全 文 ：　　 成都中医药大学学报
Journal of Chengdu University of TCM
2002 年 3月第 25 卷第 1 期
Mar.2002 , Vol.25 , No.1
中药研究
基金项目:江苏省中医药管理局科研基金资助项目 (编号:苏中医科第 017 号)。
作者简介:潘金火 , 男 , 1963年 1 月生;博士 , 副教授;研究方向:中药药剂学与中药分析学。
垂盆草药材质量控制方法研究
潘金火1　何满堂1 　罗兰2
(1.扬子江药业集团公司 博士后科研工作站 , 江苏 泰州　225321;2.陕西省宝鸡市药品检验所)
摘　要:　以垂盆草苷为指标 , 用 TLC法 , 建立了垂盆草药材的定性鉴别方法;用 RP-HPLC 法测定
了两个产地垂盆草药材中垂盆草苷的含量 , 结果表明 , 南京紫金山样品平均含量为:0.405% , RSD =4.
07%(n=5);宜兴凤凰山样品平均含量为:0.425%, RSD =4.40%(n=5)。数理统计显示 , 两者比
较无显著性差异 (P>0.05)。
关　键　词:　垂盆草药材;垂盆草苷;TLC 法;RP-HPLC 法;定性定量
中图分类号:　R282.71;R286.0　　文献标识码:A　　文章编号:1004-0668(2002)01-0044-02
　　垂盆草(Herba Sedi)为景天科植物垂盆草(Sedum Sarmen-
tosum Bunge)的干燥全草 , 又名石指甲(《四川中药志》)、半枝
莲(《药镜》)、鼠牙半支(《百草镜》)等 ,是现版《中华人民共和
国药典》收载的常用中药之一 , 具有清热 、利湿 、解毒之效 , 主
治急 、慢性肝炎等病症 , 全国各地均有分布 ,现栽培品较多。
经电脑检索《中文中医药文献资料库》和《生物学文献资
料库》及手工查阅近 15 年来国内外有关文献获知 , 目前 , 垂
盆草药材缺乏能真正体现其内在质量的质控物质和质控方
法 ,其化学 、药理研究也缺乏系统性 , 临床上更是缺乏制备工
艺先进 、质量易控制 、疗效较稳定的垂盆草制剂。所有这些
都限制了垂盆草药材在抗肝炎研究方面的深度与广度。 有
鉴于此 , 我们以垂盆草苷为质控指标 , 通过 TLC 法的 RP-
HPLC 法 ,建立了垂盆草药材的定性 、定量方法。现将实验方
法和结果报道如下。
1　仪器和试剂
PE100型 HPLC 仪 、CC-12 型微处理机;垂盆草苷对照
品:中科院上海药物研究所提供(HPLC 归一化法测得纯度为
97.60%);垂盆草药材:1997 年 7 月分别采自南京紫金山和
宜兴凤凰山 ,经南京中医药大学中药鉴定教研室王春根教授
鉴定均为 Sedum Sarmentosum Bunge的全草;硅胶 G 预制板(5
×15 cm2 , 青岛海洋化工厂生产);MeOH 、乙腈为色谱纯 ,其他
试剂均为AR级。
2　方法和结果
2.1　定性鉴别
2.1.1　供试品溶液制备　对照品溶液:精密称取垂盆草苷
约 5 mg ,MeOH 定容至 20 mL , 备用;样品溶液:称取垂盆草药
材(10 目)约 10 g ,Me2CO超声提取 2 次 , 滤液合并后 , 低温挥
尽Me2CO ,加水溶解 , 抽滤 ,滤液拌适量硅胶 H , 真空干燥 , 上
硅胶小柱 ,以 CHCl3-MeOH(8∶2)洗脱 , 前 20 mL弃去 , 后 10
mL收集 ,低温挥尽溶剂 ,MeOH溶解 ,备用。
2.1.2　薄层层析　展开条件:硅胶 G 预制板;展开剂:EtOH
-CHCl3-C6H6-H2O(30∶9∶9∶2)或 Et2O-Me2CO-H2O(25∶
25∶3)。 显色剂及显色方法:20%H2SO4 溶液喷后 , 105℃
5min , 常光下观察色斑。
①在同一块板上点对照品溶液约 2 μL、4 μL 、8μL 3 个
点 ,分别用以上 2 种展开系统展开 ,在 Rf=0.60 及 Rf=0.43
处各有 1个黑褐色斑点;②在同一块板上点对照品溶液及 2
种样品溶液适量 ,用 EtOH-CHCl3-C6H6-H2O(30∶9∶9∶2)依
法展开 、显色 , 在 Rf=0.56 处各有 1个黑褐色斑点 。
2.2　含量测定
2.2.1　色谱条件　固定相:Kromasil C18 柱(5 μm , 250 mm×
3.9 mm , 大连化学物理研究所);流动相:MeOH-乙腈-H2O
(8∶10∶82),流速:0.8 mL/min;检测波长:260 nm;柱温:30℃。
2.2.2　线性关系考察　精密称取垂盆草苷约 25 mg ,MeOH
定容至 100 mL。精密吸取上述对照液 4.0、8.0 、12.0、16.0、
20.0 μL进样 ,色谱图见图 1。以对照品进样量 C(μg)为横座
标 ,以峰面积积分值 A 为纵座标 , 经过回归处理后得回归方
程为:A=307349.2C-113504.5(r=0.9990), 线性范围为:1.
06 ～ 5.28 μg。
2.2.3　稳定性试验　据文献报道 , 垂盆草苷不太稳定 , 100℃
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DOI :10.13593/j.cnki.51-1501/r.2002.01.024
以上受热或长时间放置容易分解。因此 , 在进行此项试验
时 ,我们每 2 h 进样 10 μL对照液 ,发现在 10 h内峰面积变化
不大 , RSD=3.26%(n=6)。然后又将冰箱中避光保存 30 天
的对照液 、100℃水浴中放置 15 min 的对照液 、室温常光条件
下搁置 30天的对照液及随行空白溶剂作了比较 , 结果发现 ,
受热及室温常光下久置的对照液 HPLC图已发生了很大的变
化 ,色谱图见图 1 ～ 图4。
2.2.4　精密度实验　精密吸取对照液 10 μL ,连续进样 6 次 ,
其峰面积积分值基本不变 , RSD=3.12%(n=6)。
2.2.5　加样回收率试验　精密称取垂盆草药材粗粉(10 目)
约8 g(南京紫金山样品), 精密加入对照液 10 mL, 按样品测
定项下之方法提取 、测定 , 结果表明 ,平均加样回收率为 96.
03%, RSD =3.27%(n =5)。
2.2.6　样品测定　精密称取垂盆草药材粗粉(10 目)约 10
g , 置索氏提取器中 , 用Me2CO提取至无色(约 8～ 10 h),减压
回收Me2CO后 ,加 H2O 溶解 , 抽滤 , 滤液拌适量硅胶 H , 真空
干燥 ,上硅胶小柱 , 以 CHCl3-MeOH(8:2)洗脱 , 前 20 mL 弃
去 ,收集后面含指标成分的所有流份 , 合并后 , 低温挥尽溶
剂 ,MeOH 定容至 100 mL, 进样前用 0.45μ一次性滤膜压滤。
精密吸取各样品液 10μl进样 , 色谱图见图 5、图 7。
图 5　随行空白溶剂对照
6　药材 HPLC 图(南京产)　　图 7　药材 HPLC 图(宜兴产)
根据样品中指标成分峰面积积分值 , 由外标 2点法算得指标
成分的量 ,再计算药材中的含量 , 结果见表 1。
表 1　垂盆草药材中垂盆草苷的含量(n=5)
产地 称样量(g)含量(%)平均含量(%)RSD(%)
10.7544 0.421
10.2350 0.413
南京紫金山 10.2486 0.385 0.405 4.07
10.0177 0.390
10.1791 0.417
10.2356 0.414
9.8769 0.405
宜兴凤凰山 9.2418 0.430 0.425 4.40
10.0452 0.422
10.6903 0.454
3　讨论
数理统计表明 ,两种产地的垂盆草药材中垂盆草苷的含
量无显著性差异(P>0.05)。
因样本较少 ,上述结果仅供参考 , 本试验旨在建立一种
方法 ,至于指标成分在药材中的最低限量则有待于以后经过
大量实验后作出。
本次实验中 ,通过稳定性试验 , 验证了文献中关于垂盆
草苷不太稳定的报道 , 尤其在受热或常光 、室温下长期放置
更不稳定。
(收稿日期:2001-05-28)
·45·第 1 期 潘金火等　垂盆草药材质量控制方法研究