全 文 ：收稿　2002-05-20　　　　修定　2002-10-08
　＊　通讯作者(E-mail:chenfd@mail.njav.edu.cn)。
翠菊的组织培养
滕年军　陈发棣＊(南京农业大学园艺学院 ,南京 210095)
Tissue Culture of Callistephus chinensis
TENG Nian-Jun , CHEN Fa-Di＊(College of Horticulture , Nanjing Agricultural University , Nanjing 210095)
1　植物名称　翠菊(Call istephus chinensis)。
2　材料类别　幼嫩茎段 。
3　培养条件　基本培养基为 MS 。(1)愈伤组织诱
导培养基:MS+6-BA 1.0 mg·L-1(单位下同)+
NAA 0.2;(2)分化培养基:MS+6-BA 2.0+NAA
0.1;(3)生根培养基:MS+NAA 0.1。上述培养基
均添加 3%蔗糖 、0.65%琼脂 , pH 5.8。培养温度
25 ～ 30℃,光照度 3 000 lx , 光照时间 12 h·d-1 。
4　生长与分化情况
4.1　初代培养　翠菊种子田间播种 ,1个月后取旺
盛生长植株的幼嫩茎段 ,用自来水冲洗 30 min ,在
超净工作台上 ,用 70%的乙醇浸泡 30 s ,再用0.1%
的升汞浸泡 10 min ,无菌水冲洗 5次。幼嫩茎段从
中间纵向切割成两半 ,然后切割成 0.3 cm 左右的
茎段 ,接种于培养基(1)上。10 d后嫩茎周围开始
有绿色愈伤组织形成 , 30 d后形成绿色愈伤组织
块 ,其组织紧密且表面开始有点状凸起 。
4.2　分化培养　将愈伤组织转移到培养基(2)中。
10 d后表面的凸起开始萌动 ,个别凸起形成幼芽 ,
30 d 后愈伤组织表面形成几个 1 ～ 2 cm 左右的幼
芽。然后对该愈伤组织在同样的分化培养基上进
行 2次继代 ,每次继代时间为 1 个月 。经过 2次继
代后 ,愈伤组织被芽丛覆盖 ,分化率为 100%(图 1
上)。
4.3　生根诱导　将芽丛中的芽切割下来接种到培
养基(3)中 。1周后 ,芽基部形成 1 ～ 2条白色的根 ,
20 d后每个芽有 1 ～ 4条根不等 ,长度 0.3 ～ 4.2 cm
(图 1下)。生根率为 100%。此外 ,在诱导生根过
程中 ,大约有 30%的幼苗在培养容器中开花。
4.4　试管苗移栽　将生根后的试管苗从广口瓶中
取出 ,用无菌水将苗基部的琼脂洗净 ,移入装有灭
过菌的珍珠岩的纸杯中 ,置于温度为(25±1)℃、湿
度 70%～ 80%、光照 12 h·d-1 、光照度为 2 500 lx
的培养箱中 1周 。然后移至 20 ～ 25℃的温室中 ,10
d后幼苗成活率达 90%。
5　意义与进展　翠菊为菊科翠菊属一年生草本花
卉 ,色彩丰富艳丽 ,是优良的花坛花卉和切花材料。
虽然有翠菊原生质体培养获得再生植株的报道 ,但
是以翠菊的叶片 、茎尖 、茎段 、花瓣等为外植体进行
组织培养却尚未见报道 。本文采用翠菊幼嫩茎段
进行离体培养 ,获得了再生植株 ,为翠菊的繁殖提
供了一条值得考虑的途径。同时 ,在我们的实验中
见到的大量无菌苗开花现象 ,对诱导植物开花和发
育的研究可能也有一定的参考价值 。
图 1　翠菊的继代培养(上)和生根苗(下)
227植物生理学通讯　第 39 卷 第 3 期 , 2003 年 6 月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2003.03.016