全 文 ：第 3 6卷第 2期 江　苏　林　业　科　技 Vol.3 6No.2
2 0 0 9年 4 月 JournalofJiangsuForestryScience＆Technology Apr.2 0 0 9
文章编号:1001-7380(2009)02-0041-03
红花檵木组织培养离体快速繁殖试验
章志红 ,吴向明
(江苏省常州建设高等职业技术学校,江苏　常州　 213016)
　　收稿日期:2008-11-14;修回日期:2008-12-18
　　作者简介:章志红(1973-),女 ,江西鄱阳人 ,副教授 ,硕士 ,主要从事园林教学与研究。
摘要:红花檵木为金缕梅科檵木属常绿灌木或小乔木 , 是白檵木的变种 , 其花红 、叶红 , 色彩绚丽 ,是珍贵的盆景材
料 , 但由于其资源稀少 ,故对红花檵木进行组织培养试验 ,以加快快速繁殖。该文探讨了以茎段作为外植体的最适
培养部位 , 较为适合的消毒方式及诱导愈伤组织 、芽分化的培养基。
关键词:红花檵木;离体繁殖
中图分类号:S68;Q942.6　　文献标识码:A
　　红花檵木(Loropetalumchinensevarrubrum)为金
缕梅科檵木属常绿灌木或小乔木 ,是白檵木 (L.
chinense)的变种 。全世界檵木属有 4个品种和 1个
变种 ,其中白檵木 、大果檵木 、大花檵木 3个品种和
红花檵木变种产于我国 ,零星分布于湖南省浏阳 、平
江 、醴江和江西萍乡等地 ,其花红 、叶红 ,色彩绚丽 ,
常年有花 ,耐修剪蟠扎 ,是珍贵的盆景材料 ,又因其
观赏价值高 ,近年来也被园林绿化工程上广泛使用 。
国内已对其进行了初步研究 ,如侯伯鑫等对红
花檵木品种资源进行了研究 [ 1] ;李晨东等对不同来
源红花檵木材料的 RAPD分析及分类学进行了探
讨 [ 2] ;李党训 [ 3] 、张琴 [ 4]等对嫩枝扦插 ,张旺凡对花
期调控 [ 5] ,姚净对红花檵木盆景的培育与养护 [ 6]进
行过报道 ,但对红花檵木愈伤组织进行诱导离体快
速繁殖的报道较少。
由于原生资源较少 ,坐果率低 ,春季只有少数成
果 ,约 1.78%,其他季节都是只开花一般不结果 ,且种
子的发芽率低 ,遗传性不稳定 ,故生产上一般用扦插繁
殖。由于红花檵木是木本 ,比草本难以扦插生根 ,扦插
对时间 、环境和土壤处理要求较多 [ 3] ,繁殖速度慢 ,往
往不能满足生产上对数量日益增多的需求。为了加快
红花檵木的繁殖 ,也为更好保存种质资源 ,故进行了红
花檵木的组织培养快速繁殖试验。
1　材料与方法
1.1　材料来源
红花檵木外植体取自江苏省常州建设高等职业
技术学校苗圃生长健壮 ,无病虫害的植株 。取当年
生半木质化枝条 ,时间为 2008年 4月中旬 。
1.2　试验方法
1.2.1　不同外植体来源(不同节茎段部位)的愈伤
组织诱导试验　取母株上半木质化的新枝 ,保留从
顶往下的 1 ～ 5节 ,将枝条剪成带节的小段(每段带
1个节),用少许洗衣粉溶液浸泡 30 min,经自来水
冲洗 5 min, 75%乙醇消毒 30 s,无菌水漂洗 2 min
后 ,再用 0.1%升汞液消毒 8 min,无菌水漂洗 3次
后用无菌滤纸吸干表面水分置于 MS+蔗糖 30 g/L
+琼脂 7.5 g/L, pH调至 5.8培养基质中培养 ,以选
择愈伤组织诱导性最好的部位供后续试验用 。
1.2.2　最佳消毒方法获取试验　取从结果中选出
的外植体部位进行消毒 ,消毒方法:用少许洗衣粉溶
液浸泡 30 min,自来水冲洗 5 min, 75%乙醇消毒 30
s,无菌水漂洗 2 min后 ,采用 0.1%和 0.2%的升汞
液分别进行 6, 8, 10min的消毒处理 ,以选取最佳的
消毒方法 。经无菌水漂洗后用无菌滤纸吸干表面水
分 ,后接种于 MS+蔗糖 30 g/L+琼脂 7.5 g/L、pH
调至 5.8的基质中培养 ,以选择出最佳的消毒方法
供后续试验用 。
1.2.3　最佳愈伤组织诱导培养基的选择　对第 3、
4节位的外植体进行消毒后接种于:基本培养基为
MS,加蔗糖 30g/L,琼脂 7.5g/L, pH调至 5.8,未加
任何激素的为空白对照 ,诱导分化培养基以添加不
同质量浓度的激素作为处理 ,共设 15组 ,依次为:
(1)0.2 mg/LBA+0.1 mg/LNAA;(2)0.2 mg/L
BA+0.2 mg/LNAA;(3)0.2 mg/LBA+0.3 mg/L
NAA;(4)0.5 mg/LBA+0.1 mg/LNAA;(5)0.5
mg/LBA+0.2 mg/LNAA;(6)0.2 mg/LBA+0.3
mg/LNAA;(7)1.0mg/LBA+0.1mg/LNAA;(8)
1.0mg/LBA+0.2 mg/LNAA;(9)1.0 mg/LBA+
0.3 mg/LNAA;(10)2.0 mg/LBA+0.1 mg/L
NAA;(11)2.0 mg/LLBA+0.2 mg/LNAA;(12)
2.0mg/LBA+0.3mg/LNAA;(13)3.0mg/LBA+
0.1 mg/LNAA;(14)3.0 mg/LBA+0.2 mg/L
NAA;(15)3.0 mg/LBA+0.3 mg/LNAA。
1.2.4　最佳诱导不定芽培养基的选择　对上述试
验进行继续观察 ,选择最佳诱导不定芽的培养基。
1.3　培养条件
接种后培养温度为 (25±1)℃, 光照度 2 000
lx,光照时间 12 h/d。
2　生长与分化情况
2.1　不同节茎段部位的外植体对愈伤组织诱导的
影响
　　以不同节位的外植体进行接种 ,后置于上述空
白培养基上进行培养 , 以诱导愈伤组织 , 结果
如表 1。
表 1　不同节段部位的外植体对愈伤组织诱导的影响
节位 愈伤组织平均出现时间 /d 愈伤组织状态
第 1节 30 淡黄色 ,疏松
第 2节 26 淡黄色 ,疏松
第 3节 20 淡黄色 ,致密
第 4节 22 淡黄色 , 致密
第 5节 28 淡黄色 ,疏松
从表 1可看出 ,不同节段位的外植体对愈伤组
织诱导产生的影响不同 ,其中以第 3, 4节位的外植
体形成愈伤组织的时间最早 ,并且质量最好。
2.2　不同消毒方法对外植体的影响
取第 3, 4节位的外植体进行不同消毒方法的试
验 ,接种于上述空白的培养基中培养 ,结果如表 2。
从表 2可以看出 ,对红花檵木半木质化茎段进
行消毒 ,以最后采用 0.2% HgCl2处理 10 min效果
最好。
2.3　不同培养基对愈伤组织诱导的影响
先进行消毒 ,然后接种于不同培养基上培养 , 14
d后观察诱导情况 ,结果如表 3。
表 2　不同消毒方法对外植体的影响
升汞质量
分数 /%
时间
/min
接种数
/块
污染数
/块
污染率
/%
0.1 6 30 28 93.3
0.1 8 30 20 66.7
0.1 10 30 16 53.3
0.2 6 30 8 26.7
0.2 8 30 4 13.3
0.2 10 30 2 6.7
表 3　不同培养基对愈伤组织诱导的影响
序号 BA/(mg/L) NAA/(mg/L) 生长状态 愈伤组织诱导率 /%
1 0.2 0.1 淡黄色 ,稀疏 15
2 0.2 0.2 淡黄色 ,稀疏 18
3 0.2 0.3 淡黄色 ,稀疏 18
4 0.5 0.1 淡黄色 ,稀疏 37
5 0.5 0.2 淡黄色 ,稀疏 45
6 0.5 0.3 淡黄色 ,稀疏 47
7 1.0 0.1 淡黄色 ,稀疏 62
8 1.0 0.2 淡黄色 ,致密 70
9 1.0 0.3 淡黄色 ,致密 75
10 2.0 0.1 淡黄色 ,致密 100
11 2.0 0.2 淡黄色 ,致密 100
12 2.0 0.3 淡黄色 ,致密 100
13 3.0 0.1 淡黄色 ,致密 85
14 3.0 0.2 淡黄色 ,稀疏 82
15 3.0 0.3 淡黄色 ,稀疏 80
CK 0 0 淡黄色 ,稀硫 0
从表 3可以看出 , 在培养基中添加 2.0 mg/L
BA+0.1 mg/LNAA、 2.0 mg/LBA+0.2 mg/L
NAA、2.0 mg/LBA+0.3 mg/LNAA对愈伤组织诱
导效果非常好 。
2.4　不同培养基对诱导芽分化的影响
对上述 3种培养基(序号分别为 10, 11 , 12)处
理继续进行观察 , 30d后 ,记录试验结果如表 4。
从表 4可以看出 , 在培养基中添加 2.0 mg/L
BA+0.3 mg/LNAA,对诱导芽分化效果非常好 。
42 江　苏　林　业　科　技 第 36卷
表 4　不同培养基对诱导芽分化的影响
序号 BA/(mg/L)
NAA
/(mg/L) 生长状态
愈伤组织
诱导率 /%
10 2.0 0.1 淡黄色,致密 2
11 2.0 0.2 淡黄色,致密 4.5
12 2.0 0.3 淡黄色,致密 7
3　结论与讨论
(1)从一系列试验看出 ,对于红花檵木半木质
化茎的组织培养 ,以第 3, 4节位为最好;在基本清
洗 、75%乙醇消毒 30 s、无菌水漂洗 2 min后 ,再用
0.2% HgCl2 液消毒 10 min效果最好 ,污染程度很
低;在 MS+蔗糖 30 g/L+琼脂 7.5 g/L中添加 BA
2.0 mg/L+NAA0.3 mg/L, pH调至 5.8对愈伤组
织的诱导 、芽分化效果最好 。
(2)对红花檵木半木质化茎段进行消毒 ,最后
采用HgCl2液的质量浓度和时间都比一般的植物要
大 ,可能是因为其茎段上密生星状毛 ,且正值其旺盛
生长期的原因。
(3)红花檵木的组织培养过程中存在愈伤组织
诱导较容易 ,但芽的进一步分化比较难的现象 ,需要
较高的激素水平 。
(4)愈伤组织比较容易诱导 ,但褐变现象比较
明显 ,分析可能是以下原因所致:一是外植体消毒的
时间比较长 ,并且用了酒精消毒 ,因为刘军等研究表
明认为酒精的消毒效果虽好 ,但易引起褐变 [ 7] ;二
是 BA不仅能促进酚类化合物的合成 ,同时也能刺
激多酚氧化酶的活性 ,而多酚氧化酶会直接导致愈
伤组织的褐变 。
(5)防止或减轻褐变可以采取以下方法:选择
生长旺盛的外植体;在培养基中添加一些抗氧化剂 ,
如维生素 C、柠檬酸等;或用合适的活性炭来吸附 。
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(上接第 37页)
存 ”,可以看出城市规划的理念在改变。生物多样
性保护是实现保护自然生态环境的惟一选择。目前
城市生物多样性规划在我国尚属于探索阶段 ,相关
科学研究也存在较多的疑问有待于完善。通过相关
职能部门和学科的协同努力 ,可逐渐解决城市生物
多样性建设中所面临的难题 ,最终做到真正意义上
的和谐和可持续发展 。
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