全 文 ：小叶女贞对小鼠淋巴细胞增殖和 IL-2产生的影响
孙丰润1 ,邱世翠2 ,张循格 1 ,张　群 2
( 1滨州医学院附属医院药剂科 ,滨州市　 256603; 2滨州医学院免疫学教研室 )
【摘要】　目的:探讨小叶女贞对小鼠淋巴细胞增殖反应和 IL-2产生的免疫学作用。方法:用 100%小叶女
贞水浸出液定期给小鼠灌胃 ,然后检测小鼠淋巴细胞增殖和 IL-2的 产生。结果:用药组对以上两项免疫学指
标均有显著增强作用 ,与对照组相比差异均有极显著性 ( P < 0. 01)。结论:小叶女贞可明显增强机体免疫功
能。
【关键词】　小叶女贞 ;淋巴细胞增殖 ;白细胞介素-2;小鼠
【中图分类号】　 R392. 1　　【文献标识码】　 A　　【文章编号】　 1001-9510( 2003) 01-0001-02
EFFECT OF LIGUSTRUM QUIHOUI CARR(LQC) ON LYMPHOCYTE PROLIFERATION
AND INTERLEUKIN -2( IL-2) PRODUCTION OFMICE
Sun Feng run, Qiu Shicui , Zhang Xunge,et al
( Depar tment of Pha rmaceutics, Af filiated Hospi tal of
Binzhou Medical Colleg e, Binzhou 256603, Shandong, China )
【ABSTRACT】　 Objective: To resea rch the action o f LQC from the v iew point o f immunology. Meth-
ods: Fi lling the stomaches w ith 100% wa ter ex t ract o f LQC regularly and testing lymphocyte proli feration
and Interleukin-2 production. Results: Compared wi th tho se in control g roup, the lymphocy te proli feration
and interleukin-2 production increased significant ly in LQC g roup ( P < 0. 01) and no side ef fect appea red.
Conclusion: These resul ts indicated that taking LQC could enhance immune function obviously.
【KEY WORDS】　 lig ust rum quihoui ca rr( LQC) ; lymphocyte proli feration; IL-2; mouse
　　小叶女贞又叫小白蜡 ,为木犀科女贞属植物小
叶女贞 Ligustrum quihoui Carr .的果实 [1 ] ,和女贞
子属于同科同属植物 ,全国各地均有分布。根据近缘
生物具有相似性的特点及女贞子的药理作用 ,我们
对小叶女贞进行了淋巴细胞增殖和 IL-2免疫学方
面的初步研究。
1　材料与方法
1. 1　试剂和仪器　小叶女贞采自滨州医学院附属
医院 ,经查阅有关资料 ,确认为木犀科女贞属植物小
叶女贞 Ligustrum quihoui Carr . 的果实。水煎液制
备:取小叶女贞 200 g ,加 2 000 m l水 ,浸泡 2 h,水
煎 2次 ,每次煮沸 30 min,合并水煎液 ,浓缩成 200
m l备用。 RPM I-1640为 GIBO公司产品 ; LPL和
ConA为美国 Sigma产品 ; M TT为 FLU KA公司产
品 ;二甲基亚砜 ( DM SO)为苏州化工研究所产。美国
产全自动酶标仪 ( M ul ti skan) ; CO2培养箱由美国
Former公司生产 ; 低速冷冻离心机 ( Beckman,
U SA) ;超净工作台由苏州净化设备厂生产 ; 100目
不锈网 ; 50 ml离心管。
1. 2　动物分组与给药　 BALB /C小鼠 24只 ,体重
18～ 22 g ,雌雄不限 ,购于北京医科大学实验动物中
心。 将动物随机分为两组 ,每组 12只。 Ⅰ组为生理
盐水对照组 ;Ⅱ组为小叶女贞实验组。Ⅰ 组用生理盐
水灌胃 , 0. 5 ml / (次· 只 ) , 1次 /d;Ⅱ组用小叶女贞
液灌胃 , 0. 5 m l /(次· 只 ) , 1次 /d,两组均灌胃 15
次。
1. 3　检测指标及方法
1. 3. 1　淋巴细胞增殖反应 [ 2]:无菌制备小鼠脾细胞
悬液 ,用 RPM I-1640不完全培养液洗涤 2次 ,每次
1 000 r /min,离心 10 min,然后用完全培养液配成 5
× 106 /ml,取 100μl加入 96孔细胞培养板 ,加入终
浓度为 5μg /ml的 ConA,置 37℃ , 5% CO2培养箱
中培养 48 h后 ,每孔加入 10μl M TT溶液 ( 5mg /
ml ) ,再继续培养 12 h,然后加入 DMSO 100μl,充
分震荡后静止 20 min,全自动酶标仪 560 nm波长
进行比色分析。
·1·
滨州医学院学报
2003年　第 26卷　第 1期　　　　　　 JOU RN AL OF BINZHOU M EDICAL COLLEGEVo l. 26　 No. 1　 2003
1. 3. 2　 IL-2的诱生:取上述已制备的脾细胞悬液 5
× 106 /ml ,放入培养瓶 ,置 37℃ , 5% CO2培养箱中
培养 40 h,离心收集上清液 ,置 - 20℃冰箱保存备
用。
制备活化的脾淋巴细胞 [3, 4 ]: 按上法无菌取正常
BALB /C小鼠脾脏 ,制成 5× 106 /ml细胞悬液 ,加入
ConA使其终浓度为 5μg /ml ,置 37℃ , 5% CO2培
养箱中培养 48 h ,收集细胞 ,离心洗涤 2次 ,用完全
RPM I-1640配成 5× 105 /ml细胞悬液 ,作为检测
IL-2的反应细胞。
1. 3. 3　 IL-2活性检测 [3 ]: 取 - 20℃保存的 IL-2上
清液 ,并做 1 /2和 1 /4的稀释 ,在 96孔平底培养板
中 ,每孔加入 IL-2上清液或不同稀释度的 IL-2上
清液 100μl及上述反应细胞 100μl;阳性对照不加
IL-2上清 ,加 100μl 1640培养液。每组各设 12个复
孔 ,置 37℃ , 5% CO2培养箱中培养 48 h,每孔加
MT T( 5 mg /m l) 10μl,继续培养 4 h ,吸弃 100μl上
清液 ,加入酸化异丙醇 100μl ( 0. 04 mol /L HCl-异
丙醇 ) [4 ] ,充分震荡后静止 20 min,全自动酶标仪
560 nm波长进行比色分析。
1. 4　结果处理　实验结果采用组间均数差异 t检
验的方法进行统计学分析。
2　结果
结果见表 1。表 1显示 ,用药组脾淋巴细胞增殖
反应明显 , IL-2的产生明显增强 ,与对照组相比差
异有极显著性 (P < 0. 01)。
表 1　小叶女贞对小鼠淋巴细胞增殖
和 IL-2产生的影响 (x± s )
组别 n 脾淋巴细胞增殖　　 IL-2　　
对照组
药物组
12
12
0. 387± 0. 045
0. 574± 0. 080*
0. 169± 0. 037
0. 267± 0. 041*
　　注: * 与对照组相比 , P < 0. 01
3　讨论
本实验研究了小叶女贞对小鼠淋巴细胞增殖和
IL-2产生的影响 ,结果表明小叶女贞可使 ConA激
发的 T淋巴细胞增殖反应明显增强 [2 ] ,表明小叶女
贞对 T淋巴细胞功能具有增强作用 ,同时对 B细胞
免疫功能也具有明显的增强作用。 T细胞是机体免
疫系统赖以实现免疫调节的重要细胞 ,在机体特异
性免疫应答中起核心作用 , T细胞功能障碍会直接
影响机体的细胞免疫应答和免疫调节。 本文研究还
发现小叶女贞对细胞因子 IL-2有促进作用。IL-2主
要是由辅助 T细胞产生的非特异性细胞因子 ,作用
于活化的 T细胞促使其增殖 ,并对 B细胞有调节作
用。小叶女贞可明显促进小鼠脾细胞产生 IL-2的水
平 ,间接增强体液免疫应答。分析上述免疫指标改变
的原因可能是小叶女贞对 T淋巴细胞的直接促进
作用 ,或作用于巨噬细胞促进 T淋巴细胞的产生 ,
从而促进 T淋巴细胞产生细胞因子 ,促进 T淋巴细
胞及 IL-2的产生。以上两项免疫学指标均明显增
强 ,组间相比差异均有极显著性 (P < 0. 01)。本实验
提示 ,可以将小叶女贞开发为保健食品或新的中药
材 ,这样既能绿化环境又能获取经济效益。
参考文献
1. 全国中草药汇编编写组 . 全国中草药汇编 (下册 ) [M ] .北京:人
民卫生出版社 , 1983. 75
2. 高梅 ,贾镭 ,陈芬 ,等 . 虎尿对小鼠淋巴细胞增殖和 IL-2产生的
影响 [ J] .中国实验临床免疫学杂志 , 1999, 11( 3): 39
3. 邱世翠 ,李宗山 ,郭毅 ,等 . 枸杞对辐射损伤小鼠造血功能恢复的
影响 [ J] .中国中医药科技 , 2000, 7( 6): 362
4. 邱世翠 ,李波清 ,王运平 ,等 . 康宝饮对小鼠的抑瘤作用 [ J ].中国
现代医学杂志 , 2001, 11( 2): 33
(收稿日期: 2002-08-18)　　
作者书写统计学符号须知
　　论文中统计学符号应按 GB 3358-82《统计学名
词及符号》的有关规定书写 ,常用如下: ( 1)样本的算
术平均数用英文小写 x ; ( 2)标准差用英文小写 s;
( 3)标准误用英文小写 s x ; ( 4) t检验用英文小写 t;
( 5) F检验用英文大写 F; ( 6)卡方检验用希文小写
i2; ( 7)相关系数用英文小写 r; ( 8)自由度用英文小
写 v ; ( 9)概率用英文大写 P ( P值前应给出具体检
验值 ,如 t、i2值、 q值等 )。 以上符号均用斜体。
本刊编辑部　　
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2003年　第 26卷　第 1期　　　　　　 JOU RN AL OF BINZHOU M EDICAL COLLEGEVo l. 26　 No. 1　 2003