全 文 ：第 17 卷第 4期
1 9 95 年 8月
第 三 军 医 大 学 学 报
AC TA AC A E DM IAE M E C D I INAE M L IA T IR ISE T R T IAE
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4
1 9 9 5 3 4 1
小叶女贞提取物一 M : 自由基清除剂作用的实验研究
洪 新 杨肇享 周向东 (第三军医大学附属大坪医院呼吸内科 ) 重庆 , 6 3 0 0 4 2
提 要 采用豚 鼠哮喘模型 ,通过检测血浆 、 肺组织及支气管肺泡灌洗液 ( B A L F ) 中脂质过氧化物
(L P O )含量和 B A L F 中各种细胞计数的变化 ,观察中药小叶女贞提取的有效成分 M : 腹腔注射两天的防治效
果 ,结果发现 M : 能显著减少血浆 、 肺组织及 B A L F 中的 L P O 含量 ,并减少 B A工 F 中上皮细胞的数量 。 结果提
示 M : 具有清除自由基的作用 ,并可能对气道上皮损伤有保护作用 .
关键词 哮喘 ,氧自由基 ;小叶女贞 ;地塞米松
中图法分类号 R 2 8 2 . 7 1 , R 5 6 2 · 2 5
我院在 70 年代初期对中草药小叶女贞的临床和
实验研究中发现它具有显著的止咳平喘作用 , 从小叶
女贞中提取的有效成份 M : 动物实验及药理 、 药效学
实验也证明其具有确切的治疗作用 。 本实验采用豚鼠
哮喘模型 ,通过检测血浆 、肺经脂及支气管肺泡灌洗液
(B A L F )中脂质过氧化物 (L P O )含量的变化 , 发现 M Z
具有清除自由基的作用 , 并能减少 B A L F 中上皮细胞
的数量 。 现将结果报告如下 :
1 材料与方法
·
k g 一
’外 ,其余各步均同哮喘组 。 诱发哮喘 24 h 后 ,清醒动物四
肢固定 ,剪开股动脉取血 6~ 7 m l ,分离血浆 , 一 20 ℃ 保存 , 用于
检测 L P O 的水平 。 放血毕作气管插管 , 支气管肺泡灌洗两次 ,
合并两次 B A L F 。 取 1 m l 作细胞分类 ,其余 B A L F 离心 ,取 1 m l
上清液用于检测 L P O 量 。 支气管肺泡灌洗毕立即胸取肺组织
0
.
5 9
, 加生理盐水 2 m l 后匀浆 , 9 5 0 x g 离心 3 m in , 上清液
一 2 0℃保存用于检测 L P O 的含量 。
L P O 含量测定用 o h k a w a 法 2[] ,蛋白质含量测定用 L o w yr
法 s[J . B A L F 细胞分类计数采用白细胞分类计数法 .
1
.
2 统计学处理
采用非配对计量资料 t 检验 。
1
.
1 动物模型
体重 2 5 0 ~ 5 0 0 9 雄性豚鼠 ,随机分 4组 ,每组 g ~ 1 0 只 . 哮
喘组 :参照 H u t s o n [ , ]方法面罩雾化吸入 1%卵蛋白 3 m i n ,第 1 ,
4
,
7天各致敏一次 ,于第 21 ~ 28 天之中诱发哮喘 。 诱发前 2 天
用 。 . 9% N a cl 0 . 5 司 腹腔注射 ,每日 2 次 ,诱发前 30 m in 再注
射一 次 ,同时另用苯海拉明 10 m g · k g 一 ` .诱发用 2%卵蛋白吸
入 5 而 n , 使动物 出现典型哮喘发作 ;正常对照 组 : 除致敏用
0
.
9%的 N a CI 吸入外 , 其余均同哮喘组 ; M Z及地塞米松防治
组 : 除腹腔注射分别用 20 % M : 0 . 5 ml · k g 一 `及地塞米松 1 m g
2 结果
从表 1 可见 ,哮喘动物无论血浆 、 肺组织还是 B A L F 中的
L P O 均有显著增高 , 用 M : 及地塞米松预先用药 Z d 均能显著
减少 L p O 的产生 。
从表 2 可见 ,哮喘组 BA L F 中细胞总数 、 嗜酸粒细胞数 、 中
性粒细胞数及上皮细胞数较正常组分别升高 1 . 1 、 10 . 1 、 2 . 3 、
1
.
9倍 ,差别非常显著 ( P < 。 . 0 1 ) ,单核细胞增加 25 % ,但无显
著差别 .
表 1 哮喘豚鼠血浆 、 肺组织及 B A L F 中 L P O 的含量及 M Z 、地塞米松的防治作用任士 : )
T a b 1 C o n t e n st o f L P O i n P l as m
a , P u lm o n a r y t i s s u e a n d B A L F a n d t h e e f f ec t o f M
z a n d d e x a m e t h a s o n e
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( n rn o l / L ) B A L F (
n rn o l / rn l ) p u lm o n
a r y t i s s u e (
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m o l / m g )
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m a l 2 8
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7 4士 9 . 8 6 0 . 4 6 5士 0 . 0 56 2 4 . 5 4士 3 . 7 8
A s t h m a t i e 4 5
.
4 3士 12 . 8 8 . 0 . 6 8 1士 0 . 14 8 ’ 3 4 . 8 7士 6 . 5 4 `
M , t r e a t m e n t
D e x a m e t h a
s o n e
1 7
.
3 8士 8 . 4 3+ + 0 . 5 4 9士 0 . 0 9 4 + 2 7 . 8 0士 5 . 9 2+
t r e a t r 】l e n t 2 1 . 3 7士 6 . 9 0+ + 0 . 5 0 3士 0 . 0 5 1+ 2 4 . 8 0士 5 . 7 6+
关 P < 0
.
0 5 v s n o r m a l e o n t r o l , + P < 0
.
0 5
, 十 + P < 0 . 0 1 v s a s t h m a t ie g r o u p
DOI : 10. 16016 /j . 1000 -5404. 1995. 04. 030
4 32 第 三 军 医 大 学 学 报 第 17卷
表2 哮喘豚鼠 L A B F中细胞计数 ( 1 0“ /L )及 M :、 地塞米松的作用份士 , )
T a b 2 C e l l u l a
r e o u n st i n B A L F o f a s th e m a t i e g u i n e a p ig (一0 . / L ) a n d e f f e e t o f M : a n d d e x a m e t h a s o n e
G r o u P
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T o t a l e e l l
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E o s ip h i n o l M o n co y t e
9
.
4 1士 1 . 7 4 0 . 5 5士 0 . 2 9
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0
.
8 8士 0 . 6 3 7 . 4 6士 1 . 5 7
E p i t h e l l i u m
0
.
2 8 6士 0 . 15 6
A
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.
8 4士 3 . 0 2 “ . 6 . 1 3士 1 . 9 5 二 2 . 9 2士 1 . 5 2 9 . 3 2士 2 . 4 6 0 . 8 2 2士 0 . 4 20 二
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r e a t m e n t
I死 x a m e t h a s o n e
1 6
.
8 8士 4 . 0 1 4 . 8 3士 1 . 6 5 2 . 7 9士 1 . 4 4 8 . 0 6士 1 . 1 9 0 . 3 4 2士 0 . 28 9+ +
t r e a t l l l e n t 1 1
.
0 7士 1 . 9 6+ + 1 . 8 0士 0 . 6 7二 + + 2 . 4 0士 2 . 2 2 6 . 2 7士 0 . 8 4 0 . 3 0 7士 0 . 3 1 6+ +
、 P < 0
.
0 5
, , 、 P < 0
.
0 1 v s n o r m a l e o n t r o l , + P < 0
.
0 5
,
+ + P < 0
.
0 1 v s a s t h m a t ie g r o u p
与哮喘组 比较 , M Z治疗 组炎细胞数量无 显著变
化 , 但上皮细胞减少 5 % ( 尸 < 0 . 0 1 ) ; 地米治疗组细
胞总数 、 嗜酸细胞数和上皮细胞分别减少 4 % 、 71 %和
6 3% ( P < 0
.
0 1 )
。
数 , 而且也显著地减少 B A L F 中的炎细胞数量 , 即抑
制气道中的炎细胞的浸润 。 M Z的 自由基清 除剂样作用
是否与其止咳祛痰 、 解痉平喘的作用有关有待进一步
探讨 。
3 讨论 参考文献
我院 自70 年代起对中药小叶女贞进行了广泛的研
究 , 并在 80 年代对其有效成份进一步进行分离提取鉴
定 , M Z是其有效成分之一 。通过动物实验发现 M Z具有
显著的止咳祛痰和快速的平喘作用 ,且无明显的毒副
作用 。经数百例患者的临床试用也证实其疗效确实 。 然
而其作用机理尚未明了 。有学者报告 M Z的同类物具有
清除 自由基的作用 〔` , 5弓。从本实验 的结果来看 , M Z预先
用药 Z d 显著地减少血浆 、 肺及 B A L F 中的 L P O ,特别
是血浆中 L P O 含量 ,证实 M Z确有 自由基清除剂样作
用 , 其作 用类似于地 塞米松 。 此外 , M Z还能显著减 少
B A L F 中上皮细胞的数量 ,还可能与其作为 自由基清
除剂的作用有关 ,通过阻断气道的脂质过氧化损伤 ,减
轻气道上皮的损害 , 减少上皮细胞的脱落 。但 M Z对气
道炎细胞 (如嗜酸性 、 噬中性粒细胞等 )的浸润无 明显
作用 。 相反 , 地塞米松不仅减少 B A L F 中的上皮细胞
1 H u t s o n P A
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C h u r e h M K
,
C l a y T P e t a l
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n o n a n e s t h e t i z e d g u i n e a p i g s
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A m R e v R e s p i r 乃 s , 1 9 8 8 ; 1 3 7 :
5 4 8
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1 9 7 9 ; 9 5
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e r m e n t w it h t h e F o lin p h e n o l r e a g e n t
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:
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:
2 6
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th e m y o e a r d i u m
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1 9 8 8 ; 4
:
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(收稿 : 1 9 9 5 一 0 7 一 0 1 .修回 : 2 9 9 5一 0 7 一 2 6 )
T h e e f f e e t o f e x t r a e t o f L i g u s t r u m q u i h o u i e a r r M
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