全 文 ：第 9 1卷
19 9 4
第 3期
年 5月 林 业 科 技 FORE ST R YE C I SC NE& TE CH N OL OG YV o l
.
19No
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3
M ay 9 19 4
欧洲山杨优良种质保存的新技术
徐妙珍 张雅君
(黑龙仁省林科所 )
刘文明 于英华
(桦南林业局 ( )黑龙江省山河屯林业局 )
单玉样
(松花江林业 管理局 )
【摘要】本丈对欧洲 山杨优良种质保存新途径进行探讨 .试脸结果表明 ,愈伤组织或介化试管
苗作为保存材朴 , 效果很好 . 在低 遏下保存时 ,保存期长 ,保存率 高 ,欧洲人杨 3一 1 和欧洲山杨
3
一
2 保存派度为 2~ 4℃ , 而欧洲山杨 3一 3 为 4 ℃ ;在M S 培养基中嘴加激素含黄 (。 . 1~ 。 . Zm g / L )
保存种质效果好 ,保存期可延长 6 个 月。
关键词 : 欧洲 山杨 ;优 良种质 、 保存 ,途径
植物种质的收集 、 保存和利用是遗传育
种工作的一项重要 内容之一 , 随着珍贵优 良 `
基因资源的开发利用 ,该项技术越来越引起
人们的重视 。 近几年来国内外开展了低温种
质保存 ,建立 “ 种质银行 ” 等研究工作 ,并取得
了重要成果 ,使一些有珍贵价值的种质资源 ,
保存在 “ 种质银行 ” 即基因库内随时可 以取
用 。
冷藏 1一 3 个月 ,然后转瓶再放回正常培养条
件下 , 定期测定种质经保存后的分化能力以
及细胞遗传性状有无变化 ,试验结果如下 。
1 试验材料与方法
2 结果与分析
2
.
1 不同低温温度冷藏及其效果
试验采用 。℃ , 2℃ , 4℃三种不同低温条
件下 , 对欧山 3一 1 、 欧山 3一 2 、 欧山 3一 3 三
个无性系的试管分化苗进行保存 1一 2 个月 ,
’ 转瓶后再放回原培养室培养 ,测定再生效果 ,
有的恢复分化性能 ;有的材料虽然没有枯萎 ,
但已失去分化性能 ;有的材料枯萎死掉 。试验
结果见表 。
不同低沮保存与再生率表
0 ℃ 2℃ ` 4℃
无性系 3 0 天 右o 天 3 0 夭 6 0 夭 3 0 天 ` o 天
率)生%再(率)生%再`率)生%再(率)再生写(率)生%再(率)生另再(
常规的种质保存方法是在种子园 、 种子
场和种子库中进行 。 本研究是利用植物组织
培养法 ,对优良种质的部份组织进行培养 ,获
得不同类型的试管材料 (愈伤组织 、分化丛生
苗 、生根试管苗 ) ,放在不同的低温下进行保
存试验 , 保存库 采 用 电冰箱 , 调节温度 为
O℃ , 2℃ , 4℃三种 。试验材料是引进国外的欧
洲三倍体山杨 ( 尸。 P ul u t er m ul a ) , 经无性系
子代测定和选择 , 选择具有生长快 、 材质优 、
抗性强的无性系或个体 , 作为试验对象 ,通过
组织培养分别获得愈伤组织 、分化丛生试管
苗和生根试管苗 , 采用 3 个不同温度的低温
魁 1。 · 5 。 · 2 8 8 · , 8 6 · 5 , ” · 2 ” 5· ,
8 3
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4
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UQ山泛州侧欧-3卜
由表 1分析 , 欧洲山杨三倍体的欧山 3
2 林 业 科 技 弟 19 卷
一 1 和欧 山 3 一 2 优良种质 , 适宜的保存温度
为 2一 4℃ , 低温冷藏和培养室交替时阅为 2
一 3 个月 , 再生率为 8 %以上 ,连续保存时间
可达 3 年之久 。 而欧山 3一 3 在同样 2℃条件
下 ,再生率只有 60 %左右 , 当在 4 ℃的未件下
为 8 5% ~ 94 % , 因此适宜的保存温度为 4℃ 。
说明不同无性系间有所差异 。经细胞学观察 ,
凡获得再生能力的植株 ,都没有发生遗传性
状变异 。
.2 2 不同形态的培养墓与保存效果
试验对愈伤组织 、分化丛生试管苗 、 生根
试管苗三种不同类型的种质材料 , 采用固体
化 、 半固体化和液体化 3 种不同形态培养基 ,
在 3 ℃低温下进行保存实验 。
试验表明 ,愈伤组 织在半固化培养基 中
保存效果最佳 , 换瓶交替对间为 3 个月一个
周期 ,保存时间长达 3 年之久 ;分化苗为 2 个
月一个周期 ,保存期为 2~ 3 年 ;生根苗保存
期短 ,仅保存 l 年 。 因此采用愈伤组织或分化
试管苗为种质材料进行低温保存效果好 , 保
存期长 , 保存率高 。
.2 3 培养墓成份对种质保存率的影响
种质保存率与培养基中营养成份以及激
素种类和浓度密切相关 。 试验采用 W PM 和
M S 两 种培养基 , 附加 B A P ( o一 , 0 . 3 , o · 5 ,
0
.
7m g / L ) 4 个浓度水平 , I B A ( o , l , 0 3m g /
L ) 2个浓度水平 , 保存材料为欧 山 3一 1 号分
化试管苗 , 经交替保存 2 年统计其保存率 ,采
取方差分析进行验证 。
结果表明培养基成份与激素种类差异显
著 , 这两个因素与种质保存 率密切相关 , 而
IB A 含量对保存率影响不大 。 在富含营养的
M S 培 养 基 中 , 稍 提高激 素 含 量 ( 。 . 1一
。 . Zm g / L )种质保存期可延长 6 个月 、
3 结论
3
.
1 欧洲 山杨 3一 l 和欧洲 山杨 3一 2 的优
良种质保存的适宜温度为 2一 4℃ ,而欧洲山
杨 3一 3则为 4 ℃ 。
3
.
2 愈伤组织和分化试管苗作为保存材料
效果好 。 在低温下保存时 ,保存期长 , 保存率
高 。
3
.
3 在 M S 培养基中提高激素含量 (0 . 1 ~
0
.
Zm g / L )对种质保存效果好 ,保存期可延长
6 个月 。
T H E N E W P R E S E R V A T IO N W A Y O F G O O D G E R M
P L A SM Q U A L I T Y F O R E U R O P E A N A S P E N
X u M ia o z h e n
( F o r e s t r y R e s e a r e h hI s t i t u t e o f H e i l o n g ii a n g P r o v i n e e )
A B S T R A C T
T h i s p a p e r e o n e e r n s t h e n e w p r e s e v a t i o n w a y o f g o o d g e r m p la s m q u a l i t y e u r o p e a n
a e p e n
.
T h e r e s u l t s h o w s t h a t t h e e f f e e t o f e a l l u s a s p r e s e r v a t io n m a t t e
r ia l 15 b e t t o r
.
U r d e r
lo w t e m p r e t u r e p r e s e r v a t i o n
, t h e t im e 15 l o n g e r a n d p r e s e r v a t i o n r a t e 15 h i g h e r
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r h e s u i t a b le
P r e , e r v a t i o n t e m P r e t u r e o f e u r o P e a n a s P e n 3一 1 a n d e u r o P e a n a s P e n 3一 2 15 2一 4 ℃ , e r 、 I c , -
p e a n a s p e n 3 一 3 15 4℃ , I n e r e a s i n g h o r m o n e e o n t e n t ( 0 . 1~ 0 Zm g / L ) w h i l e i n M S e u l。; ; r e
: n e d一u r n , P r e s e r v a t i o n e f f e e t o f g e r m P l a s m 15 be t t e r
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f o r 6 m o n t h e s p r e s e r v a t io n
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K E Y W O R D S
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E u r o P ea n a s P e n ; G e r血 P l a s m ; P r e s e r v a t io 一l ; N e w w a y