全 文 ：山东中医杂志 2010 年 10 月第 29 卷第 10 期
H-17Z），5.08 （1H，brs，H-17E），4.08 （1H，brs，H-15β），
3.86（1H，dd，J=12.3，4.7 Hz，H-7β），2.80（1H，m，H-
13），2.03 （1H，m，H-14β），1.81 （1H，m，H-6β），1.78
（1H，m，H-1α），1.65（1H，m，H-14α），1.42（2H，m，
H-2），1.40（1H，m，H-6α），1.03（3H，s，H-20），0.90
（1H，dd，J =12.6，1.8 Hz，H-5β），0.88 （3H，s，H-18），
0.81（3H，s，H-19）。 13C NMR（100 MHz，CDCl3）数据
见表 1。 以上数据与文献 ［5］报道的 ent-7β，15β-di-
hydroxy-16-kaurene 一致， 故鉴定化合物 4 为对映
-7β，15β- 二羟基 -16- 贝壳杉烯。
化合物 5：白色针晶，熔点 137.0～138.0 ℃（氯
仿）。 Liebermann-Burchard反应阳性。 IR（KBr）（cm-1）
3372，2903，2868，2800，1458，1365，1048，1002，941，
820。 与 β- 谷甾醇标准品混熔点不下降，TLC 三种
不同展开剂 Rf 值均一致。 故鉴定化合物 5 为 β- 谷
甾醇。
化合物 6：白色无定形粉末 ，熔点 > 300 ℃ 。
Liebermann-Burchard 反应和 Molish 反应均呈阳性。
IR（KBr）（cm-1）：3600～3200，2962，2925，2851，1545，
1471，1382，1165，1104，1020，805。 该化合物在 10%
HCl/MeOH 溶液中水解，产物经 TLC 检测生成葡萄
糖和 β- 谷甾醇。 故鉴定化合物 6 为胡萝卜苷。
［参考文献］
［1］ 中国科学院中国植物志编辑委员会． 中国植物志（第二分册）［M］．
北京：科学出版社，1979：134．
［2］ 国家药典委员会． 中华人民共和国药典（一部）［M］． 北京：化学
工业出版社，2005：54-55．
［3］ Kuo PC，Shen YC，Yang ML，et al． Crotonkinins A and B and
related diterpenoids from croton tonkinensis as anti- inflamma-
tory and antitumor agents［J］． J. Nat. Prod.，2007，70（12）：1906-
1909．
［4］ 吴新安，赵毅民． 巴豆属植物化学成分及药理作用研究进展［J］．
天然产物研究与开发，2004，16（5）：467-472．
［5］ Malcolm SB，Joseph DC，Azizol AK，et al． Sesquiterpenoids and
diterpenoids from the liverwort jungermannia truncata ［J］． Phy-
tochemistry，1996，42（6）：1641-1646．
［6］ Bonaventure TN，Gabriel GF，Felix K，et al． Crotonadiol，a lab-
dane diterpenoid from the stem bark of croton zambesicus［J］．
Phytochemistry，1999，51（1）：171-174．
［7］ Bonaventure TN，Berhanu MA，Felix K，et al． Eudesmanolides
and other constituents of inula thapsoides ［J］． Phytochemistry，
1997，46（6）：1131-1134．
瘤毛獐牙菜（Swertia pseudochinensis Hara）属
龙胆科 （Gentianaceae）植物 ，俗称 “当药 （紫花当
药）”，一年生草本，生于海拔 500～1600 m 的山坡、
河滩、林下或灌丛中，主要分布于东北、华北及山东、
河南等地［1］，是用于泻火解毒、利湿健脾的常用中草
药。 有统计表明目前已经从獐牙菜属植物中分离得
到 100 多种不同类型的化合物，如环烯醚萜、黄酮、
三萜等及其苷类［2］，而齐墩果酸（oleanolic acid）是其
中三萜类化合物重要成分。 瘤毛獐牙菜虽然全草入
药，但其根、茎、叶、花不同部位所含齐墩果酸的量是
不同的。
齐墩果酸（OA）又名庆四素，分子式 C30H48O3，分
子量 456.71，熔点 308～310 °C，不溶于水，可溶于乙
醇、乙醚、丙酮和氯仿。 广泛存在于草本植物中。 药
理研究表明，齐墩果酸具有护肝降酶、抗炎、强心利
尿、降血糖、抗肿瘤的功效［3］。
1 仪器与试剂
质谱仪，美国 Thermo Finnigan 公司；LCQ Deca
XP Plus 离子阱质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI），
ESI负离子检测。 液相色谱仪 Agilent 1100 Series，
台式离心机 TGL-16B（上海安亭科学仪器厂）。
齐墩果酸对照品（纯度 99.9%）；无水乙醇（AR）；
甲醇（色谱级）；乙腈（色谱级）；纯水。
高效液相色谱法测定瘤毛獐牙菜不同部位齐墩果酸含量
张 原 1，廖 丹 1，贺 丹 1，樊海龙 1，常 芳 2
（1.山东大学威海分校海洋学院，山东 威海 264209； 2.济南市农业质量检测中心，山东 济南 250000）
［摘要］ 目的：用高效液相色谱法测定瘤毛獐牙菜不同部位齐墩果酸的含量，比较其不同部位齐墩果酸含量的高低。方法：瘤
毛獐牙菜中齐墩果酸的含量采用 Hypersil ODS-2 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-水溶液（65∶35），流速 0.8 ml/min，检
测波长 210 nm，用外标法定量；用离子阱质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI），ESI 负离子 1～2 级全扫描质谱检测定性。 结果：瘤毛
獐牙菜中齐墩果酸的线性回归方程为 Y=118.29X，R2=0.9999，在 1.06～4.24 μg/ml 范围线性关系良好。 结论：该方法简便、快速，
线性关系良好，可作为獐牙菜中齐墩果酸含量的测定方法。
［关键词］ 瘤毛獐牙菜；齐墩果酸；高效液相色谱；质谱
［中图分类号］ R284.1 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 0257-358X（2010）10-0708-02
［收稿日期］ 2010-05-10
［基金项目］ 山东大学威海分校大学生科研立项课题（编号：A09
043）
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山东中医杂志 2010 年 10 月第 29 卷第 10 期
图 1 齐墩果酸对照品色谱图
图 2 齐墩果酸样品色谱图
2 实验方法和结果
2. 1 对照品溶液的制备 精密称取齐墩果酸对照
品一定量，用甲醇溶解，制成浓度为 0.2 μg/ml 的溶
液，15 000 r/min 离心 5 min，上清液作为对照品溶液
备用。
2. 2 液相色谱及质谱条件 液相色谱条件：Hyper-
sil ODS-2柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，英国），流动相
为乙腈 - 水溶液（65∶35），流速 0.8 ml/min，检测波长
210 nm，用外标法定量。 质谱条件：离子阱质谱仪，
配有电喷雾离子源（ESI），ESI 负离子检测，离子源
喷射电压 3.5 kV；毛细管温度 300 ℃；毛细管电压
15 V；鞘气和辅助气均为氮气，流速分别为 60 arb 和
15 arb；辅助气碰撞气：氦气；采用 1～2 级全扫描质
谱。
2. 3 供试品溶液的制备 参照谭桂山等 ［4］的方法，
取瘤毛獐牙菜各不同部位样品，置 80 ℃烘箱干燥
24 h，粉碎，称取 1 g 加入 75%乙醇 10 ml，索氏回流
提取 1 h，过滤，残渣再按此方法重复提取 1次，合并
提取液，进行旋转蒸发，干燥的提取物用 75%乙醇溶
解稀释至 4 ml，15 000 r/min 离心 10 min，取上清液
作为供试品溶液备用。
2. 4 数据处理 标准曲线的线性关系：分别精密量
取上述 OA 对照品溶液 2，5，10，15，20 μl，以色谱峰
面积（Y）对质量（X）进行回归，齐墩果酸的线性回归
方程为 Y=118.29X，R2=0.9999，在 1.06～4.24 μg 范
围线性关系良好。
2. 5 精密度测定 取上述对照样品 2 μl，重复 6 次
进样，测定各自峰面积，计算峰面积得 RSD=1.56%。
表明仪器进样精确度良好。
2. 6 稳定性试验 取同一供试样品分别于配制后
0，2，4，6，8，10，12 h，进样 10 μl 依次测定，结果表
明，同一供试样品在 12 h内是稳定的，RSD=1.17%。
2. 7 重现性试验 取同批购买的瘤毛獐牙菜样品，
按上述方法配制成样品 6 份，分别进样 10 μl，测定
OA含量，RSD=2.07%，表明该方法重现性较好。
2. 8 样品的测定 共采集了瘤毛獐牙菜六个不同
部位（花瓣、花蕊、花萼、叶、茎、根）的样本，分别取供
试品 10 μl 进样，测定 OA 峰面积，根据线性方程计
算其含量，结果见表 1。
3 结论
从实验结果可以看到，OA 对照品和供试品在
二级质谱中，MS/MS 碰撞能量范围为 35%～120%；
在负离子全扫描模式中，均可见［M-H］- 准分子离子
峰 m/z 455.5 及 m/z 455.5 的二级质谱中都有相同
的 m/z 407.5 的特征子离子峰。 因为所采集的瘤毛
獐牙菜不同部位样本中的 OA 的含量是不同的，花
瓣、花蕊、花萼、叶、茎、根其含量从高到低（样品号）
为 2、3、1、4、5、6。 可见花蕊当中 OA含量最高，对样
品花的不同部分中 OA 含量进行分析，未见有报道。
总体而言，植物体花中的 OA 含量最为丰富，本文中
的分析与郑一敏等［5］对弥勒獐牙菜的测定和黄文哲
等 ［6］对瘤毛獐牙菜的结果基本一致，但是 OA 的含
量要低于以上两项研究，分析其原因为植物生长海
拔高度、采摘时期、产地等都有一定影响 ［7］，有待进
一步研究。
［参考文献］
［1］ 中国医学科学院药用植物资源开发研究所 . 中药志［M］. 第 4
册. 北京：人民卫生出版社，1988：342．
［2］ 任丽华，谢华通． 龙胆科植物獐牙菜属药用植物的研究及应用
概况［J］． 中医儿科杂志，2007，3（1）：50．
［3］ 田丽婷，马龙，堵年生． 齐墩果酸的药理作用研究概况［J］． 中国
中药杂志，2002，27（12）：885．
［4］ 谭桂山，徐平声，田华咏，等． 川东獐芽菜化学成分的研究［J］．
中国药学杂志，2000，35（7）：441-443．
［5］ 郑一敏，胥秀英，傅善权． 弥勒獐牙菜药材不同部位獐牙菜苦苷
与齐墩果酸的含量测定［J］． 中国中药杂志，2004，29（7）：709．
［6］ 黄文哲，许春晖，周大成，等． RP-HPLC 测定当药中环烯醚萜和
三萜类成分含量［J］． 中国中药杂志，2007，32（23）：2494．
［7］ 程会云，冯伟力，孟宪纪，等． 不同产地抱茎獐牙菜中齐墩果酸
的含量比较［J］． 中草药，2007，30（5）：521．
表 1 不同部位齐墩果酸含量
样品 部位 齐墩果酸含量（m/μg·g-1）
1 花瓣 218.470 6
2 花蕊 960.741 1
3 花萼 628.513 1
4 叶 353.996 4
5 茎 339.653 8
6 根 16.959 55
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