全 文 ：1 9 9 8年 沈阳师范学院学报 (自然科学版 )
第 4 期 J o : ` r n a l以 S he叮a n gT e a c he r C sI O介群 (Na t: `ra lS e ie n c e )
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翠菊组织培养一次成苗研究
贾景明 马纯艳
(沈阳师范学院生物系 沈阳 1 。。 31)
摘 要
关键词
分类号
以翠菊 (Ca s lf eP hu: c hzn o s l) 叶片为外植体 , 在 M S十 6一 BA O
.
5。创 L + IAA .2 Om g压
的培养基上进行培养 、结果发现 , 每叶片平均再生芽数 4~ 6 个 , 再生率达 80 % ~ 85 % .
外源激素和光照是影响芽分化的关键因素 .
翠菊 ;组织培养 ;植株再生
Q 9 4 5
翠菊 ( aC il st eP h “ , cl i,z en is ) , 属菊科 ,多年生草本植物 , 叶卵圆形至披针形 , 边缘具粗
大锯齿或深裂 . 秋季开花 、 头状花序顶生 ` 翠菊在我国为多年生宿根草本花卉 ,栽培历史悠
久 ,分布广泛 , 是人们比较喜欢的一种花卉. 随着生活水平的提高 ,人们在工作之余 , 赏花 、
观花 、 养花的越来越多 , 因而各种花卉也在不断被开发利用 . 翠菊作为一种观赏植物 , 还可
以用来布置花坛 、 用作切花 . 种植翠菊可以带来一定的经济效益 . 另外 ,翠菊还具有一定的
药用价值 , 具清热解毒 、 平肝凉血之功效 .
翠菊的繁殖常用分株 , 扦插 、嫁接等方式进行 . 其中分株较易 ,但繁殖数量少 , 速度慢 .
而采用组织培养的方法 , 并利用组培过程 中的外部环境条件 , 如光照及外源激素来控制愈
伤组织 的形成或芽的分化 , 对于翠菊的快速繁殖具有重要意义 ,首先 ,控制花期进行循环
生产 , 为美化环境提供整齐一致的幼苗 ;其次 ,可在短时间内提供大量商品性试管苗 ;第
三 , 为菊科其它种及品种的组培研究积累资料 .
1 材料与方法
1
·
1 试验材料 翠菊 ( C a l l i s t eP 人。 s e入i n e n s i ; )
1
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2 培养基 M S + 6一 B A O . s m g / L 十 I A A 2 . o m g I/ J 十蔗糖 30 9 / L + 琼脂 8 9 / L (灭菌备
用 )
收稿日期 : 1 9 , 8一 0 8一 2 6
第一作者 : 男 , 34 岁 ,硕士 ,讲师
沈阳师范学院学报 (自然科学版 )1 9 9 8年
L 3 试验方法
1
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3
.
1 取翠菊叶片 , 用 自来水冲洗干净 , 沥干水分 . (以下步骤在超净工作台上进行 ) . 将
洗净的叶片放人 75 %酒精溶液中漂洗 , 然后取出 , 再放人 0 . 1%升汞溶液中灭菌 5 分钟
(边浸泡边翻动叶片 ) ,然后取出 ,用无菌水洗 4 至 5 遍 . 将外植体再放到无菌滤纸上吸干
水分 ,将经过上述处理后的叶片边缘剪去 , 然后剪成 cI m “ 左右的小片 , 接种到培养基上 ,
每瓶 3 ~ 4 片 . 将接种后的外植体置于 25 ℃士 1℃ ,光照为 10 0 o L u x , 每天光照 10 小时的环
境中培养 、 观察 .
1
.
3
.
2 四个月后 , 将 1 . 3 . 1 步骤中形成的无菌苗转到新配制的培养基中 (其成分仍为
M S十 6一 B A O . 5 0 9 / L + I A A 2 . o m g / L + 蔗糖 3 09 / L + 琼脂 8 9 / )L . 其方法为将翠菊无菌
苗的 叶片剪成小片直接接种到新配制的培养基中 , 然后分成两组 , 一组置于 25 ℃士 I C ,
光照 为 1 0 0 1ux , 每天光照 10 小时的环境 (与前述环境条件相同 ) , 而另一组则置于 25 ℃
士 I C , 光照为 1 SOOlu x ,每天光照 24 小时的条件下进行培养 、 观察 .
2 结果与讨论
.2 1 试验结果
接种在培养基 (M S十 6一 B A O . sm g I/ 一 + I A A 2 . Om g / L十蔗糖 3 0 9 / L + 琼脂 8 9 / )L 上
的翠菊叶片组块 , 3 天 以后开始皱缩卷曲 , 7 至 8 天在组块边缘切 口处有黄绿色颗粒状愈
伤组织形成 . 以后 , 愈伤组织很快增大至 cZ m “ 左右 , 第 25 天以后开始形成丛芽 , (平均每
块小叶片上可再生出芽数 4一 6 个 ,再生率达 80 % 一 85 肠 ) . 这时愈伤组织开始变黑 , 继续
培养 50 天以后 ,开始在丛芽基部形成不定根 . (如照片 ) 当不定根长至 c3 m 即可取出 , 分
开丛生苗 ,移至盆中培养 . 也可继续接种繁殖 .
在 1 . 3 . 2 操作步骤中 , 所用外植体为菊花的无菌苗 ,其培养基及培养条件一组与上述
相同 ,其结果也一样 ;而另一组试验则是在与上一级同样培养基 , 但培养条件 ,主要是光照
条件不同的情况下进行的 , 这一组的光照强度为 1 50 0L u x , 每天光照 24 小时 . 结果 : 培养
7 天后 , 在外植体的切 口处也有黄绿色的愈伤组织形成 . 但明显不如上一组在弱光条件下
培养 ,光照 10 小时所形成的愈伤组织多 ,并且在形成愈伤组织的同时即伴有不定芽的发
生 , 而且很快形成丛芽 . 开始形成的愈伤组织则几乎停止生长 , 且不再有新的愈伤组织发
生 , 培养 60 天以后也未见有不定根形成 .
.2 2 讨论
通过上述两组对照试验结果 ,我们认为 M S十 6一 B A o . s m g L/ + I A A 2 . o m g / L 十蔗糖
3 0 9 / L + 琼脂 8 9 / L 这一培养基的成份及激素的比例对翠菊 ( C a l l i s t e p h u s e h i n e n e s i s )的
组织培养是很适合的 ,而且中间不需更换培养基 , 直接就可以在初代培养基上诱导出愈伤
组织 、再生芽及不定根 ,所以对于翠菊的快速繁殖具有重要意义 ,对于菊科其它品种 (观赏
花卉 )快速繁殖的研究也具有一定的指导意义 .
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在第二组对比实验中 , 我们认为全天光照且光照强度较大 , 对于在翠菊外植体上直接诱导
芽有明显的刺激作用 ,促进芽的形成 ,而不形成不定根 , 可以认为强光及 24 小时的全天 日
照对翠菊组织培养中生根起抑制作用 ,而较弱的光线或暗处的培养 , 利于诱导出再生根 .
对于强光条件下形成的不定芽需更换新的生根培养基来诱导生根 .
参 考 文 献
李世成 · 植物组织培养实脸技术 . 大连理工大学出版社 . 1 990 , 35 ~ 46
杨增海等 · 团艺植物组织培养 . 农业出版社 . 1 9 87 . 8 一 8 9
崔 等 · 经济植物组织培养与快速萦殖 . 农业出版社 . 1 9 8 7
〔加〕R . G . 5 . 比德韦尔著 . 刘富林译 . 植物生理学 . 高教出版社 , 1 9 86 , 48 ~ 50
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