免费文献传递   相关文献

四种溢油分散剂对青岛大扁藻和小新月菱形藻细胞密度和叶绿素含量的影响



全 文 :第 34卷 第 6期 生 态 科 学 34(6): 915
2015 年 11 月 Ecological Science Nov. 2015

收稿日期: 2014-11-26; 修订日期: 2015-01-26
基金项目: 国家海洋局海洋溢油鉴别与损害评估技术重点实验室开放研究基金(201108); 我国典型人工岸段生态化建设技术集成与示范(201005007)
作者简介: 马帅(1989—), 女, 山东德州人, 硕士, 主要从事生态毒理学研究, E-mail: mashuai19890926@126.com
*通信作者: 肖慧, E-mail: xiaoh28@163.com

马帅, 曲良, 李晓红, 等. 四种溢油分散剂对青岛大扁藻和小新月菱形藻细胞密度和叶绿素含量的影响[J]. 生态科学, 2015,
34(6): 915.
MA Shuai, QU Liang, LI Xiaohong, et al. Effects of four dispersants on cell density and chlorophyll contents of Platymonas
helgolandica var. tsingtaoensis and Nitzschia closterium f. minutissima[J]. Ecological Science, 2015, 34(6): 915.

四种溢油分散剂对青岛大扁藻和小新月菱形藻细胞
密度和叶绿素含量的影响
马帅 1,2, 曲良 3, 李晓红 1, 唐学玺 1, 肖慧 1,*
1. 中国海洋大学海洋生命学院, 青岛 266003
2. 北京农业质量标准与检测技术研究中心, 农业部农产品质量安全风险评估实验室(北京), 北京 100097
3. 中海油环保服务(天津)有限公司, 天津 300457

【摘要】 研究了 4 种溢油分散剂对青岛大扁藻(Platymonas helgolandica var. tsingtaoensis)和小新月菱形藻(Nitzschia
closterium f. minutissima)细胞密度和叶绿素含量的影响。实验结果表明: DL、GZ、WP 和 GM 4 种溢油分散剂对青岛
大扁藻生长的 96 h EC50 值分别是 0.0722、0.1852、0.1889 和 0.7198 g·L–1; 对小新月菱形藻的 96 h EC50 值分别是
0.0511、0.2592、0.2939 和 0.5816 g·L–1。对青岛大扁藻的 96 h EC50-chl-a 为 0.0433、0.1325、0.1517 和 0.5121 g·L–1,
96 h EC50-chl-b 为 0.0503、0.1719、0.1212 和 0.3091 g·L–1; 对小新月菱形藻的 96 h EC50-chl-a 为 0.0425、0.1365、
0.1470 和 0.4215 g·L–1。随溢油分散剂浓度的增加, 2 种微藻的细胞密度和叶绿素含量显著下降, 呈现显著的剂量—效
应关系。根据半数抑制浓度值, 4 种溢油分散剂的毒性大小为 DL> GZ>WP> GM。与细胞密度相比, 2 种微藻的叶绿素
含量对 4 种溢油分散剂更敏感, 更适于作为评判溢油分散剂毒性大小的指标。

关键词:溢油分散剂; 青岛大扁藻; 小新月菱形藻; 藻细胞密度; 叶绿素含量
doi:10.14108/j.cnki.1008-8873.2015.06.002 中图分类号:X171.5 文献标识码:A 文章编号:1008-8873(2015)06-009-07
Effects of four dispersants on cell density and chlorophyll contents of Platymonas
helgolandica var. tsingtaoensis and Nitzschia closterium f. minutissima
MA Shuai1,2, QU Liang3, LI Xiaohong1, TANG Xue Xi1, XIAO Hui1,*
1. College of Marine Life Science, Ocean University of China, Qingdao 266003, China
2. Beijing Research Center for Agricultural Standards and Testing, Risk Assessment Lab for Agro-products, Beijing 100097,
China
3. China Offshore Environmental Service (Tianjin) Co., Ltd., Tianjin 300457, China
Abstract: Effects of four dispersants on cell density and chlorophyll contents of Platymonas helgolandica var. tsingtaoensis
and Nitzschia closterium f. minutissima were studied under laboratory conditions. The results showed that the 96 h EC50
values of four dispersants (DL, GZ, WP and GM) to cell density of P. helgolandica var. tsingtaoensis and N. closterium f.
minutissima were 0.0722, 0.1852, 0.1889 and 0.7198 g·L–1 and 0.0511, 0.2592, 0.2939 and 0.5816 g·L–1, respectively. In
addition, the 96 h EC50-chl values of the four dispersants to chlorophyll-a and chlorophyll-b contents of P. helgolandica var.
tsingtaoensis were 0.0433, 0.1325, 0.1517 and 0.5121 g·L–1 and 0.0503, 0.1719, 0.1212 and 0.3091 g·L–1, respectively. Meanwhile
10 生 态 科 学 34 卷

the respective 96 h EC50-chl values to chlorophyll-a content of N. closterium f. minutissima were 0.0425, 0.1365, 0.1470 and
0.4215 g·L–1. According to our data, the cell density and chlorophyll contents of the 2 marine microalgal species decreased
obviously with increasing concentrations of dispersants, indicating a significant dose-effect relationship. According to these
values of 96 h EC50 and 96 h EC50-chl, DL showed the highest toxicity followed by GZ, WP and GM. Considering
the chlorophyll contents were more sensitive to four dispersants than the cell density, the 96 h EC50-chl value was more
suitable to be an evaluating index for the toxicity of dispersants to marine microalgae.
Key words: dispersants; Platymonas helgolandica var. tsingtaoensis; Nitzschia closterium f. minutissima; cell density;
chlorophyll contents
1 前言
目前, 溢油污染已经成为发生频率最高、分布
面积最广、危害程度最大的一类海洋污染, 威胁着
全球海洋生态环境。溢油事故应急处置手段包括机
械回收、分散剂处置、原位燃烧以及生物降解等[1]。
其中, 溢油分散剂由于能够较快地使溢油污染
物乳化分散, 在诸多溢油污染事故中得到了广泛地
应用, 2011年墨西哥湾石油泄漏, 约210万加仑溢油
分散剂用于海面溢油处理[2–3]。溢油分散剂的使用主
要是依据其主要成分表面活性剂的作用[4]。在溢油
处置过程中, 表面活性剂通过显著降低油水界面张
力, 使污染物形成水包油结构, 促进了溢油乳化分
解, 也加快了水体中微生物对溢油污染物的降解速
率[5]。溢油分散剂的有效成分是表面活性剂和溶剂,
其大量使用势必会对海洋生物的生长产生毒性效
应。海洋微藻是海洋生态系统的主要初级生产者,
它不仅驱动整个海洋生态系统的能流和物流, 而且
对调节全球变化起着重要作用[6]。叶绿素是海洋微
藻光合作用的基础, 是描述海洋微藻将无机物质转
变为有机物质能力的一个重要指标[7]。溢油分散剂
及其他污染物对海洋微藻的影响, 可以通过细胞密
度、代谢活动和光合作用来表现[8–9]。目前国内外学
者有不少关于溢油分散剂毒性效应的研究, 包括溢
油分散剂对海洋桡足类、蓝蟹、鱼类及微藻等[10–12]。
Fabregas研究表明, 低浓度溢油分散剂 SEAKLIN-
101-NT(8 mg·L–1)对四肩突四鞭藻(Tetraselmis suecica)
的生长和叶绿素含量有促进作用, 高浓度(200 mg·L–1)
抑制微藻的生长和叶绿素含量。随溢油分散剂浓度
升高, 微藻叶绿素含量显著降低, 呈现剂量效应关
系[13]。王向艺研究表明, 根据96h半数抑制浓度, 三
种微藻对GM-2型溢油分散剂的敏感性为叉鞭金藻
(Dicrateria inornata)>青岛大扁藻>小球藻(Chlorella
vulgaris), 对三种微藻均为高毒性[14]。徐会等研究表
明, 溢油分散剂对中肋骨条藻(Skeletonema costatum)
的生长有抑制作用, 随溢油分散剂浓度的增大抑制
作用增强, 溢油分散剂RSA-11 和ZHY-2的毒性较
低, 而溢油分散剂RSS-6毒性较强[15]。Amber 等研究
表明, 加入溢油分散剂 24 h 后, 角毛藻(Chaetoceros
gracilis)和球等鞭金藻(Isochrysis galbana)的细胞分
裂和运动性受到抑制, 角毛藻的敏感性比球等鞭金
藻高, 海洋微藻的敏感性差异对溢油分散剂的使用
非常重要[16]。
鉴于此, 本文选择青岛大扁藻和小新月菱形藻
为试验生物, 研究4种溢油分散剂对2种微藻细胞密
度及叶绿素的影响, 根据 96 h EC50 值, 比较2种微
藻对4种溢油分散剂的敏感差异、细胞密度和叶绿素
的敏感性差异及4种溢油分散剂毒性大小, 为有关
部门选择溢油分散剂处理海上溢油事故提供参考和
依据。
2 材料与方法
2.1 实验材料
藻种 : 实验所用的青岛大扁藻 (Platymonas
helgolandica var.tsingtaoensis Ehq )和小新月菱形藻
(Nitzschia closterium f. minutissima Ehr)取自中国海
洋大学海洋生命学院生态毒理学实验室。
海水 : 实验所用海水取自青岛鲁迅公园 , 经
0.45 μm 滤膜过滤, 121 ℃灭菌, 冷却后配制培养液。
溢油分散剂: 实验所用4种溢油分散剂(DL、
GZ、WP、GM)由中海石油环保服务(天津)有限公司
提供。
2.2 藻种培养
培养液采用 f/2 营养盐配方[17–18], 在指数生长
期接种。接种密度为 2105 ·mL–1, 培养温度(19±1) ,℃
光照强度24 µmol·(m2·s)–1, 光暗周期12 h 12 h∶ 。用
于微藻培养的三角瓶预先用 1 mol·L–1的盐酸浸泡
24 h, 121 ℃灭菌后待用。每组实验设6个浓度梯度3
6 期 马帅, 等. 四种溢油分散剂对青岛大扁藻和小新月菱形藻细胞密度和叶绿素含量的影响 11

个平行样, 实验周期为 96 h, 每24 h用血球计数板
计数, 每天定时摇动三角瓶 2 次。
2.3 实验方法
2.3.1 细胞密度测定
采用血球计数板法进行计数, 根据藻类生长抑
制试验和OECD化学品试验准则中的方法计算生长
速率和阻碍率和半抑制浓度[19–20]。以浓度自然对数
为因变量(Y), 以抑制率的概率值为自变量(X), 对生
长抑制率(I%)和浓度自然对数(lnC)进行线性拟合,
得到曲线: Y=aX+b, 求得 EC50 值。
微藻的生长率: μi-j =lnXj – lnXi/tj –ti
μi-j是从i天到j天平均不同藻类的平均生长率; Xi
是在藻类在第i天的生物量; Xj 是在藻类在第j天的生
物量。
微藻的生长抑制率: I%=(µC –µT)/µC×100%
I%: 平均百分抑制率; µC: 对照组平均生长率
的平均值 µT: 实验组平均生长率的平均值。
2.3.2 叶绿素测定
依据海洋监测规范(GB17378.7—2007)[21]中叶
绿素a的分光光度测定法。抽滤培养 96 h的藻液将
滤膜放入10 mL离心管中, 加入10 mL 90%丙酮
在4 ℃冰箱中提取14—24 h; 样品离心10 min; 取
上清液, 测定在750 nm、664 nm、647 nm和630 nm
下吸光值。
2.4 统计分析
采用sigmaplot12进行作图, 采用SPSS19.0软件
进行试验数据的统计分析, 采用ANOVA方法分析
处理组与空白对照组之间的差异, p<0.05 表示差异
显著。
3 实验结果和分析
3.1 4 种溢油分散剂对 2 种海洋微藻细胞密度的
抑制
4 种溢油分散剂对青岛大扁藻的抑制作用见图
1, 试验结果表明: 微藻细胞的抑制率随溢油分散剂浓
度的升高而增大, 最高浓度的 4 种溢油分散剂(DL、
GZ、WP、GM)对青岛大扁藻细胞密度的抑制率分别
为 95.2%、102.8%、89.2%和 93.1%。低浓度处理

图 1 溢油分散剂对青岛大扁藻细胞密度影响
Fig. 1 Effects of dispersants on cell density of P. helgolandica var. tsingtaoensis
注: A、B、C、D 分别代表溢油分散剂 DL、GZ、WP、GM。
12 生 态 科 学 34 卷

组(DL—0.015、GZ—0.0425 g·L–1)对青岛大扁藻细胞
密度的抑制作用不显著性(p>0.05), 其他处理组的
抑制作用显著(p<0.05)。由图2可知, 24 h时处理组
(GZ、WP、GM)对小新月菱形藻细胞密度没有显著
抑制(p>0.05), 随处理时间延长, 处理组的抑制作用
显著(p <0.05)。最高浓度的4种溢油分散剂(DL、GZ、
WP、GM)对小新月菱形藻细胞密度的抑制率分别为
78.1%、78.2%、71.6% 和 68.7%。2种微藻细胞密度
与溢油分散剂浓度呈现出明显的剂量—效应关系,
抑制率与溢油分散剂浓度正相关。
4种溢油分散剂对 2种微藻的 96 h 半效应浓度
见表 1 和 2, 溢油分散剂(DL、GZ、WP、GM)对青
岛大扁藻和小新月菱形藻的 96 h EC50 值分别为
0.0722、0.1852、0.1889、0.7198 g·L–1 和 0.0511、
0.2592、0.2939、0.5816 g·L–1。根据 96 h EC50 值大
小可知, 青岛大扁藻对 GZ 和 WP 溢油分散剂更敏
感, 小新月菱形藻对 DL 和 GM 溢油分散剂的敏感
性更强。

图 2 溢油分散剂对青岛大扁藻细胞密度影响
Fig. 2 Effects of dispersants on cell density of N. closterium f. minutissima
注: A、B、C、D 分别代表溢油分散剂 DL、GZ、WP、GM。

表 1 4 种溢油分散剂对青岛大扁藻细胞密度和叶绿素的
96 h 半效应浓度 (g·L–1)
Tab. 1 The 96 h EC50 and EC50-chl values of four dispersants
for P. helgolandica var. tsingtaoensis
溢油分散剂 96 h EC50 96 h EC50-chl-a 96 h EC50-chl-b
DL 0.0722 0.0433 0.0503
GZ 0.1852 0.1325 0.1719
WP 0.1889 0.1517 0.1212
GM 0.7198 0.5121 0.3091
表 2 4 种溢油分散剂对小新月菱形藻细胞密度和叶绿素的
96 h 半效应浓度 (g·L–1)
Tab. 2 The 96 h EC50 and EC50-chl values of four
dispersants for N. closterium f. minutissima
溢油分散剂 96 h EC50 96 h EC50-chl-a
DL 0.0511 0.0425
GZ 0.2592 0.1303
WP 0.2939 0.1470
GM 0.5816 0.4215
6 期 马帅, 等. 四种溢油分散剂对青岛大扁藻和小新月菱形藻细胞密度和叶绿素含量的影响 13

3.2 4 种溢油分散剂对 2 种海洋微藻叶绿素的影响
4种溢油分散剂处理对2种海洋微藻叶绿素含量
的影响(见图3和4), 随溢油分散剂浓度增大叶绿素
含量逐渐下降, 呈现显著的剂量—效应关系。最高
浓度溢油分散剂(DL、GZ、WP、 GM)对青岛大扁
藻和小新月菱形藻叶绿素a的抑制率分别为 84.4%、
82.9%、88.1%、82.7%和78.5%、83.1%、87.9%、77.3%,
溢油分散剂对叶绿素的抑制作用随浓度的增加而
增大。
4种溢油分散剂对2种微藻叶绿素的 96 h半效
应浓度见表1和2。由叶绿素a相对含量的变化可知, 4
种溢油分散剂(DL、GZ、WP、GM)对青岛大扁藻和
小新月菱形藻叶绿素a的 96 h EC50-chl-a 分别为
0.0433、0.1325、0.1517、0.5121 g·L–1 和 0.0425、
0.1303、0.1470、0.4215 g·L–1; 由叶绿素b相对含量
的变化可知, 4种溢油分散剂(DL、GZ、WP、 GM)
对青岛大扁藻 96 h EC50-chl-b 值分别为 0.0503、
0.1719、0.1212 和 0.3091 g·L–1。比较2种微藻叶绿
素 96 h EC50 值大小, 我们发现小新月菱形藻叶绿
素a含量的敏感性高于青岛大扁藻叶绿素a, 青岛大
扁藻叶绿素b对WP和GM溢油分散剂的敏感性高于
小新月菱形藻叶绿素a。
4 讨论
4.1 2 种微藻对溢油分散剂敏感性的差异
溢油分散剂对海洋微藻细胞密度有抑制作用,
不同微藻对溢油分散剂的敏感性有差异。双象1号等
六种溢油分散剂对包括海洋微藻在内的四种海洋生
物都有一定的毒性, 但由于受试生物的种间差异,
对溢油分散剂毒性的抗性强弱各不相同[1]; Fabregas
和Amber研究表明, 溢油分散剂对海洋微藻细胞
密度抑制作用随浓度升高而增强, 加入溢油分散
剂24 h后, 角毛藻和球等鞭金藻的细胞分裂和运动
性受到抑制, 角毛藻的敏感性比球等鞭金藻高[13,16];
王向艺的研究表明小球藻对溢油分散剂毒性的耐受
性最好, 叉鞭金藻对溢油分散剂的毒性耐受性最
差[14]。本文研究发现, 4种溢油分散剂对青岛大扁藻
和小新月菱形藻的抑制作用随浓度增加而增大, 青

图 3 溢油分散剂对青岛大扁藻叶绿素的影响
Fig. 3 Effects of dispersants on chlorophyll contents of P. helgolandica var. tsingtaoensis
注: A、B、C、D 分别代表溢油分散剂 DL、GZ、WP、GM。
14 生 态 科 学 34 卷


图 4 溢油分散剂对小新月菱形藻叶绿素 a 的影响
Fig. 4 Effects of dispersants on chlorophyll-a contents of N. closterium f. minutissima
注: A、B、C、D 分别代表溢油分散剂 DL、GZ、WP、GM。
岛大扁藻对GZ和WP溢油分散剂的敏感性高于小
新月菱形藻, 对溢油分散剂DL和GM的敏感性低于
小新月菱形藻。高浓度溢油分散剂使得培养液更
浑浊, 光照强度减弱以及溢油分散剂本身的毒性
对微藻的生长都有抑制作用[22], 不同微藻的生态
结构不同, 毒性作用的部位和机理的不同会导致
敏感性的差异性。
研究表明, 不同海洋微藻叶绿素的敏感性存在
差异。研究表明, 溢油分散剂SEAKLIN- 101-NT对
海洋微藻叶绿素有抑制作用, 抑制率随浓度增大而
增强 [13]; 研究表明 , 经4种溢油分散剂(CytoSol、
FINASOL®OSR 51、Agma OSD 569、OD4000)处理,
三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)叶绿素的敏
感性高于角毛藻和球等鞭金藻, Agma OSD 569的毒
性最小[23]。唐学玺等[24]学者在研究有机磷农药对海
洋微藻的毒性过程和机制中表明, 叉鞭金藻和三角
褐指藻的光合色素对久效磷胁迫的敏感性大不相同;
周文礼等学者在三种抗生素对几种海洋微藻叶绿素
a影响的研究中表明, 在不同抗生素胁迫下小新月菱
形藻、小球藻和金藻的叶绿素a的敏感性不同[25]; 高
尚德等学者在研究有机锡对海洋微藻的生理效应中
指出, 海洋微藻的光合色素对三苯基锡和三丁基锡
胁迫的敏感性存在较大的差异[26]。本文研究表明, 4
种溢油分散剂对2种海洋微藻叶绿素有抑制作用,
小新月菱形藻叶绿素的敏感性高于青岛大扁藻叶绿
素。
2种海洋微藻 96 h EC50 均大于 96 h EC50-chl 值,
表明海洋微藻叶绿素对溢油分散剂毒性反应更快速
更敏感。因此, 受溢油分散剂污染后微藻绿素含量
变化更快速敏感, 更适于评判溢油分散剂使用对微
藻的毒性。
4.2 4 种溢油分散剂毒性大小的差异
根据 96 h EC50 及 96 h EC50-chl-a 值, 4种溢油分
散剂毒性大小均为DL> GZ>WP>GM, 这4种溢油分
散剂毒性差异较大, 其中DL与GM溢油分散剂毒性
相差10倍以上, 由于4种不同溢油分散剂有效成分、
溶剂成分及化学结构的差异, 导致4种溢油分散剂
对2种海洋微藻毒性差异较大。按其毒性(96 h LC50)
6 期 马帅, 等. 四种溢油分散剂对青岛大扁藻和小新月菱形藻细胞密度和叶绿素含量的影响 15

大致可分三种:(1)1—l00 mg·L–1为高毒性; (2)100—
1000 mg·L–1为一般毒性; (3)1000—10000 mg·L–1为
微毒性。根据我们的研究结果, DL溢油分散剂为高
毒性, GZ、WP 和GM溢油分散剂为一般毒性。在处
理海上溢油污染时, 有关部门应慎重选择毒性较小
的溢油分散剂, 减少对海洋微藻的二次污染。
5 结论
(1) 根据2种海洋微藻细胞密度的 96 h EC50 及
叶绿 a 96 h EC50-chl-a 值, 4种溢油分散剂的毒性大小
为 DL> GZ>WP> GM。
(2) 2种微藻对溢油分散剂的敏感性存在差异。
以微藻细胞密度 96 h EC50 值为指标, 青岛大扁藻
对 GZ、WP 溢油分散剂更敏感; 以微藻叶绿素 96 h
EC50-chl-a 值为指标, 小新月菱形藻叶绿素 a 对4种溢
油分散剂更敏感。
(3) 比较 2种海洋微藻 96 h EC50-chl值及 96 h
EC50, 可知微藻叶绿素变化对溢油分散剂的敏感
性更强, 更适用于评判溢油分散剂的污染及其毒
性大小。
参考文献
[1] 杨波, 关敏, 徐汉光, 等. 几种常用消油剂对海洋生物的
毒性影响[J]. 海洋环境科学, 1991, 10(4): 14–20.
[2] KUJAWINSKI E B, KIDO SOULE M C, VALENTINE D
L, et al. Fate of dispersants associated with the Deepwater
Horizon oil spill [J]. Environmental Science &Technology
2011, 4: 1298–1306.
[3] SAMMARCO P W, KOLIAN S R, BOULDIN J L, et al.
Distribution and concentrations of petroleum hydrocarbons
associated with the BP/Deepwater Horizon Oil Spill, Gulf
of Mexico [J]. Marine Pollution Bulletin, 2013, 73(1):
129–143.
[4] 刘爱娟, 夏文香. 表面活性剂在生物修复海洋油污染中
的应用及发展[J]. 海洋湖沼通报, 2007, (3): 57–62.
[5] 曲良. 海上消油剂及其在溢油污染处置中的应用[J]. 海
洋信息, 2012, (2): 45–47.
[6] 王云慧, 肖慧, 唐学玺. 多环芳烃对3种赤潮微藻类胡萝
卜素含量的影响及其对 UV-B 辐射的响应[J]. 中国海洋
大学学报(自然科学版), 2007, 37(4): 631–635.
[7] REGELSBERGER G , JAKOPITSCH C, PLASSER L, et
al. Occurrence and biochemistry of hydroperoxidases in
oxygenic phototrophic prokaryotes [J]. Plant Physiol
Biochemistry, 2002, 40: 479–490.
[8] KUSK K O. Effects of crude oil and aromatic hydrocarbons
on the photosynthesis of the Diatom Nitzschia palea [J].
Physiologia Plantarum, 2006, (43): 1–6.
[9] SOTO C, HELLEBUST A J, HUTCHINSON T C. Effect of
naphthalene and aqueous crude oil extracts on the green
flagellate Chlamydomonas angulosa. . Growth [J]. Ⅰ
Canadian Journal of Botany, 2011, 53 (2): 109–117.
[10] COHEN J H, MCCORMICK L R, BURKHARDT S M.
Effects of dispersant and oil on survival and swimming
activity in a marine copepod [J]. Bulletin of Environmental
Contamination and Toxicology, 2014, 92: 381–387.
[11] ANDERSON LIVELY J A, MCKENZIE J. Toxicity of the
Dispersant Corexit 9500 to Early Life Stages of Blue Crab,
Callinectes sapidus [J]. Bulletin of Environmental
Contamination and Toxicology, 2014, 93 (6): 649–653.
[12] RAMACHANDRAN S D, HODSON P V, KHAN C W. Oil
dispersant increases PAH uptake by fish exposed to crude
oil [J]. Ecotoxicology and Environmental Safety, 2004, 59:
300–308.
[13] FABREGAS J, HERRERO C, VEIGA M. Effect of oil and
dispersant on growth and chlorophyll a content of the
marine microalga Tetraselmis suecica [J]. Applied and
Environmental Microbiology, 1984, 47(2): 445–447.
[14] 王向艺. 原油和消油剂对三种藻的急性毒性效应[D]. 大
连: 大连海事大学. 2012, 21–38.
[15] 徐会, 宋丹丹, 周爱华, 等. 溢油分散剂及其乳化原油对
海洋微藻的急性毒性效应评价[J]. 海洋环境科学, 2013,
32(1): 89–91.
[16] GARR A L, LARAMORE S, KREBS W. Toxic Effects of
Oil and Dispersant on Marine Microalgae [J]. Bulletin of
Environmental Contamination and Toxicology, 2014, 93:
654–659.
[17] 华汝成. 单细胞藻类的培养与利用[M]. 北京: 农业出版
社, 1986: 315–322.
[18] 谢荣, 唐学玺, 李永祺, 等. 丙溴磷对二种海洋微藻的
GPx 活性及 GSH、 CAR 含量的影响[J]. 青岛海洋大学
学报(自然科学版), 2000, 30(4): 645–650.
[19] OECD. OECD Guidelines for Testing of Chemicals, Section
2, Effects on Biotic Systems: Alga Growth Inhibition Test [S].
1984: 3–6.
[20] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局, 中国国家
标准化管理委员会. 化学品 藻类生长抑制试验 GB/T
21805—2008 [S]. 2008: 13–15.
[21] 国家技术监督局. 海洋监测规范 GB1737. 7—2007 [S].
2007: 3–11.
[22] 杨庆霄, 高光智, 粟俊, 等. 化学消油剂对孔石莼生长影
响的研究[J]. 海洋学报, 1997, 19(3): 45–49.
[23] RIAL D, MURADO M A, MENDUIÑA A, et al. Effects of
spill-treating agents on growth kinetics of marine
microalgae [J]. Journal of Hazardous Materials, 2013, 263
(7)374–381.
[24] 唐学玺, 李永祺, 林岿. 有机磷农药对海洋微藻致毒性
的生物学研究—Ⅶ久效磷对叉鞭金藻和三角褐指藻光合
色素的影响[J]. 海洋通报, 1997, 16(5): 31–35.
[25] 周文礼, 乔秀亭, 肖慧, 等. 三种抗生素对几种海洋微藻
叶绿 a 含量影响的初步研究[J]. 海洋环境科学, 2009,
28(3): 268–271.
[26] 高尚德, 吴以平, 赵心玉. 有机锡对海洋微藻的生理效
应 . Ⅰ 三苯基锡和三丁基锡对光合色素含量的影响[J].
海洋与湖沼, 1994, 25(3): 259–265.