全 文 ：收稿日期:2005-12-16　　基金项目:西藏自治区重点科技项目资助 (No:2004-34)
＊通讯作者
藏波罗花补血效果的实验研究
高鹏1 , 蒋思萍2 , 王敬文1 , 韩峰1 , 王婧1 , 高平1＊
(1.四川大学生物资源与生态环境教育部重点实验室 , 四川成都 610064;2.西藏高原生物研究所)
　　摘要:为开发利用藏波罗花及明确其药用效果 , 选用昆明种小鼠建立急性失血性贫血和溶血性贫血模型 ,
分为阳性对照组 、 贫血模型组 、 水提物组 、 80%乙醇组 、 无水乙醇组 、 乙酸乙酯组和乙醚组 , 以 0.5g 原药/只
剂量经口灌服 , 测定实验鼠的体重 、 红细胞数 、 白细胞数 、 血红蛋白值 、 骨髓有核细胞数和骨髓血红蛋白值。
结果表明水提物及醇提物组为主要有效组分 , 与模型组相比差异极显著 , 具有显著的补血效果。
关键词:藏波罗花;补血
中图分类号:Q95-33　　文献标识码:A　　文章编号:1000-7083 (2006)01-0182-03
Initial Research on Effect of Enrich the Blood of Incarvillea younghusnandii
GAO Peng1 , JIANG Si-ping2 , WANG Jin-wen1 , HAN Feng1 , WANG Jing 1 , GAO Ping1
(1.State Specialized Lab.of Biocontrol Engineering in Mouse , Insect Pest and Plant Diseases of Grasslands ,
Sichuan University , Chengdu 610064;2.Research Institute of Plateau Creature , Tibet)
　Abstract:Incarvillea younghusbandii is a kind of plateau plant widely used to enrich the blood in Tibet area.In order
to exploit and utilize this natural resource and identify its effect as drug , the acute blood loss model and hemo lytic anemia
model have been established on KM mice.Acco rding the polarity sections of the extracted drug , the mice were divided in-
to seven groups:positive control group , anaemia model group , aqueous ex tract group , 80% ethanol ex tract group , dehy-
drated alcohol extract g roup , ethyl acetate extract g roup , and e ther ex tract group , lavage dose of 0.5 g primitive drug per
individual by mouth.After experiment , six phy siological index of mice:body weight , the number of red blood cell ,
w hite blood cell , haemoglobin value , bone marrow karyocy te and haemog lobin value were determined.The result exhibit-
ed that aqueous ex tract revealed alcoho l ex tract are main active principles and they bo th showed very significant differences
as compared w ith model group , so their effect on enriching the blood was good.
　Key words:I ncarvillea younghusbandii;enrich the blood
　　藏医药学是祖国医学宝库中的一枚奇葩 。藏药
是藏医药学的重要组成部分。藏药的发展面临着机
遇与挑战 。注重单方和天然药材有效成分的研究与
开发是目前藏药研究的一个重要趋向。藏波罗花
(Incarv il lea younghusbandii)属于紫葳科角蒿属多
年生矮小草本植物 , 高 10 ～ 20 cm , 无茎 , 生于海
拔 3600 ～ 5400 m 的高山灌丛草地或高山草地 , 分
布于西藏和青海 。据记载[ 1] , 角蒿属多种植物可
入药 , 如 角 蒿 (I . sinensis)、 两 头 毛 (I .
arguta)、鸡肉参 (I .mairei)、 藏波罗花等 , 有
消炎止痛 、 祛风除湿 、 补养气血等功效 , 为我国
藏 、 蒙 、 彝 、傈僳等多个民族常用草药 。藏波罗花
虽为中国的特有种 , 资源丰富 , 有广阔的开发利用
前景 , 但国内外关于其药效学及相关研究未见报
道。本文进行其补血药效的相关研究 , 为深入研究
和开发藏波罗花提供基础实验依据[ 1] 。
1　材料与方法
1.1　实验药物的提取与制备
藏波罗花提取物:由西藏高原生物研究所提
供 , 材料采集后选择根部 , 洗去泥土晾干 , 切碎 ,
于 60℃恒温干燥箱中干燥至恒重 , 用粉碎机粉碎。
取干粉 200 g , 加约 5 倍的 80%乙醇浸提 , 50℃水
浴锅中搅拌大约 48 h , 经过滤后减压浓缩得浸膏。
浸膏拌硅藻土 , 混匀干燥后按乙醚 、 乙酸乙酯和无
水乙醇的顺序索氏提取 。80%乙醇浸提后剩下的残
渣 , 干燥后用蒸馏水 4 L , 60℃搅拌提取 , 过滤后
减压蒸发浓缩得水提物液。浓度为 1 g /ml原药。
阳性对照药物为当归补血汤 , 当归与黄芪均购
自四川大学望江医院中药材科 , 按照文献记载方法
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熬制而成[ 2] , 浓缩至 1g/ml 原药水煎液 , 冷藏备
用。
1.2　实验动物
昆明种小鼠 , 清洁级 , 体重 20 ～ 25 g , 雌雄各
半 , 由成都中医药大学实验动物中心提供。
1.3　实验方法
1.3.1　贫血模型的建立
急性失血性贫血模型[ 3] :摘去小鼠一只眼球 ,
放血 0.5 ml , 24 h后选取血红蛋白值在 5 ～ 8 g/L
的小鼠为血虚证模型 。
溶血性贫血模型[ 4] :小鼠皮下注射乙酰苯肼
水溶液 , 第 1 天剂量 4 mg/只 , 第 4 天再注射 2
mg/只 , 则做成贫血模型。
1.3.2　分组与给药　实验动物分阳性对照组 (当
归补血汤)、贫血模型组和藏波罗花水 、 80%乙醇 、
无水乙醇 、乙酸乙酯和乙醚提取物各组 。各药物组
于造模当天连续灌胃给药 7 天 , 每天 0.5 g 原药/
只 。
1.3.3　生理指标测定方法　喂药后 7天 , 小鼠摘
眼球放血 , 得全血于抗凝处理试管中测血象指标。
红细胞计数 、白细胞计数 、 血红蛋白值测定按文献
记载方法进行[ 5] 。脱颈处死小鼠 , 取出胸腺和脾
脏 , 去掉脂肪组织 , 用滤纸洗干表面水分 , 称重。
剥离小鼠两根股骨 , 去掉脂肪和肌肉组织 , 剪掉两
侧股骨头 , 其中一根用 1 ml 3%醋酸溶液冲出骨
髓 , 打散 , 得骨髓细胞悬液 , 按红细胞计数法计数
骨髓有核细胞数 。另一根用 5 ml 文-齐液吹出骨
髓 , 用 5号针头移入离心管 , 每管加乙醚 1 ml , 振
荡 3 min , 2000 r/min离心 15 min , 用吸管吸取血
红蛋白层于比色皿中 , 文-齐液调零 , 540 nm 比
色 , 测骨髓血红蛋白值[ 6] 。
2　结果与分析
2.1　失血性贫血生理指标 (表 1)
表 1　急性失血性贫血小鼠生理指标
组别 体重(g)
RBC
(×1012/ L)
WBC
(×109/ L)
Hb
(g/ L)
BMC
(×1012/ L)
BHb
(g/ L)
阳性对照组 21.62±4.75 10.34±0.70 13.60±1.36 11.77±1.19 1.14±0.12 3.37±1.01
水提物组 26.50±3.34＊## 9.27±0.80＊## 7.68±1.38＊＊ 11.29±1.54## 1.06±0.23## 2.66±0.88##
80%乙醇组 22.88±3.13 7.32±0.74＊＊## 7.22±1.80＊＊ 10.32±2.17# 1.12±0.18## 1.63±0.51＊＊
无水乙醇组 28.25±3.20＊＊## 9.36±0.64＊## 9.47±0.90＊＊# 10.60±1.34## 1.08±0.23## 1.92±0.39＊＊#
乙酸乙酯组 19.71±2.93 5.41±0.75＊＊ 5.87±1.58＊＊ 6.79±1.22＊＊# 0.77±0.19＊＊ 0.93±0.18＊＊#
乙醚组 19.00±2.00 5.19±1.14＊＊ 5.27±1.74＊＊# 8.34±0.53＊＊ 0.80±0.17＊＊# 0.63±0.23＊＊##
模型组 20.13±4.52 4.99±0.78＊＊ 7.44±2.12＊＊ 8.16±0.83＊＊ 0.57±0.21＊＊ 1.39±0.44＊＊
注:数据均以平均值±标准差的格式记录;＊为与阳性对照组 t 检验呈显著 , P <0.05 , ＊＊为极显著 , P <0.01;#为与贫血模型组
t检验呈显著 , P <0.05;##为极显著 , P <0.01。表 2同。
　　小鼠眼眶放血 0.5 ml后 , 活动能力明显下降 ,
精神萎靡 , 耳 、 眼 、 爪和尾部等体表毛细血管丰富
处颜色变淡甚至苍白 。24 h 后检测红细胞和血红
蛋白量均已减半 , 达到急性失血性贫血模型要求 。
药物处理 4天后 , 阳性对照组活动能力加强 , 5天
后受试药物水提物组和醇提物组均恢复活力 , 7天
后 , 除乙酸乙酯组 、 乙醚组和模型组外 , 其余各组
体表血色均已恢复 , 放血血量也明显偏高 , 胸腺指
数及脾指数未见显著差异 。
藏波罗花水提物组和无水乙醇组在体重指标中
显著高于阳性对照 , 且大部分指标均已达到阳性值
(Hb 、 BMC 、 BHb);除白细胞外 , 其余指标均显
著高于模型组 , 补血效果明显。
2.2　溶血性贫血生理指标 (表 2)
小鼠皮下注射乙酰苯肼 4 mg 后 , 于第二天出
现明显血虚症状 , 大部分不活动 , 不进食 , 排泄浓
尿 , 体重减轻 , 表皮粗糙 , 脱毛 , 体表温度降低 ,
毛细血管密集处颜色发黑。经血液学检测 , 红细胞
畸形率增加 , 可见很多破碎红细胞残骸 , 血液颜色
变深 , 血浆游离血红蛋白[ 7] 大幅增加 , 已达到溶
血性贫血造模目的 。7天后放血 , 阳性对照组 、受
试药物的水提物及醇提物组血量偏高 , 血色深红 ,
离心后血浆颜色清澈;乙酸乙酯组 、 乙醚组和模型
组血量少 , 颜色红黑色 , 离心后血浆量少而浑浊 ,
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表 2　乙酰苯肼导致的溶血性贫血小鼠生理指标
组别 体重 (g) RBC (×1012/ L) WBC (×109/ L) Hb (g/ L) BMC (×1012/ L) BHb (g/ L)
阳性对照组 21.00±2.73 7.65±0.88 9.52±1.69 10.20±1.95 1.01±0.19 2.35±0.39
水提物组 23.63±2.13## 7.34±0.65## 7.56±1.81＊## 12.47±0.88＊## 1.05±0.14## 1.99±0.37##
80%乙醇组 19.88±3.83 5.35±0.86＊＊## 6.23±1.46＊＊ 9.92±2.41## 0.99±0.20## 1.78±0.41＊##
无水乙醇组 21.50±1.51# 6.37±0.99＊## 8.97±1.04## 8.13±0.58＊# 0.96±0.10## 1.81±0.65##
乙酸乙酯组 19.86±3.13 3.49±0.69＊＊ 5.79±1.27＊＊ 5.41±0.54＊＊# 0.46±0.15＊＊## 0.75±0.21＊＊
乙醚组 19.29±3.25 3.09±0.56＊＊# 4.76±0.99＊＊ 4.73±0.36＊＊## 0.53±0.17＊＊# 0.74±0.19＊＊
模型组 19.29±2.21 3.95±0.73＊＊ 5.29±1.53＊＊ 6.70±1.09＊＊ 0.72±0.14＊＊ 0.72±0.27＊＊
颜色呈深黄色。除水提物组外 , 各组的胸腺都有不
同程度的萎缩 , 以乙酸乙酯组 、乙醚组和模型组为
甚。脾脏病理性肿大 , 颜色变暗 , 其中醇提物两组
肿大程度较轻 , 脾指数与其他组相比显著偏低。
藏波罗花水提物组和醇提物组全部指标均显著
高于模型组 , 大部分已达到 (水提物组的 RBC 、
BMC 、 BHb , 醇提物组的 WBC 、 BMC 、 BHb)或
超过 (水提物的 Hb)阳性值 , 补血效果显著 。
3　讨论
本次实验选用两种血虚证模型在相等原药剂量
的基础上 , 探讨了藏波罗花各个组分的补血效果 。
从外周血象上看 , 水提物和醇提物具有显著的升高
红细胞数量和血红蛋白量的作用 , 在溶血性试验组
中还显著升高了白细胞数 , 其中血红蛋白量能够达
到甚至超过阳性药物组。在骨髓象中的骨髓有核细
胞数指标 , 水提物和醇提物组也与阳性对照组无显
著差异。骨髓血红蛋白量与模型组相比也有极显著
的提高。说明药物中的补血有效成分集中在水提物
和醇提物中 , 使得失血或溶血后本来就活跃的骨髓
造血功能大大加强 , 但其补血机制和有效成分的具
体化学物质种类有待进一步研究。另外 , 水提物组
和无水乙醇提取物组与其他组相比 , 体重显著偏
高 , 而且在溶血性贫血实验组中 , 水提物极显著抑
制胸腺萎缩 , 醇提物组显著抑制脾脏肿大 , 与本次
试验中升白细胞作用相吻合 , 提示其水提物和醇提
物能加强免疫系统的抗病力 , 具体作用部位有待进
一步探讨。
本研究为开发藏波罗花作为抗贫血药物提供了
初步的实验依据。
4　参考文献
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