全 文 ：第巧卷 第 1期
19 94
昆 明 医 学 院 学 报
A C A D EM IC JO U R N A L O F K U N M IN G M ED I C A L C O L L E G E
V o l
.
1 5 N o
.
l
1 9 94
珠子参总皂贰对脾细胞增殖效应影响的研究 `
朱新华 l) 后文俊 2) 李存德 2 )
( )j 足明 医学院 实验核 医 学教研室 ; 2) 昆 明医 学院 药理 学教研室 , 昆 明 6 5 0 0 31 )
摘要 本文采用 ’ H一 T d R 掺人法 , 进行了脾细胞增殖效应的实验 , 观察了珠子参总皂贰体内
外给药时及不同浓度时 , 对有丝分裂原所诱发的淋巴细胞增殖效应的影响 . 结果表明 : 珠子参总
皂贰对 P H A 和 C o n A 诱导 下的 T 细胞增殖效应有明显的增强作用 , 而对 L P S 诱导下的 B 细胞增
殖效应无明显增强作用 , 其浓度的高低也影响着 T 细胞增殖反应的增强作用 . 结合以往的研究 ,
进一步证实了珠 子参的免疫药理作用是多方面的 , 尤其是有复杂的免疫调节性能 本文为珠子参
的临床应用提供了实验依据 .
关键词 珠子参总 一皂贰 脾细胞增殖效应 有丝分裂原 T 细胞 B 细胞
中图分类号 R g R 3
珠子参的植化成分及中医传统的临床应
用与人参 、 三七 、 竹参相似 , 民间用在跌打
损伤 、 止血 、 补气养血等方面 川 , 但国内
外对其药理作用的研究甚少 . 近年来 , 我们
通过免疫学筛选实验发现并报道 了珠子参总
皂贰能增强正常小鼠及免疫功能处于抑制状
态 小 鼠 的 细 胞 免疫 功 能 和 体 液 免疫 功
能 〔2〕 , 也证实了其对 N K 细胞活性具有明
显的促进作用 . 为了进一步探讨珠子参总皂
贰的免疫药理作用 , 我们在过去研究的基础
上 , 采用 3 H一 T d R 掺人法进行实验 , 观察
了珠子参体内外给药时对不同有丝分裂原所
诱发的淋巴细胞增殖效应的影响以及不同浓
度时对有丝分裂原所诱发的淋 巴细胞增殖效
应的影响 .
进 口 分 装 ) , L P S ( S ig m a 公 司 产 品 )
, H一 T d R ( 15
.
5 M B q 瓶 一 , , 中国原子能
所 1 9 8 9 年 l 月产 ) . 平底 96 孔 , 4 0 孔微量
细胞培养板 . 多头细胞收集器 (上海医科大
学监制 ) ; 国产 12 0 7 型液体闪烁计数仪 . 49
型玻璃纤维滤纸膜 . 微型震荡器 ,
动物 : B A L B / c 纯系小鼠 , 体重 18 一
23 9
, 雌雄兼用 .
1 材 料
珠子参总皂贰 , 由昆明植物研究所提
供 , 临用 时配制 . R P M l l 640 完全营养液
(含 15 %小牛血清 ) . 促有丝分裂原 : P H A
(广州医药工业研究所出品 ) , C o n A (北京
2 方法与结果
2
.
1 珠子参总皂贰体内给药时对不同丝裂
原诱发小鼠脾细胞增殖效应的测定 即
动物分组 : B A L B / c 纯系小 鼠按性
别 、 体重平均分为两组 . 珠子参组 , 用新鲜
配制的珠子参总皂贰按 10 0 m g · k g一 ` 灌胃
给药连续 20 d . 对照组 , 给予同量生 理盐
水 , 连续 20 d .
小鼠脾细胞的制备 : 取珠子参组及对照
组小鼠 , 分别摘眼球放血 , 处死 , 无菌条件
下分离脾细胞 , 离心 洗涤 巧0 r / m in ,
10 m in
, 共 3 次 , 用 1640 完全营养液调整
, 云南省应用基础研究基金资助项 目
昆 明 医 学 院 学 报 第 巧 卷
细胞数为l xl o” , 广 · L 一 ` , 将此细胞悬液
按组编号 , 分 别 以每个样 品两个复孔加人
9 6 孔细胞培养板 , 每孔 10 0 拜L . 分别加入 3
种丝裂原 , 使其浓度 为 (m g · L一 , :) P H A
6 2
.
5
,
C o n A 10
.
0
,
L P S 1 2
.
5
.
淋巴细胞培养及同位素样品收集 : 上述
细胞培养板置人微型混合器震荡 1 m in , 置
37 ℃ , 5% C O 。 培养箱孵育 72 h , 于终止培
养前 16 h 每孔加入 ’ H一 T d R 3 7 k B q , 培养
结束后 , 用多头细胞收集器 , 将细胞收集于
49 型玻璃纤维滤纸膜上烘干 , 用液体闪烁
计数仪 自动测量记录脉冲数 c( pm ) , 结果
见表 1 .
表 1 珠子参总皂贰体内给药后对 3种丝裂原诱发脾细胞增殖效应的 比较 (叩 m J 士 : )
3H一 T d R 掺人
组 别
PH A C
o n A
珠子参组
对 照 组
l 3
l l
2 4 9 9 1士 9 3 5 2 . 3
9 0 4 6
.
7 3 士 7 4 6 0 . 7 2
< 0
一
0 1
2 9 5 1
.
1 5士 1 5 13 .0 2 1 2 1 1 . 8 6 士 1 0 4 5 . 19
7 30
.
4 5士 58 7 . 2 9 1 0 7 4 . 8 2 士 6 2 6 一 6 1
( 0
.
0 1 > O刀5
实验结果表明 , 珠子参体内给药后 , 对
T 细胞促有丝分裂原 P H A 和 C o n A 所诱导
下的脾细胞增殖效应有明显增强作用 , 而对
B 细胞促有丝分裂原 L P S 诱导下的脾细胞
增效应无明显增强作用 .
.2 2 体外给药时对 T 细胞丝 裂原 P H A刺激
下的脾细胞增殖效应的测定
小 鼠脾细胞的制备 : 取 B A L B / c 纯系
小鼠 巧 只 , 制备脾细胞方法同前 , 用 1 640
完全营养液调整细胞数为 10 ’ “ 个 · L一 , , 每
个样品 2 个复孔 , 分 5 组按编号加人 9 6 孔
细胞培养板 , 每孔 10 0 拜L
加人 T 细胞丝裂原 P H A 每孔 so 拜L ,
使其浓度为 62 . 5 m g · L 一 ’ . 按组分别加人 不
同浓度的珠子参总皂贰 , 使其终浓度分别为
10 0
,
5 0
,
2 5
, 一2 . 5 , 6 . 2 5 m g · L 一 , , 每孔
10 0 拜L , 另设一组 , 加同体积 16 4 0 营养液
作为对照组 .
淋巴细胞培养及同位素样品收集同前 .
根据测定记录结果 , 按公式计算刺激指数 ,
结果见表 2 .
表 2 不 同浓度的珠子参总皂贰体外给药时对脾
细胞增殖效应的影响 (m 只 · L一 1)
组别 P H A 珠子参总皂贰 刺激指数
10 0力 8 .0
5 0
.
0 9
.
0
2 5
.
0 1 4
.
0
1 2
.
5 1 4石
6
.
2 5 12 4
r、气ù
口
,`,一,孟U`
6 2
.
5
6 2
.
5
r = 一 0
.
9 0 4
, 尸 < 0 . 0 1
实验结果显示 , 不同浓度珠子参总皂贰
对 T 细胞丝裂原 P H A 刺激下的脾细胞增殖
效应均有不 同程度 的增强作 用 , 且在 12 . 5
一 10 0 m g · m L 一 , 时 , 脾细胞增殖效应的增
强作用有随剂量减少而增加的趋势 , 经直线
相关分析 , 相关系数 ; = 一0 . 904 , 尸 < 0 0 1 ,
表明两者密切负相关 .
3 讨 论
数一刺激指数 = 实验组平均 c对照组平均cP m
经研究证实 , 珠子参体内给药后对有丝
分裂原 P H A 和 C o n A 诱导下的 T 细胞增效
效应 有明显 的促进作用 , 而对有丝分裂原
1期 朱新华 , 等 。 珠 子参总皂贰对脾细胞增殖效应影响的研究
L P S 诱导下的 B 细胞增殖效应无明显促进
作用 , 其对 B 细胞的作用有待于进一步研
究 .
珠子参体外给药实验进一步证实了其对丝
裂原 P H A 诱导下的 T 细胞增殖效应有明显增
强作用 , 而且此增强作用与浓度密切相关 , 珠
子参总皂贰在 12 . 5一 lo gm
·
-L
` 浓度范围
内 , 对 T 细胞的增殖效应是随剂量减少而增强
的 , 这对临床用药剂量有一定参考价值 .
众所周知 , 机体的免疫应答是一个极其
复杂的过程 , 有多种免疫细胞及免疫细胞所
分泌的因子参与 . 从对珠子参免疫药理作用的
一系列研究中发现 : 珠子参总皂贰在一定浓
度时具有促进特异性免疫功能的作用 , 对免
疫功能处于低下状态的机体促进作用更为明
显 , 尤其对机体免疫应答起重要调节 〔韵 作用
的巨噬细胞 . N K 细胞 、 T 淋巴细胞的活性
有明显的影响 , 从而进一步提示珠子参总皂
贰的免疫药理作用并非是单方面的增强作
用 , 而是具有复杂的免疫调节作用 .
鉴于珠子参这味中草药广泛产于我国各
地 , 尤其是在云南省西北部有丰富的药源 ,
故对它的免疫药理作用及其机理作进一步探
讨 , 这对开辟珠子参临床应用的新途径无疑
是有重要价值的 .
参考文献
李存德 , 朱新 华 , 杨庆周 , 等 , 珠子参总皂贰对
小鼠 N K 活性 的影响 . 昆明 医学院学报 , 19 91 ,
12 ( 3 ) : 37
朱新华 , 王 国燕 , 后文俊 , 等 . 珠子参皂贰对小
鼠免 疫功 能影 响的 初探 . 昆明 医 学 院学报 ,
19 9 0
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1 1 (4 ) : 5 3
钱玉昆 . 中药 (苦参及构祀子 ) 对免疫细胞和细
胞因 子 的实验调节 . 中华微生 物学 和 免疫学杂
志 , 19 8 8 , 8 ( 5 ) : 3 1 2
毕爱华 , 刘恭植 , 王立人 , 等 医学免疫学 . 武
汉 : 同济医科大学出版 , 19 86 . 1 16
( 19 9 3一0 9一0 6 收稿 )
S t u d y o f E fe
e t o f P a n a x J a P o n i c s S a P o n in o n S p l e e n
L y m P h o c y t e P r o l i fe r o u s R e s P o n s
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( l ) 刀印 a r mt e n t oj ’ B a s is Nu e le a r M e id c in e ; 2 ) D印 a r tm e n t of hP a rm a c o l处沙 ,
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