全 文 :珍珠梅提取物对二乙基亚硝胺诱发癌前病变大鼠
恶性肿瘤相关物质的影响
张学武 ,陈丽艳 ,孙 权 ,李莲花
(延边大学医学院 ,吉林 延吉 133000)
摘 要:目的:探讨珍珠梅乙酸乙酯提取物在大鼠肝脏化学致癌初期对恶性肿瘤相关物质(tumor supplied
group of factor ,TSGF)的抑制作用。方法:按略改良 Solt-Farber氏方法制作大鼠肝脏癌前病变模型 ,用珍珠梅提
取物饲养大鼠 6周后处死 ,取肝脏 ,用比色分析法检测 TSGF 的含量 。结果:TSGF 在珍珠梅给药组的含量显著
低于癌前病变模型组 。结论:珍珠梅乙酸乙酯提取物在大鼠肝脏化学致癌初期对TSGF 有抑制作用。
关键词:珍珠梅提取物;恶性肿瘤相关物质;实验研究
中图分类号:R73-74 文献标识码:A 文章编号:1003-5699(2003)09-0049-02
作者简介:张学武(1973~ ),男 , 硕士学位 ,讲师。研究方向:肝脏生物化学研究。
珍珠梅(Sorbaria sorbifolia)属蔷薇科植物 , 又称“山高粱” 、
“八木条” , 广泛分布于云南 、贵州 、四川 、湖北 、甘肃 、宁夏及东
北地区 , 有活血化瘀 、消肿止痛功效 , 可用于治疗骨折及跌打
损伤[ 1] , 以前的实验研究发现珍珠梅具有保肝[ 2 、3] 、清除自由
基[ 4] 、对小鼠 S180肉瘤有抑制作用[ 5] 。本实验研究珍珠梅乙酸
乙酯提取物在化学致癌初期对 TSGF的抑制作用。
1 材料
1.1 药物 珍珠梅茎 、叶 、花采集于吉林省延吉市市郊 。乙
酸乙酯分 3次浸泡珍珠梅 , 温度为 40℃, 每次 12h ,合并 3 次滤
液 ,用旋转蒸发器减压浓缩 , 获珍珠梅乙酸乙酯提取物浸膏
(1g珍珠梅有效成分相当于 33.3g生药)。
1.2 试剂 TSGF 联合检测试剂盒购于福建新大陆生物技术
有限公司。
1.3 动物 Wistar大鼠 , 雄性 , 体重为 140 ~ 160g , 由延边大学
医学院动物科提供。
2 方法
2.1 造模 、给药及检测方法 将 36 只Wistar 雄性大鼠分为
A、B 、C 3 个组 , 按尹宗柱等报道过的略改良的 Solt-Farber 氏
方法[ 6]制作大鼠肝脏癌前病变模型。 A 组为正常对照组 , 以
生理盐水(0.4ml)代替二乙基亚硝胺腹腔注射 , 3 周后肝脏部
分切除 ,给予标准粉末饲料;B组为癌前病变模型组 , 大鼠腹腔
注射二乙基亚硝胺(200mg/kg), 2 周后开始在饲料中添加乙酰
氨基芴(0.08g/ kg), 注射二乙基亚硝胺 3 周后进行肝脏部分切
除术;C 组为给药组 ,大鼠腹腔注射二乙基亚硝胺 , 2 周后开始
在饲料中添加乙酰氨基芴(0.08g/ kg)及珍珠梅(200mg/kg), 注
射二乙基亚硝胺 3周后进行肝脏部分切除术。 3 个组的大鼠
共饲养 8 周。8 周后将大鼠处死 , 取血清 , 用比色分析法检测
TSGF 。
2.2 病理形态学观察 各组大鼠肝脏均采用HE染色。
2.3 统计学处理 应用 SPS-10.0 统计软件进行方差分析。
3 结果
3.1 病理形态学观察 A 组大鼠肝组织中未见异常病变;B
组大鼠肝组织呈异型性增生 , 增生的肝细胞体积增大 ,胞浆丰
富 ,细胞核增大 ,核仁增大 , 异染色质粗糙;C 组大鼠肝组织基
本正常 ,极少数肝组织内可见到增生灶。
3.2 珍珠梅提取物对二乙基亚硝胺诱发肝脏癌变初期的大
鼠 TSGF抑制作用 见表 1。 C 组 TSGF 的含量明显低于 B 组
(P<0.01),说明珍珠梅提取物对TSGF 的生成有抑制作用。
表 1 珍珠梅提取物对二乙基亚硝胺诱发肝脏癌变初期
的大鼠 TSGF抑制作用( x±s)
组别 n TSGF(μmol)
A组 12 113.7±5.2*
B 组 9 163.6±10.2
C 组 11 131.8±19.5*
与 B 组比较 , *P<0.01
4 讨论
糖类物质所构成的糖脂 、糖蛋白 、寡聚糖等广泛分布于细
胞内外和各种体液中 , 在细胞发生癌变时其代谢紊乱可引起
其在体液中的含量升高 , 是国际公认的肿瘤标志物。氨基酸
及其代谢产物由于其瘤种特异性小而适用于各种肿瘤的筛
选 ,而 TSGF是多种肿瘤标志物的组合[ 7] 。 TSGF 是恶性肿瘤
细胞及周边毛细血管扩增的物质基础 , 具有恶性肿瘤特异性。
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吉林中医药 2003年 9月 第 23卷第 9期
DOI :10.13463/j.cnki.j lzyy.2003.09.051
TSGF来源于恶性肿瘤细胞 ,它仅对恶性肿瘤增生起重要作用 ,
而与非肿瘤血管增生无明显关系 , 血清 TSGF 水平在恶性肿瘤
形成早期即明显增高[ 8] 。因此 , TSGF 检测对恶性肿瘤早期诊
断和预防具有重大意义。由于 TSGF 对恶性肿瘤具有“广谱
性” ,其敏感性高达 80.9%[ 9] 。本实验中珍珠梅对二乙基亚硝
胺诱发大鼠癌变初期的 TSGF的生成具有抑制作用 , 说明珍珠
梅提取物对肿瘤的发生有一定的预防和治疗作用。对于其作
用机理 ,今后应进一步研究。
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及对瘤标特异性的评价[ J] .中国肿瘤临床与康复 , 2000 , 7
(2):30. (收稿日期:2003-05-13)
槲寄生碱对乳腺癌细胞抑制作用的实验研究
彭海燕1 ,章永红1 ,韩 英2 ,王 梦2
(1.南京中医药大学第一临床医学院 ,江苏 南京 210029;2.江苏省药物研究所 ,江苏 南京 210009)
摘 要:目的:探讨槲寄生碱对乳腺癌细胞生长的抑制作用。方法:采用MTT 法测定槲寄生碱对乳腺癌细
胞生长的抑制作用。取对数生长期的乳腺癌细胞培养 24h后加入含不同浓度槲寄生碱培养液 ,作用 24h后倾
去上清液 ,加入MTT ,4h后吸去上清液 ,加入 DMSO;30min后上酶标仪 570nm 处测 OD值。抑制率(%)=(对照
孔OD值-实验组OD值)/对照孔OD值×100%。结果:槲寄生碱对乳腺癌细胞生长有显著的抑制作用 。其在
0.03125mg/ml ~ 0.125mg/ml剂量时 ,对乳腺癌细胞生长抑制率为 42.7%~ 70.2%。
关键词:槲寄生碱;乳腺癌;实验研究
中图分类号:R73-74 文献标识码:A 文章编号:1003-5699(2003)09-0050-02
作者简介:彭海燕(1970~ ),女 , 江苏南京人 , 讲师 ,硕士。
近年来 ,槲寄生的抗癌作用受到国内外医药学界的重视 ,
已从多种槲寄生植物中提取到具有抗癌活性的植物糖蛋白和
生物碱。笔者从槲寄生植物中提取到具有抗癌活性的生物
碱 ,并用于抗人乳腺癌细胞的抑制试验 , 发现其对人乳腺癌细
胞有显著的抑制作用 ,现将实验结果报告如下 。
1 实验材料
1.1 瘤株 人乳腺癌MCF-7 细胞株购自省肿瘤医院肿瘤研
究所。 RPMI 1640培养液(GIBCO 公司产品)内含 10%小牛血
清 , L-谷氨酰胺 2nM , 青霉素 100IU/ ml和链霉素 100ug/ml。人
乳腺癌细胞培养于 RPMI 1640培养液中 , 培育在 37℃、5%CO2
培养箱内。
1.2 药物 槲寄生碱 ,由江苏省药物研究所植化室提供。
2 实验方法
采用MTT法[ 1]测定槲寄生碱对乳腺癌细胞生长的抑制作
用。取对数生长的乳腺癌细胞调整至 1×105/ml , 0.2ml 接种
于 96孔板上 , 置 37℃、5%CO2 培养箱内培养 24h 后舍弃原培
养液 ,加入含不同浓度槲寄生碱培养液各 0.2ml(设 3 个浓
度), 每个浓度设 9 个复孔(分 3 次重复), 并设无药物(含配制
药物的乙醇)培养液和空白对照孔(同时作 3 个板)。作用 24h
后倾去上清液 , 各孔加入MTT 0.1ml , 37℃4h 后吸去上清液 , 加
入 DMSO 0.1ml于各孔 , 30min后上酶标仪 570nm 处测 OD 值。
抑制率(%)=(对照孔 OD值-实验组 OD 值)/对照孔 OD值
×100%。
3 实验结果
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