全 文 ：香荚兰醛的大鼠药动学研究
江苏省原子医学研究所 邵鹤生 潘 尚仁 景锡南 许南星 李卫 一 王桂莲
中国科学院原子能研究所 李志敏
提要 :香英兰醛系从天麻根、 茎和松柏着等经苦杏仁酶水解而得 .成药名勺抗癫 香素片 。
本文研究了 3 H一香英兰醛在大鼠体内吸收 、 分布 、 排泄和代谢的过程。
香荚兰醛 ( Va ni l li ne ) 又名香兰素 , 是从
天麻根 、 茎和松柏昔 ( C o in f e in n) 经苦杏仁酶
水解而得 。 成药名为抗癫香素片 , 现已由南
京药学院药厂生产 。 药理研究表明 , 该药有
抗惊厥作用 I`一 “ , , 在临床上也已得到证明 。 本
品对癫痛小发作疗效较 好 , 且无 明显 副作
用 峪` , “ , 。 该药亦是常用的食用香精 。 本文 报
告 “ H 一香荚兰醛在大鼠体内的吸收 、 分布 、
排泄和代谢的研究结果 。
材料和方法
一 、 标记药物及制剂 “ H 一香荚兰 醛标
记物由我所与原子能研究所协作完成 , 比放
射性为 5 . 8 2 G B q /m M o l ( 即 1 5 7 . 4 m C i / m M 一
ol )
。 硅胶薄层层析表明 , 用重结晶法纯化后
的放射化学纯度 > 97 % , 其白色针状结 晶较
为稳定 。 将 “ H 一香荚兰醛加适量本品作载体 ,
用 1% C M C溶液制成混悬液 , 使浓度为 70 m g
/ m l
, 放射性浓度为 1 . o 4M B q / m l ( 2 8 · 2 1“ C i
/ m l)
。 吸收实验及血浆蛋白结 合率实验 用
S
H一香荚兰醛溶液的浓度为 7 m g / m l ( 。 · 10 4
M B q / m l )
。
二 、 实验动物及实验方法 采 用 1 37 ~
2 2 09 雄性大鼠 , 口服给药前禁 食 16 ~ 20 小
时 。 实验时自由进食和饮水 。
(一 ) 血 装蛋白结合率 :
取大鼠血 10 m l , 用拘椽酸钠抗凝 。 离心
后取血浆 5 m l , 加入 aH 一 香荚兰醛溶液 5 0川
(药量为 3 . s m g , 放射性剂量为 1 . 4 1拼C i) , 在
37 ℃水浴 中温孵 30 分钟 。 在 15 m l 离心试管
内加 5 m l 生理盐水作为透析外液 。 透析袋放
于离心试管内 . 然后取 l m l温孵的血浆加到
2 2
透析袋内 。 透析 1 2小时后 , 分别取内 、 外液
各 o . l m l , 测其放射性量 , 并计算血浆蛋 自
结合率 。
(二 ) 胃肠吸收 :
在乙醚麻醉下剖腹 , 结扎责门 、 幽 门; 在
胆总管下结扎 十二指肠下段 及 回肠 段 各 约
c7 m
。 在结扎段内分别注入 “ H 一香荚 兰醛溶液
50 仔1。 8 只大鼠分成 4 组 , 分别于给药后 即
时 ( o 时 )和 0 . 5 、 2 、 4 小时处死 , 取出各段 消
化道 。 用 5 m l 无水 乙醇提取残留的 “ H 一香荚
兰醛 , 测量放射性 。 以即时处死组回收到的
放射性为 1 0 % , 计算给药后不同时间消 化
道中残留的百分数 。
(三 ) 分布 :
1
. 大鼠单次口 服给药
大 鼠20 只 , 分成 5 组 , 给药剂量为 3 . 7
M B q / k g
。 给药后 0 . 7 5 、 2 、 s 、 2 4 、 4 5 小时 , 剪
断颈动脉放血处死 , 剖取大脑 、 小脑 、 脊髓
心 、 肝 、 脾 、 肺 、 肾 、 胃、 小肠 、 直肠 、 脂
肪、 肌肉及肾上腺样本 。 各组织和脏器经生
理盐水漂洗除去残留血液及脏器内容物 。 在
精密扭力天平上称取 S Om g , 取肝素抗凝血和
血浆各 0 . l m l , 分别置于闪烁杯内制样 , 测量
其放射性 。
2
. 多次 口 服给药
大鼠 4 只 , 每次给药间隔 4 小时 , 连续
给药 4 次 。 每次给药的剂量同单次 给 药 量 。
于每次给药前 10 分钟和给药后 30 分钟在尾
静脉取血 1。川 , 制样测量 。 末次给药后 4 8 小
时处死动物 , 取各脏器样本测量 , 处理方法
同上 。
( 四 ) 排 泄 :
中 成 药 研 究
时间平行下降 , 经计算血浆中放射性的生物
半衰期为 3 0小时 。 放射性药物能透过血脑屏
障 , 中枢神经系统中有一定分布量 , 约为血浆
浓度的 1 / 3一 1 / 2 。 大脑中的放射性显著高于
小脑及脊髓 ( P < 0 · 0 5 ) 。
吁临争禅心边嘴召月咭氮
叙 众找
图 1 大里 口服
, H一香英兰醛后
各胜器中放射性
分布曲线
l
”川陈é日曰
竺去 书洲 、坚
田 2 大暇口服
, H一香英兰醛后
中枢神经系统 中
放射性分布曲线
妹切俗相ù一
1
. 尿粪排泄
大鼠饲养在代谢笼内 , 自由进食饮水 , 每
笼 2 只 , 共 3 笼 。 分别收 集 给 药后 。~ 12 、
1 2 ~ 2 4
、
2连一铭 、 4 5~ 7 2 及 7 2~ 9 6 小时的尿
和粪 , 计取尿 、 粪总量 。 将各时间组的粪经
干燥后研匀 , 称取 50 m g , 放入闪烁杯内制样 、
测量 。 尿经稀释后取 o . l m l , 加闪烁液测量 。
2
. 胆道排泄及肠肝循环
大 鼠 3 只腹腔注射乌拉坦 ( o · 8 9 / k g) 麻
醉 , 剖腹 , 胆总管插管引流 , 给药后收集每
小时的胆汁 , 测量放射性 。 另用 3 只大 鼠作
受体鼠 , 也作胆道引流术 , 每只于十二指肠
给予上述收集的胆汁 2 m l , 然后收集其胆汁
和尿 , 测量其放射性 。
(五 ) 样本制备及放射性测量 :
放入闪烁杯内的样本 , 每份均加入 85 %
甲酸 0 . 4 m l , 3 0 % 过氧化氢 0 . 4 m l 及辛 醇 1
滴 , 在 75 士 5℃ 水浴中消化 45 分钟 。 冷却后
加入 4 m l 乙 二醇 乙 醚 及 6m 10 . 5% P P O 一二
甲苯闪烁液 , 摇匀 、 放置 。 用国产 FJ 一 353 双
道液体闪烁仪测量 , 用 内标准法对各实验样
品作淬灭校正 。
(六 ) 薄层层析 :
尿和胆汁均直接点样于硅胶 G 板上 ; 展
开剂为氯仿 : 醋酸乙醋 : 醋酸 : 水 (4 o : 2 :0
5 : 4 )
, 展开 1 c0 m , 在紫外灯下观察荧光 , 并
用三氯化铁一铁氰化钾试液及 2 , 4 一二硝基苯
脐试液显色 。 未经显色的层析板分 段 取 下 ,
每段 0 . 5。 m , 测量放射性 。
价
::
一 “ 认 、
用透析法测得血浆蛋 白结合率约71 % 。
图 3 多次给药
后血中放射性浓
度时间曲线
` - 一 - 一、 : ’ t 仆、
. 个
; ` 4
O 为实验值 , 曲线按下列方程计算 :
-et,a)r
C
J= A
其中
, 1 _ 。 一 r乙t / r e
r 二` 一兰一一—\ 1 _ . 一 』 t / 丁巴、 日` ` e 一 t / 了 e _
1 一 e 一 ) J t八 a
1一 e 一乙 t z T a
A = 1
`
3 5K B q / m l 刁 t 二 4小时
t
。 = 4 3
.
5小时 t a = 0 . 0 5小时
结果和讨论
一 、 胃肠道的吸收 本实验采用的是在
位吸收试验 , 结果较符合生理状况 。 结扎的
胃 、 小肠和回肠在 O · 5 小时已分别吸收 47 % ,
91 %和 92 % , 2 小时后分别为 68 % 、 98 % 和
邢% 。 可见本品吸收迅速 , 主要吸收部位为
小肠 。
二 、 分布 如图 l 和图 2 所示 , 在给药
后 0 . 75 和 2 小时 , 以肝脏中放射性最高 , 以
后则血浆中浓度较高 。 各脏器中的放射性随
1 9 8 8 年 第 g 期
多次给药组以每 4 小时给药一次 , 在第
4 次给后 48 小时 , 血浆中放射性浓度为相应
单次给药 的一倍多 , 其他脏器和中枢神经系
统为单次给药的 3~ 5倍 。 从单剂量的药动学
参数推算多次给药的血液浓度变化 〔. , , 计算
值和实验值基本符合 (见图 3) 。 由于 半衰期
较长 , 当给药间隔较短时有着蓄积现象 。 经
计算 , 当给药间隔为 4 小时 , 蓄积比为 1 1 ; 8
小时 , 蓄积 比为 6。 据临床报告 , 治疗大多需
在用药 7 天后方能起效 ’句 , 说明药物需蓄积
至一定程度方起作用 。 药物在中枢神经系统
2 3
中以何种方式蓄积和发挥作用 , 是值得进一
步探讨的问题 。
三 、 尿粪排泄和肠肝循环 给药后 12 小
时内 , 从大鼠尿中排出的放射性为给药量的
6 8%
, 9 6 小时为 8 0% ; 但粪排泄量仅为 l % 。
说明该药物主要从尿中排泄 , 且大部分在 12
小时内排出 。 12 小时内从胆汁中的排泄量为
给药量的 1 8 . 5% , 其中 13 %是在前 4 小时中
排出的 。 胆汁排出量大于粪排 出量 。 肠肝循
环实验证明 , 胆汁中的放射性能在肠道中再
吸收 。
四 、 代谢 从尿中放射性代谢产物的薄
层层析谱及测量结果看 (见图 4) , 尿中原形药
物不到 10 % , 除原形药物斑点外还可看到 6
个放射性斑点 , 均能对 F e C I : 一 K F e ( C N ) ` 试
液显色 , 其中 M : 和 M 。 在紫外灯下显紫色荧
光 。 原点 M 。 放射性最高 , 估计为香荚 兰 醛
和各种代谢物的结合产物 。 据文献报道 闭 , 大
鼠腹腔注射香荚兰醛后的主要代谢产物是游
离的和结合的香英兰酸和香荚兰醇 。 胆汁的
薄层层析谱中未发现原形药物 。
要罗子总皂武的抗缺氮
和抗炎作用的初步观察
杭州第二 中药厂 戴培兴 马心舫 尤国鸿
提 . 本文报道中药要罗子中含有的总皂
贰具有抗小鼠低压缺氧的作用 , 对炎症性渗出
有抑制作用 。
1 4 尿中代姗
物的层析日进
致谢: 本实验得到南京药学院蒋莹同志的支持和帮助。
今 考 文 做
邝安梦 、 吴云瑞等 : 中华医学杂志 4 4( 6 , : 5 82 , 19 58
江振裕 、 张德星 : 生理学报 2 魂( 3一 4 ) : 18 7 . 1 9 6 1
沈道修 、 张效文 : 药学学报 10 ( 4 ) : 2 42 : 1 96 3
南京药学院药理教研室神经药理科研组 : 香英兰醛
的药理研究抗癫痈药香英兰醛鉴定会资料汇编 ,
19 8 2 年
香兰素临床协作组 : 香兰素治疗癫 痛 2 91 例 的疗效
观察抗癫痛药香英兰醛鉴定会资料汇编 1 9 82
R o s s u m JM V
a n : K i n e t ie s o f d r u g a e t i o n 1 0 7 S P r i
。 g e r 一V e r la g B e r li n , 1 9 7 7
W
o n g K P e t a l
:
C a n J B i o e h e m 堪毛( 5 ) : 6 3 5一 4毛.
工 9 66
婆罗子 (苏罗子 )为七叶树科 ( H i p p oc as -
t a n a e e a e )七叶树 ( A e s 亡u l u s C il i n e n s i s B 。 n g e )
的干燥成熟果实 , 民间主要用于胃痛 、 心疾 、
吐血劳伤等 【` , 。 苏州市中医医院用冲剂治疗
心绞痛 , 发现它确有 “ 活血” 、 “ 温痛 ” , 并轻度
降血脂 , 动物试验能提高动 物 耐 缺 氧 的能
力 ` 2’ 。 为此我们对要罗子总皂贰的药理作用
进行了初步观察 , 现报道如下 。
一 、 婆 罗子总皂戒的提取和鉴别 取要
罗子切片以 95 % 乙醇迥流提取三次 , 合讲三
次提取液 , 回收乙醇至小体积 , 经过适当的
处理得到总皂贰 , 进行化学鉴别 , 取总皂贰
提取物用少许乙醇溶解 , 作供试液 。
L ib e r m a n 反应 : 总皂贰溶液蒸 干 与 醋
醉— 浓硫酸呈阳性反应 。溶血试验 : 总皂贰试液蒸干 , 用水溶解 、
加入红血球悬液 , 即出现溶血现象 。
泡沫试验 : 总皂贰试液蒸干 , 用水溶解
后剧烈振摇 , 产生持久性的泡沫 。
薄层层析 : 取总皂贰的酒精溶液进行薄
层层析 , 并与法国 R o g e r B e l l o n l 实验 室 从
欧马粟中提取的七叶皂贰片进 行 比 较 。 见
图 l 。
A
:
R
e p a r i l
B
: 婆罗子 』总皂戒
吸附剂 : 硅胶 G
展开剂 : 正丁醇 : 醋酸: 水
6 : 1 : 3
显色剂 : 5终磷钥酸
. 1 婆罗子提取物总
粤戒琳层层析
IJ, es, .
es1叮自nOJ胜ó卫Lù.r.
泌,
.
娜舜娜梦一月
, J.工Jes, .ù勺ō匕时了r. LFl. .L
2 4 中 成 药 研 究