全 文 ：2016 年 03 月第 36 卷第 2 期
Mar． 2016 Vol． 36 No． 2
现 代 中 医 药
Modern Traditional Chinese Medicine ·85·
菘蓝不同部位鲜品和干品抗菌
效价的对比研究
*
刘 清 徐宗军 仇 苗 冯光利 杨伟晗 寇 静
(陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046)
摘 要:目的 研究菘蓝不同部位干品和鲜品提取物的抑菌作用，为菘蓝的进一步开发利用提供理论依据。
方法 采用水提醇沉提取精制，活性炭脱色;采用试管二倍稀释法统计最小抑菌浓度(MIC)采用平板二倍稀释法
统计最小杀菌浓度(MBC)。结果 板蓝根干燥药材和新鲜药材对大肠杆菌 MIC 分别为 0． 25 g /mL、0． 5 g /mL，
MBC分别为 1． 0 g /mL、2． 0 g /mL;对金黄色葡萄球菌 MIC 分别为 0． 25 g /mL、0． 25 g /mL ，MBC = 1． 0 g /mL、
2． 0 g /mL;对绿脓杆菌 MIC分别为 0． 50 g /mL、1． 0 g /mL ，MBC =1 g /mL，2． 0 g /mL。大青叶干燥药材和新鲜药材
对大肠杆菌 MIC分别为 0． 5 g /mL、4． 0 g /mL;对金黄色葡萄球菌 MIC为 0． 5 g /mL、2． 0 g /mL;对绿脓杆菌 MIC为
0． 5 g /mL、2． 0 g /mL;大青叶干品和鲜品提取液实验浓度未测出上述三种细菌的 MBC，仅呈现出一定的抗菌趋
势。结论 菘蓝根和叶对三种菌株均有一定的抑制或杀灭作用，按照干品和鲜品质量换算，抗菌效价鲜品强于干
品;入药部位比较，板蓝根优于大青叶。
关键词:菘蓝;二倍稀释法;MIC;MBC
中图分类号:Ｒ917 文献标识码:A 文章编号:1672 － 0571(2016)02 － 0085 － 03
DOI:10． 13424 / j． cnki． mtcm． 2016． 02． 030
菘蓝(Isatis indigotica Fort．)为十字花科植物，
根即板蓝根，叶为大青叶，具有清热解毒，凉血利
咽和消斑之功效，用于温病高热，发热咽痛，神昏，
发斑发疹，痄腮，喉痹，烂喉丹痧，大头瘟疫，丹毒，
痈肿等［1］。另据文献报道，中药材的清热解毒功
效主要集中于其有效成份的抗内毒素作用和抗病
原微生物作用，其中板蓝根、大青叶对金黄色葡萄
球菌等菌株具有较强的抑制作用，具有广谱抗菌
作用，其作用主要是通过多种有效成分、多环节、
多途径地发挥协同作用而表现出较强的抗菌功
效，临床应用价值较强［2］。
另外，鲜药材作为物质基础保存最为完整的
原生药材在国内外均有悠久的应用历史。但是随
着中药商品化流通，为了便于运输储存及工业化
大生产，几乎所有中药材都采取干燥药材入药，不
可避免地导致中药材在提取加工过程中有效成分
流失或结构变化，中药药性和药理活性出现差异。
基于此，本研究分别对板蓝根和大青叶的鲜药材
与干燥药材进行抗菌效价对比研究，为菘蓝鲜药
材的开发研究和临床应用及产业化提供科学
依据。
1 材料与仪器
1． 1 材料 菘蓝新鲜药材，2014 年 5 月 15 日采
收于陕西中医药大学药用植物园;菘蓝(板蓝根、
大青叶)干燥药材，均购于陕西中医学院国医堂，
经陕西中医药大学王继涛高级实验师鉴定为十字
花科植物菘蓝(Isatis indigotica Fort．)。
1． 2 仪器与试剂 旋转蒸发仪(EYEL4 上海爱
明仪器有限公司);循环水式多用真空泵(SHB － 3
郑州长城科工贸有限公司);电子天平(上海恭航
称重公司，精度 1 mg);手提式不锈钢压力蒸汽灭
菌器(上海三申医疗器械有限公司型号 YXZ80B);
* 基金项目:陕西中医药大学校级课题资助(14XJZＲ29)
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恒温恒湿培养箱。
1． 3 菌种 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆
菌菌株均由陕西中医药大学微生物实验室提供。
2 实验方法
2． 1 菘蓝不同药用部位样品的制备
2． 1． 1 板蓝根干燥药材水提液的制备 称取板
蓝根粗粉 250 克，置 3000 mL圆底烧瓶中分别加入
10 倍量的水提取两次，每次 1 h，过滤，合并滤液，
适度浓缩后加入 95 %乙醇调至含醇量为 65 %，静
置 24 小时，抽滤，得澄清液，再用旋转蒸发仪回收
乙醇，浓缩至无醇味约 1000 mL，加入活性炭加热
搅拌除色，抽滤后滤液浓缩定容至 500 mL 容量
瓶中。
2． 1． 2 板蓝根新鲜药材水提取物的制备 称取
新鲜板蓝根 500 g，提取方法同板蓝根干燥药材，滤
液浓缩定容至 500 mL容量瓶中。
2． 1． 3 大青叶干燥药材水提物的制备 称取大
青叶粗粉约 250 克，置 5000 mL圆底烧瓶中分别加
入 15 倍量的水提取两次，提取精制方法同板蓝根
干燥药材，滤液浓缩定容至 500 mL容量瓶中。
2． 1． 4 大青叶新鲜药材水提取物的制备 称取
新鲜大青叶 1000 g，提取精制方法同大青叶干燥药
材，滤液浓缩定容至 500 mL容量瓶中。
2． 2 菌液的制备 斜面菌种接入牛肉膏液体培
养基中，30 ℃活化 24 h，再以 1 %的接种量接入牛
肉膏液体培养基中，30 ℃培养 6 h，取出稀释涂平
板，30 ℃ 倒置培养 24 h，计算菌落形成单位
(Colony forming unit CFU)。活化后的菌液贮存于
4 ℃冰箱中备用。
2． 3 MIC、MBC 测定［3 － 7］ 按体外抗菌试验试管
二倍稀释法测定药物最低抑菌浓度(MIC)。板蓝
根提取液经 MH肉汤培养液二倍稀释为 7 ～ 10 管，
其药物浓度分别按 2 倍依次递减，另设细菌对照管
(不加药液)、空白组。试验用菌株先用 MH 培养
液配 106CFU /mL浓度。上述各试验管中分别加入
0． 1 mL 菌液，混匀后各管内细菌菌液终浓
105CFU /mL，置 37 ℃培养 24 h 后观察结果。无细
菌生长的最低药物浓度确定为 MIC。取 MIC 终点
浓度以上未生长细菌的各稀释管内培养物，分别
接种在琼脂平板上，置 37 ℃培养 24 h 后观察平板
有无细菌生长，无细菌生长的最低药物浓度为最
小杀菌浓度(MBC)，结果见表 1 － 4。
表 1 板蓝根干燥药材提取液的抑菌效果
菌株
菌落生长情况(g /mL)
1． 0 0． 5 0． 25 0． 125 0． 0625 0． 031
大肠杆菌 － － － + + +
金黄色葡萄球菌 － － － + + +
绿脓杆菌 － － + + + +
注:+表示有细菌生长，－表示无细菌生长，－ / +表示有微量
细菌生长(下同)
表 2 板蓝根新鲜药材提取液的抑菌效果
菌株
菌落生长情况(g /mL)
2． 0 1． 0 0． 5 0． 25 0． 125 0． 062
大肠杆菌 － － － + + +
金黄色葡萄球菌 － － － － + +
绿脓杆菌 － － － / + + + +
表 3 大青叶干燥药材提取液的抑菌效果
菌株
菌落生长情况(g /mL)
1． 0 0． 5 0． 25 0． 125 0． 0625 0． 031
大肠杆菌 － － + + + +
金黄色葡萄球菌 － － － / + + + +
绿脓杆菌 － － + + + +
表 4 大青叶新鲜药材提取液的抑菌效果
菌株
菌落生长情况(g /mL)
4． 0 2． 0 1． 0 0． 5 0． 25 0． 125
大肠杆菌 － － / + + + + +
金黄色葡萄球菌 － － － / + + + +
绿脓杆菌 － － + + + +
板蓝根干燥药材抑菌实验结果显示:大肠杆
菌试管，1 ～ 3 管清亮透明，从第 4 管开始出现轻度
浑浊，第 5 管开始出现菌膜，提示大肠杆菌的 MIC
=0． 25 g /mL;金黄色葡萄球菌试管，1 ～ 3 管清亮
透明，从第 3 管开始出现浑浊，第 5 管开始出现菌
膜，提示金黄色葡萄球菌的 MIC =0． 25 g /mL;绿脓
杆菌试管，1 ～ 2 管清亮透明，从第 3 管开始出现浑
浊，第 4 管开始出现菌膜;提示绿脓杆菌 MIC =
0． 50 g /mL。另外，板蓝根干燥药材在第 1 管的琼
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脂平板区域，未生长任何细菌，从第 2 管开始出现
大量细菌，所以大肠杆菌、金葡菌、绿脓杆菌的
MBC均为 1． 0 g /mL。
同样方法观测，板蓝根新鲜药材对大肠杆菌
的 MIC = 0． 50 g /mL;金黄色葡萄球菌的 MIC =
0． 25 g /mL;绿脓杆菌的 MIC = 1． 0 g /mL。大肠杆
菌、金葡菌、绿脓杆菌的 MBC 均为 2． 0 g /mL。大
青叶干燥药材对大肠杆菌的 MIC =0． 5 g /mL;金黄
色葡萄球 MIC = 0． 5 g /mL;绿脓杆菌的 MIC =
0． 5 g /mL。大青叶新鲜药材的大肠杆菌的 MIC =
4． 0 g /mL;金黄色葡萄球菌的 MIC = 2． 0 g /mL;绿
脓杆菌的 MIC = 2． 0 g /mL。另外，杀菌实验中，从
第 1 管开始就有较多细菌生长，所以现有浓度未检
测出三种菌株的 MBC，说明大青叶杀菌作用相对
板蓝根较弱。
对比研究结果提示板蓝根、大青叶干燥药材
和新鲜药材水提液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、
绿脓杆菌等菌株均具有较强的抑制作用。根据新
鲜药材和干燥药材质量换算，大青叶 5． 55 g 鲜品
干燥后为 1 g干品，板蓝根 3． 14 鲜品干燥后为 1 g
干品，由此可得对于菘蓝而言其鲜品抗菌效价明
显优于干品;就入药部位而言，板蓝根对三种实验
菌株的抑菌效价强于大青叶。
3 讨论
神农尝百草，始有医药，这里的百草其实指的
就是鲜药材，因此，药材鲜用是我国中医药起源的
用药方式，并贯穿于中医药学的整个发展过程。
《神农本草经》中的“生者尤良”中的“生”字指的
就是鲜药材，且鲜药材在治疗热证、急症、表证等
方面的疾病具有独特的优点，取其清新之气，清暑
生津力强，这些作用在目前中成药产品中是难于
解决和做到的。
本实验结果提示菘蓝不同部位的干燥药材和
新鲜药材水提液对金黄色葡萄球菌等菌株均具有
较强的抑制作用，且其鲜品抗菌效果略强与干品。
另外，本实验由于实验条件有限，仅考察了菘蓝对
大肠杆菌等三种菌株的抗菌作用，所选菌株有限，
下一步研究应结合临床拓宽抗菌谱，纳入肺炎球
菌、链球菌等细菌和支原体、病毒等致病微生物，
实验结果就更具有临床指导意义。
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