全 文 :0.16U/kg、0.08 U/kg和 0.04 U/kg经兔耳缘静脉
一次给药对血小板聚集无明显影响;立止血经兔耳
缘静脉一次给药对血小板聚集也无明显影响。上述
研究结果为临床用药提供了依据。
注:本研究系国家 “十五 ”重大科技专项 “创新药物和中药现代
化 ”立项课题(编号:2003AA2Z3156、 2004AA2Z3B70)
参 考 文 献
1 倪永兵 ,等 .中国福建蝮蛇蛇毒凝血酶止血作用的实验
研究 .南京医科大学学报 , 2001, 21(6)∶515
2 康佐文 , 等 .立止血对家兔止血效果的研究 .蛇志 ,
2000, 12(2)∶8
(2004-12-08收稿)
西藏红景天对小鼠辐射损伤的保护作用
及其抗高原反应与低温环境的作用
吴万征 李朝晖 梁 球
(广东医学院附属医院药剂科 ,广东湛江 524001)
摘要 本文研究了西藏红景天提取物对辐射损伤小鼠的保护作用 , 并对其抗高原反应 、抗低温环境进行了实
验研究。结果表明:西藏红景天能够明显延长受照小鼠生存时间 , 并能明显提高受照小鼠脾 T淋巴细胞转化率 ,说
明其对受照小鼠免疫系统有保护作用。西藏红景天能够改善缺氧动物的有氧代谢过程 , 增强动物对缺氧的耐力 ,
并能够明显提高小鼠的耐寒能力 ,说明西藏红景天具有抗高原反应和抗低温环境的作用。本研究为西藏红景天的
开发利用提供了实验依据。
关键词 西藏红景天;抗辐射损伤;抗高原反应;抗低温环境
西藏红景天 Rhodiolatibetica(Hook.f.etThom-
as)Fu是青藏高原特有的天然药用植物 ,笔者研究
了西藏红景天提取物对辐射损伤小鼠的保护作用 ,
并对其抗高原反应 、抗低温环境进行了实验研究 ,现
报道如下。
1 材料
1.1 药品 西藏红景天药材按水醇法提取后制成
浸膏 ,再经喷雾干燥制成药粉 ,临用时配成所需的浓
度 。
1.2 实验动物 昆明种小鼠 ,体重 18 ~ 20g,雌雄
兼用 ,由广东省医学实验动物中心提供。 Wistar大
鼠 ,体重 160 ~ 220 g,雄性 ,由广东省医学实验动物
中心提供;SD大鼠 ,体重 120 ~ 140 g,雌雄兼用 ,由
广东省医学实验动物中心提供 。
1.3 试剂与仪器 RPMI-1640培养基 , Gibco公
司;小牛血清 , 杭州四季青生物工程材料研究所;
MIT、SDS, Sigma公司;PHA,上海市医学化验所;CO2
培养箱 , Napco公司;DG3022A型酶标仪 ,国营华东
电子管厂。
2 对辐射损伤小鼠的保护作用
2.1 方法
2.1.1 辐射条件:照射源为直线加速器 ,一次性全
身照射 ,剂量率 200mGy/min,靶距 1 m。
2.1.2 分组及给药方法:将小鼠随机分为生理盐
水对照组 、模型组 、西藏红景天大 、中 、小三个剂量组
(3、1.5、 0.75 g/kg)、维生素 E75 mg/kg组 ,灌胃
(ig)给药 ,连续 14天后接受一次性全身照射(生理
盐水组不接受照射)。照射剂量:平均存活时间实
验为 8Gy,淋巴细胞实验为 2.5Gy。
2.1.3 观察指标:8Gy照射后观察小鼠 30天内的
平均存活时间 ,同时密切注意小鼠的各种反应 ,如有
无惊厥 、自主活动情况等 。
2.1.4 淋巴细胞实验:2.5 Gy照射后第 3天颈椎
脱臼处死小鼠 ,按常规方法制备骨髓和脾细胞标本 ,
进行如下实验:(1)骨髓 DNA含量(μg)测定:剖取
一侧股骨 ,除净软组织 ,用 10 mlCaCl2(5 mmol/L)
将全部骨髓冲入离心管中 ,于 4℃冰箱中放置 30
min, 2500 r/min离心 15 min,弃上清 ,加入 HClO4 5
ml将沉淀物充分混合 , 95℃加热 15min,冷却 ,滤纸
过滤 ,滤液用紫外分光光度计在 268 nm处测定吸光
度 A值 ,计算每根股骨 DNA含量(DNA含量 =40×
50×A)。(2)MTT法:按常规制备脾细胞悬液 ,用
RPMI-1640培养液(含 20%小牛血清 , PHA100μg/
ml)调细胞数至 2×106 /ml,加入 96孔培养板(100
·128· 中药材第 28卷第 2期 2005年 2月
μl/孔),于 CO2培养箱中孵育 72 h,加入 MTT, 4 h
后酸化 SDS终止反应 ,用 DC3022A型酶标仪在 570
nm处测定 A值 。
2.2 结果
2.2.1 对 8Gy照射小鼠 30天内平均生存时间及
生存率的影响:结果见表 1。西藏红景天给药大 、中
剂量组能明显延长 8Gy照射小鼠 30天平均生存时
间 ,与模型组有显著性差异;维生素 E组与模型组
差异不显著(P>0.05),西藏红景天给药小剂量组
与模型组无显著差异 。提示西藏红景天能明显延长
受照小鼠的生存时间 ,提高生存率。
表 1 8Gy照射小鼠 30天内平均生存时间及生存率
组别 剂量(g/kg) 动物数(只) 存活数(只) 生存率(%) 生存时间(天)
生理盐水组 - 20 20 100 30
模型组 - 20 0 0 9.1±1.13
维生素 E组 0.075 20 1 5 13.2±2.77
西藏红景天组 0.75 20 0 0 11.8±1.98
1.5 20 1 5 17.4±2.85*
3 20 2 10 19.3±3.01**
与模型组比较 , *P<0.05, **P<0.01
2.2.2 对 2.5 Gy照射小鼠骨髓 DNA含量的影
响:见表 2。经 2.5Gy照射后 ,与生理盐水组比较 ,
模型组小鼠骨髓 DNA含量显著降低 ,与模型组比
较 ,西藏红景天大 、中剂量组骨髓 DNA含量有所提
高 ,但无显著性差异。
表 2 2.5Gy照射小鼠骨髓 DNA含量
组别 剂量(g/kg) DNA含量(μg)
生理盐水组 - 179.3±9.8
模型组 - 116.2±5.6###
维生素 E组 0.075 148.4±9.4**
西藏红景天组 0.75 116.8±6.9
1.5 132.1±8.9
3 134.4±7.3
与模型组比较 , **P<0.01;与生理盐水组比较 , ###P<0.001
表 3 2.5 Gy照射小鼠脾 T淋巴细胞转化能力
组别 剂量(g/kg) T淋巴细胞转化能力(A)
生理盐水组 - 0.318±0.13
模型组 - 0.126±0.05###
维生素 E组 0.075 0.328±0.09**
西藏红景天组 0.75 0.236±0.17
1.5 0.245±0.13*
3 0.362±0.17**
与模型组比较 , *P<0.05, **P<0.01;与生理盐水组比较 ,
###P<0.001
2.2.3 对受照小鼠淋巴细胞转化率的影响:见表
3。经 2.5 Gy照射后 ,小鼠脾 T淋巴细胞转化率明
显降低 ,与生理盐水组相比有显著性差异。维生素
E组明显提高受照小鼠脾 T淋巴细胞转化率 。西藏
红景天组三个剂量组均能提高受照小鼠脾 T淋巴
细胞转化率 ,提示西藏红景天能减轻辐射对小鼠免
疫系统的损伤 。
3 抗高原反应与低温环境的作用
3.1 各组大鼠减压低氧游泳后血乳酸含量的比
较〔1〕 取 Wistar大鼠 ,体重 160 ~ 220 g,雄性 ,共 20
只 ,随机分为西藏红景天药物组和对照组 (蒸馏
水)。灌胃给药 ,每次剂量为 0.125 g药粉 /kg,每天
2次 , 7天后按体重的 6%在其尾根部负重 ,然后置
于模拟海拔 5000m低压仓内游泳。 1h后从眼眶取
血 ,测定血乳酸含量 ,结果见表 4。游泳 1 h后 ,西藏
红景天药物组大鼠血乳酸含量明显低于对照组。说
明西藏红景天能够改善缺氧动物的有氧代谢过程 。
表 4 大鼠低氧负重游泳后血乳酸含量的比较
组别 n 血乳酸含量(mmol/L)
生理盐水组 10 20.8±1.7
西藏红景天组 10 13.9±1.6*
与生理盐水组比较 , *P<0.05
3.2 给药组与生理盐水组大鼠减压低氧后心 、肺
组织心钠素含量的比较 取 SD大鼠 ,体重 120 ~
140 g,雌雄兼用 ,共 20只 ,随机分为西藏红景天药
物组和对照组(蒸馏水)。灌胃给药 ,每次剂量为
0.125 g药粉 /kg,每天 2次 , 7天后将大鼠置于模拟
海拔 5000 m低压仓内 ,过 24 h后取出处死 ,取心 、
肺组织 ,测定心钠素(ANP)含量 。心钠素的测定采
用解放军总医院提供的 125I-ANP试剂盒 。结果见表
5。西藏红景天组大鼠心 、肺组织 ANP含量明显高
于对照组 。说明西藏红景天能够增强大鼠对缺氧的
耐力 。
表 5 大鼠心 、肺组织 ANP含量的比较
组别 ANP含量(pg/mg)心 肺
生理盐水组 249.42±70.91 413.83±69.72
西藏红景天组 510.31±63.26* 493.92±51.61*
与生理盐水组比较 , *P<0.05
3.3 抗低温环境的作用 参照文献 〔2〕方法 ,取体
重 18 ~ 22g的昆明种小鼠 80只 ,雌雄各半 ,随机分
为四组 ,每组 20只。三组灌胃给予西藏红景天药粉
0.2、2.0、4.0 g/kg,另一组灌胃给予等容量生理盐
水 ,每日给药 2次 ,连续给药 7天 ,于末次给药后 30
·129·中药材第 28卷第 2期 2005年 2月
min将小鼠放入冰箱冻格(-10℃),每隔 30min观
表 6 西藏红景天对小鼠抗低温环境的影响
组别 剂量(g/kg) n
各时段小鼠死亡数
60min 90min 120min
死亡总数 死亡率
对照组 - 20 1 15 4 20 100%
西藏红景天组 0.2 20 1 11 6 18 90%
2.0 20 1 7 5 13 65%*
4.0 20 1 4 5 10 50%*
与对照组比较 , *P<0.05
察一次 ,记录各组小鼠死亡数 ,结果见表 6。说明西
藏红景天可明显提高小鼠的耐寒能力。
参 考 文 献
1 尹昭云 ,等 .高能合剂提高高原劳动能力的效果研究 .
航天医学与医学工程 , 1991, (4)∶145
2 孙晓波 , 等 .鹿茸精强壮作用的研究 .中药药理与临
床 , 1987, 3(3)∶11
(2004-11-26收稿)
竹叶提取物对大鼠血液流变学的影响
付晓春 1 王敏伟1 李少鹏2 李艳春 1
(1.沈阳药科大学药学院 ,沈阳 110016;2.中国医科大学第二临床医院神经外科 ,沈阳 110016)
摘要 60只大鼠随机分为 6组 , 皮下注射异丙肾上腺素 , 建立血瘀模型 , 静脉给予不同剂量的竹叶提取物(15
mg/kg、 30 mg/kg和 60 mg/kg),用 MVIS-2000全自动血液流变学分析系统测定全血粘度(BV)、血浆粘度(PV)、纤
维蛋白原(FIB)、血细胞比容积(HCT)、血沉(ESR)、血沉方程 k(TK)、红细胞电泳时间(t);小鼠 60只随机分为 6
组 , 静脉给予不同剂量的竹叶提取物(22.5 mg/kg, 45mg/kg, 90 mg/kg)后小鼠眼眶静脉采血取血清 ,测定血清胆固
醇。结果表明竹叶提取物能显著降低血瘀模型大鼠全血粘度 ,降低血浆粘度 , 降低纤维蛋白原的含量 , 并能显著降
低红细胞比容积 , 减慢血沉速度 , 降低血沉方程 k值(TK), 显著加快红细胞电泳时间;竹叶提取物能明显降低高胆
固醇血症小鼠的血清胆固醇。
关键词 竹叶提取物;红细胞电泳时间;血液流变学;血清胆固醇
竹叶作为传统中药在中国已有上千年的历史 。
竹叶的特点是无味 ,微酸 。竹叶具有抗自由基的活
性并与银杏叶具有可比性 ,银杏叶是一类天然的抗
氧化剂和自由基清除剂〔1〕。据 《药品化义 》中记载 ,
竹叶治温以清 ,专清心气 ,味淡利窍 ,使心经热血分
解 。目前竹叶已用作心脑血管疾病的保健品 ,本文
从对血液流变学影响方面探讨竹叶提取物的活血化
瘀作用 ,为其在心血管方面的临床应用提供基础实
验研究依据 。
1 实验材料
1.1 动物 昆明种小鼠 , 18 ~ 22 g, SD大鼠 280 ~
300g,以上动物均由沈阳药科大学实验动物中心提
供 ,合格证号:辽实动字 033号。
1.2 药品与试剂 竹叶提取物由杭州中美华东制
药公司提供(总黄酮含量为 88.6%),批号 200003,
用时以生理盐水配成相应的浓度;香丹注射液 , 10
ml/支 ,由福建省三爱药业股份有限公司提供 ,批号
001107;胆固醇 ,纯品 ,上海市食品公司制药厂生产 ,
批号:010104;去氧胆酸钠 ,含量 97%, Fluka进口分
装 ,上海化学试剂采购供应站提供;甲硫氧嘧啶 ,上
海市食品公司制药厂生产。血清总胆固醇试剂盒 ,
东欧生物工程公司生产 ,批号:010506;盐酸肾上腺
素注射液 , 上海禾丰制药有限公司生产 , 批号:
020428;肝素注射液 ,上海生物化学制药生产 ,批号:
000912。
1.3 高脂饲料的组成 胆固醇 5 g,去氧胆酸钠
1.0 g,甲硫氧嘧啶 0.5 g,猪油 10 g,吐温 -80和丙二
醇各 10ml助溶 ,加水 50 ml装入瓶内备用 。
1.4 实验仪器 MVIS-2000全自动血液变分析系
统(重庆天海医疗设置研究所)。
2 实验方法
2.1 竹叶提取物对急性血瘀模型大鼠血液流变学
的影响 〔2、3〕 随机将大鼠(280 ~ 300g)分为 6组 ,每
组 10只。皮下注射体积分数为 0.1%肾上腺素
0.08 ml/kg共 2次 , 2次间隔 4h,在 2次之间(前后
各间隔 2 h)将大鼠浸入冰水中 5min,处置后停食 ,
次晨断头取血检验 ,建立血瘀模型 。静脉给予不同
剂量的竹叶提取物(15 mg/kg、30 mg/kg和 60 mg/
kg)后 ,造模方法同血瘀模型组 ,用 MVIS-2000全自
动血液流变学分析系统测定全血粘度(BV)、血浆粘
度(PV)、纤维蛋白原(FIB)、血细胞比容积(HCT)、
血沉(ESR)、血沉方程 k(TK)、红细胞电泳时间
·130· 中药材第 28卷第 2期 2005年 2月