全 文 ：火绒草的抗炎活性研究
———对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀及毛细血管通透性的影响
黄利权1 ,伍义行2
(1.浙江大学动物科学学院 ,杭州华家池　310029;2.浙江大学药学院 ,杭州　310031)
摘　要:建立二甲苯所致小鼠耳廓肿胀急性炎症模型 ,针对火绒草 3 种水溶性组分(水煎液 、水提醇沉液 、醇提
水溶部分),每种试验药物分为大剂量组(1g/ml)和小剂量组(0.5g/ ml), 每组 12 只小鼠 , 以地塞米松作为阳性对照
药物 ,比较试验组与对照组小鼠耳廓肿胀度的差异 , 计算小鼠耳廓伊文氏蓝染料渗出的抑制率 , 探讨试验药物对二
甲苯所致小鼠耳廓肿胀及毛细血管通透性的影响。结果显示:试验组小鼠耳廓肿胀度和耳增重百分比与对照组比
较 ,除了水煎液小剂量组外 , 其差异具有非常显著(P<0.01)或极显著意义(P<0.001),说明 3 种提取物对二甲苯所
致小鼠耳廓肿胀具有显著的抑制作用。试验药物对小鼠耳廓伊文氏蓝染料渗出的抑制作用与对照组比较 , 具有极
显著差异(P<0.001),且抑制率均在 88%以上 , 显示了较强的抗炎活性。
关键词:火绒草;水提物;耳肿胀模型;抗炎活性
中图分类号:S853.75　文献标识码:B　文章编号:1003-8655(2004)02-0010-03
　　菊科火绒草属(Leontopodium R.Br.)植物约 56
种 ,主要分布于亚洲 、欧洲和南美洲 ,寒带 、温带 、亚热
带及热带均有分布[ 1] 。我国约有 41 种 ,主要分布于
东北 、西北 、华北及西南地区 ,特别是青藏高原尤为丰
富。其中 25种在民间作为药用植物 。火绒草 ,Leon-
topodium leontopodioides(Willd.)Beauv.是菊科火绒草
属植物的一种[ 2] 。民间用药经验表明:火绒草具有疏
风解表 、清热解毒 、凉血止血 、消炎利尿等多种功
效[ 3-5] 。文献检索和实地考察显示:火绒草野生资源
极为丰富 ,目前国内有关研究报道不多[ 6-14] ,国外尚
无其化学和药理活性的研究报道 。本文仅就火绒草
水提物的抗炎活性作一初步探讨。
1　材料
1.1 　药材 　火绒草:Leontopodium leontopodioides
(Willd.)Beauv.,2000年 9 月采自甘南草原。由农业
部新兽药工程重点开放实验室天然药物研究室鉴定。
1.2　试验药液(均为生药浓度)
(1)水煎液:1g/ml ,0.5g/ml
(2)水提醇沉液:1g/ml ,0.5g/ml
(3)醇提水溶部分:1g/ml ,0.5g/ml
1.3　试验动物　ISR小白鼠 96只 ,雄性 ,体重 24 ～
26g ,由浙江中医学院实验动物中心提供。
1.4　主要器材　紫外-可见光分光光度计 ,离心机 ,
电子天平 ,打孔器 ,微量加样器 ,注射器 ,镊子 ,剪刀 ,
二甲苯 ,地塞米松磷酸钠注射液 ,伊文氏蓝(Even s
blue),丙酮等。
2　方法
2.1　实验动物的选择与分组　取雄性小鼠 96只 ,体
重24 ～ 26g ,随机分成 8组 ,每组 12只。每种试验药
物分成大剂量和小剂量进行试验 ,以等体积的生理盐
水作空白对照 ,以地塞米松作阳性对照药物 。分组及
给药剂量见表 1[ 15 、16] 。
2.2　炎症模型的建立及抗炎指标的检测
2.2.1　实验动物分组后 ,每日灌胃给药 1次 ,每只0.
5ml ,连续给药 7 天 。阳性对照组最后一天(即第 7
天)一次性给药 5mg/kg(0.5%水溶液 1ml/kg),即 0.
01ml/10g 。
2.2.2　末次给药后 30分钟 ,在小鼠右耳正反两面用
微量加样器各滴加 10μ1二甲苯致炎。同时给各鼠尾
静脉注射 Even s blue ,每只 0.25ml(0.2%溶液)。
2.2.3　末次给药后 1小时 ,将小鼠颈椎脱臼处死 ,沿
耳廓基部剪下两耳 ,用直径 9毫米的打孔器在左右耳
的同一部位打下圆形耳片 。
2.2.4　称同一小鼠左右两耳片的重量 ,以左右两耳
片重量之差表示肿胀度 ,并比较试验组与对照组间差
异的显著性。按下式计算耳增重百分比 ,并比较试验
组和对照组差异的显著性[ 17] 。
耳增重百分比=耳肿胀度左耳重 ×100%
2.2.5　将各鼠右耳片浸泡于 4毫升35%的丙酮水溶
液中 ,48小时后取浸出液 ,经离心后在波长为 590nm
处比色 ,并比较试验组与对照组 OD值的差异显著
性[ 18 、19] 。
按下式计算试验组小鼠耳廓染料渗出的抑制率:
抑制率
=对照组渗出量(OD值)-试验组渗出量(OD值)对照组渗出量(OD组)
×100%
·10· 中兽医学杂志　2004年第 2期(总117期)
表 1　试验分组及给药剂量
药物 组别 样本数 浓　度 剂　量
生理盐水 对照组 12 0.9% 0.2ml/ 10g
水煎液 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/ 10g大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/ 10g
水提醇沉液 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/ 10g大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/ 10g
醇提水溶部分 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/ 10g大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/ 10g
地塞米松 阳性组 12 0.5% 0.01ml/ 10g
3　结果与分析
3.1　对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
将试验组和阳性组小鼠耳廓肿胀度与生理盐水
对照组小鼠耳廓肿胀度进行统计分析 ,结果表明 ,水
煎液小剂量组与对照组比较差异不显著(P>0.05);
水提醇沉液和醇提水溶部分与对照组比较 ,其差异具
有非常显著意义(P<0.01);水煎液大剂量组和阳性
组与对照组比较 , 其差异具有极其显著意义(P <
0.001)。试验组与对照组耳廓肿胀度差异的统计分
析结果见表2。
试验组和阳性组小鼠耳增重百分比与生理盐水
对照组小鼠比较 ,结果显示 ,水煎液小剂量组与对照
组比较 ,具有显著性差异(P<0.05);水提醇沉液大剂
量组和醇提水溶部分小剂量组与对照组比较 ,其差异
具有非常显著意义(P<0.01);水煎液大剂量组 、水提
醇沉液小剂量组 、醇提水溶部分大剂量组和阳性组与
对照组比较 ,其差异具有极显著性意义(P <0.001)。
试验组与对照组小鼠耳增重百分比差异的统计分析
结果见表 3。
表 2　试验组和对照组小鼠耳廓肿胀度
药　物 组别 样本数 浓度 剂量 耳廓肿胀度(mg)( X±SD)
生理盐水 对照组 12 0.9% 0.2ml/10g 10.025±3.725
水煎液 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 7.813±1.792大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 3.763±0.950＊＊＊
水提醇沉液 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 5.413±1.950＊＊大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 4.875±2.625＊＊
醇提水溶部分小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 5.90±1.812＊＊大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 5.50±1.653＊＊＊
地塞米松 阳性组 12 0.5% 0.01ml/10g 3.325±2.101＊＊＊
注:试验组与对照组比较 , ＊＊表示非常显著(P<0.01), ＊＊＊表示
极显著(P<0.001)。
表3　试验组和对照组小鼠耳增重百分比
药　物 组别 样本数 浓度 剂量 耳廓肿胀度(mg)( X±SD)
生理盐水 对照组 12 0.9% 0.2ml/10g 92.13±25.73
水煎液 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 66.72±14.49＊＊大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 30.70±8.01＊＊＊
水提醇沉液 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 45.44±14.19＊＊＊大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 43.72±23.83＊＊
醇提水溶部分小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 50.69±14.39
＊＊
大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 45.37±13.19＊＊＊
地塞米松 阳性组 12 0.5% 0.01ml/10g 23.81±23.74＊＊＊
注:试验组与对照组比较 , ＊表示显著(P<0.05), ＊＊表示非常显著
(P<0.01), ＊＊＊表示极显著(P<0.001)。
3.2　对毛细血管通透性的影响
试验组和对照组小鼠耳廓 Even s blue染料渗出
的OD值与生理盐水对照组小鼠比较 ,其差异均具有
极显著意义(P<0.001)。试验组与对照组小鼠耳廓
染料渗出液OD值的统计分析结果见表 4。
试验药物对小鼠耳廓 Even s blue 染料渗出的抑
制率见表 5。
表 4　试验组和对照组小鼠耳廓染料渗出液的 OD值
药　物 组别 样本数 浓度 剂量 耳廓肿胀度(mg)( X±SD)
生理盐水 对照组 12 0.9% 0.2ml/10g 0.276±0.168
水煎液 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 0.013±0.030＊＊＊大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 0.007±0.010＊＊＊
水提醇沉液 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 0.010±0.015＊＊＊大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 0.004±0.006＊＊＊
醇提水溶部分小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 0.030±0.070
＊＊＊
大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 0.020±0.049＊＊＊
地塞米松 阳性组 12 0.5% 0.01ml/10g 0.004±0.005＊＊＊
注:试验组与对照组比较 , ＊＊＊表示极显著(P<0.001)。
表 5　试验组小鼠染料渗出的抑制率(%)
药　物 组别 样本数 浓度 剂量 OD值 抑制率(%)
生理盐水 对照组 12 0.9% 0.2ml/10g 0.267
水煎液 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 0.030 95.13大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 0.020 97.38
水提醇沉液 小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 0.010 96.25大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 0.004 98.50
醇提水溶部分小剂量组 12 0.5g/ml 0.2ml/10g 0.013 88.76大剂量组 12 1.0g/ml 0.2ml/10g 0.007 92.51
地塞米松 阳性组 12 0.5% 0.01ml/10g 0.004 98.50
　　从试验药物抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的试
验结果可知 ,除了水煎液小剂量组外 ,试验组小鼠耳
廓肿胀度与对照组比较 ,其差异具有非常显著或极显
著意义。试验组小鼠耳增重百分比与对照组比较 ,具
有显著 、非常显著或极显著差异。且其抗炎活性均接
近阳性对照组药物地塞米松 ,说明试验药物具有较强
的抑制炎症的作用 。
分析试验药物对小鼠毛细血管通透性的影响 ,不
难看出试验药物对染料渗出的抑制作用与对照组比
较 ,均具有极显著差异 ,且与阳性对照药物地塞米松
·11·中兽医学杂志　2004年第 2期(总 117期)
活性近似 。显然 ,试验药物对二甲苯所致炎症造成的
毛细血管通透性增加和染料渗出具有很强的抑制作
用。此外 ,从表 5可以看出 ,试验药对染料渗出的抑
制率均在 88%以上 ,显示了很强的抗炎活性 。总之 ,
通过二甲苯致炎模型 ,初步证明了 3种试验药物具有
很强的抗炎活性 。
据现有报道来看 ,目前尚无火绒草水提物抗炎活
性的研究报道 ,本试验通过对火绒草3种水溶性提取
物的抗菌活性研究 ,初步探讨了火绒草水提物的抗炎
活性 ,为深入研究和开发利用打下了基础。
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文章编号:1003-8655(2004)02-0012-02
中西医结合治疗犊牛肺炎
赵学修1 ,杨曾国1 ,田伯耘2 ,曹广芝1 ,田　耕3
(1.河南省周口职业技术学院 ,河南周口 466001;
2.河南省淮阳县动检站;
3.河南省淮阳县王店乡兽医站)
中图分类号:S858.23　文献标识码:B
新生犊牛肺炎是兽医临床上的常见多发病。该
病病情危急 ,如治疗不妥 ,往往导致死亡。笔者用中
西医相结合疗法 ,对 136例犊牛肺炎进行治疗 ,取得
了较为满意的效果 ,现报告如下:
1　发病情况　本病多发生于出生后 3 ～ 7天的牛犊。
笔者收治的 136例病例中 ,病程最短的 4 天 ,最长的
20天。在发病的犊牛中 ,夏洛来 、西门塔尔等杂交牛
犊达 90例 ,本地牛犊仅 46例。夏秋季节发病达 120
例 ,冬春季节仅 16例。主要病因是出生之前羊水破
裂过早 ,致使羊水进入呼吸道;或因牛犊出生时无人
接生护理 ,没有及时清理犊牛身上污垢及鼻腔内羊水
异物 ,引起吸入性肺炎。冬季气温较低 ,引起外感 ,也
可继发肺炎。
2　临床症状　犊牛发病后 ,表现精神沉郁 ,呼吸困
难 ,体温升高到 39.5℃—41.5℃,吃奶减少或废绝。
听诊肺部 ,病初肺泡音增强 ,呼吸粗厉 ,继而引起支气
管黏膜肿胀 ,分泌物粘稠 ,这时可听到干罗音。当支
气管内有多量渗出物时 ,两鼻孔内流出蛋清样鼻液或
白色泡沫样鼻液 。当支气管炎与细支气管炎合并发
生时 ,全身症状较重 ,表现张口喘息 ,结膜发绀。鼻镜
干燥 ,舌黏膜干粘。如治疗不及时 ,往往导致死亡 。
3　施治方法
3.1　根据临床症状不同 ,发病季节不同 ,治疗方法不
一样 。夏季与冬季治疗也各有所别 ,应辨证辨病辨季
节相结合 ,才能有利于疾病的康复 。初生犊牛脏腑娇
嫩 ,不耐寒热 ,属雏阴雏阳之体 ,治疗上应倍加注意。
3.2　在夏秋季节 ,治疗体温过高的肺炎犊牛多采用
洗浴降温。方法是用 38℃的温水约 40kg ,不洗头部 ,
全身涂上洗浴液或肥皂 ,洗净冲洗之后用布擦干 。然
后用鱼腥草注射液或银黄热毒清注射液 10 ～ 20ml ,
溶解 37℃温水 500 ～ 800ml ,涂布全身 ,让其透入毛孔
吸收解热 ,经过 1 ～ 2小时即可降至常温 。每日可洗
浴 1 ～ 3次 ,此法优于解热药物降温。
3.3　对脱水严重 ,口腔干粘 ,体温 41℃以上者 ,同时
伴发呼吸高度困难的犊牛 ,多采用右侧腹腔注入补液
·12· 中兽医学杂志　2004年第 2期(总117期)