全 文 ：西北林学院学报 2006, 21( 2): 130～ 133
Journal of No r thw est Fo r estry Univ e rsity
七子花叶片次生代谢产物含量分析
⒇
杨蓓芬 ,　邵　红 ,　金则新
(台州学院 生态研究所 ,浙江 临海 317000 )
摘　要:对七子花树冠不同层次叶片的黄酮、鞣质、生物碱、皂甙、木质素和绿原酸等 6种次生代谢
产物的含量进行测定。结果表明 , 6种次生代谢产物的总量和各次生代谢产物的含量在不同层次之
间存在着一定的差异 ,总量以上层最高 ,为 150. 66 g· kg- 1;黄酮以中层最高 ,总生物碱是下层最
高 ,总皂甙、绿原酸、鞣质、木质素均为上层最高。 6种次生代谢产物中 ,绿原酸与总皂甙、总生物碱
与绿原酸之间存在极显著的相关性。
关键词: 七子花 ;叶片 ;次生代谢产物 ;含量
中图分类号: Q946. 8　　文献标识码: A　　 文章编号: 1001-7461( 2006) 02-0130-03
Analysis of Secondary Metabolism Contents in Leafblades of
Heptacodium miconioides
YANG Bei-fen,　 SHAO　 Hong,　 JIN Ze-xin
(Ecology Insti tute of Taizhou Univer si ty , Linhai ,Zhej iang 317000,China )
Abstract: Contents of 6 seconda ry metabolites such as flavonoid, tannin, alkaloid, saponin, lig nin and
chlorog enic acid in leaves of Heptacodium miconioides f rom dif ferent crow n layer w ere determined. The re-
sul ts showed tha t there w ere cer tain dif ferences among 6 secondary metaboli tes contents and to tal content
in the leaves f rom dif ferent lay ers. The total secondary metabo li tes content in the leaves f rom the top lay er
w as highest ( 150. 66 g· kg- 1 ) . The f lav onoids in the leaves f rom the middle lay er w ere the highest , and
the alkaloid in the leaves f rom the low layer w as the highest. The saponin, chlo ro genic acid, tannin and
lignin in the leaves f rom the top la yer w ere the highest. Among 6 secondary metabo li tes, there w as signifi-
cant relationship between the ch lorog enic acid and the tannin, and a lso betw een the chlo rog enic acid and
the alkaloid.
Key words: Heptacodium miconioides; leafblades; seconda ry metabolites; content
　　七子花 ( Heptacodium miconioides )为我国特有
的落叶小乔木 ,属忍冬科 ( Capri fo liaceae )的单种属
植物 ,是国家首批 2级重点保护植物。多生于悬崖峭
壁、沟谷和山坡灌丛 ,分布范围窄 ,野生资源很少。七
子花树姿优美 ,花朵纤小可爱 ,具有很高的观赏价
值 ,可以作为园林绿化树种。有关七子花的已有较多
的研究 ,主要集中在对其种群结构、分布格局、群落
特征、物种多样性、光合生理生态特性以及细胞学等
方面 [1 ]。而对次生代谢产物方面研究很少 ,仅对总黄
酮含量及成分进行了分析 [ 2] ,而对其他次生代谢产
物含量以及不同层次叶片黄酮含量变化的研究尚未
报道。本研究对七子花树冠不同层次叶片的黄酮、鞣
质、生物碱、皂甙、木质素和绿原酸等 6种次生代谢
产物的含量进行了测定 ,为合理开发利用七子花资
源提供基础资料。
1　材料与方法
1. 1　实验材料和仪器
实验材料于 2004年 7月采自浙江天台山狮子岩
坑的天然七子花个体。选择生长正常的七子花植株 ,
对其树冠叶片分上、中、下 3层进行采集 ,将各样品
分别用湿布包裹 ,塑料袋封装 ,立即带回实验室。 将
⒇ 收稿日期: 2005-07-28　修回日期: 2005-09-24
基金项目:浙江省自然科学基金项目 (399203)、台州市科技局项目 ( 044205)
作者简介:杨蓓芬 ( 1965-) ,女 ,浙江临海人 ,讲师 ,主要从事植物学教学与研究工作。
材料洗净 ,自然风干 , 100℃水蒸气固定 25 min, 70
℃干燥 12 h,研磨后经过 0. 25 mm金属网筛 ,将烘干
样品放入磨口广口瓶 ,置于干燥器中保存 ,备用 [3 ]。
芦丁、绿原酸、小蘖碱、人参皂甙 Rb购自中国药
品生物制品检定所。
吸光度的测定在日本岛津 UV 2401- PC紫外
- 可见分光光度计上完成。
1. 2　次生代谢产物含量的测定
1. 2. 1　黄酮的测定 [ 4]　取七子花样品 0. 1 g ,加入 5
m L甲醇 , 80℃水浴回流提取 2 h,离心取上清液 ,定
容至 25 mL,取 1 mL,置 10 mL离心管中 ,加入 4 mL
0. 1 mol /L AlCl3 -甲醇溶液 ,摇匀 ,在 420 nm处测
定吸光度。 以芦丁为标准品 ,其回归方程为 y= 8.
036 2x - 0. 001 6, R2= 0. 997 5。
1. 2. 2　鞣质的测定 [ 5]　取七子花样品 0. 1 g ,加水
25 mL,微火煮沸 30 min,放冷过滤至干燥锥形瓶
中 ,加水定容至 25 mL,吸取 1 m L提取液 ,加入 24
m L蒸馏水 ,再加入 2滴 5%靛红溶液 ,用 0. 01 mol /L
KMnO4溶液滴定 ,溶液从蓝色变以绿色再变为黄
色为终点。以没食子酸为标准品 ,回归方程为 y= 0.
013 6x+ 0. 000 3, R2= 0. 999 9。
1. 2. 3　生物碱的测定 [6 ]　取七子花样品 0. 1 g ,加
入 90%乙醇 5 mL, 85℃水浴回流提取 0. 5 h,离心取
上清液 ,再用 90%乙醇定容至 25 mL。取提取液 1. 4
m L置于精密加入 4 mL氯仿的分液漏斗中 ,加入 7.
2× 10- 4 mo l /L溴甲酚绿 pH= 4. 42缓冲溶液 0. 6
m L,振摇 1 min,静置 1 h,取澄清的氯仿液 ,以试剂
空白作对照 ,于 417 nm处测定吸收度。以小檗碱为
标准品 ,其回归方程为 y= 6. 6x - 0. 010 2, R2= 0.
999 9。
1. 2. 4　总皂甙的测定 [7 ]　取七子花样品 0. 1 g ,加
入无水乙醇 5 mL, 85℃回流提取 6 h,离心取上清液 ,
挥去溶剂后加 2 mL水使其溶解 ,再加 2 m L乙醚进
行萃取 ,取水层 ,放入 80℃干燥箱中 ,待干燥后用甲
醇定容至 25 mL,取 1 mL置 25 mL容量瓶中 ,挥去
溶剂后 ,加入 0. 2 mL 5%香草醛冰醋酸溶液 ,再加入
0. 8 mL高氯酸 ,于 70℃水浴加热 20 min,取出 ,冷
却 ,加 5mL冰醋酸 ,以试剂空白作对照 ,于 560 nm波
长处测其吸光度。以人参皂甙 Rb为标准品 ,其回归
方程为 y= 27. 763x+ 0. 090 1, R2= 0. 971 6。
1. 2. 5　绿原酸的测定 [8 ]　取七子花样品 0. 1 g ,加
入 95%乙醇 5 mL回流提取 2 h,离心取上清液 ,定容
至 25 mL,取 1 m L,置 25 mL容量瓶中 ,加入 0. 2
mo l /L HCl定容至刻度 ,摇匀 ,以试剂空白为对照 ,
在 324 nm处测定吸光度。以绿原酸为标准品 ,其回
归方程为 y= 57. 868x - 0. 006 1, R2= 0. 991 4。
1. 2. 6　木质素的测定 [9 ]　取七子花样品 0. 1 g ,加
入 1%冰乙酸 5 mL摇匀 ,放置提取 0. 5 h, 2 500 r /
min离心 10 min,去上清液 ,取沉淀 ;沉淀中加 5 mL
丙酮同上处理 ,最加 5 mL 72% H2 SO4同上处理 ;所
得沉淀加 5 mL 0. 5 mol /L重铬酸钾 5 mL放置提取
0. 5 h,加入 0. 1 mol /L K I 10 mL和 1%淀粉水溶液
1 mL,用 0. 5 mol /L硫代硫酸钠滴定至亮黄色 ,记录
滴定溶液毫升数。并作空白对照。
1. 3　数据处理
试验处理及数据测定均重复 3次 ,将所得数据
输入 SPSS数据分析系统进行统计分析 ,对不同层次
之间次生代谢产物的含量进行 t-检验 ,对 6种次生代
谢产物的含量进行相关性分析。
2　结果与分析
2. 1　不同层次叶片中次生代谢产物含量分析
由表 1可知 ,七子花不同层次叶片黄酮平均含
量为 28. 70 g· kg- 1 ,其中中层叶片黄酮含量最高 ,
上层次之 ,下层最低 ;总皂甙、绿原酸和 6种次生代
谢产物的总量的平均含量分别为 5. 86、 37. 98、
143. 05 g· kg- 1 ,都是上层> 中层> 下层 ;鞣质和木
质素的平均含量分别为 6. 45 g· kg- 1和 20. 98 g·
kg- 1 ;均为上层 > 下层 > 中层 ;总生物碱的含量是
43. 08 g· kg- 1 ,且是下层> 中层> 上层。
表 1　七子花不同层次叶片次生代谢产物的含量
Table 1　 Th e content of s econdary metaboli sm in leaves of H. miconioides f rom dif ferent layer　 g· k g- 1
层次 黄酮 总皂甙 鞣质 木质素 绿原酸 总生物碱 总量
上层 27. 89 6. 36 7. 32 21. 30 52. 86 34. 93 150. 66
中层 32. 41 5. 70 5. 60 20. 57 32. 41 42. 78 139. 47
下层 25. 79 5. 52 6. 42 21. 08 28. 67 51. 54 139. 02
平均 28. 70 5. 86 6. 45 20. 98 37. 98 43. 08 143. 05
131第 2期 杨蓓芬等　七子花叶片次生代谢产物含量分析
2. 2　不同层次叶片次生代谢产物含量的差异性
　　从表 2可知 ,七子花的上层与中层之间 ,黄酮、
绿原酸、生物碱具有极显著的差异 ,木质素具有显著
差异 ,皂甙、鞣质和总量则没有显著差异 ;上层与下
层之间 ,黄酮、皂甙、绿原酸、生物碱存在极显著差
异 ,总量具有显著差异 ,鞣质无差异 ;上层和下层之
间 ,黄酮与总生物碱存在着极显著的差异 ,木质素、
绿原酸存在显著差异 ,总皂甙、鞣质和总量没有显著
差异。
表 2　七子花不同层次次生代谢产物含量的 t检验
Table 2　 Th e tes t of content of secondary metabolism in leaves of H. miconioid es f rom dif ferent layers
层次 黄酮 总皂甙 鞣质 木质素 绿原酸 总生物碱 总量
上层～ 中层 - 31. 241* * 2. 157 2. 513 3. 309* 10. 592* * - 49. 516* * 3. 900
上层～ 下层 13. 660* * 6. 349* * 1. 219 1. 267 13. 537* * - 82. 604* * 4. 596*
中层～ 下层 59. 691* * 0. 614 - 1. 240 - 3. 129* 3. 041* - 67. 252* * 0. 234
　　注: * : p < 0. 05,差异显著 ; * * : p < 0. 01,差异极显著 (下表同 )
2. 3　不同层次叶片次生代谢产物含量的相关性
　　从表 3中可以看出 , 6种次生代谢产物的总量与
总皂甙、鞣质、绿原酸存在极显著的相关性 ,与木质
素、总生物碱存在显著相关性 ,而与黄酮则没有显著
相关性。总生物碱与绿原酸之间存在极显著相关性 ,
与总皂甙之间存在显著相关性 ,与黄酮、鞣质、木质
素没有显著相关性。 绿原酸与总皂甙之间存在极显
著相关性 ,与黄酮、鞣质、木质素之间不存在显著相
关性。木质素与黄酮、总皂甙和鞣质之间均存在显著
相关性。 总皂甙与黄酮之间没有显著相关性。
表 3　七子花不同层次叶片次生代谢产物含量的相关性分析
Table 3　 Th e co rrelations analysis of content of secondary metabolism in the leav es of H. m iconioides f rom di fferen t layer
黄酮 总皂甙 鞣质 木质素 绿原酸 总生物碱 总量
黄酮 1. 000 - 0. 010 - 0. 449 - 0. 639* - 0. 061 - 0. 341 - 0. 151
总皂甙 1. 000 0. 660 0. 667* 0. 855* * - 0. 772* 0. 891* *
鞣质 1. 000 0. 702* 0. 652 - 0. 363 0. 816* *
木质素 1. 000 0. 565 - 0. 230 0. 667*
绿原酸 1. 000 - 0. 907* * 0. 956* *
总生物碱 1. 000 - 0. 794*
总量 1. 000
3　结论与讨论
次生代谢是植物的重要特征 ,其产物既具有重
要的生态学意义又可决定各类植物在进化过程中的
兴衰成败、生死存亡等问题。合成和利用次生代谢产
物是植物适应环境的重要对策之一 ,植物可以通过
次生代谢产物来阻止其他生物的侵袭 ,抑制与其竞
争生存条件的其他植物种群的生长发育 [ 10]。
七子花叶片中 6种次生代谢产物的总量在不同
层次之间存在着一定的差异 ,其中各次生代谢产物
的含量也具有一定的差异。黄酮以中层最高 ,表明叶
片黄酮的含量并不是随着光照强度的增加而线性增
加 ,而是存在一个最适光照强度 ,处在这一临界光照
条件的叶片黄酮含量最高 ,大于或小于这一临界光
照强度黄酮的含量下降 [11 ] ;总生物碱是下层最高 ,
这与范卓文的结论一致 [ 12] ;总皂甙、绿原酸、鞣质、
木质素均为上层最高 ,表明总皂甙、绿原酸、鞣质、木
质素的形成需要较强的光照 ,可能与次生代谢产物
的合成途径有一定的关系 [13 ]。
七子花叶片中绿原酸与总皂甙之间、绿原酸与
总生物碱之间具有极显著的相关性 ;木质素与黄酮、
总皂甙、鞣质之间 ,总皂甙和总生物碱之间具有显著
相关性 ,这可能与它们是否具有相同的代谢中间产
物有一定的关系 [13 ]。
七子花叶片中黄酮、总生物碱、总皂甙、绿原酸、
鞣质、木质素的最高含量分别为 32. 41、 51. 54、 6. 36、
52. 86、 7. 32、 21. 30 g· kg- 1。
据文献资料可知 ,银杏叶中黄酮的含量最高为
27. 4 g· kg- 1 [ 14] ,金银花中绿原酸的平均含量为 56.
92 g· kg- 1 [ 15] ,苦参叶中总生物碱含量分别为 7. 1 g
· kg- 1 ,沙枣中鞣质的含量为 77. 3 g· kg- 1 [17 ]。黄瓜
经诱导和未诱导叶片中木质素含量分别为 84. 0 g·
kg
- 1和 70. 0 g· kg- 1 [ 18]。不难看出 ,七子花叶片中的
黄酮、绿原酸、总生物碱的含量较高 ,可能具有一定
132 西北林学院学报 21卷　
的开发前景 ,有待进一步的研究。
参考文献:
[1 ]　俞建 , 于明坚 , 金孝锋 ,等 . 浙江省七子花资源现状及保护建
议 [ J] . 浙江大学学报 (理学版 ) , 2003, 30( 3): 314-326.
[2 ]　金则新 , 李钧敏 . 七子花总黄酮含量及成分分析 [ J] . 浙江林
学院学报 , 2003, 20( 4): 357-359.
[3 ]　何维明 , 钟章成 . 绞股蓝种群次生代谢产物的动态及其生态
学意义 [ J] .云南植物研究 , 1998, 20( 4): 434-438.
[4 ]　彭晓春 , 王辉宪 , 刘文萍 ,等 . 湘西杜鹃花根黄酮类化合物含
量测定 [ J] . 吉首大学学报 (自然科学版 ) , 2000, 21( 1 ): 11-
12.
[5 ]　王璐 , 王晓 , 施大文 . 中药锁阳鞣质含量的测定 [ J ] . 上海医
科大学学报 , 1996, 23( 2): 150.
[6 ]　李惠芬 , 卢继新 , 张晓梅 ,等 . 五种不同产地天仙子总生物碱
的含量分析 [ J] . 中草药 , 1999, 30( 8): 582-583.
[7 ]　丁之恩 , 严平 . 西洋参茎叶总皂甙的提取分离研究 [ J] . 经济
林研究 , 2000, 18( 1) : 58-59.
[8 ]　邢俊波 ,李萍 , 温德良 . 不同物候期金银花中总绿原酸的积累
动态研究 [ J] . 中国中药杂志 , 2001, 26( 7): 456-459.
[9 ]　骆桂芬 ,皱艳华 ,张伟 . 黄瓜叶片中木质素含量与抗霜霉病的
关系 [ J ]. 吉林农业大学学报 , 1995, 17( 2): 18-21.
[ 10]　杜近义 , 胡国赋 , 秦际威 . 植物次生代谢产物的生态学意义
[ J ]. 生物学杂志 , 1999, 16( 5): 9-10.
[ 11 ]　王田华 ,谢宝东 ,姜岳忠 , 等 .光照强度对银杏叶片发育及黄
酮和内酯含量的影响 [ J] . 江西农业大学学报 , 2002, 24( 5):
618-622.
[12 ]　范卓文 , 雷捷 . 日照强度对贝母总生物碱含量的影响 [ J] . 哈
尔滨师范大学学报 (自然科学版 ) , 2003, 19( 2): 98-99.
[ 13 ]　唐建军 ,项田夫 ,张禄源 , 等 . 植物次生代谢、离体培养条件
下次生代谢物积累及其调控研究进展 [ J ].中国野生植物资
源 , 1998, 17( 4): 1-6.
[14 ]　张迪清 ,何照范 . 银杏叶资源 [M ] .北京:中国轻工业出版社 ,
1999.
[ 15]　李海鹰 ,周凤琴 ,张照荣 , 等 . 不同批次商品金银花绿原酸含
量比较 [ J ]. 山东中医学院学报 , 1995, 19( 2): 134-135.
[ 16 ]　周维仁 ,李优琴 ,薛飞 , 等 .苦参植株中总生物碱的分布及含
量测定 [ J ]. 氨基酸和生物资源 , 2001, 23( 2): 57-58.
[ 17 ]　江发寿 ,赵继红 . 沙枣鞣质的含量测定 [ J ] .基层中药杂志 ,
2002, 16( 2): 25-26.
[18 ]　骆桂芬 ,崔俊涛 ,张莉 ,等 .黄瓜叶片中糖和木质素含量与霜霉
病诱导抗性的关系 [ J ].植物病理学报 , 1997, 27( 1): 65-69.
(上接第 129页 )
参考文献:
[1 ]　何芬奇 ,张荫荪 , 吴勇 ,等 . 鄂尔多斯桃力庙 -阿拉善湾海子
湿地鸟类群落研究与湿地生境评估 [ A] . 见:陈宜瑜主编 .中
国湿地研究 [ C ].长春:吉林科学技术出版社 , 1995.
[2 ]　何芬奇 , 乔振忠 , 罗伟仁 . 面临考验的不止是鄂尔多斯遗鸥
[ J] . 大自然 , 2004, 5: 32-34.
[3 ]　罗娅萍 .心系鄂尔多斯高原 [ J] .大自然 , 2004, ( 5): 34-36.
[4 ]　张荫荪 ,何芬奇 ,陈容伯 ,等 .遗欧繁殖生境选择及其繁殖地湿
地鸟类群落研究 [ J ].动物学研究 , 1993, 14( 2): 128-135.
[5 ]　高铁军 , 吴勇 , 吴兆军 ,等 . 遗鸥在鄂尔多斯中部的分布暨一
新巢群的发现 [ J] . 动物学杂志 , 1992, 27( 5): 31-33.
[ 6 ]　何芬奇 , 张荫荪 , 吴 勇 . 遗鸥鄂尔多斯种群研究的最新报道
[ J ]. 生物多样性 , 1994, 2( 2): 88-90.
[ 7]　何芬奇 , 张荫荪 , 叶恩琦 ,等 . 鄂尔多斯桃力庙 - 阿拉善湾海
子湿地鸟类群落研究与湿地生境评估 [ J ]. 生物多样性 , 4( 4):
187-193.
[ 8 ]　国家自然科学基金委员会 .物种濒危机制和保育原理 [M ].北
京:中国科学出版社 , 2005.
133第 2期 杨蓓芬等　七子花叶片次生代谢产物含量分析