全 文 ：书收稿日期:2012-08-03; 修订日期:2012-12-24
基金项目:国家自然科学基金 ( No． 81102760 ) ;
内蒙古自治区高等科学技术研究项目( No． NJ10185)
作者简介:郑东华( 1982-) ，男( 汉族) ，内蒙古包头人，现任内蒙古科技大
学包头医学院讲师，硕士学位，主要从事中蒙药成分及药理研究工作．
* 通讯作者简介:石松利( 1981-) ，女( 汉族) ，河南洛阳人，现任内蒙古科
技大学包头医学院副教授，博士学位，主要从事中蒙药成分及资源开发利
用研究工作．
蒙古扁桃药材中有机酸含量的测定
郑东华，石松利* ，苏 琨
(内蒙古科技大学包头医学院药学院，内蒙古 包头 014040)
摘要:目的 建立蒙古扁桃药材中总有机酸含量的测定方法。方法 采用酸碱返滴定法，以酚酞作为指示剂。结果 经方
法学考察，方法符合含量测定要求，平均回收率在 100． 83% ( ＲSD = 1． 16%，n = 6 ) ，总有机酸以柠檬酸( C6H8O7 ) 计
2． 56%。结论 该方法操作简便，重现性好，准确度高，可作为蒙古扁桃药材总有机酸含量测定的方法。
关键词:蒙古扁桃; 返滴定法; 有机酸
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 03． 002
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2013) 03-0515-01
Determination of Content of Organic acids in Prunus mongolica
ZHENG Dong-hua，SHI Song-li* ，SU Kun
( Baotou Medical College，Inner Mongolia University of Science ＆ Technology，Baotou，Innermongolia 014040，
China )
Abstract: Objective Determination of total organic acids in the establishment of Prunus mongolica seeds． Methods Using the
acid － base back titration with phenolphthalein as the indicator． Ｒesults Methodology study，the approach is consistent with the
content determination requirements，the average recoveries were 100． 83% ( ＲSD = 1． 16%，n = 6) ． total organic acids as cit-
ric acid ( C6H8O7 ) meter． Conclusion The method is simple，reproducible，accurate and can be used as the method for determi-
nation of Mongolia almond seeds total organic acid content．
Key words: Prunus mongolica; Back titration; Organic acids
蒙古扁桃(Prunus mongolica)又称山樱桃、土豆子、乌兰布依
勒斯，隶属于蔷薇科李属，是亚洲中部戈壁荒漠区特有的旱生落
叶灌木［1］，分布于内蒙古西部、甘肃河西走廊及宁夏等地［2］。为
传统的中药材，种仁可代“郁李仁”入药。其性味苦，具润肠通
便、止咳化痰之功效，主治咽喉干燥、干咳及支气管炎、阴虚便秘、
腹水、脚气、水肿、高血压等病症［3，4］。蒙古扁桃来源于自然，含
有一些特殊生理活性成分，如生物碱类、黄酮类、挥发油、有机酸
等。越来越多的研究证明，有机酸类成分具有抗肿瘤、抑菌、抗血
栓、抗艾滋病毒、降血脂等广泛的生物活性［5］。因此，有机酸类
成分的提取成为热点。与此有相似功效的半夏、天南星采用酸碱
返滴定法测定总有机酸含量作为质量控制指标［6，7］。迄今，尚未
见有蒙古扁桃药材有机酸含量测定的报道。本课题组研究发现
蒙古扁桃药材具有新的药理作用———降血脂作用［8］，为了研究
蒙古扁桃药材中有机酸与药效的内在联系和更好的开发利用蒙
古扁桃资源，本研究采用酸碱返滴定法测定蒙古扁桃药材中有机
酸含量，为更有效的控制药材质量，完善质量控制标准提供依据，
为进一步探索蒙古扁桃药用的物质基础和药理作用提供参考。
1 材料与仪器
蒙古扁桃种子，经内蒙古大学生命科学学院王迎春教授鉴
定。SHZ － D(Ⅲ)循环水式多用真空泵(天津华鑫仪器厂) ;电子
天平;烘干机。
2 方法
2． 1 对照品溶液的制备 精密称取柠檬酸 0． 113 2 g，加适量
0． 05 mol /L NaOH 溶液溶解，全部转移至 500 ml 容量瓶中，加
0． 05 mol /L NaOH溶液定容至刻度，摇匀，备用。
2． 2 供试品溶液制备方法 将蒙古扁桃种子去壳，种仁置 105℃
的烘箱中烘 4 h，取出冷却、研成细粉，放干燥器中备用。精密称
取烘干至恒重的蒙古扁桃种仁粉末 2 g，置具塞锥形瓶中，精密加
入 0． 05 mol /L NaOH 溶液 100 ml，密塞，室温放置 0． 5 h，抽滤，备
用。
2． 3 测定方法 精密吸取 25 ml 供试品溶液 3 份于 250 ml 三角
烧瓶中，分别加入蒸馏水 25 ml、酚酞指示剂 2 滴，用 0． 05 mol /L
HCl标准溶液滴定。记录溶液红色褪去时消耗标准酸体积 V标
(ml) ，并计算平均值。同时滴定 0． 05 mol /L NaOH 溶液 25 ml，记
录空白溶液消耗标准酸体积 V0(ml) ，并计算平均值。1 ml 0． 05
mol /L HCl相当于 3． 302 mg柠檬酸(C6H8O7)。计算蒙古扁桃种
仁中有机酸的含量。
3 结果
3． 1 有机酸的含量测定 经测定，实验中蒙古扁桃药材中的有机
酸含量为 2． 56%。
3． 2 静置时间的选择 精密称取 2 g蒙古扁桃种仁粉末 5 份，置
具塞锥形瓶中，分别精密加入 0． 05 mol /L NaOH 溶液 100 ml，密
塞，室温放置 1，1． 5，2，2． 5，3 h 后，抽滤，按照“2． 3 测定方法”项
下测定，分别记录 V标 和 V0，计算各个时间段的蒙古扁桃种仁中
有机酸的含量。测定结果见表 1。
表 1 不同时间段的有机酸含量
时间 含量(%)
0． 5h 2． 37
1h 2． 56
1． 5h 2． 31
2h 2． 41
2． 5h 2． 45
3h 2． 35
3． 3 加样回收试验
取 0． 5 g 蒙古扁桃种仁粉末 6 份，精密称定，于具塞锥形瓶
中，分别精密加入对照品溶液 50 ml，密塞，室温放置 1 h，抽滤。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2013 VOL． 24 NO． 3 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 3 期
书分别精密吸取溶液 25 ml 于 250 ml 三角烧瓶中，加入蒸馏水 25
ml、酚酞指示剂 2 滴，用 0． 05 mol /L HCl 标准溶液滴定。记录溶
液红色褪去时消耗的标准酸体积 V回。
取 0． 5g蒙古扁桃种仁粉末 3 份，精密称定，于具塞锥形瓶
中，分别精密加入 0． 05mol /L NaOH 溶液 50 ml，密塞，室温放置 1
h，抽滤。分别精密吸取溶液 25 ml 于 250 ml三角烧瓶中，加入蒸
馏水 25 ml、酚酞指示剂 2 滴，用 0． 05 mol /L HCl 标准溶液滴定。
记录溶液红色褪去时消耗的标准酸体积 V标，并计算平均值 V平
= 22． 97ml。
结果见表 2，平均回收率为 101． 31%，ＲSD = 1． 23%。结果显
示，该方法准确性好。
表 2 加样回收试验结果
样品含量
/ g
加入柠檬酸
/ml
测得 V回
/ml
回收率
(%)
平均回收率
(%)
ＲSD
(%)
0． 5 50 21． 20 103． 26
0． 5 50 21． 25 100． 34
0． 5 50 21． 25 100． 34 101． 31 1． 23
0． 5 50 21． 18 104． 43
0． 5 50 21． 28 98． 60
0． 5 50 21． 30 97． 43
n = 6
3． 5 重复性试验 精密称取 1 g蒙古扁桃种仁粉末 3 份，置具塞
锥形瓶中，分别精密加入 0． 05 mol /L NaOH 溶液 50 ml，密塞，室
温放置 1 h，抽滤，平行测定，记录消耗标准酸体积 V标(ml) ，并计
算平均值。结合前述已测定出的 V标，计算出 ＲSD = 1． 89%(n =
6) ，表明该方法重复性好。
3． 5 稳定性试验 由表 1 的数据可算出 ＲSD = 3． 65%，结果表明
供试品溶液在 3h内稳定性较好。
4 结论与讨论
有机酸含量测定方法多样，最常用的有滴定法、高效液相色
谱法、离子色谱法、薄层色谱法［9］。本论文旨在研究建立有机酸
含量的具体测定方法，由于蒙古扁桃种仁粉末供试品溶液颜色较
浅，无背景颜色干扰观察指示剂颜色变化，考虑操作的简便性，本
方法选用酚酞作为指示剂指示终点。方法学考察结果表明，酸碱
返滴定法用于测定蒙古扁桃种仁中有机酸含量的方法简单、快
速、准确、重现性好、实用性强。
参考文献:
［1］ 马毓泉．内蒙古植物志(第三卷) ［M］．呼和浩特:内蒙古人民出版
社，1989:519．
［2］ 赵一之．蒙古扁桃的植物区系地理分布研究［J］． 内蒙古大学学报
(自然科学版) ，1995，26(6) :713．
［3］ 李国林，和 平，刘晓松，等．山羊蒙古扁桃中毒的诊断和治疗［J］．
内蒙古畜牧科学，1994，1:5．
［4］ 斯琴巴特尔．蒙古扁桃［J］．生物学通报，2003，38(8) :23．
［5］ 潘 明，王世宽，刘慧杰，等． 超声波强化提取荠菜中有机酸的研究
［J］．时珍国医国药，2009，20(2) :313．
［6］ 杜巧珍，红 雨，包贺喜图．珍稀濒危植物蒙古扁桃研究进展［J］．
内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版) ，2010，39(3) :308．
［7］ 国家药典委员会．中国药典，一部［S］．北京:中国医药科技出版社，
2010:53．
［8］ 白迎春，石松利，钮树芳，等．蒙古扁桃药材对大鼠高脂血症的影响
［J］．时珍国医国药，2012，23(10) :2406．
［9］ 张 立． 中草药中有机酸、糖及丙烯酰胺的色谱分析方法研究
［D］．河北大学，分析化学，2008．
收稿日期:2012-08-15; 修订日期:2012-12-24
基金项目:国家自然科学基金( No． 81272909)
作者简介:陈 莎( 1982-) ，女( 汉族) ，重庆人，现为第三军医大学硕士研究生，学士学位，主要从事自噬与肿瘤发生发展的相关研究工作．
* 通讯作者简介:李淑慧( 1964-) ，女( 汉族) ，四川广源人，现任第三军医大学副教授，博士学位，主要从事肿瘤发生发展及药物治疗的基础研究工作．
调节自噬对乳腺癌细胞紫杉醇耐药性影响的实验研究
陈 莎1，韩 起1，王旭辉2，杨明珍1，张竹君1，陈 安1，胡川闽2，李淑慧1*
(1．中国人民解放军第三军医大学，重庆 400038;
2．中国人民解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所，重庆 400042)
摘要:目的 观察调节自噬对乳腺癌细胞紫杉醇耐药性的影响。方法 选取两株乳腺癌细胞 MDA － MB － 231 及 MDA －
MB － 468 细胞，分为不同浓度的紫杉醇( PTX) 组、联合自噬激动剂雷帕霉素( PTX + Ｒapa) 组和联合自噬抑制剂 3 － MA
( PTX + 3 － MA) 组( 对照组给予相应溶剂) ，分别作用 24 h、48 h及 72 h后，应用MTT比色法检测各组细胞的存活率及抑
制率。结果 PTX + Ｒapa组对两株乳腺癌细胞的抑制作用均显著优于单独给药的 PTX 组及 PTX + 3 － MA 给药组( P ＜
0． 01) ，而 PTX + 3 － MA 组对两株乳腺癌细胞的抑制作用则明显弱于单独给药的 PTX 组( MDA － MB － 231，P ＜ 0． 05;
MDA － MB － 468，P ＜ 0． 01) ，提示自噬激动剂雷帕霉素( 10 nm) 可降低乳腺癌细胞对紫杉醇耐药性，增强紫杉醇对乳腺癌
细胞的抑制作用，而自噬抑制剂 3 － MA( 10 mm) 在一定程度上增强乳腺癌细胞紫杉醇耐药性，拮抗紫杉醇对乳腺癌细胞
的抑制作用。结论 调节自噬能明显影响乳腺癌细胞对紫杉醇的耐药性，这为自噬与乳腺癌细胞紫杉醇耐药性关系的研
究提供了新的思路。
关键词:自噬; 乳腺癌; 紫杉醇; 耐药
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 03． 003
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2013) 03-0516-04
The Effects of Ｒegulated Autophagy in the Ｒesistance of Breast Cancer Cells to Paclitaxel
CHEN Sha1，HAN Qi1，WANG Xu-hui2，YANG Ming-zhen1，ZHANG Zhu-jun1，CHEN An1，HU Chuan-min1，LI Shu-
hui1*
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时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 3 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2013 VOL． 24 NO． 3