全 文 ：【论著】
苞叶雪莲水提物对小鼠辐射防护作用研究
徐进彦 1 ,李文辉1 ,刘建波 1 ,王曙光 2
中图分类号:R818　文献标识码:A　文章编号:1004-714X(2008)04-0403-02
　　【摘要】　目的　初步探讨苞叶雪莲水提物对小鼠辐射损伤的防护作用 。方法　以辐射损伤小鼠作为研究对象 ,
分别以不同剂量苞叶雪莲水提物予照射 +给药组灌胃 ,而单纯照射组(IR组)灌相应量的生理盐水 , 灌胃 5d后接受
6Gy的 X射线一次全身照射 ,然后再灌胃 5d并继续观察 ,至第 18天 , 测定体重 、静脉血中的 RBC、WBC、PLT、Hb含量 、
骨髓有核细胞数 、骨髓 DNA含量(A值)、脾重量 、脾指数。结果　与 IR组比较 , 各给药 +照射组小鼠的体重 、WBC、
PLT、骨髓 DNA含量(A值)、骨髓有核细胞数 、脾重量 、脾指数均明显升高 ,存在显著性统计学差异 , P<0.01(血小板
的 IR+LD组 、脾重量 、脾指数 P<0.05), 各组均以 IR+HD组升高最为明显;各给药 +照射组小鼠的 RBC、Hb含量与
IR组比较无统计学差异 , P>0.05。结论　苞叶雪莲水提物中的活性成分对小鼠的造血系统有明显的辐射防护作用 ,
并能刺激小鼠脾细胞增殖 , 改善免疫功能。外周血 RBC、Hb含量各照射组差异不明显 ,这可能与 RBC、Hb代谢周期较
长 , 造血组织对 RBC释放 、Hb合成延迟有关。
【关键词】　苞叶雪莲水提物;辐射损伤;防护作用
StudyoftheRadioprotectiveEfectsoftheAqueousExtractofS.obval-lataDC.EdgewonMicefromRadiationInjury.
XUJin-yan, LIWen-hui, LIUJian-bo, etal.RadiationOncologyCenter, TheThirdAffiliatedHospitalofKunming
MedicalColege, Kunming650031, China.
【Abstract】　Objective　TopreliminarilyexploretheradioprotectiveeffectsoftheaqueousextractofS.obval-lataDC.
Edgewonmicefromradiationinjury.Methods　micefromradiationinjury, astargetoftheresearch, arebeenintragastricly
administratingandreceivedifferentdosesofaqueousextractofS.obval-lataDC.EdgewinIR+medicationgroups, andcorre-
spondingamountofnormalandsalineforIRgroup.After5 days, micearebeenreceiveatotalbodyirradiationatadoesof
6GyX-ray.Thenrepeatedintragastricadministratingwasgivenfor5daysandobserved.Onthe18thday, thebodyweights
tomeasure, RBC、WBC、PLT、Hbofvenousblood, theboneDNAcontents(Avalue)andmarrownucleatedcelpopulation, the
spleenweights.Results　InIR+medicationgroups, IRgroupcomparedwiththebodyweights, WBC、PLT, thebonemarrow
DNAcontents(Avalue)andnucleatedcellpopulationofmiceriseobviously, thereweresignificantstatisticaldifferencesamong
them, P<0.01(PLTofIR+LDgroup、thespleenweights、thespleenindex, P<0.05), Thedifferencesaremoreobviousinthe
IR+HDgroup.However, TherearenostatisticsdifferencetothecontentsofRBC、Hbofperipheralbloodinalirradiation
groups, P>0.05.Conclusions　TheactivecomponentsoftheaqueousextractofS.obval-lataDC.Edgewexpressouttheobvi-
ousradioprotectiveeffectsforhemopoieticsystemofmiceandcanstimulateproliferationofthespleencel, improveimmune
functionofmice.NoobviousdifferencetothecontentsofRBC、Hbofperipheralbloodinalirradiationgroupsispossibllyrelat-
edwiththelongmetabolismcycleofRBC、HbandthedelayofhematopoietictissuedeliveryRBCandHbsynthesis.
【Keywords】　TheAqueousExtractofS.obval-lataDC.Edgew;RadiationInjury;ProtectiveEffects
　　苞叶雪莲(S.obval-lataDC.Edgew)是菊科植物凤毛菊
属(SaussureaDC)、雪莲亚属植物 ,为生长在海拔 3 700 ～ 4 800
m高山草甸 、稀疏灌木丛地的多年生草本。其生存环境具有低
温 、风大 、氧气稀薄 、紫外辐射强等特点 , 多产于青海 、新疆 、西
藏 、四川西部 、云南西北部 [ 1] 。苞叶雪莲药性苦寒 , 具有消炎
镇痛 、清热解毒 、舒经活络等作用。还有研究表明 [ 2, 3] ,其提取
基金项目:云南省自然科学基金项目(编号:2003COOOR)作者单位:1　昆明医学院第三附属医院,云南　昆明　 650031;
　　 2　云南省中医中药研究所作者简介:徐进彦(1970 ～ ),男 , 湖北通城人 ,硕士 ,主治医师;研究方
向:肿瘤放射治疗及肿瘤防护剂。
通讯作者:李文辉
物中的活性成分能促进细胞超氧化物歧化酶活性 ,对抗氧自由
基的损害。笔者通过辐射损伤小鼠来初步探讨苞叶雪莲水提
物的辐射防护作用。
1　材料与方法
1.1　实验动物　昆明种小鼠 50只 , 雄性 、6 ～ 8周龄 、体重(20
±2)g,由昆明医学院动物实验部提供。
1.2　实验药物　苞叶雪莲(产地西藏)由云南省中医中药研
究所提供 , 在云南大学天然药物教研室制成含生药浓度为 0.3
g/ml的水提液 , 4℃冰箱保存待用。
1.3　主要实验试剂与仪器　RPMI-1640(GIBCO公司生产 ,
磺酸 , VA等 ,因此在以后的研究中还需进一步摸索这些微量营
养素的配伍组方 , 以寻找到具有更好的抗微波所致的过氧化损
伤作用的微量营养素干预方法。
参考文献:
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(收稿日期:2008-05-26)
·403·　中国辐射卫生 2008年 12月第 17卷第 4期　ChinJRadiolHealth, Dec.2008, Vol17, No4DOI :10.13491/j.cnki.issn.1004-714x.2008.04.053
批号:1296119)、高氯酸 、苦味酸 、氯化钙 、冰醋酸 、福尔马林 、西
门子直线加速器 、离心机 、普通光学显微镜 、血细胞计数仪 、分
光光度计 、电子天平 、烘箱等。
1.4　实验方法
1.4.1　实验动物分组　将 50只小鼠按体重分层随机抽样分
成 5组 , 即:正常对照组(control组)、单纯照射组(IR组)、照射
+高剂量给药组(IR+HD组)、照射 +中剂量给药组(IR+MD
组)、照射 +低剂量给药组(IR+LD组), 每组 10只。
1.4.2　给药剂量及方式　按小鼠体重将实验药物分别给予 IR
+HD组 3g/(kg.d)(用生理盐水稀释为 0.2ml, 灌胃给药 , 下
同)、IR+MD组 1.5g/(kg.d)、IR+LD组 0.75g/(kg.d), Control
组和 IR组分别灌 0.2ml的生理盐水 ,均连续灌胃 5d;第 6d予各
照射组照射后 , 再连续灌胃 5d(方法同前),随后观察至第 18天。
1.4.3　辐射条件及剂量　云南省肿瘤医院放疗中心 , 直线加
速器 6MV-X射线给予各照射组小鼠一次全身照射 , 照射剂
量:6Gy, 剂量率:10cGy/s。
1.5　观察指标　实验第 18天 , 将所有小鼠称重后股静脉取
血 , 并颈椎脱臼处死小鼠 , 取股骨骨髓及脾脏 , 测定体重 、静血
中的 RBC、WBC、PLT、Hb、骨髓有核细胞数 、骨髓 DNA含量(A
值)(按公式 DNA=40×50×A计算 DNA量)、脾重量 、脾指数
(脾指数 =脾脏重量 /小鼠体重)。
1.6　统计学处理　采用统计软件 SPSS11.5对数据进行方差
分析 , 检验水准 α=0.05。
2　结果
如表 1、表 2、表 3所示 , 与 control组比较 , IR组的体重 、静
脉血中 RBC、WBC、PLT、Hb含量 、骨髓 DNA含量(A值)、骨髓
有核细胞数 、脾重量 、脾指数均明显下降 ,存在统计学差异 , P<
0.01(其中脾重量 、脾指数 P<0.05)。
表 1　用药并照射后 12d小鼠各观察指标的变化(x±s)
组别 例数(n)
体重
(g)
红细
(×1012/L)
白细胞
(×109/L)
Control 10 25.6300 ±2.0365　 10.5945±0.4516 9.6727±1.6835　
IR 10 20.6419 ±1.80261) 　7.6491±0.73481) 0.4400 ±0.18381)
IR+LD 10 22.7164 ±2.67492) 7.7280±0.5513 1.0170 ±0.81732)
IR+MD 10 23.1400 ±1.84452) 7.6900±0.7298 1.0286 ±0.57072)
IR+HD 10 23.9033 ±1.95772) 7.7240±0.5655 1.1556 ±0.54572)
注:1)与 Control组比较 P<0.01;2)与 IR比较 P<0.01。
表 2　用药并照射后 12d小鼠各观察指标的变化(x±s)
组别 例数(n)
血小板
(×109 /L)
血红蛋白
(g/L)
骨髓 DNA
含量(A值)
Control 10 1 178.7273±57.4072 　180.3636±8.4294 1.8348±0.1220　
IR 10 231.0000 ±22.35841)　 131.8333±11.73671)1.2971 ±0.15381)
IR+LD 10 325.2000 ±27.60562) 131.2000±12.2824 1.6726 ±0.20803)
IR+MD 10 339.7500 ±35.94013) 132.2857 ±8.6740 1.7334 ±0.23643)
IR+HD 10 340.7500 ±34.60623) 133.4200±10.2067 1.7553 ±0.19073)
注:1)与 Control组比较 P<0.01;2)与 IR组比较 P<0.05;)3)与 IR组
比较 P<0.01。
表 3　用药并照射后 12d小鼠各观察指标的变化(x±s)
组别 例数(n)
骨髓有核细
胞数(个)
脾重量
(×10-3g)
脾指数
(×10-3)
Control 10 58.3333 ±5.5041　 38.4200±4.6724　 1.5990±0.0234　
IR 10 26.8333 ±4.22581) 27.1300±2.27312) 1.3144 ±0.04132)
IR+LD 10 47.6667 ±3.81653) 36.4000±4.65924) 1.6021 ±0.02114)
IR+MD 10 52.2222 ±4.53153) 38.3600±3.02744) 1.6577 ±0.03744)
IR+HD 10 54.6000 ±4.78433) 39.7300±3.61234) 1.6623 ±0.04524)
注:1)与 Control组比较 P<0.01;2)与 Control组比较 P<0.05;3)与 IR
组比较 P<0.05;4)R组比较 P<0.01。
与 IR组比较 ,各给药 +照射组的体重 、WBC、PLT、骨髓DNA
含量(A值)、骨髓有核细胞数 、脾重量 、脾指数均明显升高 , 存在
统计学差异, P<0.01(其中血小板的 IR+LD组、脾重量、脾指数
P<0.05), 各组均以 IR+HD组升高最为明显;各给药 +照射组
RBC、Hb含量与 IR组比较无统计学差异, P>0.05。
3　讨论
电离辐射对组织细胞的损伤很大程度上依赖水辐射产生
的大量自由基介导。自由基包括超氧阴离子自由基(O2 -)和
羟自由基(·OH)及有机自由基(R· , RO· , ROO·)等 , 它们有
很强的生物活性。适量自由基对细胞的分裂 、生长起积极作
用 ,但过剩则会损伤细胞膜 ,使 DNA断裂、蛋白质变性 、酶失活 ,
造成细胞功能丧失 、周期紊乱和遗传的不稳定性 , 甚至直接引起
细胞解体和死亡。还有一些含氧产物如单线态氧 、过氧化氢
(H2 02)等 ,它们虽不属自由基 ,但含有活性氧 ,其化学性质较基
态氧活泼 ,可在自由基反应中产生 ,同时还可直接或间接触发自
由基反应。它们和自由基一样, 当产生过剩时会损伤机体。
3.1　对细胞的损伤
3.1.1　对 DNA的损伤　DNA是生命信息的载体 ,是细胞中最
重要的生物大分子。自由基对 DNA的损伤包括碱基 、核糖 、磷
酸基损伤 ,最严重者为直接引起 DNA断裂。
3.1.2　对生物膜的损伤　生物膜的损伤主要是通过氧自由基
的脂质过氧化作用造成 , 其损伤途径为:氧自由基 +细胞膜脂
质※脂质过氧化反应※过氧化脂质※丙二醛 +细胞成分※脂
褐质。在有氧条件下 ,辐射产生的氧自由基和活性氧可通过脂
质过氧化作用造成生物膜中饱和与不饱和脂肪酸的比例失衡 ,
改变膜结构的刚柔特性 ,增加膜的通透性 ,甚至发生崩解。
3.1.3　对蛋白质的损伤　自由基可以通过脂质过氧化产物醛
类物质造成蛋白质中巯基和氨基的氧化损伤 ,此种应看作自由
基间接作用的结果。同时自由基也可直接造成蛋白质的损伤 ,
表现在一级结构上肽链断裂 、氨基酸组成改变 , 另外还有空间
构象上的改变;
3.1.4　致死效应　自由基致 DNA、蛋白质(酶)的损伤固定 ,干
扰了 DNA复制 、转录和修复是细胞死亡主要原因。 另外自由
基还有致突 、致癌等远期效应。
3.2　药物对辐射损伤的防护作用　主要是通过清除辐射产生
的大量自由基来防止或减轻其对重要生物大分子(如 DNA、蛋
白质)和细胞膜的攻击。
3.2.1　由基的清除或钝化　辐射防护药物通过其化合物上的氢
转移中和自由基。研究表明 ,自由基损伤中以氢氧自由基(·OH)
的危害最大,所以辐射防护药物的作用与 ·OH清除能力成正比。
3.2.2　氧化应激的防御　大量自由基使机体内氧化和抗氧化
的平衡失衡而使氧化作用占优势 , 即氧化应激。辐射防护药物
可刺激机体产生多种酶 , 如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物
酶(GSH)、过氧化氢酶等 ,来对体内的氧化应激进行 “脱毒”, 从
而得到保护作用。
3.2.3　远期效应的防止或减轻　通过药物对辐射引起的癌基
因和抑癌基因进行调控 ,使受损 DNA得到修复 , 通过诱导细胞
的凋亡 ,在一定程度上减少 DNA突变和细胞癌变的发生。
苞叶雪莲作为常用的中药材 , 急 、慢性毒理试验证明 , 其药
用安全可靠 ,无任何副作用 [ 4] 。现代药理研究进一步发现 [ 5 , 6] ,
苞叶雪莲提取物中含有丰富的黄酮类 、三萜类物质以及生物
碱 、内酯甾醇 、多糖等多种成分 , 其主要次生代谢物包括黄酮 、
粗毛豚草素 、山柰素 、金合欢素 、槲皮素 、皂甙 、芦丁等多种活性
物质。这些活性物质中大部分具有清除自由基和抗氧化作
用 [ 7] 。其中黄酮能提高超氧化物歧化酶(SOD)活性 ,降低细胞
脂质过氧化物的生成 ,对羟自由基所致的多种细胞损伤都有不
同程度的保护作用 [ 8];槲皮素有清除 · O2、·OH和单线态氧等
活性氧的能力 ,能有效保护生物膜免受自由基的损害 [ 9];皂甙
能抑制钙通道 , 显著抑制黄嘌呤――次黄嘌呤氧化酶所致的自
由基增多 ,还能明显抑制生物膜的脂质过氧化 , 并提高 SOD和
谷胱苷肽过氧化物酶活性 [ 10];多糖 、粗毛豚草素和金合欢素均
具有清除自由基和抗氧化的能力 [ 11] 。此外 , 研究表明 [ 12] , 苞叶
·404· 中国辐射卫生 2008年 12月第 17卷第 4期　ChinJRadiolHealth, Dec.2008, Vol17, No4　
【论著】
E838提高肿瘤化疗药物疗效及抗免疫抑制作用的研究
王月英 ,李德冠 ,吴红英 ,刘　强 ,路　璐 ,王　勇 ,孟爱民 ,王彦 ,王汝勤 ,张良安 ,史　元
中图分类号:R817.1　文献标识码:A　文章编号:1004-714X(2008)04-0405-02
　　【摘要】　目的　观察 E838联合环磷酰胺(CTX)抗淋巴瘤(LM)及其对 CTX的减毒作用。方法　建立 LM荷瘤
小鼠模型 , 实验分对照组 、CTX、不同浓度 E838组 、不同浓度 E838+CTX组 , 比较各组间的差别。结果　所有 E838治
疗组瘤重明显小于对照组 , 联合用药组各项实验指标均好于 CTX组。结论　E838对 LM有抑制作用 , 并对 CTX有增
效及提高机体免疫作用。
【关键词】　E838;抗肿瘤;环磷酰胺;协同作用;IRM-2小鼠
StudiesofReducingPoisonandIncreasingEfectsofE838onImmuneFunctionofTumor-BearingMice.WANGYue-
ying, LIDe-guan, WUHong-ying, etal.InstituteofRadiationMedicine, ChineseAcademyofMedicalSciences, Tian-
jinKeylaboratoryofMolecularNuclearMedicine, Tianjin300192 China.
【Abstract】　Objective　 ToobservetheinhibitoryefectofE838 combinedwithcyclophosvnamide(CTX)onlympho-
ma(LM), andtheE838reducingpoisoninfluencetoCTX.Methods　 themicewithLMwereseparatedinto8 groupstreated
withcontrol, differentE838 concentration, diferentE838 concentrationcombinedwithCTX, CTX.Thetherapyefectsin
eachgroupwerecompared.Results　 ThetumorweightsinallE838treatedgroupsweresignificantlylowerthanthatofcontrol
group.AlindexesincombinationgroupswerebeterCTXgroup.Conclusion　 E838 showedinhibitoryeffectsonLM, could
increaseCTXtherapyefectsandelevatemiceimmunesystemfunction.
【Keywords】　E838;TumorinhibitoryEfects;CTX;SynergisticEfects;IRM-2 Mouse
　　恶性肿瘤的发生 、发展与机体的免疫功能降低密切相关。
目前 , 化疗仍是对恶性肿瘤较为有效而又普遍使用的一种治疗
方法。然而众多的抗肿瘤化学药物也是免疫系统的抑制剂。
最常见的不良反应就是剂量依赖性的骨髓抑制。 E838是一种
新型辐射防护剂 , 在以往我们进行的药效学实验已证实:E838
基金项目:天津市自然科学重点基金项目(043802411)作者单位:中国医学科学院放射医学研究所 ,天津市分子核医学重点实
验室 ,天津　300192)
作者简介:王月英(1957 ～ ),女 , 副研究员 ,研究方向:放射生物学 、实验动物学。
通讯作者:孟爱民 ,研究员 ,博士生导师。
具有放射防护效价高 [ 1] 、毒副作用小的特点 , 能显著提高受照
射小鼠 30d存活率和保护指数 [ 2] ,具有提升白细胞作用 , 本试
验按照国家一类新药报批要求 [ 3] , 利用 IRM-2荷瘤小鼠作为
肿瘤模型 , 进一步观察 E838单独用药及联合化疗药物 CTX对
荷瘤小鼠的抑瘤增效作用及对免疫 、造血功能的影响 , 为 E838
在肿瘤化疗中的作用提供实验依据。
1　材料和方法
1.1　实验材料　动物及瘤株 ,由我所自己培育的 IRM-2近
交系小鼠 , 雌雄兼用 ,体重为 26～ 27g。细胞株为 IRM-2小鼠
自发淋巴瘤(LM)。
雪莲还含有丰富的 K、Zn、Cu元素 , 其中尤以 Zn、Cu远高于一
般植物性食物。 Zn、Cu是酶蛋白空间构成的重要微量元素 , 对
机体内 DNA、蛋白质损伤的修复具有重要作用。 K参与细胞静
息电位的维持 , 对生物膜脂质过氧化损害具有稳定作用。
本实验以辐射高度敏感的造血系统(骨髓)和免疫系统
(脾脏)作为主要研究对象 , 观察苞叶雪莲水提物对辐射损伤
小鼠的防护作用。结果显示各给药组小鼠的体重 、外周血象中
的白细胞和血小板 、骨髓 DNA含量(A值)、骨髓有核细胞数 、
脾重量 、脾指数等均明显高于单纯照射组 , 其中以高剂量给药
组升高最为明显 , 并存在显著性统计学差异。这表明苞叶雪莲
水提物中的活性成分能减轻辐射对小鼠生长发育的影响 ,对小
鼠的造血系统有明显的辐射防护作用 ,并能刺激小鼠脾细胞增
殖 , 改善免疫功能。外周血 RBC、Hb含量各照射组差异不明
显 , 这可能与 RBC、Hb代谢周期较长 , 造血组织对 RBC释放 、
Hb合成延迟有关。
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·405·　中国辐射卫生 2008年 12月第 17卷第 4期　ChinJRadiolHealth, Dec.2008, Vol17, No4