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正交试验法优选辣木叶总皂苷的提取工艺



全 文 :《现代食品科技》 Modern Food Science and Technology Vol.21 No.2(总 84)
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中图分类号:TS2;文献标识码:B;文章篇号:1007-2764(2005)02-00106-038

正交试验法优选辣木叶总皂苷的提取工艺

董雪丽,周才琼
(西南农业大学食品科学学院,重庆 400716)
摘要:目的 优选辣木叶总皂苷的提取工艺。方法 采用正交试验法,以辣木总皂苷的含量和提取率为指标进行试验。结果 辣
木总皂苷的最佳提取工艺水平为:50%乙醇,提取3次,24h/次。结论 此法简单、易行,可提高辣木总皂苷的提取率。
关键词:辣木;总皂苷;正交试验;提取工艺
Extracting Procedure of total saponins from Moringa Oleifera
Dong Xue-li, Zhou Cai-qiong
(Southwest Agricultural University ,Chongqing 400716,China)
Abstract:Objective:Select the optimal extracting produce of total saponins from Moringa Oleifera. Methods:Select the contents and
extraction efficiency of total saponins from Moringa Oleifera by orthogonal test. Results:The best extracting procedure is 24hr/1time, 3 time
by 50% alcohol. Conclusion:The optimal extraction process is simple and repeatable; it can increase the extraction efficiency of total saponins
from Moringa Oleifera.
Keywords:Moringa Oleifera; Total saponins; Orthogonal test; Extraction process

辣木(Moringa Oleifera)属辣木科、辣木属,起
源于印度北部的亚喜马拉雅山地带[1]。辣木不仅可以
食用,在热带、亚热带地区还用作植物药而备受重视。
据报道皂苷是辣木叶中最主要的活性成分[2],目前尚
未发现有对辣木皂苷深入研究的报道。为合理开发辣
木,本文采用正交试验法用乙醇进行辣木提取工艺研
究[3],并对辣木总皂苷采用正丁醇萃取、乙醚/丙酮萃
取进行分离、纯化。
1 仪器与药品
SHIMADZU 高效液相色谱仪(日本岛津公司);
辣木采自重庆长寿;薯蓣皂苷标准品(中国药品生物
制品检定所);其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 提取工艺
取辣木叶干粉 15g,用乙醇回流提取,过滤,滤
液减压回收乙醇,减压干燥得干膏。
2.2 正交试验
表1 因素水平表
水平 乙醇浓度A(%) 提取时间 B(h) 提取次数 C
1 50 2 1
2 70 12 2
3 95 24 3
如表 1,选取乙醇浓度(A)、提取时间(B)、提
取次数(C)3 个试验因素按 L9(34)进行试验,结果
见表 2。
2.3 辣木总皂苷的含量测定
2.3.1 色谱条件
色谱柱 HiQ sil C18(5µm,250mm×4.6mm),流动
相为甲醇 - 水 (50 : 50),检测波长 211nm, 流速
1.0mL·min-1,柱温 40℃。
2.3.2 对照溶液制备
精密称取薯蓣皂苷 12.5mg,加甲醇溶解定容至
25ml,制成每 1ml 含薯蓣皂苷 0.5mg 的标准溶液。
2.3.3 标准曲线制备
分别精密吸取5,10,15,20,25µL进样,每点
重复3次,按上述色谱条件测定,以峰面积为纵坐标,
以薯蓣皂苷元的量为横坐标,绘制标准曲线,得回归方
程:Y=115619X-285191,r=0.9994,结果表明,辣木皂苷
在 2.5-12.6μg 内线性关系良好。
2.3.4 干膏的分离、纯化
取 15g 辣木叶干粉的干膏,加入蒸馏水溶解,用
等体积的饱和正丁醇萃取 3 次并将萃取液减压浓缩;
浓缩后的浸膏用蒸馏水溶解后用等体积的乙醚/丙酮
(1:1)萃取 3 次,并对萃取液进行减压浓缩即得浸膏。
2.3.5 浸膏中的总皂苷含量测定
方法按对照液。结果如表 2。 (下转第93页)
DOI:10.13982/j.mfst.1673-9078.2005.02.038
《现代食品科技》 Modern Food Science and Technology Vol.21 No.2(总 84)
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为: A3 B2 C1 D2;以总蒽醌含量方面则为:A1 B1 C1 D3。
综合各方面分析,本试验的最优工艺条件为 A1B2C1D2,
即干决明子量为 40g,干山楂叶量为 15g,琼脂量为
2.2%,魔芋胶量为 0.8%。组合最佳方案见表 3。
2.7 产品质量指标
感观指标:具决明子山楂叶提取液特有的淡黄色、
透明有光泽;表面平整光滑、糖体饱满、块形完整、
大小一致;无气泡、体质软韧、富有弹性、有韧劲而
不粘牙、甜度适中;具有决明子山楂叶特有的清香。
理化指标:水分含量 12%-18%,还原糖含量 35%~
40%,无肉眼可见杂质。
微生物指标:大肠杆菌 MPN/100g ≤30,细菌
总数(个/g)≤500,致病菌不得检出。
3 结果与讨论
3.1 在软糖生产中,可将琼脂与水预先浸泡,然后加
热到完全溶化。用琼脂生产的软糖特点是较脆、入口
易破,需复配其它胶类一起使用。而魔芋胶是一种优
良的水溶性膳食纤维,其分子结构在 pH3-9 之间黏稠
度比较稳定,是一种十分优良的增稠剂,这是由于魔
芋胶甘糖相对分子质量大、水合力强和不带电荷等特
性决定的,具有独特的胶凝性能[8]。在软糖生产中,
添加魔芋胶有利于软糖的凝结、成型,改善软糖的组
织结构,使软糖具有独特良好的口感和风味及保健功
能作用。
3.2 pH 值是软糖形成的关键,不适当的 PH 值不但
不利于凝胶的形成,还会导致胶体和蔗糖的分解。因
此,我们在设计配方和制定操作程序时,要注意这酸
度对凝胶的影响。过低的 pH 值会引起砂糖过度转化,
当 pH 值太高时,以要防止糖焦化和胶体降解,胶体
降解以后就会影响胶体的添加量,产生胶体用量不足,
影响产量质量。
参考文献
[1] 何菊英,刘松青.决明子的药理作用及其临床应用[J].药学
实践杂志,2001,19(2):111-113.
[2] 杨怀礼、张帮启、张明. 决明子有效成分和临床应用的初
步研究[J]. 基层中药杂志,2002,(04):45-46.
[3] 刘训红、陶春洪.决明子及其炮制品中营养成分的分析[J].
中国中药杂志,1993,18(5):283.
[4] 王立娟、张世润. 山楂叶中黄酮类化合物及提取方法[J].
中国林副特产, 2000,2(1):47-48.
[5] 万成志.山楂叶提取黄酮技术[J].应用科技,1999,11:5.
[6] 陈发奎.常用中草药有效成分含量测定[M].北京:人民卫生
出版社.1997.264-265.
[7] 杨国义.食品安全与卫生强制性标准实用手册[M].西宁:青
海人民出版社,2002.529-531.
[8] 詹晓北.食用胶的生产、性能与应用[J].中国轻工业出版社,
2003 .173-179、245-255.


(上接第106页)
表2 正交设计及数据处理表(n=3)
实验号 A B C 总皂苷(g) 提取率(%)
1 1 1 1 1.594 10.63
2 1 2 2 1.241 8.27
3 1 3 3 2.365 15.77
4 2 1 2 0.759 5.06
5 2 2 3 0.785 5.23
6 2 3 1 0.635 4.23
7 3 1 3 1.529 10.19
8 3 2 1 0.514 3.43
9 3 3 2 0.893 5.95
K1 1.733 1.294 0.914 1.091
K2 0.726 0.847 0.964 1.135
K3 0.979 1.298 1.560 1.213


苷 R 1.007 0.451 0.646 0.122

K1 11.56 8.63 6.10 7.27
K2 4.84 5.64 6.43 7.56
K3 6.52 8.65 10.40 8.09



R 6.72 3.01 3.97 0.82

3 讨论
3.1 表 2 结果表明辣木叶干粉用乙醇回流提取,乙醇浓
度、提取次数对辣木总皂苷有显著影响,而提取时间影响
不大,各因素对测定结果表明的影响次序为 A>C>B,优选
工艺为A1B3C3,即 50%乙醇,提取 3 次,每次 24h。
3.2 为考察最佳工艺的合理性,在重复验证实验中,增
加一组提取4次,每次 24h 的比较试验,结果发现与提
取3次,每次 24h 相比,提取率略有提高,但无统计学
意义。从节省乙醇消耗、避免提取液体积过大而后处理
困难、缩短工时、提高效率考虑,选用提取3次,每次
24h。
参考文献
[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会. 中国药典. 北京:化学
工业出版社,1999,34 卷:6-8.
[2] H. P. S. Makkar and K. Becker. Nutrients and antiquality factors
in different morphological parts of the Moringa oleifera tree.
Journal of Agricultural Science. Cambridge (1997).128.311-322
[3] 桂双英,周亚球. 正交试验法优选人参总皂苷的提取工艺.
时珍国医国药,2003,14(10):591-592