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不同采收期连翘、金钟花果实中连翘酯苷和连翘苷的含量测定



全 文 :2008 年 8 月第 15 卷第 8期 中国中医药信息杂志 ·47·
不同采收期连翘、金钟花果实中连翘酯苷和
连翘苷的含量测定
曲欢欢 1,李白雪 2,燕 菲 3,孙文基 1
(1.西北大学陕西省生物医药重点实验室,陕西 西安 710069;2.成都中医药大学,四川 成都 610075;
3.中国人民解放军第二军医大学药学院,上海 200433)
摘要:目的 考察不同采收期连翘、金钟花果实中连翘酯苷和连翘苷的含量。方法 采用 HPLC-PDA 法,以
Diamonsil-C18(4.6 mm×250 mm,5 µm)为色谱柱,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速为 1 mL/min,检测波长 270 nm。
结果 连翘果实中连翘酯苷的含量远高于金钟花,金钟花果实中不含连翘苷。结论 不同采收期连翘、金钟花果实中
连翘酯苷和连翘苷的含量有较大差别,金钟花不应混作连翘使用。
关键词:连翘;金钟花;连翘酯苷;连翘苷;含量测定
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2008)08-0047-02
Determination of Forsythiaside and Forsythin from Fruits of Forsythia Suspensa and
Forsythia Viridissima Lindl Collected in Different Periods QU Huan-huan1, LI Bai-xue2, YAN Fei3,
et al (1.Biology and Medicine Key Laboratory of Shanxi Province, Northwest University, Xi’an 710069, China;
2.Chengdu University of TCM, Chengdu 610075, China;3. School of Pharmacy, Second Military Medical University
of PLA, Shanghai 200433, China)
Abstract:Objective To study the content of forsythiaside and forsythin from fruits of Forsythia
suspensa and Forsythia viridissima Lindl collected in different periods. Methods Samples were dealt by
HPLC-PDA with Diamonsil-C18 (4.6 mm× 250 mm, 5 µm) column. The mobile phase consisted of
methanol-water, gradient elution, the flow rate was 1.0 mL/min. The UV detection was set at 270 nm.
Results The content of forsythiaside from fruits of Forsythia suspensa was much higher than that from
fruits of Forsythia viridissima Lindl. And there was no forsythin from fruits of Forsythia viridissima Lindl.
Conclusion There was much difference in content of forsythiaside and forsythin from the two kinds of fruits
above. Forsythia viridissima Lindl should not be used as Forsythia suspensa.
Key words:Forsythia suspensa;Forsythia viridissima Lindl;forsythiaside;forsythin
连翘是历史悠久、使用广泛的一种中药,具有清热解毒、
消肿散结的功效。我国药典收载的连翘为木犀科连翘属植物连
翘 Forsythia suspense (Thunb.)Vahl 的干燥果实,主产于山
西、河南、陕西[1]。对全国大部分地区使用的商品连翘调查发
现,在少数地区有将同属植物金钟花 F.viridissima Lindl.的
果实混作连翘使用现象[2]。另外,近几年在连翘的主产区皆出
现了“抢青”现象,产区“采青”时间过长,采收混乱,造成连
翘品质差异较大,严重影响了连翘的质量和产量[3]。基于上述
现象,本研究比较了不同采收期连翘、金钟花果实中连翘酯苷
和连翘苷的含量,为中药连翘的质量控制提供理论依据。
1 材料
1.1 仪器与试剂
美国 BECKMAN 高效液相色谱仪,125 型泵,168 型 PDA 检测
器,32Karat 色谱工作站;HAMILTON 微量进样器(HAMILTON 公
司);微孔滤膜φ=13 mm,0.45 µm(天津市色谱科学技术公司);

通讯作者:孙文基,Tel:(029)88304569,E-mail:aiby116@163.
com
YCQ-300 型超声波清洗器(上海凯波超声设备有限公司)。甲醇
为色谱纯,水为双蒸水并经 0.45 µm 水系滤膜过滤。
1.2 样品
连翘酯苷、连翘苷对照品均为自行分离精制,并经 UV、IR、
NMR鉴定结构,HPLC检测,面积归一化法计算纯度,均大于99%。
选西安医学院种植的连翘和金钟花为样株(经西北大学生命科
学学院王亚洲副教授鉴定为 Forsythia suspensa(Thumb.)
Vahl 和 F.viridissima Lindl.,果实具体采收时间见表 1。
50 ℃干燥至恒重后,研成粉末,过 2O 目筛,备用。
表 1 连翘、金钟花果实样品采集情况(2006 年)
编号 样品 采集日期(月-日) 编号 样品 采集日期(月-日)
LQ-1 连翘 06-08 LQ-8 连翘 10-28
LQ-2 连翘 06-28 JZH-1 金钟花 07-18
LQ-3 连翘 07-18 JZH-2 金钟花 08-01
LQ-4 连翘 08-18 JZH-3 金钟花 08-26
LQ-5 连翘 08-28 JZH-4 金钟花 09-18
LQ-6 连翘 09-18 JZH-5 金钟花 10-08
LQ-7 连翘 10-08 JZH-6 金钟花 10-08
·48· Chinese Journal of Information on TCM Aug.2008 Vol.15 No.8
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱:Diamonsil-C18(5 µm,4.6 mm×250 mm)。流动相:
A-水,B-甲醇;B相洗脱梯度:0~14 min,34.6%;14~15 min,
34.6%~43.5%;15~23 min,43.5%;23~24 min,43.5%~45%;
24~34 min,45%;34~36 min,45%~80%;36~40 min,80%;
流速:1 mL/min。柱温:室温 28 ℃;灵敏度 0.02 AUFS;检
测波长 270 nm。理论塔板数以连翘酯苷计应不低于 3 300,以
连翘苷计应不低于 7 600。色谱图见图1。






A B C
注:A.对照品;B.连翘果实;C.金钟花果实;1.连翘酯苷;2.连翘苷
图 1 连翘、金钟花果实 HPLC 图谱
2.2 对照品溶液的制备
分别精密称取连翘酯苷和连翘苷对照品 9.86、4.40 mg
置于 10 mL 量瓶中,用 60%甲醇定容至刻度,置于冰箱中(4 ℃)
保存备用。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取不同采收期连翘、金钟花果实的干燥粉末各约
1.000 g 置于具塞三角瓶中,精确加入甲醇 30 mL,精密称质量,
超声提取 30 min 后,用甲醇补足质量,加 20 mL 双蒸水,混匀,
用微孔滤膜(4.5 µm)过滤,作为供试品溶液。
2.4 标准曲线及线性范围的考察
精密吸取上述混合对照品溶液 3、5、10、20、40、50 µL,
进样测定,按上述色谱条件测定峰面积,按外标法以进样量
X(µg)对峰面积 Y 进行回归,得连翘酯苷和连翘苷的回归方程,
分别为:Y=582 121X-816 019,r=0.999 7;Y=580 793X-
33 182,r =0.999 8。结果表明,连翘酯苷进样量在 2.96~
49.30 µg、连翘苷进样量在 1.32~22.00 µg 范围内与峰面积
呈良好的线性关系。
2.5 检测限和定量限测定
连翘酯苷的检测限(S/N=3)为 18.72 ng/mg,定量限(S/N=
10)为 62.41 ng/mL;连翘苷的检测限(S/N=3)为 13.74 ng/mL,
定量限(S/N=10)为 45.79 ng/mL。
2.6 精密度试验
精密吸取混合对照品溶液 20 µL,连续进样 6次,测定峰面
积,结果连翘酯苷、连翘苷的 RSD 分别为 1.20%、1.04%。
2.7 重复性试验
取同一连翘果实(LQ-1)样品 6 份,制备供试品溶液,各取
20 µL 进样,测定峰面积,计算,连翘酯苷、连翘苷的 RSD 分别
为 2.00%、0.68%。
2.8 稳定性试验
精密吸取混合对照品溶液 20 µL 分别于配制后的 0、4、8、
16、24、48 h 内进样,测定峰面积。计算连翘酯苷、连翘苷的
RSD 分别为 1.61%、1.96%。结果表明,对照品溶液在 48 h 内稳
定。
2.9 加样回收率试验
准确称取同一连翘果实(LQ-1)样品 6 份,其中 5 份分别定
量加入连翘酯苷、连翘苷的混合对照品溶液,待自然挥干后,
按供试品溶液制备方法操作,并按上述色谱条件测定峰面积,
计算连翘酯苷、连翘苷的平均回收率分别为 100.79%、
100.31%,RSD 分别为 0.33%、0.36%。
2.10 样品中连翘酯苷、连翘苷的含量测定
取连翘各部位的干燥粉末,按供试品溶液制备方法操作,
按照色谱条件测定峰面积,以外标法计算含量,结果见表2。
表 2 样品含量测定结果(%,n =3)
编号 连翘酯苷含量 连翘苷含量 编号 连翘酯苷含量 连翘苷含量
LQ-1 3.41 0.84 LQ-8 0.72 0.05
LQ-2 1.90 0.64 JZH-1 0.65 0.00
LQ-3 1.21 0.51 JZH-2 0.31 0.00
LQ-4 0.79 0.15 JZH-3 0.17 0.00
LQ-5 0.98 0.49 JZH-4 0.12 0.00
LQ-6 1.31 0.47 JZH-5 0.09 0.00
LQ-7 1.17 0.36 JZH-6 0.81 0.00
3 讨论
3.1 检测波长的选择
采用二极管阵列检测器对检测波长进行了考察,分别提取
并观察 230、254、270、280、324、365 nm 波长处的色谱图[4]。
结果发现 230、254、280 nm 处其他物质的吸收较强,干扰较
大,324、365 nm 波长处干扰较小,但连翘苷无吸收,而 270 nm
处 4 个待检测物质的吸收峰峰形较好且其他物质的吸收较弱,
干扰较少,结果较为准确。故本试验中选择了 270 nm 作为检测
波长。
3.2 流动相的选择
试验先后选择了乙腈-水、甲醇-水、甲醇-水-冰醋酸流动
相体系,从分离情况、出峰时间以及对色谱柱的消耗程度等综
合分析,最终选择甲醇-水梯度洗脱。
4 结论
试验结果表明,连翘和金钟花虽为同属植物,但金钟花果
实中连翘酯苷的含量远低于连翘果实,而且不含有连翘苷,因
此,将金钟花混作连翘使用是不合适的。
参考文献:
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版社,2005.117-118.
[2] 李晓燕.中药连翘及其几种类似品的鉴别[J].中草药,2000,(6):463-
466.
[3] 李卫健,李先恩.连翘果实干物质与有效成分积累规律研究[J].中草药,
2006,37(6):921-924.
[4] 张 杲,李发荣,段 飞,等.不同采收期连翘叶中连翘苷、连翘酯苷和芦
丁的含量测定[J].天然产物研究与开发,2005,17(6):790-793.
(收稿日期:2007-11-30,编辑:华强)
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