全 文 ：收稿日期：2012-07-10
作者简介：叶华（1971—），女，副主任药师，从事临床中药学研究。
蓝花参为桔梗科植物蓝花参 Wahlenbergia
marginata（Thunb．） A． DC. 的根或全草 ［1］，我国长江
以南各省至陕西南部均有分布，为民间习用草药，用
于防治感冒、气管炎、痢疾、百日咳等疾病［2］。 本实验
选做蓝花参抗炎、 止痛和急性毒性 MTD 测定试验，
为蓝花参抗炎、 止痛作用的有效性和安全性提供实
验依据。
1 试验材料
1.1 药物 蓝花参全草干品（福州回春中药饮片厂
有限公司，批号：11010501），由福建中医药大学药学
院 杨 成 梓 副 教 授 鉴 定 为 蓝 花 参 Wahlenbergia
marginata（Thunb．） A． DC. 的全草。 蓝花参经水提醇
沉，回收乙醇，水提液配成 1 g ／mL（含生药）；醇沉物
配成 1 g ／mL（含生药），备用。 地塞米松（广东三才石
岐制药有限公司，批号：2111123）；阿司匹林（石药集
团欧意药业有限公司，批号：018100624）。
1.2 动物 ICR 清洁级小鼠，福建医科大学实验动
物中心提供，许可证号：SCXK（闽）2012-0001。
1.3 试剂 二甲苯 （广东光华化学厂有限公司，批
号：20101224，分析纯）；醋酸（鹏彩精细北京化工有
限公司，批号：20110826，分析纯）。
1.4 主要仪器 BS210S 电子分析天平 （北京赛多
利斯天平有限公司）；PV-200 足趾容积测量仪（成都
泰盟科技有限公司）；YLS-6A 智能热板仪 （山东省
医学科学院设备站）。
2 实验方法
2.1 蓝花参对二甲苯致炎小鼠耳廓肿胀的影响（耳
肿胀法）［3］ 小鼠 60 只，雄性，体重（20±2）g，随机
分为 6组，每组 10只。实验设为模型对照组，阳性对
照组（地塞米松 0.048 g ／ kg），蓝花参水提醇沉液高、
中、低（10、5、2.5 g ／ kg）3 个剂量组，蓝花参醇沉物组
（10 g ／ kg），以上各剂量配成等容积 20 mL，均按体重
0.2 mL ／ 10 g 灌胃， 模型对照组给等体积饮用水，每
日 1 次，连续 3 d。 末次灌胃后 30 min，各组小鼠右
耳前后面涂二甲苯 0.1 mL致炎，左耳不涂。 1 h后处
死小鼠， 沿耳廓基线用直径 6 mm 打孔器在同一部
位取下左右耳片称重， 以左右耳片重量差值为炎性
肿胀度，计算肿胀抑制率。
肿胀抑制率（%）＝
（对照组肿胀度－给药组肿胀度）
对照组肿胀度
×100%
2.2 蓝花参对蛋清致小鼠足肿胀的影响 （足肿胀
法）［3］ 小鼠 60 只，雄性，体重（20±2）g，随机分为 6
组，每组 10只。 分为模型对照组，阳性对照组（地塞
米松 0.048 g ／ kg），蓝花参水提醇沉液高、中、低（10、
5、2.5 g ／ kg）3 个剂量组和蓝花参醇沉物组（10 g ／ kg）
共 6 组。 以上各剂量配成等容积 20 mL， 均按体重
0.2 mL ／ 10 g 灌胃， 模型对照组给等体积饮用水，每
日 1次，连续 3 d。 末次灌胃后 30 min，各组小鼠右后
足跖腱膜下注射蛋清 0.1 mL致炎。 3 h后处死动物，
用足趾肿胀测定仪分别测定左右足趾的足趾容积，
以左右足趾容积差为肿胀程度指标，观察药物作用。
2.3 蓝花参对热刺激致痛小鼠的止痛作用 （热板
法）［3］ 选合格雌性小鼠［小鼠置智能热板仪（55±
0.5）℃，5～30 s 内出现疼痛反应者 ］60 只 ， 体重
（20±2）g，随机分为模型对照组，阳性对照组（阿司
匹林 0.5 g ／ kg），蓝花参水提醇沉液高、中、低（10、5、
2.5 g ／ kg）3 个剂量组及蓝花参醇沉物组（10 g ／ kg）共
6组，每组 10只。 以上各剂量配成等容积 20 mL，均
按体重 0.2 mL ／ 10 g灌胃，模型对照组给等体积饮用
水，每日 1 次，连续 3 d。 末次灌胃后 30、60、90 min
小鼠分别置智能热板仪上测小鼠致痛潜伏期 （小鼠
置智能热板仪至出现舔足反应时间）， 若 60 s 后仍
无反应按 60 s计算。
2.4 蓝花参对醋酸致痛小鼠扭体的影响（扭体法）［3］
小鼠 60 只，雌雄各半，体重（20±2）g，按性别随机分
为 6组，每组 10只。实验分为模型对照组，阳性对照
组（阿司匹林 0.5 g ／ kg），蓝花参水提醇沉液高、中、
低（10、5、2.5 g ／ kg）3 个剂量组，蓝花参醇沉物组（10
g ／ kg）共 6 组。 以上各剂量配成等容积 20 mL，均按
体重 0.2 mL ／ 10 g 灌胃， 模型对照组给等体积饮用
水，各组小鼠连续灌胃给药 3 d，末次给药 1 h 后各
关键词：蓝花参；抗炎；镇痛；急性毒性试验；最大耐受量
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1000-338X（2012）05-0049-02
蓝花参抗炎、止痛的药效学与急性毒性试验研究
叶 华 1，曾茂贵 1，罗戢彬凯 2，张文清 3，念其滨 3
（1. 福建中医药大学附属第二人民医院，福建 福州 350003；2. 福建中医药大学药学院，福建 福州 350122；
3. 福建卫生职业技术学院附属福建省级机关医院，福建 福州 350003）
福建中医药 2012 年 10 月 第 43 卷 第 5 期
Fujian Journal of TCM October 2012，43（5） 49
DOI:10.13260/j.cnki.jfjtcm.010434
注：与模型对照组比较，1） P＜0.05，2） P＜0.01。
表 1 蓝花参对二甲苯致炎小鼠耳廓肿胀及对蛋清致小鼠足肿胀的影响（x±s）
耳肿胀度 ／mg
68.90±16.2
46.90±12.91）
47.90±15.41）
50.60±14.51）
63.88±10.9
59.00±17.9
肿胀抑制率 ／%
—
31.93
30.48
25.56
7.28
14.36
足肿胀度 ／mg
0.42±0.19
0.13±0.082）
0.15±0.142）
0.22±0.172）
0.31±0.26
0.25±0.092）
肿胀抑制率 ／%
—
69.05
64.28
47.62
26.19
40.47
组 别
模 型 对 照 组
地 塞 米 松 组
蓝花参高剂量组
蓝花参中剂量组
蓝花参低剂量组
蓝花参醇沉物组
n
10
10
10
10
10
10
对二甲苯致炎小鼠耳廓肿胀的影响 对蛋清致小鼠足肿胀的影响
注：与模型对照组比较，1） P＜0.01。
表 3 蓝花参对醋酸致痛小鼠扭体的影响（x±s）
剂量 ／ （g ／ kg）
—
0.5
2.5
5.0
10.0
10.0
n
10
10
10
10
10
10
扭体潜伏期 ／ s
176.60±35.40
204.30±123.50
207.60±52.38
206.90±79.36
210.30±101.59
185.10±53.20
10 min 扭体次数 ／次
41.2±7.7
22.8±10.91）
26.3±9.81）
25.1±7.81）
41.5±17.1
38.5±8.6
组 别
模 型 对 照 组
阿 司 匹 林 组
蓝花参高剂量组
蓝花参中剂量组
蓝花参低剂量组
蓝花参醇沉物组
表 4 蓝花参对小鼠 MTD 测定
累计剂量
／ （g ／ kg）
40
80
120
小鼠数
／只
20
20
20
2 周内小鼠
死亡数 ／只
0
20
20
组 别
1 日灌胃 1 次组
1 日灌胃 2 次组
1 日灌胃 3 次组
结果显示，阿司匹林和蓝花参高、中剂量均有明
显延长小鼠致痛潜伏期， 与模型对照组比较，P＜
0.01，说明蓝花参高、中剂量有一定止痛作用，并随
剂量增加止痛作用时间延长。
3.3 蓝花参对醋酸致痛小鼠扭体的影响 见表 3。
鼠腹腔注射 0.5%醋酸 0.2 mL ／只。 记录各组小鼠开
始扭体的时间及 10 min各小鼠扭体反应次数。
2.5 蓝花参小鼠急性毒性最大耐受量 （MTD）试
验［3-4］ 给小鼠每天灌胃 2～3 次，测定最大耐受量。
小鼠 60 只，雌雄各半，体重（24±2）g，按性别随机分
为 3组， 每组 20只。 小鼠禁食不禁水 16 h， 按 0.4
mL ／ 10 g灌胃。 1组每天灌胃 1次，剂量为 40 g ／ kg；2
组每天灌胃 2 次， 累计剂量为 80 g ／ kg；3 组每天灌
胃 3次，累计剂量为 120 g ／ kg。小鼠灌胃后恢复正常
饲养， 连续观察 2 周， 记录小鼠毒副反应及死亡情
况，测定最大耐受量（MTD）。
3 结 果
3.1 蓝花参对二甲苯致炎小鼠耳廓肿胀、对蛋清致
小鼠足肿胀的影响 见表 1。
结果显示，地塞米松和蓝花参高、中剂量均能明
显对抗二甲苯和蛋清致小鼠耳廓和足肿胀度， 说明
蓝花参高、中剂量有明显的抗炎、消肿作用。
3.2 蓝花参对热刺激致痛小鼠的止痛作用 见表
2。
结果显示，阿司匹林和蓝花参高、中剂量均有明
显降低小鼠醋酸致痛 10 min 扭体次数，说明蓝花参
高、中剂量有明显止痛作用。
3.4 蓝花参对小鼠 MTD 测定 见表 4。 测得 MTD
为 40 g ／ kg， 相当于临床日用量的 80 倍 （临床用量
30 g ／ d，人体重以 60 kg计）。
注：与模型对照组比较，1） P＜0.01。
表 2 蓝花参对热刺激致痛小鼠的止痛作用（x±s）
剂量 ／ （g ／ kg）
—
0.5
2.5
5.0
10.0
10.0
灌胃后 30 min
6.21±1.29
14.36±1.051）
14.18±3.331）
11.56±1.881）
9.70±2.061）
7.56±1.84
灌胃后 60 min
6.45±0.88
14.61±4.161）
13.21±0.981）
10.29±2.911）
8.79±1.901）
6.72±1.75
灌胃后 90 min
7.86±1.30
14.24±2.481）
12.29±2.221）
9.42±2.17
7.16±1.46
8.44±2.34
组 别
模 型 对 照 组
阿 司 匹 林 组
蓝花参高剂量组
蓝花参中剂量组
蓝花参低剂量组
蓝花参醇沉物组
致痛潜伏期 ／ s
n
10
10
10
10
10
10
（下转第 55页）
福建中医药 第 43卷50
结果发现 1 日灌胃 2 次组和 1 日灌胃 3 次组的
小鼠在末次给药后 6～24 h内死亡。
4 结 论
蓝花参高、 中剂量对小鼠二甲苯致炎耳廓肿胀
和蛋清致足肿胀均有显著的抗炎消肿作用；对小鼠
热和醋酸刺激致痛均有明显的镇痛作用，本研究表
明蓝花参有明显的抗炎、止痛作用。蓝花参抗炎消肿、
镇痛的有效部位，主要分布在水提醇沉液部分，醇沉
物部分作用不明显。 急性毒性试验测得蓝花参水提
醇沉液小鼠灌胃给药的最大耐受量为 40 g ／ kg，相当
有效量的 4～8 倍，临床日用量的 80 倍，说明蓝花参
有较大的安全性， 为蓝花参进一步的研究开发提供
实验依据。
参考文献：
［1］ 国家中医药管理局 《中华本草》编委会 . 中华本草［M］． 7 版 .
上海：上海科学技术出版社，1999：628-629．
［2］ 中国药物大全编委会． 中国药物大全：中药卷［M］． 2 版. 北京：
人民卫生出版社，1998：370．
［3］ 李仪奎 ． 中药药理实验方法学 ［M］ ． 上海 ：上海科学技术出
版社 ，1991：298-300，350-353，528-532．
［4］ 陈奇． 中药药理研究方法学［M］． 北京：人民卫生出版社，1993：
118-119．
（上接第 50页）
1.3.6 闽产重楼皂苷类成分含量测定 按照 1.3.3
项下色谱条件， 测定共 8 批闽产栽培重楼 HPLC 谱
图，将所得峰面积代入标准曲线，根据以下公式计算
样品中重楼皂苷含量（%）。
重楼皂苷含量 （%）＝xV1 ／ （V2W）×100%［x：进
样 10 μL 重楼皂苷含量（μg）；V1：定容体积 25 mL；
V2：HPLC进样量 10 μL；W：称样量 g］。
2 结 果
闽产栽培重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量见表 2。
3 体 会
3.1 实验对色谱洗脱梯度进行了考察，确定以乙腈
（A）-水（B）为流动相进行线性梯度洗脱，A 相 0～5
min （45% ），5～25 min （45%～44% ），25～40 min
（44%～45%），41 min（停止），在此条件下，4 个重楼
皂苷成分能很好地分开出峰，谱图清晰。
3.2 本实验 8 批栽培重楼生药材所含重楼皂苷Ⅰ、
Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ总量最低为 1.99%，最高为 4.67%，均高于
《中华人民共和国药典》规定不得低于 0.6%的标准，
完全符合药材标准要求， 说明闽产栽培重楼的药材
质量优良，值得进一步栽培推广。
3.3 华重楼根茎与云南重楼根茎在皂苷含量与成
分组成上存在明显差异。 7 批华重楼根茎皂苷含量
最高的均为皂苷Ⅶ， 云南重楼根茎皂苷含量最高的
则是皂苷Ⅰ； 且云南重楼根茎皂苷总含量远大于华
重楼根茎。 这是否是华重楼与云南重楼种质不同所
造成的确定性差异，有待于加大样品批次，作进一步
的分析。
（致谢：宁化县生物医药有限公司提供本实验部
分栽培样品， 福建中医药大学药学院范世明高级实
验师提供闽产重楼栽培信息，特此致谢！ ）
参考文献：
［1］ 国家药典委员会 . 中华人民共和国药典 ：一部［M］. 北京：中
国医药科技出版社，2010：243-244.
［2］ 国家中药管理局《中华本草》编委会 . 中华本草：第 8 册［M］.
上海：上海科学技术出版社，1999：130-135.
［3］ 福建省科学技术委员会 《福建植物志》编写组 . 福建植物志：
第四卷［M］. 福州：福建科学技术出版社，1989：479-480.
总含量
2.07
3.02
2.69
1.99
4.67
2.23
2.57
2.32
表 2 闽产栽培重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量
皂苷Ⅰ
含量
—
0.50
0.43
0.37
2.75
0.36
0.36
0.44
皂苷Ⅱ
含量
0.36
0.53
0.40
0.43
0.61
0.39
0.34
0.39
皂苷Ⅵ
含量
0.34
0.48
0.38
0.34
0.43
0.34
0.35
0.38
皂苷Ⅶ
含量
1.36
1.50
1.47
0.83
0.86
1.12
1.50
1.10
样品
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
产地
宁化 1
宁化 2
宁化 3
宁化 4
宁化 5
尤 溪
福州 1
福州 2
%
图 6 重楼皂苷Ⅶ对照品标准曲线
信
号
强
度
／m
V
含量 ／μg
!!!!!!!!!!!!!!!!!
第 5期 刘小芬等：闽产栽培重楼质量评价分析 55