全 文 ：热带林业
徐强兴 (广东省湛江市农科所)
潘学峰 莫 丹(海南大学农学院)
摘要:进行了猪笼草顶端幼嫩茎段离体培养的研究 , 试验表明:对外植体消毒效果较好的杀菌剂是 12%双氧
水+0.1%升汞;在培养基中加入 0.1%活性炭可有效地防止猪笼草的外植体发生褐变;丛生芽连续在 1/4MS中培
养的材料褐化较轻;BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L的激素配比对芽的增殖效果较好;1/4MS+NAA0.5 ～ 1.0mg/L诱导
生根 、促进壮苗效果较佳;试管苗移栽在水苔上 ,成活率可达 80%。
关键词:猪笼草;茎段;离体繁殖
中图分类号:S336 文献标识码:A
消毒剂 接种瓶数 污染瓶数 污染率 备注
12%双氧水 20 17 85 无药害
0.1升汞 20 13 65 基本无药害
0.15升汞 20 10 50 30%有药害
12%双氧水+0.1升汞 20 5 25 15%有轻微药害
12%双氧水+0.15升汞 20 5 25 55%有轻微药害
45热带花卉
猪笼草(Nepenthes mirabilis), 又名雷公壶 、猴子
埕 、猪仔笼等 ,是猪笼草科 、猪笼草属 ,多年生草本或
半木质化藤本植物 , 原产于亚洲东南部和大洋洲北
部 ,全世界约有 67种 ,我国产 1种 ,分布在海南和广
东的湛江 、珠海 、中山等部分地区 , 喜生于潮湿的沼
泽地或小溪旁边[1] 。猪笼草是热带植物 , 性喜温暖 、
湿润和半荫环境 ,不耐寒 ,怕干燥和强阳暴晒 。宜在
温室栽培 。其叶互生 , 长椭圆形 , 全缘 , 中脉延长为
卷须 ,末端着生一小叶笼 ,瓶状 ,笼内生有粘液 ,有气
味 ,吸虫入内 ,是一种食虫植物[ 2] 。落到袋中的虫子
在袋底被消化液溶解 ,成为养分被吸收[ 3] 。
猪笼草现已成为引人注目的观赏植物 , 用常规
的扦插方法繁殖 , 难以满足生产的需求 , 因此 , 开展
猪笼草的组培快繁是必要的。目前尚未见有关猪笼
草组培快繁方面的报道 , 笔者以猪笼草的幼嫩茎段
为外植体进行离体培养 ,现将研究结果介绍如下:
1 材料与方法
1.1 材料
供试材料为旺盛生长的猪笼草的顶端幼嫩茎
段。
1.2 培养基
选用 MS为基本培养 ,设置不同的激素配比 , pH
调至 5.8。每升加入食用白糖基 30克 ,琼脂 5克。
1.3 茎段的消毒方法
选取正在旺盛生长的猪笼草的顶端生长点以
下 3～ 4节较幼嫩茎段 , 切成单芽茎段 , 先在洗衣粉
溶液中漂洗 5～ 10分钟 ,用自来水冲洗干净 ,在超净
工作台上 , 先用灭菌剂消毒 , 再用无菌水冲洗 5次 ,
然后切去损伤组织 ,接入诱芽培养基中。
1.4 培养条件
培养室温度为(28±2)℃, 以日光灯为光源 , 每
天连续光照 10h ,光照强度为 1500Lx 。
1.5 移栽基质
采用水苔 、表土 、沙和沙混表土(1:1)作为移栽
基质。
2 结果分析
2.1 外植体对消毒剂的反应效果
不同植物体对不同的消毒剂反应不同 , 故我们
试验了升汞和双氧水的灭菌效果。
表 1. 不同杀菌剂对外植体的消效果比较
从表 1可知 , 单独使用 12%双氧水 、 0.1 ～
0.15%升汞灭菌 10分钟 , 效果不够理想 , 污染率高
猪笼草的快速繁殖技术研究
2003年 6月 第 31卷 第 2期
基本培养基 增殖倍数 备注
MS 0 90%的芽变褐枯死
1/2MS 2.5 芽健壮 、浓绿 、生长正常
1/3MS 2.4 芽健壮 、浓绿 、生长正常
1/4MS 2.6 芽健壮 、常绿 、生长正常
激素组合(mg/ l) 平均增殖倍数 增殖芽平均高度(cm) 主芽平均高度(cm)
BA0.1+NAA0.1 0.6 0.44 4.1
BA0.25+NAA0.1 2.6 0.33 3.7
BA0.5+NAA0.1 3.1 0.31 3.1
BA1.0+NAA0.1 4.1 0.24 2.9
BA0.5+NAA0.25 1.8 0.29 2.9
BA0.5+NAA0.5 1.0 0.27 2.7
BA0.5+NAA1.0 0.4 0.27 2.4
于 50%;以双氧水和升汞混合使用效果较好 , 其中
12%双氧水+0.1%升汞混合液处理 10分钟的效果
最佳 ,污染率只有 25%,且药害轻微 ,不影响外植体
的生长。
2.2 芽的萌发及丛芽的诱导
将经过消毒处理的茎段 , 接入 1/ 2MS +
KT2.0+0.1%活性炭的培养基中 , 与不加活性炭为
对照 , 每个处理接种 30个芽 。经观察 , 在含有活性
炭的培养基中 , 6天后芽开始萌动;再经过约一个月
的培养 ,可长成 1～ 2厘米高 、3 ～ 4片叶的芽。而在
不含有活性炭的培养基中 , 培养基褐化严重 , 95%
以上的外植体褐死 , 不褐死的外植体一个月后才开
始萌芽。在培养基中加入适量活性炭 , 可防止植物
组织自身的酚类物质排泌和变褐老化 , 对形态发生
和器官形成有良好效应[ 4] 。将萌发至 1 ～ 2厘米高的
芽连同基部部分组织切下 , 接入 1/4MS+BA0.5+
NAA0.1中 , 约经 40天的培养 , 从芽基部和叶腋间
长出 2～ 3个芽 ,经不断切割可获得大量的丛芽 。
2.3 芽的增殖
增殖培养试验用芽是将前代增殖芽在无任何
外源激素的 1/4MS+0.1%活性炭的培养基中培养
30天作参试材料 , 从中切取约 2厘米高的单芽接
入 ,每处理重复 20株 ,培养周期为 45天。
2.3.1 无机盐浓度对芽培殖的影响
猪龙草外植体在全量无机盐浓度的 MS培养基
中容易变褐 , 为了寻找较适合猪笼草芽增殖的无机
盐浓度 ,笔者试用了 4种无机盐浓度的 MS培养基:
MS 、 1/2MS 、 1/3MS和 1/4MS , 采用激素组合
BA0.3mg/l+NAA0.1mg/l来筛选 ,结果见表 2。
表 2.不同无机盐浓度对芽增殖的影响
实验结果表明:不同无机盐浓度对芽的增殖有
不同的影响。全量 MS培养基不适应猪笼草的生长 ,
芽易变褐枯死 , 这是由于猪笼草酚含量较高的缘
故。而 1/2MS ～ 1/4MS则适应猪笼草的生长 。1/
2MS 、1/3MS和 1/4MS对芽的增殖及长势未表现出
明显差异 , 芽在其中长势良好及健壮 。另据笔者观
察 ,连续在 1/2MS中培养的材料 ,褐化会逐渐加重;
在 1/3MS中培养褐化稍轻;而在 1/4MS中培养的材
料基本无褐化 。因此 , 1/4MS培养基较适宜猪笼草
丛芽的增殖。
2.3.2 不同激素浓度配比对芽增殖的影响
为了确定较佳的激素质量浓度和激素配比 , 笔
者以 1/4MS为基本培养基 ,选用 BA与 NAA进行配
比 , 共 7个处理组合进行试验 , 观察其芽的增殖倍
数 ,增殖芽平均高度和主芽平均高度 ,结果见表 3。
在实验中 , 各处理中的增殖芽从接入芽的基部
和叶腋间长出 。由表 3可看出 , 当 NAA的浓度为
0.1时 , 随 BA浓度的升高 , 增殖芽随之增加 , 增殖
芽的高度随之下降 。当 BA达 1.0时 , 增殖芽成粒
状。据观察 ,连续在 BA为 1.0中培养的芽虽然增殖
倍数较高 , 但伸长的芽少 , 商品率低 。当 BA为 0.5
时 , 加入 0.1的 NAA芽的增殖倍数可达 3.1倍 , 接
入芽基部未出现愈伤组织 。当 NAA达 0.25时 ,接入
芽的基部出现少量的愈伤组织 , 影响芽的增殖;随
NAA浓度的继续增加 , 愈伤组织体积增大;当 NAA
浓度为 1.0时 , 出现大块的愈伤组织 , 严重阻碍了
芽的增殖和生长。
表 3. 不同激素配比对芽增殖的影响
2.4 根的诱导
切取约 2厘米高 、大小基本一致的无根幼苗接
入不同的生根培养中 ,培养 50天后观察。结果见表
4。
从表 4可知 , 猪笼草诱导生根较易 , 在所试的
生长素种类及浓度均能生根 , NAA浓度为 1.0时 ,
46 热带花卉
TROPICAL FORESTRY VOL.31 NO.2 Jun.2003
热带林业
激素浓度(mg/ l) 平均根数(条) 生根率(%) 平均根长(cm) 平均苗高(cm)
1/4ms+NAA0.25 1.8 90 0.24 3.3
1/4MS+NAA0.5 2.5 92 0.42 3.4
1/4MS+NAA1.0 2.6 92 0.43 3.5
1/4MS+IBAA0.25 2.1 82 0.42 3.5
1/4MS+IBA0.5 2.3 85 0.45 3.5
1/4MS+IBA1.0 2.4 80 0.44 3.6
基质 移栽株数 成活株数 成活率(%)
水苔 20 16 80.0
表土 20 12 60.0
沙 20 10 50.0
沙混表土 20 13 65.0
47热带花卉
幼苗生根数最多 ,为 2.6;NAA浓度为 0.5和 1.0时 ,
生根率最高 , 为 92%;IBA浓度为 0.5时 , 平均根长
最长 , 为 0.48厘米;IBA浓度为 1.0时 , 平均苗高最
高 , 为 3.6厘米 。综合以上分析 , 可知 1/4MS+
NAA0.5～ 1.0诱导生根和促进壮苗效果最佳 。
表 4.生长素对根诱导的影响
2.5 试管苗的移植
当生根苗高为 3.5厘米左右 、具 3～ 5片叶时 ,
将培养瓶移到室外较强自然散射光下炼苗 , 10天后
取出 ,用清水洗净粘附在根系上的培养基 ,以免琼脂
发霉而引起烂根 , 然后移植至基质中 , 20天即可成
活 。笔者以水苔 、表土 、沙和沙混表土(1:1)作基质 ,
30天后统计成活率 ,结果见表 5。
猪笼草试管苗移栽方法简单易行 , 在所试验的
四种基质中均能成活 , 成活率在 50%～ 80%, 在沙
上的成活率较低 , 只有 50%, 最好的是水苔 ,成活率
可达 80%,且植株长势较好。
表 5.猪龙草试管苗移栽到不同基质上的成活率
3 结论
(1)从试验结果可知 ,对猪笼草幼嫩茎段消毒效
果较好的杀菌剂是 12%双氧水+0.1%升汞 ,处理时
间为 10分钟。
(2)在培养基中加入 0.1%活性炭可有效防止猪
笼草的外植体发生褐变 ,有利腋芽抽发。
(3)丛生芽连续在 1/4MS上培养材料褐化较轻 ,
增殖效果较佳。
(4)采用 BA0.5+NAA0.1的激素配比对芽增殖
的效果较好 ,平均每 45天可增殖 3.1倍。
(5)以 1/4MS+NAA0.5 ～ 1.0诱导生根和促进
壮苗效果较佳 ,平均生根率可达 92%。
(6)猪笼草试管苗移栽成活率较高 ,移栽方法简
单易行 ,只要管理得当 ,成活率可达 80%。
参考文献
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[ 3](日)土桥丰主编 ,周拓译 .观叶植物鉴赏与栽培 .山东科
学技术出版社 .2001.188
(上接第 49页)分层或沉淀等现象 ,并使二甲基硅氧
烷等调理成份从乳化体系中破乳分离 , 导致配方的
去污力下降 ,调理性能大大下降 ,铵盐和钠盐在头皮
的沉积增多 , 从而产生头皮干燥 , 头痒 , 头屑增多等
负作用 。
4.2 脱苦芦荟原汁和芦荟干粉具有优异的泡沫性
能 ,良好的去污性能 ,常温下洗涤效果好 ,易漂洗 ,刺
激小 , 生物降解性好 , 还具有自防腐性能 , 可以避免
生产 、贮藏 、运输过程中的微生物污染问题 。因此可
作优良香波和沐浴产品的基础原料 , 使用量应控制
在 1.0～ 1.2%为最好 。但天然芦荟叶中的汁液则因
含有大量的大黄素和醌苷等有毒物质 , 对人体的毛
发 ,皮肤有较大的刺激性和过敏性 ,建议有关部门加
大宣传力度 , 不可轻易大量使用未经脱苦和去毒的
芦荟汁液 ,否则 ,容易导致皮肤过敏而出现头发脱落
和头皮屑过多和产生暗疮等症状。
4.3 由于芦荟干粉对某些细菌和霉菌的生长不能
控制 ,因此在实际生产上 ,芦荟在防腐上只能起辅助
作用 , 在化妆品的配方中还需要加入其它的防腐剂
如卡松才能保证产品不会发霉变质 。
参考文献
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[ 3]薛聪贤 ,球根花卉和多肉植物 150种 ,景观园林植物图鉴
2003年 6月 第 31卷 第 2期