全 文 ：高效液相色谱法测定维吾尔药材香青兰中
田蓟苷和洋芹素的含量■
新疆维吾尔医学专科学校(和田 848000) 买买提·努尔艾合提 吐尔洪·艾买尔
江西中医学院(南昌 330004) 罗光明
摘 要:目的:建立维吾尔药材香青兰中田蓟苷和洋芹素的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法:采用 Agilent1200向效液
相色谱仪 、Diamonsil(钻石)C
18
5μ200×4.6mm色谱柱 , 甲醇 -0.2%磷酸水(48:52)洗脱 , 流速为 1.00ml/min, 检测波长为
328nm。结果:待测组分与其它组成分的分离度良好 , 田蓟苷和洋芹素分别在 12.3 ～ 72123μg/ml和 0.864 ～ 8.64μg/ml范围
内具有良好的线性关系(R=0.99989和 R=0.99993), 精密度 RSD分别为 0.977%和 0.793%(n=5)。田蓟苷和洋芹素平均
回收率分别为 100.07%、99.21%, RSD分别为 2.127%和 2.376%(n=5)。结论:此方法操作简便 、准确性好 , 可以作为香青
兰中田蓟苷和洋芹素含量测定方法。
关键词:维吾尔药;香青兰;高效液相色谱法;田蓟苷;洋芹素;含量测定
中图分类号:R291.5 文献标识码:B 文章编号:1006-6810(2009)11-0061-02
香青兰为维吾尔医常用药材 ,为唇形科(Labiatae)植物
香青兰(Dr6cocephalummoldavucaL.)的干燥全草 ,维吾尔语
名为 Badranjibuyaqini, 主产于新疆 ,目前在新疆各地有栽培。
该药材在维吾尔医和民间主要用于治疗冠心病及血液质旺
盛(高血压)、心悸心痛 、头晕脑胀 、反应迟钝 、感觉低下 、寒
性神经性头疼 、寒性感冒 、气管炎等疾病 〔1〕 , 有数百余年的
用药历史。在《中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药
材分册》 〔1〕、《新疆维吾尔药材标准》 〔1〕、《维吾尔药志 》〔1〕、
《中华本草》(维吾尔药卷)〔4〕均有记载。 但是没有有效成
分含量测定的资料 , 通过测定香青兰有效成分田蓟苷和洋
芹素 , 为控制药材质量提供科学依据。
1 仪器 、试剂和药材
Agilent-1200高效液相色谱仪(美国), Agilent化学工
作站 、UV检测器 、四元泵 , DiamonsilC18色谱柱(200mm×4.
6mm, 5μm,迪马), arium 611UV型超纯水系统(德国 Sarto-
rius公司), KQ-250超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公
司), BP211D电子天平(Sartorius, 万分之一)。高效液相用
甲醇 、乙腈:色谱纯 , TEDIA公司:其余试剂为分析纯:水为
高纯水。对照品:田蓟苷对照品(自备 , 用高效相色谱仪经
峰面积归一法测定纯度 >98%)、洋芹素对照品(含量测定
用 , 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心提供)。香青
兰药材来自新疆墨玉县忙来乡大汗村(新疆维吾尔医学专
科学校药材种植试验基地)及周围的种植地 , 经江西中医学
院药学院赖学文教授鉴定为唇形科植物香青兰 Dracoceph-
alummoldavucaL.的干燥全草。
■国家十一五科技支撑计划项目(子课题编号 2007BAI30B06-
4),新疆维吾尔自治区卫生厅青年人才培养项目(编号:2007Y13)
作者简介:买买提·努尔艾合提(1973), 在职硕士 ,从事维吾
尔药材资源开发研究。 E-mail:mamat-nur@163.com
2 方法与结果
2.1 色谱条件:DiamonsilC18色谱柱 (200mm×4.6mm,
5μm,迪马);流动相为甲醇:0.2%磷酸水溶液(48:52);流
速:1ml· min-1;柱温:30℃;检测波长:328nm;进样量:10μl。
2.2 线性关系的考察:精密称取田蓟苷对照品 6.15mg和
浓度为 108μg/ml的洋芹素对照品溶液 4ml, 置于 50ml容量
瓶中 , 甲醇溶解并稀释至刻度 ,作对照品溶液。
精密吸取上述对照品溶液制成一系列不同浓度的对照
品溶液 , 分别进样 , 按色谱条件测定峰面积积分值 , 以峰面
积为纵坐标 , 浓度为横坐标 , 绘制标准吸收曲线 , 线性范围
和回归方程分别为田蓟苷:Y=53.493x-21.97, R=0.
99989, 线性范围为:12.3 ～ 72123μg/ml,洋芹素:Y=84.155x
-19.4, R=0.99993, 线性范围为:0.864 ～ 8.64μg/ml。
HPLC色谱图见图 1。
2.3 供试品溶液的制备:取干燥粉碎的(30目)香青兰药材
粉末约 0.5g, 精密称定 , 置索氏提取器加甲醇 50ml, 提取
3h, 提取液浓缩定容 10ml, 加入已处理好的聚酰胺柱(80-
120目 , 3g,内径 1.5cm)上 , 用水 50ml洗脱 , 弃去水液 , 再经
甲醇 100ml洗脱 , 收集洗脱液 , 减压蒸干 ,残渣用色谱甲醇溶
解并定容 10ml, 摇匀;用微孔滤膜(0.45μm)滤过即得。
2.4 精密度实验:精密吸取标准品溶液 , 按 “ 2.1”项下色谱
条件 , 连续进样 6次 , 每次进样 10μl, 测定峰面积值计算
RSD, 田蓟苷和洋芹素 RSD分别为 0.977%、 0.793%, 说明
仪器和色谱条件的精密度都良好。
2.5 重现性实验:精密称取同一批药品粉末 0.5g共 5份 ,
按 “ 2.3”项下样品溶液的制备操作 , 按 “ 2.1”项下条件连续
进样 5次 , 每次 10μl, 测定峰面积计算 RSD, 田蓟苦和洋芹
素的 RSD分别为 1.83%、1, 74%,结果显示 , 该方法具有较
好的重现性。
612009年 11月第 11期 中国民族医药杂志 DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2009.11.046
图 1 HPLC色谱图
2.6 稳定性实验:在室温条件下 , 将样品按测定方法处理
后 , 分别在 0、 4、8、16、24h进样 10μl, 测得峰面积计算 RSD,
田蓟苦和洋芹素的 RSD分别为 0.26%、0.16%(n=5)。结
果表明 , 供试品溶液在 24个小时内的含量基本保持不变。
2.7 加样回收率实验:取已知含量香青兰粉末 5份 ,每份约
0.5g,分别添加含量分别为 123μg/ml和 8.64μg/ml的田蓟
昔和洋芹素对照品混合溶液 5ml, 按 “ 2.3”项下供试品溶液
的制备方法处理 , 按 “ 2.1”项下色谱条件进样分析 , 计算
表 1 不同批次香青兰中田蓟苷和
洋芹素含量测定结果(n=3)
样品编号 田蓟苷含量(%)±RSD(%)
洋芹素含量(%)
±RSD(%)
新疆墨玉县芒来乡达汗村 0.141±0.612 0.00602±1.645
新疆墨玉县芒来乡达汗村 0.179±0.358 0.00675±1.212
新疆墨玉县墨玉镇卡亚西村 0.040±0.796 0.00145±1.676
新疆墨玉县忙来乡阿克塔木村 0.116±0.097 0.00332±1.700
新疆洛浦县布亚乡恰勒米村 0.155±0.296 0.00143±0.521
新疆洛浦县玉龙喀什镇英阿瓦提村 0.106±0.142 0±0
新疆墨玉县芒来乡吐格日亚村 0.122±0.810 0.00807±0.822
平均值 0.123±0.444 0.00386±1.082
回收率 , 田蓟苷和洋芹素的平均回收率分别为 100.07%、
99.21%:R5D分别为 2.13%, 2, 38%(n=5),表明方法回收
率较好。
2.8 样品的测定:按 “ 2.3”项下供试品溶液的制备方法分
别处理不同产地不同栽培时期的香青兰药材 7批 , 依次进
样检测其田蓟苷和洋芹素的含量 ,结果见表 1。
3 讨 论
本实验利用高效液相法测定维吾尔药材香青兰中田蓟
苷和洋芹素含量 , 尚属首次 , 该方法简便 、准确 , 重现性好 ,
为香青兰药材的开发提供了质量控制标准。
参考文献
〔1〕中国药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准(维
吾尔药分册)〔M〕.乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社 ,
1999.72.
〔2〕新疆维吾尔自治区卫生厅.维吾尔药材标准 〔M〕.乌鲁
木齐:新疆科技出版社 , 1999.245-249.
〔3〕刘勇民.维吾尔药志(上册)〔M〕.乌鲁木齐:新疆科技卫
生出版社 , 1999.405-407.
〔4〕中华本草编委会.中华本草(维吾尔药卷)〔M〕.上海科
学技术出版社 , 2005.235.
2009年 7月 6日收稿
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62 中国民族医药杂志 2009年 11月第 11期