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蓝靛果中总黄酮含量测定方法的探讨



全 文 :[ 收稿日期]  1999-09-24
[ 作者简介]  洪淳赞(1954-), 男(朝鲜族), 副主任药师 , 学
士;金胜日(1958-), 男(朝鲜族), 药师;姜哲(1973-),
男(朝鲜族),药师 ,学士.
蓝靛果中总黄酮含量测定方法的探讨
洪淳赞1 ,金胜日1 ,姜哲1 ,郭伟明2 ,元美花3
(1.延边大学医学院 附属医院药剂科 , 吉林 ,延吉 133000;2.大庆市第二医院 ,黑龙江 , 大庆 163461;3.延边大学 草仙药业有
限公司 ,吉林 , 龙井 133400)
[ 摘要]  [ 目的] 筛选测定总黄酮含量的最佳的方法.[ 方法] 制备蓝靛果试液 ,以芦丁作为对照品用比色法测定蓝
靛果中总黄酮含量(%);另用重量法测定其总黄酮含量制备蓝靛果试液.[ 结果] 比色法测定的 100 g 蓝靛果中总黄
酮含量为 104.6 g ,重量法测定的总黄酮含量为 55.5 g.[ 结论]两种方法所得结果相差很大.
[ 关键词]  黄酮类;植物 , 药用;比色法
[ 中图分类号] R284   [ 文献标识码] A   [ 文章编号] 1000-1824(2000)01-0041-02
Inquire into method of the assaying flavonoid in Lonicera edulis
HONG Chun-zan1 ,JIN Sheng-ri1 ,JIANG Zhe1 ,GUO Wei-ming2 , YUAN Mei-hua3
(1.Department of Pharmacy , Af f iliated Hospi tal of Y anbian Universi ty College of Medicine , Yanj i
133000 , J ilin , China ;2.The Second Hospital of Daqing Ci ty , Daqing 163461 , Heilongjiang , China;3.
Yanbian University Cosaint Pharmaceutical CO.LTD , Longjing 133400 , J il in , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To screen optimal method of detecting the content of to tal flavone in the Lonicera
edul is.METHODS With the rutin as control sample , the content(%)of total flavone w as detected f rom fresh
fruits of the Lonicera edulis by using Chromatometry and of the Lonicera edulis by using gravimetry.RE-
SULTS The content of total flavone were 104.6 g and 55.5 g , respectively.CONCLUSION The tw o methods
had dif ferent results fo r detecting the content of total f lavone in the Lonicera edulis.
Key words:flavones;plants ,medicinal;colorimetry
  蓝靛果(Lonicera edulis)是忍冬科忍冬
属植物 ,我国主要分布于小兴安岭 、长白山等
地 ,其果实酸甜可口 、营养丰富[ 1] .目前 ,对蓝
靛果的研究只限于营养成分 、生态学特征 、分
类地位 、人工栽培等方面[ 2~ 5] .据报道蓝靛果
的主要化学成分为黄酮类(主要为花色甙).
在蓝靛果产地 ,有人用蓝靛果酒降血压.用蓝
靛果进行的降压实验表明 ,蓝靛果对高血压
有一定的降压作用 ,且对正常血压无影响[ 6] .
为了搞清蓝靛果的降血压作用机理 ,在检识
其黄酮类成分[ 7] 的基础上 ,测定其总黄酮含
量 ,为进一步研究奠定了基础.
1 实验材料与方法
1.1 材料处理 于6 ~ 7月份采集80 kg蓝靛
果鲜果 ,用 20 L乙醇浸泡 ,密闭 ,冷藏 ,备用.
另精称 100 g鲜果 ,在阴凉处自然风干 ,再称
重得 15 g 干果.蓝靛果提取液:把上述备用
的新鲜蓝靛果捣碎成汁(果实含量为 80%),
取 100 mL 蓝靛果汁 ,加 500 mL 95%乙醇
(盐酸含量为 0.1%,搅拌 ,在 4 ~ 10 ℃下静
置过夜 , 过滤 , 回收乙醇 , 加蒸馏水至 200
mL ,即得).
1.2 仪器和试剂 日本岛津UV-260型记录
式分光光度计;旋转蒸发器 RE-52 型:上海
青沪西仪器厂产品;芦丁对照品:中国药品生
物制品检定所提供.
1.3 标准曲线绘制 精称芦丁200 mg对照
品 ,用 70 mL 甲醇微热溶解后 ,置100 mL容
量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀;精吸 10 mL 置
100 mL 容量瓶中加水至刻度 ,摇匀;分别吸
取 1.0 , 2.0 , 3.0 , 4.0 , 5.0 , 6.0 mL ,分别置于
25mL 容量瓶中 ,各加水至 6 mL ,加 50g/L
亚硝酸钠 1 mL ,混匀 ,放置 6 min ,再加氢氧
化钠试液 10 mL ,加水至刻度 ,摇匀 ,放置 15
min.以第一瓶作空白 ,置于分光光度计中 ,在
500 nm处测定吸收度值(A).以浓度(g/ L)
为横坐标 ,以吸收度值 A 为纵坐标 ,绘制标
·41·延边大学医学学报 2000 年 3 月 第 23卷 第 1期
DOI :10.16068/j.1000-1824.2000.01.016
准曲线 , 得回归方程:Y = 2.2892X +
0.0141 , R =0.9997 ,查表得 R 0.01 =0.9170 ,
因 R >R 0.01 ,故相关性显著.
2 结果
2.1 用比色法测定总黄酮含量 精吸蓝靛
果试液12 , 15 , 18 mL 各 3 份 , 分别置于 50
mL 容量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀;精吸 10
mL置 25 mL 容量瓶中 ,加水至刻度 ,摇匀;
精吸 3mL置 25mL容量瓶中 ,加水至 6 mL ,
加 50 g/L 亚硝酸钠溶液 1 mL ,混匀 ,放置 6
min ,加 100 g/ L 硝酸铝溶液 1 mL ,混匀 ,放
置 6min ,加氢氧化钠试液 10 mL ,加水至刻
度 ,摇匀 ,放置 15 min ,以不加样的平行溶液
作空白 ,在 500 nm 处测定吸收度值(A),将
测得的各吸收度值代入回归方程 ,计算测定
结果 ,见表 1.
表 1 用比色法测定的总黄酮含量
序号 取样量 A C(g/ L) 样品中总黄酮含量(g/L) 平均(g/ L)
1 12 0.304 0.7102 61.65
2 12 0.292 0.6827 59.26
3 12 0.295 0.6896 59.86
4 15 0.421 0.9781 67.92
5 15 0.401 0.9323 64.74 62.81±2.98
6 15 0.405 0.9415 65.38
7 18 0.477 1.1063 64.02
8 18 0.450 1.0445 60.45
9 18 0.462 1.0720 62.04
  即样品中含有总黄酮 62.81×200 ÷
1 000=12.562(g).所以干果中总黄酮含量
为 12.562 ÷(80 ×0.15)×100 =104.6 g
(100g干果中含 104.6 g 总黄酮).
2.2 用重量法[ 8] 测定总黄酮含量 取100mL
蓝靛果汁加 95%乙醇 500mL ,搅拌 ,4~ 10 ℃下
静置过夜 ,过滤 ,回收乙醇 ,减压干燥(50 ℃)至
恒重 ,称重为 6.66 g.即干果中总黄酮含量为 66
÷80÷0.15×100=55.5 g(100 g 干果中含 55.5
g 总黄酮).
3 讨论
中国药典 1995年版中规定用芦丁对照品
测定黄酮类化合物的含量 ,可见以芦丁对照品
测定大多数黄酮类化合物是可行的 ,但通过以
上实验表明 ,以芦丁对照品测定蓝靛果(干果)
中总黄酮含量时所得结果大于 100 g ,与以重
量法测定结果相差较大 ,其原因可能是由于黄
酮类化合物之间结构差异所致 ,芦丁结构中具
有大多数黄酮类化合物均具备的黄酮母核第
4-羰基 ,而蓝靛果中所含黄酮类成分主要为花
色甙 ,其结构中无 4-羰基 ,故建议在测定花色
甙含量时 ,如用芦丁对照品 ,应通过实验算出
校正系数 ,加以校正.如选以其它黄酮类化合
物作为对照品 ,最好选用花色甙类 ,有待于进
一步研究.
[参 考 文 献]
[ 1]  李淑芹.野生植物 ———蓝靛果营养成分研究
[ J] .东北农业大学学报 ,1994 , 5(4):401.
[ 2]  黄普华.我国东北地区蓝靛果初步研究[ J] .
自然资源研究 ,1982 ,(1):57.
[ 3]  许双华.蓝靛果的人工栽培[ J] .黑龙江林业 ,
1986 ,(10):8.
[ 4]  汪矛.蓝靛果忍冬的果实解剖及其分类意义
[ J] .植物研究 ,1988 , 8(4):203.
[ 5]  日本 S.S.制药株式会社.蓝靛果中食用天然
色素[ P] .1964 ,特许号 39-55790.
[ 6]  都昌杰.蓝靛果营养保健功能研究[ P] .鉴定
材料之二 , 92黑科成鉴字 148号.
[ 7]  葛正华 ,李延冰 ,贾玉良.蓝靛果果实中黄酮
类成分的检识分析[ J] .中医药学报 , 1995 ,
(4):56.
[ 8]  周明杨 主编.实用药品检验[ M] .长春:吉林
科学技术出版社 ,1993.490.◎
·42· Journal of Medical Science Yanbian Universi ty March 2000 Vol.23 No.1