纯化，回收率
较高，纯度好。
［关键词］　Ｄ１０１大孔树脂；红蓼；总黄酮；分离纯化；工艺研究
［中图分类号］Ｒ９４３　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１－５２１３（２０１４）１５－１２５９－０４　ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１４．１５．０５
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｉｃｓ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍＰｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔｌｅ　Ｌ
ｂｙ　Ｄ１０１　ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ａｄｓｏｒｐｔｉｖｅ　ｒｅｓｉｎ
ＤＩＮＧ　Ｗｅｉ－ｊｉｅ１，ＨＵ　Ｙｉｎｇ１，ＣＨＥＮ　Ｌｕａｎ１，ＹＩＮＧ　Ｋａｉ－ｗｅｎ１，ＺＨＡＯ　Ｘｉａｎｇ２，ＬＯＵ　Ｙｉ－ｃｅｎｇ２（１．Ｗｕｈａｎ　Ｐｕｒｅｎ
ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｈｕｂｅｉ　Ｗｕｈａｎ　４３００８１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｗｕｈａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈｕｂｅｉ　Ｗｕ－
ｈａｎ　４３００７０，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｐｕｒｉｆｙ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍＰｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔｌｅ　Ｌ　ｗｉｔｈ　ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ａｄｓｏｒｐｔｉｖｅ　ｒｅｓｉｎ　ａｎｄ　ｅｓ－
ｔａｂｌｉｓｈ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｆｏｒ　ｓｅｐａｒａｔｉｎｇ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｏｆ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｂｙ　ｓｔａｔｉｃ　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｔｅｓｔｓ，ａｎｄ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｂｙ　ｍｅａｓ－
ｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍＰｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔｌｅ　Ｌ　ｗｉｔｈ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ｔｙｐｅ
Ｄ１０１　ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ａｄｓｏｒｐｔｉｖｅ　ｒｅｓｉｎ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔｌｅ　Ｌ．
Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｓａｍｐｌｅ　ａｍｏｕｎｔ　１０３．３　ｍｇ·ｇ－１，ａｎｄ　ｓａｍｐｌｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ２．２１３　ｍｇ·ｍＬ－１　ａｔ　ｐＨ４；ａｎｄ　ｅｌｕ－
ｔｉｎｇ　ｒｅａｇｅｎｔ　ｗａｓ　５０％ａｌｃｏｈｏｌ　ｗｉｔｈ　４　ＢＶ，ａｎｄ　ｗａｔｅｒ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｖｏｌｕｍｅ　ｗａｓ　３　ＢＶ．Ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｒｅａｃｈｅｄ
５６．２％ ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｐｕｒｉｔｙ　ｏｆ　７２．３％．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｔｏ　ｕｔｉｌｉｚｅ　ｔｈｅ　Ｄ１０１　ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ａｄｓｏｒｐｔｉｖｅ　ｒｅｓｉｎ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒ－
ｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔｌｅ　Ｌ　ｉｓ　ｆｅａｓｉｂｌｅ，ｓｈｏｗｓ　ｈｉｇｈ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｔｙ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：Ｄ１０１　ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ａｄｓｏｒｐｔｉｖｅ　ｒｅｓｉｎ；Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔｌｅ　Ｌ；ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｔｅｃｈｎｉ－
ｃａｌ　ｓｔｕｄｙ
　　红蓼为蓼科植物荭草Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔｌｅ　Ｌ全
草，别名天蓼、大蓼、石龙等，其性味凉辛有毒，具有
祛风除湿、清热解毒、活血、截疟的功效［１］。研究表
明，红蓼的黄酮类成分具有良好的抗肿瘤活性，该药
·９５２１·中国医院药学杂志２０１４年８月第３４卷第１５期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｕｇ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．１５
对于扩张血管、降血压、抗菌等亦有广泛的药理活
性［２］。大孔吸附树脂在中药提取分离中的应用日益
广泛，已成为纯化中药有效成分或有效部位的一种
有效方法［３－８］。运用大孔吸附树脂技术富集纯化总
黄酮成分，并对提取纯化工艺进行优化。
１　仪器与试药
１．１　 仪器　７５２型紫外分光光度仪（南京麒麟分
析仪器有限公司）；电子天平（德国赛多利斯公司）；
旋转蒸发仪Ｒｅ－５２Ａ（上海亚荣科技有限公司）；渗漉
器（自制）。
１．２　 试剂　芦丁标准品（中国药品生物制品检定
所，批号００８０－０８１５）；亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，
盐酸；无水乙醇均为分析纯；纯化水。大孔吸附树脂
Ｄ１０１、ＡＢ－８（天津市海光化工有限公司），Ｄ２０１、
Ｄ３０１、Ｄ２０２（安徽皖东化工有限公司）。
１．３　 药材　红蓼药材采自湖北武汉，由武汉理工
大学化学工程学院楼一层教授鉴定为蓼科植物荭草
Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔｌｅ　Ｌ．全草。
２　方法与结果
２．１　提取液的制备　取药材粗粉１．５　ｋｇ，于渗漉器
中用８０％乙醇浸泡２４　ｈ后，８倍量的８０％乙醇连续
渗漉，控制流速约５　ｍｌ·ｍｉｎ－１，回收乙醇至相对密
度为１．２　ｇ·ｍＬ－１得流浸膏。流浸膏用纯化水溶解，
静置，抽滤得提取液。
２．２　总黄酮含量测定　采用硝酸铝－亚硝酸钠比色
法［９］，以芦丁为标准品在５０８　ｎｍ 处测定吸光度，芦
丁浓度为纵坐标，吸光值为横坐标，得标准曲线回归
方程：Ｙ＝０．０８６　８　Ｘ＋０．０００　９（ｒ＝０．９９８　６），在
０．００８～０．０７２　ｍｇ·ｍＬ－１范围内线性关系良好。
２．３　树脂的筛选
２．３．１　树脂预处理　树脂于９５％乙醇中充分溶
胀后装柱，依次用下列溶液冲洗：９５％乙醇洗至流
出液澄清；水洗尽乙醇（无醇味）；５％盐酸溶液冲
洗，水洗至中性；４％氢氧化钠溶液冲洗，水洗至中
性，备用。
２．３．２　静态吸附－解吸　称取５种树脂各６　ｇ于锥
形瓶中，各加入１６０　ｍｌ上样液（已知质量浓度２．２１３
ｍｇ·ｍｌ－１），于振荡器中振摇１０　ｍｉｎ后静止２４　ｈ，过
滤，按方法测定吸附后滤液浓度。将滤出的树脂用
１６０　ｍｌ纯化水洗净，另置２５０　ｍｌ锥形瓶中，加入
５０％乙醇１６０　ｍｌ，振摇后静止２４　ｈ，测定解吸后滤
液浓度。按照下式计算各树脂对红蓼总黄酮的静态
饱和吸附量、解吸率［１０－１１］，结果见表１。
饱和吸附量（ｍｇ·ｇ－１）＝（样液浓度－吸附后滤
液浓度）×上样液体积／干树脂量；
解吸量（ｍｇ·ｇ－１）＝解吸后滤液浓度×解吸液
体积／干树脂量；
解吸率（％）＝解吸量／饱和吸附量×１００％
表１　５种树脂静态吸附－解吸测定结果（ｎ＝３）
Ｔａｂ　１　Ｔｈｅ　ｓｔａｔｉｃ　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｆｉｖｅ　ｔｙｐｅｓ
ｏｆ　ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ｒｅｓｉｎｓ（ｎ＝３）
树脂型号
饱和吸附量
／ｍｇ·ｇ－１
解吸量
／ｍｇ·ｇ－１
解吸率
／％
Ｄ１０１　 ５３．４０　 ４６．４０　 ８６．８９
Ｄ２０１　 １１９．８０　 ７．８１　 ６．５２
Ｄ２０２　 １９．８０　 ６．４０　 ３２．３２
Ｄ３０１　 １３５．８０　 ４．７２　 ３．５８
ＡＢ－８　 １０８．８７　 ４３．６０　 ４０．０５
２．３．３　动态吸附－解吸　称取５种树脂各６　ｇ，湿法
装柱，各加入１６０　ｍＬ上样液（已知质量浓度２．２１３
ｍｇ·ｍｌ－１），上样吸附，过柱液重吸附一次，控制流速
适宜；１６０　ｍｌ纯化水冲洗后，用５０％乙醇洗脱，将各
吸附后残液、水洗液、醇洗脱液按方法测定总黄酮含
量。按下列公式计算比吸附量、比洗脱量、总黄酮回
收率，结果见表２。
表２　５种树脂动态吸附－解吸测定结果（ｎ＝３）
Ｔａｂ　２　Ｔｈｅ　ｄｙｎａｍｉｃ　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｆｉｖｅ
ｔｙｐｅｓ　ｏｆ　ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ｒｅｓｉｎｓ（ｎ＝３）
树脂
型号
５０％乙醇
洗脱量／ｍｇ
比吸附量
／ｍｇ·ｇ－１
比洗脱量
／ｍｇ·ｇ－１
总黄酮
回收率／％
Ｄ１０１　 １９２．００　 ５４．６７　 ３２．００　 ５４．２３
Ｄ２０１　 ２１．２８　 ５３．９５　 ３．５５　 ６．０１
Ｄ２０２　 ３５．８４　 ４４．０８　 ５．９７　 １０．１２
Ｄ３０１　 ３１．６０　 ４２．０１　 ５．２７　 ８．９２
ＡＢ－８　 １８７．２０　 ５４．３５　 ３１．２０　 ５２．８７
　　比吸附量（ｍｇ·ｇ－１）＝（上柱黄酮量－残液中黄
酮量－水洗液中黄酮量）／干树脂量；
比洗脱量（ｍｇ·ｇ－１）＝醇洗脱液中黄酮量／干树
脂量；
总黄酮回收率（％）＝醇洗脱液中黄酮量／上柱
黄酮量×１００％
由于树脂的极性、孔径、比表面积等性质的不
同，对黄酮的吸附－解吸的能力亦各不相同。结合两
组吸附－解吸试验，５种树脂中Ｄ１０１型具有最佳的
解吸率和总黄酮回收率，故选用Ｄ１０１型树脂分离
纯化红蓼总黄酮。
２．４　分离纯化红蓼总黄酮工艺参数考察
２．４．１　上样量　８份干树脂各３　ｇ，湿法装柱，分别
加入上样液（已知质量浓度２．２１３　ｍｇ·ｍｌ－１）５０，８０，
１１０，１４０，１８０，２２０，３２０，３７５　ｍｌ，吸附完全后依次用
４　ＢＶ的纯化水、４　ＢＶ５０％乙醇洗脱，按方法测定各
吸附后残液、醇洗脱液黄酮含量并计算回收率，结果
见图１。当上样液１４０　ｍｌ即上柱量与干树脂之比
为１０３．３　ｍｇ·ｇ－１时，黄酮回收率达到最大值，随后
·０６２１· 中国医院药学杂志２０１４年８月第３４卷第１５期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｕｇ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．１５
逐渐降低。这是由于上样量过大，导致吸附不完全，
造成泄露，而且过大的上样量会造成上层树脂局部
过饱和吸附，影响树脂的重复使用；但上样量过少则
吸附剂用量偏多，总黄酮回收率虽保持较高水平，但
成本也会增高。综合考察选用上样量约１０３．３　ｍｇ·
ｇ－１为宜。
图１　上样量的影响
Ｆｉｇ　１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ａｍｏｕｎｔ
２．４．２　上样浓度　６份干树脂各３　ｇ，湿法装柱，不
同浓度（０．９００、１．６００、２．２１３、４．５１５、７．０００、９．２８０
ｍｇ·ｍｌ－１）上样液４　ＢＶ上柱。吸附完全后依次用４
ＢＶ的纯化水、４　ＢＶ５０％乙醇洗脱，按方法测定各
吸附后残液、醇洗脱液黄酮含量并计算回收率，见图
２。在树脂吸附量不变的条件下，采用低浓度上样液
会使工作量加大。考虑回收率及经济因素，宜选择
红蓼上样液（质量浓度２．２１３　ｍｇ·ｍｌ－１）直接上样。
图２　上样浓度的影响
Ｆｉｇ　２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
２．４．３　上样液ｐＨ值　干树脂８份各３　ｇ，湿法装
柱，用１　ｍｏｌ·Ｌ－１的盐酸溶液或氢氧化钠溶液调上
样液ｐＨ值为２、３、４、５、６、７、８、９，各取１００　ｍｌ上柱
吸附完全后，依次用４　ＢＶ的纯化水、４　ＢＶ５０％乙
醇洗脱，按方法测定各原液、吸附后残液、醇洗脱液
黄酮含量并计算回收率，结果见图３和表３。
图３　上样溶液ｐＨ的影响
Ｆｉｇ　３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ｐＨ　ｖａｌｕｅ
表３　不同ｐＨ上样液测定结果（ｎ＝３）
Ｔａｂ　３　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐＨ　ｖａｌｕｅｓ（ｎ＝３）
ｐＨ　 ２　 ３　 ４　 ５　 ６　 ７　 ８　 ９
现象 澄清 澄清 澄清 澄清 少量沉淀 少量沉淀 沉淀较多 沉淀较多
黄酮回收率／％７３．９６　７２．８１　９２．９１　７２．１９　 ６１．１３　 ５４．８０　 ５４．１２　 ２９．３２
２．４．４　洗脱剂乙醇的体积分数　５份干树脂各３
ｇ，湿法装柱，１６０　ｍｌ上样液上柱吸附完全，用４　ＢＶ
纯化水洗柱后，分别１０％，３０％，５０％，７０％，９５％乙
醇洗脱，每种洗脱液收集４　ＢＶ，按方法测定各吸附
后残液、醇洗脱液黄酮含量并计算回收率，见图４。
随着乙醇的体积分数的增加，总黄酮回收率随之增
加，增大到５０％后，曲线呈平缓趋势，同时考虑到工
业生产成本问题，采用５０％乙醇即可达到较好解吸
效果。
图４　乙醇的体积分数的影响
Ｆｉｇ　４　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
２．４．５　洗脱剂体积　８　ｇ干树脂，湿法装柱，１６０　ｍｌ
上样液吸附完全后，用４　ＢＶ的纯化水、４　ＢＶ５０％
乙醇洗脱，依次收集醇洗脱液８个柱床体积，测定吸
附后残液、每个收集体积的黄酮含量并计算回收率，
见图５。当洗脱液用量为４　ＢＶ时，总黄酮的回收率
接近１００％，基本上将总黄酮洗脱完全，继续增大洗
脱体积效果并不明显，故洗脱４ＢＶ 确定为洗脱终
点。
图５　洗脱体积的影响
Ｆｉｇ　５　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｖｏｌｕｍｅ
２．４．６　水洗体积　４份干树脂各３　ｇ，湿法装柱，
１６０　ｍｌ上样液吸附完全后，分别用１，３，５，７　ＢＶ的
纯化水洗脱，再用１８０　ｍｌ　５０％的乙醇洗脱，测定各
部分的黄酮含量；各醇洗脱液浓缩干燥得固体样品，
称重，计算总黄酮纯度。结果见图６。采用大孔树
脂时，会同时吸附色素、糖类、蛋白质类等杂质，醇洗
脱前应用水尽量除去。采用３　ＢＶ水洗体积时，回
收率和纯度可达５６．２％、７２．３％，同时还可保证较低
工作量。
２．５　工艺验证　按照优化工艺，将１．５　ｋｇ药材粗
粉所得浸膏制备成提取液，通过２　ｋｇ　Ｄ１０１树脂（柱
子规格：６　ｃｍ×１２０　ｃｍ）全部进行纯化，按方法测定
样品纯化前后总黄酮含量，计算纯度。纯化前总黄
酮纯度仅为１８．２１％，纯化后纯度达到７１．０３％
·１６２１·中国医院药学杂志２０１４年８月第３４卷第１５期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｕｇ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．１５
（ｎ＝３，ＲＳＤ＝２．３２％）。经Ｄ１０１大孔树脂纯化后纯
度提高约３倍，优化的工艺稳定可行，具有良好效
果。
图６　水洗体积的影响
Ｆｉｇ　６　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｖｏｌｕｍｅ
３　讨论
本文对红蓼进行渗漉提取，通过对上样液浓度、
上样液ｐＨ、上样液体积、水洗体积、洗脱浓度等因
素的考察，建立了Ｄ１０１型大孔吸附树脂分离纯化
红蓼总黄酮的工艺优化方法，最佳工艺为采用质量
浓度为２．２１３　ｍｇ·ｍｌ－１的红蓼提取液４　ＢＶ上柱，调
节ｐＨ＝４．０左右，先以３　ＢＶ 纯化水淋洗，再用
４　ＢＶ５０％乙醇洗脱。所得红蓼精制提取物中总黄
酮纯度为７２．３％，回收率为５６．２％，为进一步应用研
究打下坚实基础。
ｐＨ值对于Ｄ１０１树脂吸附总黄酮有较大影响，
在酸性条件下吸附性能较好，碱性时样品易形成沉
淀，吸附效果差，这可能与黄酮类成分分子结构有
关，酸性环境下黄酮处于分子形式易于吸附，而在碱
性环境中，黄酮分子上的酚羟基形成酸根离子，易于
与其他离子形成络合物而产生沉淀。
大孔树脂本身具有较好的重复使用性，故文中
未考察其重复使用次数，在工业化生产当中可根据
实际情况进行重复使用处理。大孔树脂应用于中药
提取物纯化具有良好应用前景，但实际运用还需考
察众多指标，后期研究中还应充分考虑。
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［收稿日期］２０１３－１１－２０
［基金项目］河南省科技厅课题（编号：０９２１０２３１０２０３）　［作者简介］杨秀丽，女，主治医师、讲师，研究方向：冠心病、心力衰竭的诊治。电话：
０３７３－３０２９６４１，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｇｘｉｕｌｉ０１＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ　［通讯作者］赵国安，男，博士，主任医师、教授，研究方向：冠心病的介入治疗，Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｕｏ－
ａｎｚｈａｏ＠ｙｅａｈ．ｎｅｔ
不同剂量辛伐他汀对慢性心力衰竭兔左室重塑及心功能的影响
杨秀丽１，王显良１，冯现君２，孙海燕１，刘迎春３，武惠敏１，赵国安１　 （１．新乡医学院第三附属医院心内科，河南 新乡
４５３００３；２．新乡市第一人民医院心内科，河南 新乡４５３００３，；３．新乡医学院护理学院，河南 新乡４５３００３）
［摘要］　目的：通过观察不同剂量辛伐他汀对慢性心力衰竭（ＣＨＦ）左室重塑及心功能的影响，探讨辛伐他汀对慢性心力衰竭
兔心肌细胞发挥保护作用的机制。方法：雄性大耳白兔６０只，随机分成５组，正常对照（ＣＯＮ）组，慢性心力衰竭（ＣＨＦ）组，低
剂量辛伐他汀（ＳＤ－ＳＩＭ组），中剂量辛伐他汀（ＭＤ－ＳＩＭ）组，高剂量辛伐他汀（ＨＤ－ＳＩＭ）组。耳缘静脉注射阿霉素 （ＡＤＲ），制
作ＣＨＦ模型。行心脏彩超检查，测量左室结构、功能，测定血流动力学指标。处死动物后，留取左心室室壁多聚甲醛固定，染
色后进行免疫组化检测热休克蛋白２２（ＨＳＰ２２）表达水平。结果：心功能检查显示，与ＣＯＮ组相比ＳＤ－ＳＩＭ、ＭＤ－ＳＩＭ、ＨＤ－
ＳＩＭ、ＣＨＦ组左心室射血分数（ＬＶＥＦ）明显下降（Ｐ＜０．０５），与 ＭＤ－ＳＩＭ组相比，ＳＤ－ＳＩＭ组、ＨＤ－ＳＩＭ组明显下降（Ｐ＜０．０５）；
与ＣＯＮ组相比ＳＤ－ＳＩＭ、ＭＤ－ＳＩＭ、ＨＤ－ＳＩＭ、ＣＨＦ组左室舒张末内径（ＬＶＥＤＤ）、左室收缩末内径（ＬＶＥＳＤ）显著增加（Ｐ＜
０．０５），与 ＭＤ－ＳＩＭ组相比，ＳＤ－ＳＩＭ组和 ＨＤ－ＳＩＭ组明显增大（Ｐ＜０．０５）；血流动力学检测显示：与ＣＯＮ组相比，ＳＤ－ＳＩＭ组、
ＭＤ－ＳＩＭ组、ＨＤ－ＳＩＭ组、ＣＨＦ组的＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ、－ｄｐ／ｄｔｍａｘ及ＬＶＳＰ明显下降（Ｐ＜０．０５），ＳＤ－ＳＩＭ组、ＨＤ－ＳＩＭ组与 ＭＤ－ＳＩＭ
组相比明显下降（Ｐ＜０．０５）。ＨＳＰ２２的表达：与ＣＯＮ组相比ＳＤ－ＳＩＭ组、ＭＤ－ＳＩＭ组、ＨＤ－ＳＩＭ组、ＣＨＦ组ＨＳＰ２２蛋白的表达
明显增多（Ｐ＜０．０１），ＳＤ－ＳＩＭ组、ＭＤ－ＳＩＭ组、ＨＤ－ＳＩＭ组与ＣＨＦ组相比表达明显减少（Ｐ＜０．０５），其中ＭＤ－ＳＩＭ组表达最少
（Ｐ＜０．０５）。结论：辛伐他汀可明显改善慢性心力衰竭兔左室重塑，改善心功能，其中 ＭＤ－ＳＩＭ组效果最好，其机制可能与辛伐
·２６２１· 中国医院药学杂志２０１４年８月第３４卷第１５期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｕｇ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．１５