全 文 ：不 同地区和生长物候期藏药花锚有效成分齐墩果酸的含量变化研究
杨慧玲 , , 2 ,刘建全 ’ ` (1 . 中国科学院西北高原生物研究所 . 青海 西宁 81姗8 ; 2 . 中国科学院研究生院 ,北京 ,。 1珍9 )
摘要 : 目的 探讨花锚中齐墩果酸不 同产地和物候期 的变化 。 方法
(栽培 )花锚样品 中齐墩果酸含量进行了比较分析 。 结果
用 高效液相 色谱法对 不 同产地 (栽培和野生 )和物候期
齐墩果酸的含量随海拔和物候期的变化 明显 。 结论
加 , 花锚中齐墩果酸的含量有一定的升高 ;栽培植物的含量低于野生植物
关键词 :花锚 ; 齐墩果酸 ; 高效液相色谱法 ;海拔 ;生长物候期
随海拔的增
; 随物候生长有一定的规律变化 , 花期含量最高 。
中图分类号 : 9R 31 , 6 文献标识码 : A 文章编号 : 10 1 一 2 4 94 ( 2《I 以 )的 一伪59 一 02
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花锚 (从放 {朋 。“ itP哪 D . Don )为龙胆科 ( eG nt i~ e ae )花锚属 (劲垅、 )2 年生草本植物 L`〕 , 以全草入药 , 为藏族药物系
统中用于治疗肝胆系统疾病的常用植物之一 ’ j , 广布于青藏
高原 ,亦称 “ 藏茵陈 ” 。 花锚具有清热利湿 、平肝利胆的功能 ,
对治疗急性黄疽型肝炎和慢性胆囊炎等疾病也有很好的疗
效 , 齐墩果酸可能也是治疗这些疾病的成分之一 3[ 一 4 〕。 本实
验比较了野生状态下不同海拔 、栽培条件下不同生长时期花
锚的齐墩果酸含量侧 , 为确定该药材的采收时期 、 不同地区
药材的质量以及栽培地点的选择提供理论依据 。
1 仪器与材料
Wa
沈。 高效液相色谱仪系列 :跳 l esr 以X) E 液相色谱仪 ,
W川 e sr 48 6 紫外检测器 , w ate rs 746 数据处理系统 , iM il po er 溶
剂过滤系统 。 色谱柱 : heP n~ ne x k ll ” 1`玛 iC C 18柱 (4
.
6 ~
、
250 nmr
,
5 娜 ) 。
齐墩果酸 ( 。 le al lo li。 ac id )对照品 (本所植化室分离 zj[ , 纯
度为 97 . 5% ) ,水为重蒸水 , 甲醇 (色谱纯 ) ,其他试剂为分析
纯 。 试剂使用之前均通过 iM肠p ” 1 愁溶剂过滤系统过滤 。
药材样品的采集时间为 2 ( x Xj 年 9 月至 2X( )2 年 9 月 。 栽
培样品分为幼苗期 、蕾期 、花期和果期采集 , 自然分布的花锚
采集时期为果期 。 凭证标本存于中国科学院西北高原生物
研究所标本馆 , 所有样品均由中国科学院西北高原生物研究
所刘建全研究员鉴定为 执巍、 e llij对ica D . oD n 。
2 方法与结果
2
.
1 液相色谱条件
流动相 : 甲醇一水一磷酸 (体积比 % : 4 : 2 ) ;检测波长 : 2 20
nm
;流速 : l mL · im n 一 ’ ;柱温 :室温 ;进样量 : 10 川、
.2 2 检测波长的选择
将齐墩果酸对照品用 50 % 甲醇溶解后 , 在 巧0 一 30 unT
进行扫描 ,由于在 190 lun 处基线不稳 , 杂峰较多 ,而在 220 unr
处基线稳定 , 波形较好 , 故选择 22O nm 作为检测波长 。
.2 3 提取 方法的选择
取花锚药粉适量 (过 4O 目筛 )精密称定 1 . 5 9 , 放人锥形
瓶中加无水乙醇 40 rnL 称重 , 分别冷浸 l , 2 和 3 h , 超声 or , 20
和 30 而 n , 补重后过滤到 50 mL 的量瓶中 ,用无水乙醇定容至
刻度 , 过微孔滤膜 0 . 45 阿 ,进样 10 沁测定 , 结果超声 30 而 n
提取率最高 , 杂峰较少 , 故采用超声 30 im n 提取 。
.2 4 提取溶剂的选择
取一定量的花锚粉末精密称定 1 . 5 9 于锥形瓶中 , 分别
加 75 % ,卯% 无水乙醇和甲醇 40 礼称重 , 超声提取 30 皿 n ,
补重后过滤到 50 mL 的量瓶中 ,分别用各 自的提取剂定容至
刻度 ,再过微孔滤膜 0 . 45 阿测定 , 结果用无水乙醇提取率最
高 ,杂质较少 , 故选用无水乙醇作为提取剂 。
基金项目 :归国留学人员重点科研项 目 、 中国科学院知识创新工程方向性项目 (心 Cx 一 S那 l肠 ) 、中国科学院 “ 西部之光 ” 人才培养计划和全国优
秀博士论文专向基金资助
作者简介 :杨慧玲 , 女 ,硕士研究生 ` 作者简介 : 刘建全 ,男 ,研究员 ,博士生导师 elT : (【刃7 1 ) 6 15 3 87 axF : (仪刀 1 ) 6 14 3 282 E一。 l :
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中国药学杂志 2仪碎年 9 月第 39 卷第 9 期 hC o Z,〕。。 J , 2记尧膨 s , ￡曰刀` , , 椒 ,刃 No , 夕 · 6 59 ·
2. 5 线性关系
准确称取齐墩果酸对照品适量 ,用 50 % 甲醇溶解并制成
一定浓度的对照品储备液 ,精密吸取对照品储备液适量 , 用
50 %甲醇稀释成浓度为 o . 47 2 gm ·礼 一 ’ 对照品溶液 。 精密吸
取 0 . 47 2 鸭 · mL 一 ’浓度的齐墩果酸对照品溶液 4 , 8 , or , 12 , 16
匹进样 , 按 ,’2 . 1” 项色谱条件测定峰面积 , 以峰面积积分值为
纵坐标 , 相应齐墩果酸对照品进样量 (滩 )为横坐标 , 进行回
归分析 , 回归方程 和相 关关系如下 : y 二 一 3 9科 . 10 十 43
97 2
.
77 x
, : 二 0 . 99 7 ,线性范围为 x . 8 9 一 7 . 5 5 照 。
.2 6 精密度实验
取同一样品溶液按 “ 2 . 1 ” 项色谱条件重复进样 5 次 (每
次 10 汕 ) ,样品峰面积积分值的 RS I ) 为 1 . 2 % 。
.2 7 稳定性实验
精密吸取同一样品溶液 ,进样 10 匹 ,分别于配制后 0 , 2 ,
4
,
6
,
8
,
12 h
,依次测定 , 结果表明 ,供试品溶液在 12 h 内基本
稳定 , RS D 二 0 . 84 % 。
.2 8 样品测定
取花锚全草粉末约 20 9 (过 4o 目筛 ) , 精密称定 1 . 5 9 于
锥形瓶中 , 加无水乙醇 4O 礼 称重 , 超声提取 30 ~ , 补重滤去残渣 , 过滤到 50 礼 量瓶中 , 并用无水乙醇洗涤容器和残
渣数次 , 过滤洗液并人 50 mL 量瓶中并用无水乙醇定容至刻
度 ,微孔滤膜过滤 (0 . 45 脚 )制成供试品溶液 。 吸取 10 川 进
样测定 ,每个样品重复至少 3次 , 结果见表 1 , 2 和图 1 , 2 。
表 1 栽培和野生花锚不同生长时期齐墩果酸的含量
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图 1 对照品 ( A )与样品 ( B ) HP I〔 ! 色谱图
l 一齐墩果酸
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地点 幼苗期 l哗 · g 一 L 蕾期 ,gm · g 一 1 花期尹呢 · g一 ’ 果期 ,啤 · g 一 `
西宁 0 . 34 士 0 . 02 0 35 士 让傀 0 . 32 士 0 .以
涅 中 0 . 3 8士 0 . 01 已 45 土 0 .以 0 . 29 士 让 0 1
表 2 不同海拔栽培和野生花锚果期齐墩果酸的含量
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山价 n 己n t al t i t u d e s
采集地点 海拔 /m 纬度 经度 齐墩果酸含量 /嘿 · g 一 ’
青海西宁 2么刀 360 36 沈泛4 , 101 045
`
(义刃 , 0 . 3 2 士 0 .以
青海大通 2夕幻 360 37 17 ` 10 1 0 10 9 , )’ 0
.形 士 0刀 1
青海互助 26淡】 36哪 . 92 8 , 1《介 〕1 7 阴刀 住 45 士 让 01
青海惶中 2620 36 04 7 . 6叹! , 101 。犯 . 97。 ` 0 . 29 士 0 . 01
西藏郎县 卫)50 2尹 ) 1 . 3沁 ` 93 巧 3 O 3( )` 0 . 29 士住 01
西藏波密 3 1印 夕39 、 2石7 , 肠 “ 12 . 28 8 , 0 . 印 士 0 .03
西藏曲水 3 6 , 〕 夕 17 . 5卯 , 叫吧 1 4日〕’ 住 69 土 0 .02
西藏帮达 43 70 3() 理7 . 36 〕, 97 0 10 . 0翻 )` 仓 92 士 0 .以
3 讨 论
表 l 是不同生长时期人工栽培和野生居群花锚中齐墩
果酸的含量 。 从表 l 可以发现花锚花期齐墩果酸含量最高 ,
而幼苗期 、蕾期和果期都低于花期的含量 。 可见物候期影响
着花锚药材中齐墩果酸的含量 , 花锚中齐墩果酸的含量随物
候期变化呈一定的规律性 , 花期之前呈上升趋势 , 在花期达
到了最高值 ,之后又呈下降趋势 。 花期采收的花锚齐墩果酸
含量最高。 而且从生物量的角度考虑 , 花期的生物量高于果
期更高于其他时期 , 因此花期得到的药材最多质量也最好 。
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图 2 花锚果期齐墩果酸含量随海拔高度变化的趋势
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表 2 是不同海拔栽培和野生花锚果期齐墩果酸的含量 , 除西
藏朗县的材料以外 ,高海拔地区花锚中齐墩果酸含量明显高
于低海拔地区 。 由此可见 , 海拔也影响着花锚中齐墩果酸的
含量 , 随着海拔的升高 , 花锚中齐墩果酸的含量呈一定的增
加趋势 , 尤其对于西藏海拔较高地区的花锚 ,趋势较为显著 。
此外 ,从青海互助 2 6以) m 采集的花锚种子人工栽培到
两个地点 (西宁 、大通 ) ,其相同时期 (果期 )的含量都有一定
程度的降低 , 即使海拔高度相似 (大通 )时 , 也是表现为减少
的趋势 (图 2 ) 。 可见花锚 中齐墩果酸的含量除受海拔影响
外 , 可能还受到其他生态因素的影响 , 如土壤 、 降雨等生态因
子 ;因为栽培地与野生状态下土壤的理化性质显然不一样 。
因此 ,将来的研究应集中在单一生态因子控制上 比较其变
化 。 我们的研究结果表明 , 各地产花锚中齐墩果酸存在较大
的差异 , 这种差异可能是该植物对不同生态环境的综合反
应 , 药材质量与产地密切相关 。 这种差异无论在收购野生药
材和栽培药材时都应加以认真对待。
参考文献
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青海人 民出版社 , l望汉, .
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t s] 邢俊波 ,李萍 , 刘云 . 不同产地 、 不同物候期金银花中绿原酸
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(收稿日期 : 2《Xj 3 一肠一20 )
中国药学杂志勿以抖年 9 月第39 卷第 9 期