全 文 ：泛刻乞上丝经P ,刃A s ( B e `j’ n “ · 1 2 ( z ) : 4 1 9 9 0
山荆子染色体中期 G
梁 国
带带型的初步研究
鲁
(西南农业大学园艺系 , 重庆 )
本文报道了胰酶法对山荆子中期染色体的 G 带诱导 。 经过技术上的一些改良 , 在大部分染色体上
的 G 带带纹较为明显 。 进行染色体处理时 , 获得某一时期的大量分裂相是诱导 G 带的关键措施之一 。 针
对植物染色体的高度浓缩性 ,采用先高温处理后再进行胰酶消化 ,可提高 G 带显示的成功率 。
关键词 : 中期染色体 , G 带 ,山荆子
材 料 与 方 法
供试材料山荆子 ( M a l , , b a c c a , a ) 来自本
校果树研究室种质资源圃 。 于春季 , 移出盆栽
幼苗 , 取其旺盛生长的新根 ,洗去泥沙 , 立即置
于饱和的 a 一澳蔡溶液中 , 25 ℃ 下处理 4 小时 ,
切取根尖分生组织区于新鲜配制的甲醇和冰醋
酸 ( 3 : l) 固定液中 4一 6℃ 下固定 24 小时左
右 。 经处理后的试材 , 按陈瑞阳等人的去壁低
渗法制片切 。 制好的片子经 95 一 1 0 ℃ 的烘箱
中高温处理 扔 分钟后 ,用 0 . 0 1多的胰酶 ( iD f。 。
2 50 : l
, .0 02 沁 E D T A 溶液配制 ) 4一 6℃ 下处
理 1 . 。一 1 . 5 分钟 , 经 0 . 85 多 N a CI 溶液彻底清
洗 ,热风烘干后 , 随即以 20 : 1 p H 7 . 2磷酸缓冲
液稀释的 iG e m s a 染液染色 30 分钟 , 最后染色
体镜检照相 。
结 果 与 讨 论
在同一处理未经 G 带诱导下 , 山荆子中期
染色体形态如图版 I , l 。 它由 1 对中部着丝点
染色体和 6 对近中部着丝点染色体组成 。 在第
7 染色体短臂上有一对随体 。 其核型公 式 为
Zn 一 3 4 ~ 2 2 m + 12 s m ( Z s A T ) , 染色体平均
长度 3 . 8夕微米 , 属小染色体范围 , 各染色体间
无明显的形态识别特征 。 采用胰酶法对其中期
染色体 G 带诱导的结果如图版 I , 2所示 。 第一
染色体上具有 ,一 6条带 ,且长臂上带纹的位置
也有差异 。 第 2一 12 染色体上多 数具 有 z一 4
条带 , 而第 13 一 17 染色体则较难辨认 出带 纹
来 。 所显带纹与有关苹果 c 带相比是截然不同
的 。 苹果 c 带仅在大多数染色体 上 出 现 末端
带 `1] 。 除第一染色体具有带纹差异外 , 其余各
同源染色体成员之间基本一致 。
比较成功的 G 带带型均以早中期至晚前期
的染色体为佳 , 而在中期染色体上显示 G 带则
较为困难 〔3南 7] 。 鉴于人们对显带机制所知不多 ,
且大多又来自动物及人类染色体资料 的推 测 ,
因此 ,要想完全否认 G r e il h u be : 关于植物不能
显示 G 带的观点 ’ ” , 是不现实的。 到 目前为止 ,
获得较理想的 G 带类型仅涉及少数植物 , 而对
广泛的小。染色体植物 , 特别是那些木本的小染
色体植物的研究 , 确极为贫乏 。 最近的研究显
示 G 带可能是螺旋结构的表现形态之一 4[J 。 显
然 , 对于染色体上固有的这种带纹结构 ,就会随
着染色体的不断螺旋化而相互融合而紧密地集
聚在一起 。 从而在一定程度上阻碍了中期染色
体上的 G 带诱导 。 而要实现植物染色体 G 带的
目标 , 则必须在技术上得以突破 。
(下转第 16 页 )
乙 i a , g ` u o l “ : A p r e l i m i n a r y s t u d萝 o n G 一 b “ n d i n g
P a t t e r n s a t M
e t a P h a s o C h r o m o s o m o s i n 衬 a l“ `
b a c e a ` a
本文于 1 , 8 8年 1 月 8 日收到 。
DOI : 10. 16288 /j . yczz. 1990. 02. 002
反映性状的真实分布 , 所提出的估计方法是否
有效 。 经过计算并与应用 C o slt e 一 w r i g ht 公式
的结果对比 , 两种方法的结果都列在表 1中 。
由表 1 可以看出 , 应用新的估计方法求出结果
的损失函数均低于 C a slt e 一w ir ght 公式的估计
结果 。 说明新方法得出的估计更接近实 际 情
况 ,同时也看出新方法包含了 C as d e 一w r i g ht 公
式 。 因此 , 运用新方法得理出的估计值去预测和
指导育种工作将取得更好的效果 。
数据估计控制性状基因对数的方法 。 经过对一
系列实际例题的计算表明 , 新 的 估 计 方法 比
e a s t l e 一 w r sg h t 公式更加优秀 。它将有益于提高
育种工作的预见性 。
参 考 文 献
[ l ]
结 束 r 语
本文基于数量性状的数学模型 , 推导出数
量性状 F : 代群体分布密度函数 。 由于模型中
既包含了基因的加性作用 , 也考虑到显性偏差
和上位性偏差 , 因而理论分布函数能够比较全
面地反映性状的真卖分布 。 根据所得到的概率
密度函数 ,建立了利用认 , P: , · F : 及后2代群体的
{: }
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(上接第 4 页 )
从本文的 G 带诱导可初步体会到 : 1 . 获得
某一时期丰富的染色体分裂相 , 是 G 带诱导成
功的关键措施之一 。 而如何提高细胞的分裂指
数 , 则又是实现这一 目标的重要前提 。 针对目
前的现状 , 本文主要采取促进根系旺盛生长的
措施 , 包括温度 、湿度和光照的控制以及提供旺
盛生长所需的营养物质。 通过这样的精心 培
养 , 就可明显提高山荆子的细胞分裂指数 。 2 . 采
用去壁低渗法制片时 2[J , 适度延长酶解去壁 时
间 , 有利于染色体的分散 ,减少交叉重叠 。 具体
应以染色体标本上全无细胞壁存在为佳。 3 . 对
去壁低渗所制的染色体标本 , 立即进行一定时
间的高温处理 ,可起到 G 带的前诱导作用 ,从而
可提高 G 带的成功率 。 此法源于人类和动物染
色体的 G 带技术措施 , 而在植物中确少有利用 。
张 自立等!31 在制片时让火焰使固定液 燃起 火 ,
直到熄灭 。 无疑也是一种快速简便的高温处理
法。 作者对山荆子采用高温干燥 ( 95 一 10 ℃ )
30 分钟与涂片后让固定液在载片上 燃 烧 的反
应具有类似的效果 。但固定液燃烧不易控制 。此
外 , 在进行高温处理时 ,如果处理过了头 ,染色
体对 iG e m s a 的结合力就会明显变弱 , 呈现一
种淡淡的桃红色 ,而不是正常状态下的紫红色 ,
同时染色体本身也变得十分“ 单薄 ” 。 显然 ,经高
温处理后 , 引起了染色质成分的丢失 。尽管我们
还不具体了解高温所起的作用 ,但这一现象 , 对
于染色体浓缩度较高的植物或是处于正中期的
染色体 G 带诱导来说 ,是有一定价值的 。
参 考 文 献
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[ 7 ]
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· 山荆子染 色体中期核型 , 2n ~ 3呼 ~ 犯 m 十 I北 m (招 A T ) ;
乙山荆子染色体中期 G 带带 型 。