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天名精对亚洲带绦虫囊尾蚴的杀灭作用



全 文 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2015 年 6 月第 33 卷第 3 期 Chin J Parasitol Parasit Dis Jun. 2015, Vol. 33, No.3
【提要】 将天名精煎剂 20、 40 和 60 mg/ml 与亚洲带绦虫囊尾蚴进行体外共培养, 24 h 后观察囊尾蚴的死亡情况
及形态变化。 20、 40 和 60 mg/ml 天名精煎剂对囊尾蚴均具有显著杀灭作用。 以 60 mg/ml 杀灭效果最佳, 囊尾蚴死亡率
达 95.0% (57/60), 死亡的囊尾蚴囊体呈紧缩状, 头节膨大, 吸盘组织变性, 形态变形。
【关键词】 天名精;亚洲牛带绦虫;囊尾蚴;死亡
中图分类号: R383.34 文献标识码: B
Killing Effect of Carpesium abrotanoides on
Taenia asiatica Cysticercus
LIU Xiao-yan, GUO Guang-wu, WANG Heng
(Department of Medical Laboratory, Qiannan Medical College for Nationalities, Duyun 558000, China)
【Abstract】 The cysticerci of Taenia asiatica were cultured in vitro with different concentrations of water decoction
of Carpesium abrotanoides (20, 40, and 60 mg/ml). The killing effect of C. abrotanoides on T. asiatica and the
morphological change of cysticerci were observed under microscope 24 hours post-culture. The water decoction of C.
abrotanoides showed significant killing effect on the cysticerci. The mortality of the parasites(95.0%, 57/60) was highest
in 60 mg/ml group. The dead body of cysticercus shows shrunken with the enlarged scolex, and sucker tissue
degenerated.
【Key words】 Carpesium abrotanoides; Taenia saginata asiatica; Cysticercus; Death
Supported by Natural Science Fund of Qiannan Medical College for Nationalities (No. 201408)
【研究简报】文章编号:1000-7423(2015)-03-0237-02
天名精对亚洲带绦虫囊尾蚴的杀灭作用
刘晓焱,郭光武,王恒
基金项目:黔南民族医学高等专科学校自然科学基金 (No. 201408)
作者单位: 黔南民族医学高等专科学校医学检验教研室, 都匀 558000
天名精 (Carpesium abrotanoides) 为菊科植物, 具有驱虫
功能, 主治蛔虫病、 绦虫病、 蛲虫病、 虫积腹痛 [1]。 2007年编
著的 《中国水族医药宝典》 系统总结了水族医药的基本理论和
疗法, 记录1 068味全彩集水族民间药。 天名精水药名燕嘎,
性味幸、 寒, 全草供药, 具有祛痰、 清热、 破血、 止血、 解毒
和杀虫功效[2]。
贵州省黔南州是一个多民族地区, 因少数民族不同生活饮
食习惯及特殊的地理气候环境, 亚洲带绦虫病流行严重, 极大
影响人民身体健康和畜牧业发展。 国内关于中草药对猪囊尾蚴
杀灭作用的报道较多[3-5], 未见对亚洲带绦虫囊尾蚴杀灭的报
道。 为了解民族药天名精对亚洲带绦虫囊尾蚴的杀灭作用, 求
证其驱虫作用, 本实验观察了天名精体外抗亚洲带绦虫囊尾蚴
的作用, 为进一步探讨其体内抗虫作用提供实验基础。
1 材料与方法
1.1 药物和实验动物来源 天名精全草于2014年8月采自贵州
省三都水族自治县。 按天名精的资源分布、 药材性状、 组织结
构及理化鉴别特点, 鉴定该植物为天名精 [6]。 去根、 洗净、 晾
干, 粉碎。 取药物粉末60 g, 加入蒸馏水1 000 ml, 煮沸后文
火煎煮2 h, 减压过滤, 将滤液稀释至1 000 ml, 配制成 (相当
原药材 ) 20 、 40和 60 mg/ml等 3个药物浓度备用 。 吡喹酮
(0.2 g/片, 批号20131102) 购自南京制药厂有限公司, 粉碎,
置乙醇液中浸提3次, 弃残渣, 水浴蒸干备用。 昆明小鼠120只,
雌雄各半, 20~25 g, 购自贵阳医学院动物中心。 均经粪检、
驱虫和间接血凝实验检测囊尾蚴抗体, 证明无囊尾蚴感染。
1.2 囊尾蚴来源 贵州省都匀市亚洲带绦虫流行区3例排孕节
节片的患者, 经知情同意后, 采用槟榔、 南瓜子驱虫。 获得
3条完整虫体, 经形态学鉴定为亚洲带绦虫 (Taenia saginata
asiatica)。 分别取每条成虫末端成熟孕节8节剪碎, 使虫卵全部
溢出。 用生理盐水漂洗, 除虫体碎片, 230×g离心5 min, 弃上
清, 调节虫卵浓度至600个/ml, 0.5%次氯酸钠孵化4 min后, 每
鼠背部皮下注射1 ml。 60 d后剖杀, 获取的都匀亚洲带绦虫囊
尾蚴用于后续实验。
1.3 实验分组 取20、 40和60 mg/ml天名精水煎剂各10 ml加
入3个无菌的平皿中, 同时加入40%猪胆汁5ml, 青霉素0.2mg/ml,
混匀, 加入囊尾蚴20个, 37 ℃培养24 h。 对照组加入等体积的
吡喹酮 (0.25 mg/ml), 同时设空白对照组, 每个药物浓度重复
3次。 每隔8 h镜下观察, 24 h后头节不能翻出者视为死亡, 计
算死亡率, 囊尾蚴压片镜下 (×100) 观察其头节形态。
1.4 统计学分析 实验数据采用SPSS18.0软件进行统计学分
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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2015 年 6 月第 33 卷第 3 期 Chin J Parasitol Parasit Dis Jun. 2015, Vol. 33, No.3
析, 各药物浓度囊尾蚴死亡率与空白对照组比较采用卡方检
验, 检验水平为α=0.05。
2 结果
2.1 天名精不同浓度组对囊尾蚴杀灭效果 天 名 精 20 、 40 和
60 mg/ml组囊尾蚴死亡率分别为65.0% (39/60)、 80.0% (48/60)
和95.0% (57/60), 3组差异有统计学意义 (P<0.01)。 吡喹酮
对照组囊尾蚴死亡率为100% (60/60), 空白对照组囊尾蚴死亡
率为5.0% (3/60)。 天名精60 mg/ml组与吡喹酮对照组囊尾蚴死
亡率差异无统计学意义 (P>0.05)。
2.2 不同天名精浓度组囊尾蚴形态变化 20 mg/ml天名精组,
囊尾蚴头节部分完全翻出, 颈节部分伸出1~2节; 头颈节呈柱
状, 粗大, 示两圈点状小钩, 吸盘凸起变形, 囊体呈黄色 (图
1A)。 40 mg/ml组, 囊尾蚴仅翻出头部, 头部膨大呈圆球形 ,
顶端凹口处有一明显缺口, 示半圈点状小钩, 吸盘肿大变形,
囊体呈棕黄色, 囊体中不能翻出的颈节部分颜色较深 (图1B)。
60 mg/ml组, 囊尾蚴头部仅露出吸盘部分, 吸盘模糊不清, 顶
端凹口处变平, 未示点状小钩; 囊体呈球形, 紧缩状态, 囊体
胞质变淡, 棕色, 体表略成溶蚀状, 头部颜色比囊体深 (图
1C)。 吡喹酮对照组, 无囊尾蚴头节翻出, 囊尾蚴在吡喹酮药
物作用下, 头节略露出囊体, 囊液变少, 囊体皱缩, 体表呈溶
蚀状, 环状皱褶间隙明显增大, 可见纵细条纹 (图1D)。 空白
对照组, 95.0%的囊尾蚴头、 颈节完全从囊中自然脱出, 颈节
部位自行扭动明显, 较细, 原囊明显膨大, 前体部皱褶均匀细
密, 经胆汁染色呈黄色, 表面平滑, 可见明显吸盘、 顶突及两
圈点状小钩 (图1E)。
A: 20 mg/ml天名精组囊尾蚴头节形态; B: 40 mg/ml天名精组囊尾蚴头节形态; C: 60 mg/ml天名精组囊尾蚴头节形态; D: 吡喹酮对照组囊尾蚴
形态; E: 空白对照组囊尾蚴头节形态。
图1 都匀亚洲带绦虫囊尾蚴形态 (×100)
A B C D E
3 讨论
一系列实验证实贵州都匀牛带绦虫为亚洲带绦虫, 从江带
绦虫为传统的牛带绦虫[7-9]。 为进一步研究都匀亚洲带绦虫, 陈
利红等 [10]用都匀亚洲带绦虫感染免疫抑制小鼠获得成功。 汪
敏、 李薄等[11,12]对亚洲带绦虫实验感染家猪 (牛) 的病理学和
生化指标进行了系统研究, 但中草药对亚洲带绦虫囊尾蚴的杀
灭研究尚属空白。
文献显示天名精具有杀虫功效 [1,2]。 本实验将天名精煎剂
20、 40和60 mg/ml与都匀亚洲带绦虫囊尾蚴进行体外共培养,
24 h后观察囊尾蚴的死亡情况及形态。 结果可见3个浓度的天
名精对都匀亚洲带绦虫囊尾蚴均具有杀灭作用, 3组差异有统
计学意义。 杀灭的囊尾蚴囊体呈紧缩状, 头节膨大, 顶端凹口
处由凹变平, 吸盘组织变性, 形态变形, 说明药物主要作用于
囊尾蚴头节部分, 与许琳等[13]报道南瓜子麻痹和抑制囊尾蚴头
节以及张贵君等[14]报道的全蝎乙醇提取液麻痹猪囊尾蚴头节的
杀灭机制一致, 和赵冠宏等[15]报道雷丸蛋白酶体外抗猪囊尾蚴
形态和组织结构具有明显的破坏作用相似。 培养1 h头节变形
的囊尾蚴, 用生理盐水冲洗, 再置猪胆汁生理盐水溶液中培养
4 h, 未见囊尾蚴形态恢复正常, 说明天名精杀灭囊尾蚴的作
用效果好、 稳定。 今后将进行小鼠感染亚洲带绦虫囊尾蚴的体
内抗虫实验, 分析其化学成分, 了解药理作用机制, 为开发经
济、 低毒、 高效的体内抗虫药物提供实验依据。
参 考 文 献
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(收稿日期: 2015-01-15 编辑: 衣凤芸)
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