全 文 ：[ 2] 　徐家云 ,赵崇高 ,王可.双倍剂量雷公藤多甙治疗成人难
治性原发性肾病综合征的疗效分析[ J] .中国中西医结
合肾病杂志 , 2004 , 5(3):71-72.
[ 3] 　朱晓明 , 熊汝成.雷公藤红素对犬肾移植抗排斥疗效的
观察[ J] .中华器官移植杂志 , 1996 , 17(1):21-22.
[ 4] 　翟边.武汉科学家首次发现 雷公藤有望成为抗癌新药
[ J] .中国医药信息 , 2007 , 22(9):15.
(收稿日期:2007-07-02)
基金项目:内蒙古医学院蒙药现代化研究项目(MX2005ZB024)
HPLC法同时测定毛建草中齐墩果
酸和熊果酸的含量
王雨梅 ,杜瑞芳 ,刘卫东 ,马　丽(内蒙古自治区医药工
业研究所 ,内蒙古 呼和浩特 010020)
摘要:目的　建立毛建草中齐墩果酸和熊果酸的高效液相色
谱测定方法。方法　采用 ODS 柱 , 流动相为乙腈-甲醇-水-醋
酸铵(70∶14∶16∶0.05),检测波长 210 nm。结果　齐墩果
酸在 0.196～ 3.920μg范围内线性关系良好, 熊果酸在 0.512 ～
12.800 μg范围内线性关系良好;该法回收率齐墩果酸为 99.5%,
熊果酸为 100.6%;齐墩果酸 RSD 为 2.0%, 熊果酸 RSD 为
2.2%(n=6)。结论　为毛建草的含量测定提供了一种快速 、
准确的方法 ,为蒙药植物资源的进一步开发提供了依据。
关键词:毛建草;齐墩果酸;熊果酸;含量测定;HPLC
中图分类号:R927.2　　　文献标识码:A　　　
文章编号:1004-2407(2008)02-0084-02
毛建草为唇形科植物毛建草 Dracocephalum rupe-
stre Hance 的地上部分。作为蒙古族习用药材 , 《内蒙
古植物药志》记载其具有清热 、解表 、止痛功效 ,用于
治疗感冒头痛 、咽痛 、咳嗽 、胸肋胀痛[ 1] 。在晋北地
区 ,毛建草嫩叶经粗加工后当茶饮用[ 2] 。经分析 ,全
草除含有丰富的氨基酸 、维生素及微量元素外 ,主要
含有黄酮类化合物 ,其中柚皮素-7-O-葡萄糖苷和北
美圣草素-7-O-葡萄糖苷含量较高[ 3 , 4] 。笔者采用
HPLC法[ 5] 测定毛建草中齐墩果酸(oleano lic acid)
和熊果酸(ursolic acid)含量 ,操作简便 ,测定灵敏度 、
准确度均较好 ,对更好地开发毛建草药用植物资源具
有一定的意义。
1　仪器与材料
1.1　仪器　Agilent1100液相色谱仪;Agilent1100紫外
检测器;AS3120超声波清洗机;AG135电子分析天平。
1.2　试药　齐墩果酸对照品(批号 110826-200307)和
熊果酸对照品(批号 110827-200407)均由中国药品生物
制品检定所购入(供含量测定用 ,未标明纯度);水为双
蒸水 ,乙腈 、甲醇为色谱纯 ,其它试剂均为分析纯。
1.3　药材　毛建草采自呼和浩特市郊大青山 ,由内
蒙古大学生命科学学院赵立清博士鉴定为毛建草
Dracocephalum rupestre Hance 。
2　方法和结果
2.1　色谱条件　Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6
mm ,5 μm);流动相:乙腈-甲醇-水-醋酸铵(70∶14∶
16∶0.05);检测波长 210 nm;流速:1.0 mL·min-1 ;柱
温:25 ℃;进样量:20μL。在此条件下供试品中齐墩果
酸 、熊果酸成分能与其它成分达到较好分离(见图1)。
图 1　混合对照品(A)及样品(B)的 HPLC色谱图
1-齐墩果酸;2-熊果酸
2.2　对照品溶液制备　精密称取齐墩果酸对照品和
熊果酸对照品适量 ,加甲醇分别制成每 1 mL含齐墩果
酸 50 μg 和熊果酸 125μg 的混合对照品溶液 ,即得。
2.3　供试品溶液制备　取本品粗粉约0.5 g ,精密称
定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加甲醇 25 mL ,密塞 ,称定
质量 ,加热回流 30 min ,放冷 ,再称定质量 ,用甲醇补
足减失的质量 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液 ,即得。
2.4　标准曲线制备　取齐墩果酸对照品和熊果酸对
照品各约10 mg ,精密称定 ,分别置 10 mL 量瓶中 ,用
甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀。精密量取齐墩果酸对
照品溶液 0.1 ,0.2 ,0.5 , 1.0和 2.0 mL 、熊果酸对照
品溶液 0.2 ,0.5 ,1.0 , 2.0和 5.0 mL ,分别置于同一
10 mL 量瓶中 ,用甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,制成混合对
照品溶液 ,分别进样 20μL 测定峰面积。分别以对照
品峰面积Y 为纵坐标 ,相应对照品的量 X (μg)为横
坐标进行线性回归 ,齐墩果酸回归方程为:Y =1E +
06X +20 587 , r=0.999 5 ,线性范围0.196 ～ 3.920μg;
熊果酸回归方程为Y =956 922X+84 796 ,r =0.999 7 ,
线性范围 0.512～ 12.800 μg 。
2.5　精密度试验　取对照品混合溶液 ,重复进样 5
次 ,测定峰面积。结果齐墩果酸峰面积 RSD为 2.8%,
熊果酸峰面积 RSD为 0.7%。
2.6　稳定性试验　取同一供试品溶液 ,间隔一定时
间进样 ,依法测定峰面积。结果熊果酸峰面积 RSD为
2.9%(n =5);齐墩果酸峰面积 RSD为1.3%(n =5)。
供试品溶液在8 h内稳定。
2.7　重现性试验　取同一批药材 5份 ,按供试品溶液
制备方法 ,分别测定齐墩果酸 、熊果酸峰面积。结果齐墩
果酸峰面积RSD为2.6%,熊果酸峰面积 RSD为2.4%。
2.8　加样回收试验　精密称取已知含量的样品 0.25
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g ,分别精密加入一定量的齐墩果酸及熊果酸对照品 ,按
供试品溶液制备方法进行测定并计算回收率 ,结果齐墩
果酸平均回收率为99.5%,RSD为 2.0%(n =6),熊果
酸平均回收率为100.6%,RSD为 2.2%(n =6)。
2.9　样品测定　取不同批次的毛建草药材粉末 ,按
2.3项下方法处理 ,进样测定 ,结果见表 1。
表 1　毛建草中齐墩果酸和熊果酸测定结果(n=3)
药材批次 齐墩果酸含量/mg· g -1 熊果酸含量/mg· g -1
1 2.65 8.19
2 2.24 6.21
3 1.62 5.20
3　讨论
①笔者针对熊果酸进行紫外光谱扫描 ,观察到熊
果酸在(204±2)nm 处有最大吸收 ,在此波长下测定
含量溶剂干扰很大 。有文献采用蒸发光散射检测器
进行测定 ,但由于检测器的普及有一定的难度 ,多数
仍采用紫外检测器进行测定。为了减少流动相引起
的基线噪音 ,采用 210 nm 为检测波长。
②有关毛建草化学成分研究的文献相对较少 ,笔
者在薄层分离结果的基础上 ,提取药材时以不同体积
分数的乙醇溶液和甲醇溶液为提取溶媒 ,采用超声提
取和回流提取 2 种方法提取 ,测定 。从色谱图来看 ,
甲醇 、乙醇加热回流的提取方法所得供试液的成分较
多且指标性成分峰面积较大 ,而 2种溶剂色谱峰峰形
及面积基本一致;同时还考察了超声提取时间 ,结果
以 30 min甲醇回流提取为最佳提取条件。
③由于药材中齐墩果酸与熊果酸经常并存且两者
性质相似 ,不易分离 ,因此流动相的选择在适当调整甲
醇、乙腈 、水的比例的同时 ,考虑加入一定量的醋酸铵作
为改性剂 ,可使齐墩果酸与熊果酸达到基线分离[ 6 ,7] 。
参考文献:
[ 1] 　朱亚民.内蒙古植物药志[ M] .呼和浩特:内蒙古人民出
版社 , 1998:2.
[ 2] 　郑晓敏 , 秦玉明 ,郑佳林.岩青兰中微量元素的研究[ J] .
山西医科大学学报 , 2000 , 31(2):132-133.
[ 3] 　任冬梅 , 娄红祥 , 季梅 , 等.H PLC 法测定不同采收期岩
青兰中两种二氢黄酮的含量[ J] .山东大学学报(医学
版), 2004 , 42(6):741-742.
[ 4] 　任冬梅 , 娄红祥 , 马斌 , 等.H PLC 法测定岩青兰地上全
草与不同部位中柚皮素-7-O-葡萄糖苷及北美圣草素-7-
O-葡萄糖苷的含量[ J] .天然产物研究与开发 , 2003 , 15
(3):229-231.
[ 5] 　王梅 , 高晓黎.高效液相色谱法测定齐墩果酸前体脂质
体水合后的含量及包封率[ J] .西北药学杂志 , 2007 , 22
(5):230-232.
[ 6] 　丁腈 , 徐德然 ,王峥涛.HPLC 法测定六味地黄丸及六味
地黄胶囊中齐墩果酸 、熊果酸的含量[ J] .中国中药杂
志 , 2002 , 27(8):587-589.
[ 7] 　涂兴明 , 黄有仲 ,欧阳毅.HPLC 法测定山茱萸中熊果酸
的含量[ J] .中华医药杂志 , 4(9):120-122.
(收稿日期:2007-10-30)
HPLC法测定小儿导赤片中大黄酚
的含量
肖培云 ,杨永寿(云南大理学院药学院 , 云南 大理 671000)
摘要:目的　建立高效液相色谱法测定小儿导赤片中大黄酚
含量的方法。方法　采用 HPLC 法 , C18柱(150 mm ×4.6
mm , 5 μm)为固定相 ,甲醇-1 g · L-1磷酸水溶液(80∶20)为
流动相 , 流速为 1.0 mL · min-1 , 柱温为 30 ℃, 检测波长为
254 nm。结果　大黄酚在 0.04～ 0.4μg(r =0.999 9)范围内
具有良好的线性关系。其平均回收率和 RSD 分别为 98.9%和
1.2%。结论　该方法能准确 、快速地进行定量检测 , 可用于
小儿导赤片中大黄酚的含量测定。
关键词:高效液相色谱法;小儿导赤片;大黄酚
中图分类号:R927.2　　　文献标识码:A　　　
文章编号:1004-2407(2008)02-0085-03
小儿导赤片为纯中药制剂 ,收载于部颁标准[ 1] ,
由大黄 、栀子 、滑石 、地黄 、甘草 、木通 、茯苓 7味中药
组成。有清热利便的功效 ,用于口舌生疮 、咽喉肿痛 、
牙根出血 、腮颊肿痛 、爆发火眼 、大便不利 、小便赤黄
等症。为了有效地控制该产品的质量 ,笔者参照文
献[ 2 , 3] ,采用高效液相色谱法对处方中的主要药大黄
中的有效成分大黄酚进行了定量分析。
1　仪器与试药
1.1 　仪器 　A gilent 1100 高效液相色谱仪 ,包括
G1315A/B DAD检测器 ,G1313A A LS 自动进样器 ,
Ag ilent 1100 色谱工作站(美国安捷伦科技有限公
司);梅特勒电子天平 A E240(瑞士);SZ-97 自动三重
纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂);DZKW-4 水浴
锅(上海科析实验仪器厂);超声波清洗器(上海科导
超声仪器公司)。
1.2　试药　大黄酚对照品(中国药品生物制品检定
所 ,批号 749-200312);小儿导赤片(大理白族自治州
中药制药有限责任公司);甲醇(色谱纯),磷酸(分析
纯),水(重蒸馏纯净水)。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱:Agilent C18(150 mm ×4.6
mm ,5μm),流动相:甲醇-1 g ·L-1磷酸水溶液(80∶
20),流速:1.0 mL·min-1 ,柱温:30 ℃,检测波长:254
nm ,进样量:10μL。
2.2　溶液的制备
2.2.1　对照品溶液的制备　精密称取大黄酚对照品
5 mg 于 50 mL量瓶中 ,加甲醇溶解制成每1 mL含 0.1
mg大黄酚储备液 ,取上述溶液 2 mL于 10 mL 量瓶中 ,
加甲醇定容 ,即得 20 mg ·L-1的大黄酚对照品溶液。
2.2.2　样品溶液的制备　取本品 20 片 ,精密称定 ,
研细 ,精密称取约 0.5 g ,加甲醇 25 mL ,称定 ,摇匀 。
加热回流 30 min ,放冷 ,称定质量 ,用甲醇补足质量 ,
摇匀 ,过滤。精密移取续滤液 5 mL ,置烧瓶中 ,挥去
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