免费文献传递   相关文献

香青兰抗血小板聚集及抗血栓作用



全 文 :(IL-10)and tumor necrosis factor alpha(TNF-α)were detected by Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results:The inhibition
rate of the tumor growth in the SLT low and high dose groups (4 g /kg,8 g /kg)are 84. 26% and 62. 24%,obviously higher than CTX group
29. 28% . After treated with SLT,the thymus index was up-regulated,while the spleen index was down-regulated The percentage content of
CD3 +,CD4 + lymphocyte T were improved,while the percentage of CD8 + lymphocyte T were reduced,and CD4 + /CD8 + was increased
markedly. The levels of serum IL-6 and IL-10 were up-regulated significantly,and the level of TNF-α has the tendency to rise. Conclusion:
Sedum lineare had an anti-tumor effect on S180-bearing mice,and its mechanism result of improving the immune response function.
Key words Sedum Lineare(佛甲草);tumor-bearing mice;the inhibition rate of tumor;immunologic mechanism
香青兰抗血小板聚集及抗血栓作用
*
阿迪拉木·阿比利米提,王新玲,热娜·卡斯木**,阿衣努尔·热合曼,
派日黛姆·乌布勒,娜地拉·热依木,王晓梅,胡君萍
(新疆医科大学药学院,乌鲁木齐 830011)
摘 要 目的:评价香青兰提取物及不同萃取部位体外抗血小板聚集及抗血栓作用。方法:应用比浊法测定香青兰水提物、
醇提物及三个不同萃取部位体外抗血小板聚集作用,采用 FeCl3 诱导大鼠颈动脉血栓模型,小鼠肺血栓模型及大鼠下腔静脉血栓模
型 3 种实验性血栓模型,考察香青兰不同溶剂提取物抗血栓形成作用。结果:香青兰醇提物、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等萃取部位以
10μg / ml、100μg / ml、1000μg / ml 均具有不同程度的抑制血小板聚集作用,10μg / ml 为有效剂量; 香青兰不同提取物 100mg /kg、
400mg /kg延长 FeCl3 诱导大鼠颈动血栓形成时间,并减轻血栓湿质量; 提高胶原蛋白-肾上腺素混合诱导剂所致肺血栓小鼠的存活
率; 减轻结扎法所致下腔静脉血栓湿质量,且其中乙醇为溶剂剂量为 400 mg /kg的香青兰提取物效果最为显著。结论:香青兰醇提
物与正丁醇萃取部位具有较强的抗血小板聚集作用;香青兰醇提物具有显着的抗血栓作用。
关键词 香青兰;凝血酶;血小板聚集;抗血栓
香青兰(Dracocephalum moldavica L.)为唇形科青兰属植
物,以干燥的地上部分入药[1]。分布于我国东,北西,北及华北
等地区,特别是新疆,资源丰富[2],主要含有黄酮、挥发油[3]等。
香青兰是民间用于治疗心脑血管疾病的常用维吾尔药[4],研究
发现[5]香青兰水煎剂单方在维吾尔医用于预防和治疗冠心病
及血液质旺盛(高血压)、寒性神经头疼、寒性感冒、活血化瘀、
通路开窍及止痛解毒等。其作用机制可能与血小板聚集率、抗
质脂过氧化损伤及改善患者血液粘度、心肌缺血等因素有关。
本文拟对香青兰提取物及三个不同萃取部位的体外抗血小板
聚集实验与香青兰不同溶剂提取物对不同动物体内血栓形成
模型实验,对香青兰进行了活血化瘀作用研究,为临床运用香
青兰治疗心血管方面疾病研究奠定基础。
1 材料
1. 1 试验药物 香青兰地上部分 9. 8kg,由新疆医科大学药学
院生药教研室帕丽达教授鉴定。晒干,粉碎到 1 ~ 2cm,加水 8
~ 10 倍,回流提取 3 次,合并浓缩提取液所得的膏浸干燥。水
提浸膏与水混悬,依次用极性不同的有机溶剂氯仿、乙酸乙酯、
正丁醇萃取回收有机溶剂,收集各部分浸膏,备用。醇提物的制
备方法为香青兰地上部分 10kg,加 8 倍 95%乙醇溶液回流提取
3 次,合并浓缩提取液所得的膏浸干燥,实验时配成不同的浓
度。银杏叶片,哈药药业有限公司,批号:090303。
1. 2 动物 新西兰种兔,雄性,体重:1. 8 ± 0. 5kg。饲养环境:
每 12 h明暗交替,温度 21 ± 2℃,湿度 40 ~ 45%,由新疆医科大
学实验动物中心 2011-0004 提供。SD大白鼠,KM小鼠(疆维吾
尔自治区疾控中心实验动物中心提供,大鼠雌雄各半,300 ~
400g。温度:控制目标为 23℃ ± 2℃;相对湿度:控制目标为
40% ~60%,有空气净化装置;饲料:自由摄食经灭菌的啮齿类
动物颗粒饲料;饮水:自由饮水,由动物饲养人员添加;光照:人
工照明,每 12 h明暗交替;每 3 天更换垫料一次。
1. 3 试剂 凝血酶(Sigma公司进口分装);阿司匹林(Sigma公
司进口分装,批号:200064);胶原蛋白(Sigma 公司进口分装);
盐酸肾上腺素注射液(天津药业集团新郑股份有限公司,批号:
071101)。6-keto-PGF1α放免试剂盒(北京北方生物技术研究
所,批号 20130110 ),TXB2 放免试剂盒(北京北方生物技术研
究所,批号 20130110 )。
1. 4 仪器 BC-2300 准全自动三分群血液细胞分析仪(深圳迈
瑞生物医疗电子股份有限公司);490-4D血小板凝聚仪(CHRO-
NO-LOG,USA);全自动酶标仪(BECKMAN AD340);冷冻干燥
机(北京博医康实验仪器有限公司,FD);半导体点式温度计(西
门子电子仪器厂);NU-6511E 超低温冰箱(日本 NUAIRE 公
司)。
1. 5 方法
1. 5. 1 体外抗血小板聚集实验[6,7] 从家兔耳缘静脉取血,3.
8%枸橼酸钠 1∶ 9 抗凝。先以 1000 rpm 离心 10 min 得到上层
68 中药药理与临床 2013;29(6)
* [基金项目]2012 年国家科技支撑计划课题维吾尔,哈萨克药生物活性成分筛选和现代标准组分库建设 ( 2012B) **通讯作者
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2013.06.028
液即富血小板血浆(platelet-rich-plasma,PRP),余下部分以 3000
r /min 离心 15 min,得到贫血小板血浆(platelet-poor-plasma,
PPP),用 PPP 调零和稀释 PRP中的血小板数至 200 × 109 个 / L
。PPP调零,以 270μl PRP 加 30μl 受试样品,37℃条件下预热
5min,加入凝血酶(凝血酶终浓度为 10U /ml),测定由凝血酶诱
导的血小板聚集率。血小板聚集率越高,则说明受试样品抗血
小板聚集能力越弱。按比浊法在 490-4D 型血小板聚集仪上进
行血小板聚集测定,观察 5 分钟视其最大聚集率,血小板抑制聚
集百分率 =(对照管血小板聚集率-样品管血小板聚集率)/对
照管血小板聚集率 × 100%。
1. 5. 2 FeCl3 诱导大鼠颈总动脉血栓形成实验
[8 ~ 10] 取 SD
大鼠 64 只,雌雄各半,随机分为 8 组,每组 8 只,即空白组,模型
组(给予等体积的生理盐水),阳性对照组阿司匹林组(5mg /
kg) ,银杏叶片组(120mg /kg),香青兰水提物低,高(100、400
mg /kg) ,香青兰醇提物低、高(100、400 mg /kg)。各组动物灌胃
给药 10 天,每日给药 1 次,给药体积为 1ml /100g,末次给药 2h
后腹腔注射水合氯醛麻醉,首先分离右侧颈总动脉 2cm,下面方
置小片塑料薄膜(2. 5cm × 1cm),方置小片塑料薄膜的原因是为
了保护血管周围组织,将吸有 70% FeCl3 溶液的滤纸片(1cm ×
1cm)敷于暴露的动脉表面上,空白组敷的是生理盐水滤纸片,
然后监测动脉表面温度变化,监测时用半导体点式温度计,等
温度达到最高温度之后,敷上浸泡 FeCl3 的滤纸片,记录从敷上
滤纸片开始计时,至温度突然下降的时间为血栓形成时间(oc-
clusiontime,OT),剪下血栓发生部位的血管放于滤纸上吸干残
血,以电子分析天平称其重量。计算血栓形成抑制率,血栓形成
的抑制率% =(模型组血栓重量 -药物干预组血栓重量)/模型
组血栓重量 × 100%。
1. 5. 3 香青兰对大鼠血栓模型 TXB2 和 6-keto-PGF1α 含量的
影响 取 SD大鼠 64 只,雌雄各半,动物分组,给药,麻醉及手
术方法同 1. 5. 2。剪下血栓后,快速分离腹主动脉,颠倒混匀,
4℃离心,3000 rpm,15min,分离血浆,采用放射免疫法检测大鼠
血浆中的 TXB2 和 6-keto-PGF1α含量。
1. 5. 4 小鼠肺血栓实验 取小鼠 100 只,体重量 19 ~ 22g雌雄
各半,随机分成 5 组,即:模型组(生理盐水组),阿司匹林组(5
mg /kg),银杏叶片组(120mg /kg),香青兰水提物组(400mg /
kg) ,香青兰醇提物组(400mg /kg),每组 20 只。小鼠分别灌胃
给药 15d,1 天 1 次,给药体积为(10mg /kg),末次给药 2h 后参
照 Diminno等的方法[11],尾静脉注射胶原蛋白(10mg /kg )与肾
上腺素(1mg /kg)混合诱导剂,模型组注射生理盐水,观察 5min
内小鼠死亡数,计算小鼠存活率。
1. 5. 5 下腔静脉血栓实验 取雄性大鼠 50 只,随机分成 5 组,
即:模型组(生理盐水组)、阿司匹林组(5mg /kg)、银杏叶片组
(120 mg /kg)、香青兰水提物组(400 mg /kg)、香青兰醇提物组
(400 mg /kg),每组 10 只。各组动物灌胃给药 15d,1 天 1 次,
给药体积为 10 mg /kg,末次给药 1h 后腹腔注射乌拉坦(1. 5g /
kg)麻醉,参照 Reyer 等的方法[12],沿大鼠腹中线开腹腔,分离
下腔静脉,于下腔静脉和左肾静脉交叉下方用丝线结扎,缝合
腹壁。4h后重新开腹腔,用止血钳将距结扎处 2cm 的下腔静
脉和与下腔静脉连接的其他静脉侧枝夹住,剪取该段静脉,分
离出血管内血栓与滤纸上吸干残血,测其血栓质量,并按上述
公式计算血栓形成抑制率。
2 结果
2. 1 体外抗血小板聚集实验 结果表明香青兰醇提物与正丁
醇萃取部位由凝血酶诱导的抗血小板聚集作用最强,10μg /ml
表现出显著的抑制作用,其抑制能力与同浓度的其他组分比较
也较为明显;乙酸乙酯、氯仿萃取部位也具有较强的抗血小板聚
集作用,其 100μg /ml抑制作用显著,水提物抗血小板聚集作用
弱。血小板聚集率与各组分质量浓度之间存在着明显地剂量依
赖性。
表 1 香青兰各萃取部位对血小板聚集的影响(珋x ± s,n = 9)
组别 终浓度(μg /ml) 血小板聚集率(%)
对照组 85. 65 ± 4. 30
香青兰醇提物 10 72. 01 ± 5. 21**
100 63. 56 ± 4. 80**
1000 50. 43 ± 5. 56**
香青兰水提取物 10 80. 66 ± 6. 30
100 75. 23 ± 6. 50
1000 68. 44 ± 7. 70**
香青兰正丁醇萃取部位 10 75. 00 ± 5. 00**
100 68. 78 ± 4. 60**
1000 59. 33 ± 5. 42**
香青兰乙酸乙酯萃取部位 10 79. 11 ± 4. 50
100 72. 56 ± 4. 55**
1000 64 ± 2. 93**
香青兰氯仿萃取部位 10 79. 67 ± 5. 49
100 73. 56 ± 3. 78*
1000 67. 11 ± 4. 44**
与对照组比较 * P < 0. 05,** P < 0. 01
2. 2 FeCl3 诱导大鼠颈总动脉血栓形成实验 结果表明,空白
组无血栓形成,模型组右侧颈总动脉可见有闭塞性血栓形成。
与模型组相比,香青兰水提物,香青兰醇提物均能显著延长血栓
形成时间并降低血栓重量,且作用呈浓度依赖性,血栓重量测定
结果显示,与模型组比较香青兰水提和醇提取物大、小剂量组,
其均显著减轻血栓重量,差异均有统计学意义,香青兰水提物和
醇提取物低剂量组血栓重量明显比大剂量组减轻,差异具有统
计学意义,抑制率分别为 28. 8%、39. 3%、26. 9%、37%。
表 2 香青兰提取物对 FeCl 3 致大鼠颈总动脉栓塞形成的影响(珋x
± s,n = 8)
组别
剂量
(mg /kg)
血栓形成时间
(s)
血栓重量
(mg)
抑制率
(%)
空白对照
模型对照 728 ± 50 7. 94 ± 0. 82
阿司匹林 5 1013 ± 104** 5. 23 ± 1. 7 ** 33. 2
银杏叶 120 874 ± 91* 5. 26 ± 1. 72** 31. 7
香青兰水提 100 900 ± 45* 4. 86 ± 1. 9** 39. 3
香青兰水提 400 1005 ± 89** 5. 63 ± 0. 70* 28. 8
香青兰醇提 100 1005 ± 89** 5. 63 ± 0. 70* 37. 0
香青兰醇提 400 1005 ± 88** 5. 80 ± 1. 25* 26. 9
与模型组比较 * P <0. 05,** P <0. 01
2. 3 香青兰对大鼠血栓模型 TXB2 和 6-keto-PGF1α 含量的影
响 结果表明,与生理盐水组比较,模型组 6-keto-PGF1α 降低,
且 TXB2 的含量显著升高,与模型组相比,香青兰提取物小、大
剂量均明显降低 TXB2 的含量,升高 6-keto-PGF1α的含量,差异
具有统计学意义。
78中药药理与临床 2013;29(6)
表 3 香青兰对大鼠血栓模型 TXB2 和 6-keto-PGF1α 含量的影响
(珋x ± s,n = 8)
组别
剂量
(mg /kg)
6-酮前列腺素
(pg /ml)
TXB2
(pg /ml)
空白对照 2932. 37 ± 451. 99 173. 88 ± 1. 05
模型对照 364. 9 ± 121. 15 533. 97 ± 56. 50**
阿司匹林 5 1404. 07 ± 91. 39* 263. 05 ± 33. 09
银杏叶 120 1368. 8 ± 81. 50* 231. 10 ± 0. 08
香青兰水提 100 2562. 1 ± 97. 66 215. 63 ± 0. 18
香青兰水提 400 1925. 14 ± 70. 06* 250. 98 ± 0. 08
香青兰 醇提 100 2322. 6 ± 93. 7 271. 89 ± 0. 05*
香青兰 醇提 400 1136. 04 ± 172. 88** 292. 40 ± 0. 07*
与模型组相比 * P <0. 05,** P <0. 01(下同)
2. 4 小鼠肺血栓实验 结果表明,香青兰提取物对由胶原蛋白
和肾上腺素混合诱导剂引发的肺血栓有一定的保护作用,香青
兰水提物组,香青兰醇提物组存活率分别达到了 31. 4%、68.
7%。
表 4 香青兰提取物对小鼠肺血栓塞的抑制作用
组别 鼠数(只) 死亡数(只) 存活率%
模型对照 18 15 /18 10. 1
阿司匹林 17 10 /17 41. 3*
银杏叶 19 11 /19 41. 9*
香青兰水提 17 12 /17 31. 2
香青兰醇提 18 5 /18 68. 7**
2. 5 下腔静脉血栓实验 结果表明,与生理盐水对照组比较,
香青兰醇提物组能显著减少结扎所致大鼠下腔静脉血栓质量,
血栓形成抑制率为 27. 1%。
表 5 香青兰提取物对下腔静脉血栓实验小鼠肺血栓塞的抑制作
用(珋x ± s)
组别 鼠数(只) 血栓的质量(mg) 血栓抑制率%
模型对照 10 6. 73 ± 0. 55
阿司匹林 10 5. 30 ± 0. 70** 20. 1
银杏叶 10 5. 24 ± 0. 72** 24. 8
香青兰水提 10 6. 01 ± 0. 56 10. 9
香青兰醇提 10 5. 01 ± 0. 28** 27. 1
3 讨论
血栓形成涉及机体凝血功能,血小板功能,血管内皮功能
等众多因素,其引起的栓塞和缺血是许多心血管疾病发生的重
要病理基础。本研究通过体外抗血小板聚集实验以及 3 种不同
的动物体内血栓形成模型实验初步发现香青兰醇提物与正丁
醇萃取部位使凝血酶诱导的家兔血小板最大聚集率显著降低,
说明具有体外抗血小板聚集作用;香青兰用不同的溶剂提取,
其抗血栓作用有所不同,醇提物具有较强明显的抗血栓作用而
水提物作用不如醇提物强,其抗血栓物质基础可能是脂溶性较
高的黄酮类成分。
目前国内外对香青兰的研究主要集中在临床观察和药理
研究方面,对其药效物质基础的研究较少。因此本课题我们针
对性地对该传统的维吾尔药进行从血小板聚集和血栓形成两
方面的药效物质基础研究初步揭示了香青兰活血化瘀的药理
基础,进一步说明了作为药用的可行性,并为临床应用提供了
有效数据和研究基础。
参考文献
1 刘勇民(主编). 维吾尔药志(上).乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社.
1999∶ 405 ~ 406
2 宋睿,金传山,周亚伟,等.维药香青兰的研究进展. 安徽医药,2010:
14(3)∶ 344 ~ 345
3 Saeidnia S,Gohari AR,Uchiyama N,et al. Two new monoterpene glyco-
sides and trypanocidal terpenoids from Dracocephalum kotschyi. Chen Pharm
Bull. 2004;52(10),1249 ~ 1250
4 徐叔云,卞如濂,陈修,等.药理实验方法学(第三版)北京:人民卫生
出版社,2001∶ 1281 ~ 1281
5 中华人民共和国卫生部药典文员会. 中华人民共和国卫生部药品标
准维吾尔分册.乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社,1999∶ 73 ~ 74
6 王欢,唐于平,郭建明,等.当归一川芎药对不同配比组方对家兔血小
板聚集和凝血功能的影响.中国实验方剂学杂志,2010;16(2)∶ 73 ~ 75
7 龚小见,陈华国,等.姜黄活性成分对血小板聚集及小鼠常压耐缺氧
能力的影响. 中国实验方剂学杂志,2010;16(11)∶ 125 ~ 126
8 Kurz K D,Main B W ,Sandusky G E. Rat model of arterial thrmbosis
induced by ferric chloride. Thromb Res ,1990,60(4)∶ 269 ~ 280
9 刘小光,徐理纳,等.一种能评价溶栓和抗栓药的大鼠大脑中动脉血
栓模型.药学学报,1995;30(9)∶ 622 ~ 624
10 张玉珍.银杏叶提取物(EGB )对大鼠局部脑缺血及颈静脉血栓形
成的保护作用.药学学报,1998;33(12 )∶ 901 ~ 903
11 Giovanni Diminno,Mellvin J. Silver. Mouse antithrombotic assay:A
simply method for the evaluation of antithrombotic activity by Ethyl Alcohol.
Pharmacol Exp Ther,1983;22(5)∶ 57 ~ 58
12 Reyer L. Failure of asprin at different doses to modify experimental
thrombosis in rat. Thromb Res,1980;18(5)∶ 669 ~ 670
Study on anti-platelet aggregation and anti-thrombotic role of Dracocephalum moldavica L
A Dilamu abilimiti,Wang Xinling,Re Nakasimu,A Yinuer Rehiman,Pai Redaimu Wubuli,Na Dila Reyimu,Wang Xiaomei ,Hu Junping
(College of Pharmacy,Xinjiang Medical University,Urumqi 830011)
Objective:To evaluation of anti-platelet aggregation and anti-thrombotic role of in Dracocephalum moldavica L. extractions and different
fractions. Methods:Using turbidimetry determination of Dracocephalum moldavica L. alcohol extracts ,aqueous extraction and different frac-
tions anti-platelet aggregation;three experimental models in vivo,FeCl3- induced arterial thrombosis,Pulmonary thromboembolim in mice
and ligation- induced inferior caval thrombosis in rat were used to examine the antithrombotic activity of aqueous and alcohol extract of Draco-
cephalum moldavica L. Results:Dracocephalum moldavica L. alcohol extracts,chloroform,ethylacetate,n-butanol fractions were 10μg / ml,
100μg / ml,1000μg / ml all three dose have effectively inhibit platelet aggregation induced by thrombin;10μg / ml for the effective dose ;
88 中药药理与临床 2013;29(6)
Dracocephalum moldavica L. different extracts of 100 mg /kg and 400 mg /kg can extension arterial thrombosis induced by FeCl3 and signifi-
cantly decease wet weight of thrombus(P < 0. 05 or P < 0. 01);markedly increase the survival rate of the mouse suffering from Pulmonary
thrombosis induced by the mixture of collagen and epinephrine(P < 0. 05 or P < 0. 01)and significantly decreased the weight of thrombus liga-
tion of inferior venacava(P < 0. 05 or P < 0. 01) ;the dose were 400 mg / kg alcohol extracts effect is most significant(P < 0. 01). Conclu-
sion:Dracocephalum moldavica L. alcohol extracts and n-butanol fraction showed better anti-platelet aggregation ;alcohol extracts have strong
anti-thrombotic activity.
Key words Dracocephalum moldavica L(香青兰);thrombin;anti-platelet aggregation;anti-thrombotic;
红葱对急性胃黏膜损伤的保护作用及抗氧化作用
戴娇娇1,闵庆喜1,钟彩红1,朱全红1* ,王红星2
(1南方医科大学中医药学院,广州 510515;2广州白云华南生物科技有限公司,广州 510545)
摘 要 目的:研究红葱乙醇提取物对实验性急性胃黏膜损伤的保护作用及其抗氧化作用,并研究了红葱的急性毒性。方
法:采用无水乙醇诱导大鼠胃溃疡损伤模型,通过测定胃黏膜溃疡指数观察红葱乙醇提取物不同剂量组对大鼠胃黏膜损伤的保护
作用;采用老龄小鼠模型,测定小鼠血液和肝组织中 SOD、GSH-Px 活性与 MDA的含量;采用小鼠最大耐受量( MTD) 灌胃法,间隔 6
小时连续 3 次给药后,常规饲养小鼠 14 天,记录小鼠毒性反应情况,死亡数目及体重变化。结果:与模型组比较,红葱乙醇提取物中
剂量组( 18. 75g /kg) 能显著减小溃疡大鼠的溃疡面积,降低血液中 MDA含量,增强 SOD活性及 GSH-Px活性;红葱乙醇提取物能显
著增强血液中 SOD活性及 GSH-Px活性;红葱乙醇提取物高剂量组、中剂量组能明显降低肝组织中 MDA含量,增强 SOD活性; 低剂
量组能明显降低肝组织中 MDA含量,增强 GSH-Px活性。小鼠 1 天内的最大给药量为 112. 5g /kg,14 天内未见小鼠出现毒副反应。
结论:红葱乙醇提取物具有保护胃黏膜作用和抗氧化作用,初步评价无明显毒性作用。
关键词 红葱;胃黏膜损伤保护;抗氧化作用;急性毒性
红葱为鸢尾科(Iridaceae)植物红葱(Eleutherine plicata)的
鳞茎,红葱主治吐血,咯血,痢疾,闭经腹痛,风湿痹痛,跌打损
伤,疮疖肿毒的功效。从红葱中分离得到的红葱甲、乙、丙素的
混合结晶制成的片剂用于冠心病有较好疗效且未见明显副作
用[1]。另有文献报道同属植物红葱(Eleutherine americana)的
主要活性成分为萘醌衍生物及其葡萄糖苷,具有扩张冠状动
脉[2]、体外抗菌[3]、抗人体肿瘤细胞活性[4]、降低血糖[5]、促进
细胞生长[6]、作为天然抗氧剂抑制脂质过氧[5]等药理作用,由
此推断红葱具有胃黏膜保护作用和抗氧化作用。目前对红葱
(Eleutherine plicata)的药理作用研究仍然比较少,为进一步的
开发和临床用药提供药理基础,本文探讨了红葱在保护胃黏膜
方面的作用及抗氧化作用,并探究其急性毒性。
1 材料与方法
1. 1 试验药物 红葱乙醇提取物:红葱采集于广州华南生物科
技有限公司药材基地,经马骥教授鉴定为鸢尾科红葱 Eleuther-
ine plicata鳞茎;制备方法[4,7]为红葱药材加入 10 倍(V/W)
95%乙醇,浸渍 30min 后,87℃水浴加热回流 2h,过滤,滤液
40℃、30rpm减压回旋蒸发,回收乙醇,浓缩液蒸发至无醇味,加
蒸馏水配成不同浓度的受试物溶液。西咪替丁片,广东恒健制
药有限公司,国药准字 H44020624,产品批号 110403;维生素 E
软胶囊 (天然型),青岛双鲸药业有限公司,国药准字
H20043134,产品批号 110708。
1. 2 动物 Wistar大鼠 72 只,雄性,体重(200 ± 20)g,由广东
省医学实验动物中心提供,生产许可证号:SCXK(粤)2008-
0002。9 月龄 CD-1 小鼠 50 只,雄性,体重(40 ± 5)g,4 周龄 CD-
1 小鼠 10 只,雄性,体重(20 ± 2)g,均由北京维通利华实验动物
技术有限公司提供,动物合格证号:SCXK(京)2007-0001。SPF
级昆明小鼠 40 只,雌雄各半,体重(20 ± 2)g,由南方医科大学
实验动物中心提供,生产许可证号:SCXK(粤)2011-0015。
1. 3 试剂 丙二醛(MDA)试剂盒、超氧化物歧化酶(T-SOD)
试剂盒、谷胱甘肽氧化物酶(GSH-Px)试剂盒(均由南京建成生
物工程研究所提供,生产批号分别为 20111213、20111222、
20111219)。
1. 4 仪器 GG17R 系列旋转蒸发器(上海申生科技有限公
司);Agilent8453 紫外分光光度计(美国惠普公司);KDC-12 低
速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司)。
1. 5 方法
1. 5. 1 胃溃疡损伤实验 以体重为 60kg 的人的日用量为 45g
换算,大鼠的等效剂量为 7. 5g /kg,设定此为低剂量,2. 5 倍等效
剂量为中剂量,5 倍等效剂量为高剂量。具体如下:红葱乙醇提
取物高剂量(37. 5g /kg)、中剂量(18. 75g /kg)、低剂量(7. 5g /
kg)、西咪替丁(150mg /kg,蒸馏水配液)、模型组(2ml 蒸馏水)、
空白组(2ml蒸馏水)。
将大鼠随机分为 6 组,每组 12 只:空白组、模型组、西咪替
丁组、红葱乙醇提取物高、中、低剂量组。大鼠适应性饲养 3 天
后,空白组和模型组给予 2ml蒸馏水灌胃,阳性对照组给予西咪
98中药药理与临床 2013;29(6)
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2013.06.029