全 文 :表 1 脑栓通注射液对线栓法致脑缺血再灌注大鼠脑组织
NO含量和 iNOS表达的影响 ( x-± s )
组 别 剂量 ( g /kg ) NO (μmol /gpro t) iNOS阳性细胞面积总和 (μm2 ) iNOS平均灰度值 (像素点 )
假手术组 9. 78± 3. 52* * 5694. 02± 2233. 26* 138. 21± 9. 94* *
模型组 15. 80± 3. 82 10307. 30± 3524. 18 125. 06± 9. 92
高剂量组 0. 11 11. 53± 2. 62* * 7753. 16± 3370. 51 135. 93± 13. 11*
中剂量组 0. 055 13. 25± 3. 57 8657. 10± 4570. 57 135. 26± 9. 71*
低剂量组 0. 0275 14. 39± 3. 67 9422. 34± 5297. 93 127. 70± 11. 02
舒血宁组 0. 833ml /kg 12. 85± 2. 71 7990. 47± 2598. 17 131. 48± 9. 49
注: 与模型组比较 ,* * P < 0. 01,* P < 0. 05。
3 结果 3. 1对线栓法致脑缺血再灌注大鼠脑组织 NO
的影响: 从表 1可见 ,大鼠线栓法脑缺血再灌注 24h后 ,模型组
大鼠脑组织 NO的含量明显升高 ,与假手术组比较差异明显 (P
< 0. 01)。给予脑栓通注射液 ip 0. 11、 0. 055、 0. 0275g /kg后 ,高
剂量组大鼠脑组织 NO含量与模型组比较明显降低 ( P < 0.
01)。
3. 2病理学检查结果:从附图 1~ 2可见 ,光镜下模型组变
性坏死的神经细胞主要分布在大脑皮层 ,缺血中心区梗死灶淡
染 ,细胞数量明显减少 ,脑组织水肿、疏松 ,可见大量神经细胞
胞体为三角形 ,核固缩 ,细胞周围间隙增宽 ,水肿空泡形成。 其
中与模型组比较 ,脑栓通注射液各剂量组的缺血中心区坏死的
神经细胞数量减少 ,且周围细胞水肿减轻。
3. 3对线栓法致脑缺血再灌注大鼠脑组织神经细胞 iNOS
表达的影响: 从表 1,附图 3~ 4可见 ,模型组大鼠脑组织神经细
胞的 iNOS表达有明显的升高 ,阳性表达的面积和平均灰度值
差异明显 (P < 0. 05或 P < 0. 01)。脑栓通注射液高、中剂量组神
经细胞的 iNOS表达降低 ,与模型组比较 iNOS平均灰度值有明
显差异 (P < 0. 05)。 提示脑栓通注射液具有抑制大鼠脑缺血再
灌注损伤神经细胞 iNOS表达的作用。
4 讨 论 不同类型的 NOS所产生的 NO对缺血性脑
组织具有不同的影响 ,起着神经保护和神经毒性双重作用 [4 ]。 实
验研究结果表明 ,脑缺血模型组大鼠与假手术组比较 ,脑组织
中的 NO的含量明显升高 ,说明 NO参与了大鼠脑缺血再灌注
损伤。 本实验还观察了脑缺血再灌注 24h脑组织 iNOS的表达
及脑栓通注射液对其表达的影响 ,结果显示脑缺血再灌注模型
组缺血侧脑组织 iNOS大量表达 ,脑栓通注射液高、中剂量组脑
组织 iNOS的表达明显低于脑缺血再灌注模型组 ,表明脑栓通
注射液可能对脑缺血诱导的 iNOS表达有较强的抑制作用 ,降
低源于 iNOS过度表达所形成的 NO神经毒性 ,提高自由基清
除酶的活性 ,抑制脂质过氧化反应 ,从而对缺血性的脑组织损
伤起保护性作用。
参考文献
[ 1] 邹 军 ,张家维 ,赖新生 ,等 .电针对缺血性中风兴奋
性氨基酸、 C-fos及细胞凋亡影响 [ J]. 陕西中医 , 2002, 23( 8):
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[2 ] 窦万臣 ,王任直 ,张波 ,等 .大鼠局灶性脑缺血模型制
作方法的改进 [ J].中国脑血管病杂志 , 2004, 1( 2): 81-84.
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[ J].中国临床解剖学杂志 , 2005, 23( 2): 222-223.
[4 ] 帅杰 ,叶建宁 ,高广正 .前脑缺血再灌注海马 CA1区
神经元死亡与一氧化氮的关系 [ J].中国临床康复 , 2004, 8( 1):
70-71. (收稿 2008-01-31;修回 2008-02-25)
珠子参叶总皂苷抗疲劳抗应激作用的实验研究*
考玉萍 姜 宋小妹△ 陕西省中医药研究院 (西安 710003)
摘 要 目的:研究珠子参叶总皂苷的抗疲劳抗应激作用。方法:采用小鼠游泳、耐高温和耐缺氧
实验。结果: 能延长缺氧条件下小鼠存活时间。对延长高温时间和游泳存活时间不明显。
结论:能延长缺氧情况下小鼠的存活时间。
主题词 珠子参叶 /药理学 抗疲劳 /中医药疗法 实验研究 小鼠
珠子参叶 ,又名汉中参叶 ,为五加科植物珠子参 ( Panax
japonicus C. A. Mey. v ar. majo r ( Burk ) C. Y. Wu et K. M. Feng
* 陕西省中医管理局科研课题 (编号: 2005095)
△陕西中医学院 (咸阳 712046)
的干燥带茎叶 ,珠子参叶作为民间药 ,具有清热消炎 ,滋补强壮
等功效。在民间多有以其叶入茶保护嗓音。化学研究证明 ,其化
学成分主要为皂苷类 ,包括人参皂苷 Re, Rg1 , Rg2 , F2 ,珠子参
苷 R1 , R2 , F1 , F2 , F3 , F4 , F5 , F6等。
1 实验材料与仪器 1. 1动物: 昆明种小鼠 ,雌雄各半 ,
1092 陕西中医 2008年第 29卷第 8期
体重 18~ 22g ,由第四军医大学提供。
1. 2药品: 珠子参叶总皂苷水溶液: 珠子参叶 (购于陕西宁
强 ,经鉴定为珠子参的干燥带茎叶 ) ,大剂量: 每毫升相当于生
药 0. 500g;中剂量: 每毫升相当于生药 0. 250g;小剂量: 每毫升
相当于生药 0. 125g。
阿司匹林: 5片加水配成 100 ml混悬液 ,用时摇匀。西安博
华制药有限责任公司 ,批号: 0701004。
生脉饮: 10ml稀释至 100ml,吉林春光制药有限公司 ,批
号: 20070911。
1. 3仪器 UV- 1102型紫外 -可见分光光度计 (上海天美
科学仪器有限公司 ) ;萨多利斯 GB204-电子天平 (瑞典 )。
2 实验方法 2. 1耐缺氧实验: 取小鼠 50只 ,雌雄各
半 ,随机均分为 5组 ,大、中、小剂量灌胃珠子参叶总皂苷 0. 4
ml /只 ,空白组给予等量生理盐水 ,阳性组灌胃给予生脉饮 0. 4
ml /只 ,给药组连续 1周 ,于末次给药后 30min,放入盛有 15g钠
石灰的磨口瓶中 ,瓶口涂凡士林 ,记录封瓶口到小鼠呼吸停止
死亡的时间为存活时间。
2. 2耐高温实验: 取小鼠 50只 ,雌雄各半 ,分组、给药方法
及剂量同实验 2. 1项 ,给药组连续 1周 ,末次灌胃 1h后 ,将所
有组小鼠混合装于笼中 ,置培养箱 ( 45± 1℃ )中 , 30min后每隔
30min观察 1次 ,以小鼠总数死亡一半为界 ,记录各组小鼠死
亡数。
2. 3游泳实验:取小鼠 50只 ,雌雄各半 ,分组、给药方法及
剂量同实验 2. 1项 ,给药组连续 1周 ,于末次给药后 1h,将小鼠
缚重 ( 10% )后游泳 ,水温为 ( 26± 1℃ ) ,以小鼠无力冲起 ,沉入
水底为界 ,记录游泳时间 ,以观察小鼠在水中的耐力。
3 实验结果 3. 1珠子参叶总皂苷对小鼠死亡时间的影
响: 与对照组比较 ,大剂量珠子参叶总皂苷能延长缺氧情况下
小鼠的存活时间。 结果见表 1。
3. 2 珠子参叶总皂苷对小鼠死亡数量的影响: 大、中、小
剂量 3组与生理盐水组比较无明显差别。 结果见表 2。
3. 3 珠子参叶总皂苷对小鼠游泳时间的影响 :大、中、小
剂量 3组与生理盐水组比较无明显差别。 结果见表 3。
4 讨 论 本实验证实 ,能延长缺氧情况下小鼠的存活
时间 ,证明有一定的耐缺氧作用。为用药提供科学依据。耐高温
实验 ,游泳实验表明 ,结果不明显。
表 1 珠子参叶总皂苷对小鼠死亡时间的影响
组别 剂量 时间 ( min)
生理盐水 0. 4 ml /只 35. 2± 6. 9
阳性对照 0. 4 ml /只 43. 5± 7. 7
大剂量 0. 4 ml /只 63. 0± 19. 2
27. 8± 26. 8
中剂量 0. 4 ml /只 41. 1± 11. 3
小剂量 0. 4 ml /只 38. 9± 5. 2
P < 0. 05,与生理盐水组比较* P < 0. 01; n= 10
表 2 珠子参叶总皂苷对小鼠死亡数量的影响
组别 剂量 死亡数量 (只 ) 死亡率 (% )
生理盐水 0. 4 ml /只 6 60
阳性对照 0. 4 ml /只 3 30
大剂量 0. 4 ml /只 5 50
中剂量 0. 4 ml /只 6 60
小剂量 0. 4 ml /只 6 60
P < 0. 05,与生理盐水组比较* P < 0. 01; n= 10
表 3 珠子参叶总皂苷对小鼠游泳时间的影响
组别 剂量 游泳时间 ( min)
生理盐水 0. 4 ml /只 4. 6± 1. 38
阳性对照 0. 4 ml /只 6. 8± 0. 91
大剂量 0. 4 ml /只 5. 0± 1. 52
中剂量 0. 4 ml /只 5. 4± 1. 38
小剂量 0. 4 ml /只 5. 2± 1. 09
P < 0. 05,与生理盐水组比较* P < 0. 01; n= 10
参考文献
[ 1] 陈 奇 .中药药理研究方法学 [M ].北京: 人民卫生
出版社 , 1993.
[ 2] 徐 虹 ,姜 等 .汉中参叶总皂苷提取工艺研究 ,
现代中医药 , 2007, 27( 3): 78.
[ 3] 杨长江 ,田继义等 .温阳补气方对小鼠应激能力的影
响 ,现代中医药 , 2004, ( 4): 56.
(收稿 2008-03-05;修回 2008-04-25)
(上接第 1071页 )
所提供 )。苦参碱 氧化苦参碱 (中国药品生物制品检定
所 )
2 供试液与对照品制备 取苦参粉末 0. 5g ,加
氯仿 25ml,浓氨试液 0. 3ml,放置过夜 ,滤过 ,滤液蒸
干 ,残渣加氯仿 0. 5ml使溶解 ,作为供试液。另取苦参
碱 ,氧化苦参碱对照品 ,分别加乙醇制成每 1ml各含
0. 2mg的溶液 ,作为对照品溶液。
3 薄层板制备与展开 吸附剂硅胶 G( 10~
40μm青岛产 )取硅胶 G,加水适量 ,调成糊状 ,均匀涂
布于玻璃板上 ,自然干燥后 , 110℃烘箱中活化 2h,取
出置干燥器内备用。吸取上述三种溶液各 10μl,分别点
于同一硅胶 G薄层板上 ,以氯仿—甲醇 ( 5: 0. 2)为展
开剂 ,置氨蒸气饱和的层析缸内 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷
雾碘化铋钾试液 ,结果供试液色谱中 ,在与对照品色谱
相应的位置上 ,显相同的橙色斑点。 该斑点清晰度好 ,
Rf值适中。
4 结 论 此法简便、快速、准确、重现性好。
(收稿 2008-02-24;修回 2008-04-23)
1093陕西中医 2008年第 29卷第 8期