全 文 ： 2007年3月 阴 山 学 刊 Mar.2007
第21卷 第1期 YINSHAN ACADEMIC JOURNAL Vol.21 No.1
收稿日期：
作者简介：
蒙 古 扁 桃（prunus mongolia Maxim ）是 蔷 薇 科
（Rosaceae）李属（Prunus L.）多年生木本植物。由于自然
历史原因和人类经济活动的影响，特别是过渡放牧及人们
的乱砍乱伐和大量采集其种仁榨油，入药，使其数量锐减，
分布范围日益缩小，被国家的环境保护局列为三级保护植
物。国内学者对蒙古扁桃的形态学、种子生理、组培、细胞
学、资源利用等方面做了大量工作，但对蒙古扁桃果实及种
子中存在的萌发抑制物质活性、存在部位的研究尚未见报
道，本文就此对其进行了研究。
1 材料与方法
1.1 材料
于2005年8月在包头市郊区鹿沟采集成熟的蒙古扁桃
果实，自然干燥后供试材料，存放于室内干燥通风处，并于
2006年4月份将果实分割成外中果皮、内果皮和种子三部分
备用。
1.2 实验方法
蒙古扁桃外中果皮，内果皮和种子的抑制物粗提物的
制取：分别称量外中果皮，内果皮和种皮,20g,40g ，2g加入
研钵中研碎，分别加十倍量的水置于56℃条件下浸泡24h过
滤，残渣在浸泡提取2次，合并3次滤液，56℃条件下浓缩成
一定体积并定容至200ml,100ml,100ml。粗提物含有各种试
验材料的质量数为0.2g.ml-1.
1.2.1 蒙古扁桃种子萌发测定
分别将蒙古扁桃分为：a. 去除外中果皮,b. 去除内果皮
三组,c.去除种皮,在培养皿中用双层滤纸做发芽床，室温置
于光照下，测定不同处理的种子的发芽率与发芽指数。
计算发芽率（%）；发芽指数 GI=∑(Gi/Di)
其中，Gi指t天后的发芽数，Di指发芽天数。
1.2.2 蒙古扁桃粗提物的抑制活性的生物测定
分别取蒙古扁桃内果皮，外中果皮和种皮粗提物加入
60ml的培养皿中保持每皿内的液体总量为6ml，不足部分补
入蒸馏水，用小麦种子进行生物测定，每皿内加入50粒小麦
种子，23℃黑暗中培养24h测定小麦的发芽率，然后不间断
的2h测定一次，结束了测定其幼根及芽的长度。
取种皮粗提物配制不同浓度（0，0.025,0.050,0.075,0.1,
0.125,0.150,0.175,0.2）加入60ml的培养皿中保持每皿内的液
体总量为6ml，不足部分补入蒸馏水，用小麦种子进行生物
测定，每皿内加入50粒小麦种子，23℃黑暗中培养24h测定
小麦的发芽率，然后不间断的2h测定一次，结束了测定其幼
根及芽的长度。
1.2.3 蒙古扁桃粗提物培育小麦的种子的脱氢酶活性、抗
氧化酶活性和过氧化氢酶的测定
过氧化物酶（POD）的测定：取种子用吸水纸吸干，称
取一半质量种子抽样比例（w/v）1：10加入预冷的磷酸缓冲
液（PBS 0.05mol/L,PH=7）提取，冰浴研磨成匀浆4℃条件下
用离心机离心30min(最大转速)，上清液用于活性的测定，3
次重复。脱氢酶活性的测定：取另一半种子在各皿中选取
0.5-1g种子置与试管中加入0.1%的TTC 10ml,25℃水浴中恒
温4小时（黑暗），反应后用蒸馏水冲洗数次，用滤纸吸干
表面的水以1：10 的比例（W/V）加入丙酮研磨过滤提取液
在离心机离心30min（最大转速）取上清液测定490nm的光吸
收值，重复3次。过氧化氢酶（CTA）的测定：取0.05ml酶液，
加入3.4mlPBS(0.025mol/L,PH=7.0,内含0.1x10-3mol/L EDTA)
0.2molH2O2(0.1mol/L),在25℃下反应，测定420nm下的光吸收
值。取另一半种子在各皿中选取0.5-1g种子置与试管中加
入0.1%的TTC 10ml,25℃水浴中恒温4小时（黑暗），反应后
用蒸馏水冲洗数次，用滤纸吸干表面的水以1：10 的比例
（W/V）加入丙酮研磨过滤提取液在离心机离心30min（最
大转速）取上清液测定490nm的光吸收值，重复3次。
1.2.4 蒙古扁桃内果皮，种皮乙醚提取液制备及纸层析分
段生物测定

蒙古扁桃果实及种子内源萌发抑制物质活性

方 海 涛
（包头师范学院 生物科学与技术学院，内蒙古 包头 014030）

摘 要：通过对蒙古扁桃的外中果皮，内果皮、种皮内源萌发抑制物的研究，探讨了蒙古扁桃种子休眠
的原因。制取蒙古扁桃果实各部分及种子的粗提物，通过各部分的粗提物培育小麦，测定小麦的发芽率和发
芽指数以及脱氢酶和抗氧化酶的活性来表现蒙古扁桃各部分的抑制物的活性。研究结果表明：蒙古扁桃的内
果皮，外中果皮均含有一定的活性的内源抑制物。
关键词：蒙古扁桃种子； 抑制物质
中图分类号：Q945.4 文献标识码：A 文章编号：1004（1869）2007－01－0058-03
2006－09－24
方海涛（1973-），男，内蒙古通辽人，讲师，研究方向：昆虫与植物的关系。
58
DOI:10.13388/j.cnki.ysajs.2007.01.023
将粗提物用乙醚萃取，得到乙醚萃取液和乙醚萃取残
余液，在分别定容至50ml，用上行层析法进行层析，层析滤
纸用标准规格。用毛细管沿层析纸点样，每张层析纸点样量
相同（做3次）用纸宽6cm,长18cm，当层析纸到15 cm时结束
层析，凉干滤纸，将层析纸按不同RF值剪成10段，每段1.5cm,
每段对折后，在剪成3cm两段，放入90cm小培养皿中，注入
2ml蒸馏水，再将三个并组溶液合在一起。
取健壮饱满的小麦种子400粒，分别放于20个实验组培
养皿中，20粒/皿，将培养皿置于25℃恒温箱黑暗条件下培
养，随时加水保持陪样皿内溶液为6ml,记录不同RF区段的
作用下，小麦种子的发芽率和发芽指数。
2 结果分析
2.1 蒙古扁桃粗提物的抑制活性的生物学测定
用蒙古扁桃的种皮、内果皮、外中果皮粗提取液培育小
麦，外中果皮的抑制作用最强，其次是种皮的抑制作用（如
图1）。不同浓度全果实的粗提物对根长长和芽长长的抑制
作用不同，抑制活性是随粗提物的浓度增大而增强，当浓度
高与0.1时，抑制作用最强，当浓度大于0.125后，抑制作用
反而减弱。同一浓度对根和芽的抑制作用不同，对根的抑制
作用大于对芽的抑制作用（如图2）。
图1内果皮，种皮，外中果皮粗提物培育小麦的平均根
长及芽长

图2：全果实粗提物不同浓度对小麦萌发的影响

2.2 蒙古扁桃粗提物培育小麦种子的抗氧化性
酶和脱氢酶活性的测定
2.2.1 过氧化物酶活性（POD）的测定
小麦种子在外中果皮，内果皮浸泡下吸胀萌发后，内果
皮、外中果皮的过氧化物酶活性几乎相同（如图3）。不同
浓度全果实浸泡下的小麦的过氧化物酶活随浓度的增大，
过氧化物酶的活性呈下降趋势，进一步说明了全果实的抑
制物的存在（如图４）。
图3外中果皮，内果皮浸泡小麦的过氧物氢酶测定

图4：全果实不同浓度浸泡小麦的过氧化物酶测定

图5：全果实，外中果皮，内果皮浸泡小麦的脱氢酶测定
２.2.2 脱氢酶活性的测定
小麦种子在外中果皮，内果皮浸泡下吸胀萌发后，脱氢
酶活性是全果实的浸泡培育小麦的脱氢酶活性最小（图5），
说明全果实的粗提物中的抑制物活性最大。随全果实浸出
液浓度的增大，抑制性增大（图6）。

图6：全果实不同浓度浸泡小麦的脱氢酶测定

图7：外果乙醚提取液纸层析不同Rf区段
培育小麦的发芽率测定
2.3 蒙古扁桃外中果皮，内果皮乙醚提取液纸层
析分段生物测定结果
蒙古扁桃外中果皮乙醚提取液在Rf=0.3和Rf=0.9区对
小麦的发芽率的影响较大（图7）内果皮的乙醚提取液在
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
内果皮 种皮 外中果皮
果实各部分粗提物小
麦
根
及
芽
的
平
均
长
度
根长
芽长
0
0.5
1
1.5
2
2.5
0
0.0
5 0.1 150 0.2
芽长
根长
过氧化物酶（POD）测定
0
5
10
对照组 外中果皮 内果皮
0
1
2
3
4
5
0
0.0
5 0.1 150
0
1
2
3
4
5
对照
组
全果
实
外果
皮
内果
皮
脱氢酶物酶
测定
A490nm/g光
吸收值
0
1
2
3
4
5
对照
组
全果
实
外果
皮
内果
皮
脱氢酶物酶
测定
A490nm/g光
吸收值
59
Rf=0.9区对小麦的抑制最大（图9）。乙醚的外果皮萃取残余
液（图8）在Rf=0.4区段的抑制活性最大，乙醚的内果皮萃取
残余液（图10）在Rf=0.6区段的抑制或性最大，由此可知，
蒙古扁桃有易于溶于水和易于溶于乙醚的活性抑制成分，
由图11，图12可知，易溶于乙醚的活性成分高于易溶于水的
成分。

图8：外果乙醚提取残余液纸层析不同Rf区段
培育小麦的发芽率测定

图9：内果乙醚提取液纸层析不同Rf区段
培育小麦的发芽率测定

图10：外果乙醚提取残余液纸层析不同Rf
区段培育小麦的发芽率测定
3 讨论
蒙古扁桃的外中果皮，内果皮拨去，在23℃发芽培养，
20d后其发芽率为85%，，但相同条件下带内果皮的种子和
带内中外果皮的全果实的发芽率分别为20%和10%，将带有
内果皮和外果皮的种子用蒸馏水浸泡24小时后，种子吸水
鲜中无显著差异，表面内果皮和外果皮是可以透水的，说明
蒙古扁桃除种子本身的各部分均含有一定的抑制物质，从
而抑制其种子的发芽。

图11：外果皮上层及下层液对小麦发芽指数的影响

图12：内果皮上层及下层液对小麦发芽指数
用蒙古扁桃各部分粗提物对小麦的培育，通过对小麦
的发芽率，发芽指数及脱氢酶，抗氧化酶的测定，初步证明
了蒙古扁桃的内果皮，外中果皮，全果实中均含有一定的内
源抑制物，但对其是那一种物质还不清楚。通过对内果皮及
外果皮的乙醚提取液分段生物测定说明了内果皮，外中果
皮中含有溶于水和溶于乙醚的抑制物，而溶于乙醚的抑制
物活性更大一些。

[参考文献]
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[4]赵敏,王炎.刺五加果实及种子内源萌发抑制物质活
性的研究[J].中国中药杂志,2001,26(8).
外果皮提取液不同Rf值发芽率（%）
0
50
100
0.1 0.3 0.4 0.6 0.8 0.9
外果皮残余液不同Rf值发芽率（%）
0
50
100
0.1 0.3 0.4 0.6 0.8 0.9
内果皮提取液不同Rf值发芽率（%）
0
50
100
0.1 0.3 0.4 0.6 0.8 0.9
内果皮残余液不同Rf值发芽率（%）
0
50
100
0.1 0.3 0.4 0.6 0.8 0.9
0
10
20
30
0.1 0.3 0.4 0.6 0.8 0.9
外果皮上层液
外果皮下层液

Study on Activity of Inner Inhibitory Substances of Prunus Mongolica Maxi Fruits and Seeds

FANG Hai-tao
(Faculty of biology, Baotou Teachers College; Baotou 014030)

Abstract: By studying on the inner inhibitory substances of Prunus Mongolica fruits and seeds,the reason for
dormancy of the Seeds was investigated. The raw extracts of Prunus Mongolica fruits and seeds were prepared and
determined by biological methods,and cul
Key words：Prunus Mongolica seeds; activity of inner inhibitory substances
60