全 文 ：延边大学医学学报2 0 05 年 9月 第8 2 卷 第 3期
7 1 1
蓝靛果乙酸乙醋萃取物对小鼠5 18 。实体瘤的抑制作用
杨恩月 ’ ,金光 1 ,金海英 “ , 洪淳赞 3
( 1
. 延 边大学 基础 医 学院 药理学教研 室 ;2 . 延吉市妇 幼保健 院 病理科 ; 3 . 延 边大学医 院 药剂科 : 吉林 延吉 1 33 00 0)
〔摘要 」 【目的」研究蓝靛果 乙 酸乙 醋萃取物 ( E E L C )对小 鼠 51 8。实体瘤的抑制作用及血清 SO D , M D A ,
N O
,
N O S 的影响 . 〔方法 」将 E E L C 灌 胃给 予实体瘤模 型小 鼠 , 观察对小 鼠肿瘤 的抑制作用 , 并用 比色法
测定血清 SO D , N O S , M D A , N O 值 [结 果 〕 E E L C 对小 鼠 51 8 0实体 瘤 的生长 有 明显 的抑制 作 用 , E E L C
大 、 中 、 小剂量组的肿瘤抑 制 率分别为 50 . 9 % , 3 9 .朽 % , 27 . 84 % ; E E L C 可 提高 51 8 0 实体瘤 小 鼠血 清
S O D 活力 , 降低 M D A , N o , N o s 值 . 【结论 } E E L C 对小 鼠 51 8。实体瘤 的生长有抑制作用 .
【关键词 l 肉瘤 ;植物 , 药用 ;超 氧化物歧化酶 ; 丙 二醛 ; 小 鼠
[中图分类号 ] R 2 8 5 . 5 【文献标识码 I A 【文章编号 」 10 00 一 1 8 2 4 (2 005 )0 3 一 0 1 7 1 一0 3
I n h i b i t o r y e f fe e t s o f E E L C o n t u m o r g r o w t h o f b e a r i n g s a r e o m a 5 1 5 0 i n
n l l C e
v A N G E n
一
y u e ` , J I N G u a n g , , J I N H a i · y i n扩 , H o N G e h u n · z a n 3
( 1
.
eD aP
r z , n e n t of ljP
a r m a 〔。 l`哪 , aY n b ia n U ,: i* sr i.Vt 肠11毋 Of B a s i`· M e d f e i n e ; 2注 )亡沪a r l , n e , , 2 oj aP t h o l。月协j , h , u Z oH s P i t a l 为 r
M
口 ze r , , a l a ,: d lC i ld l了亡“ l rh 肠 er ; 3 . eD aP r r m e n r oj lP a r m a 卿 , oH s P i r a l of aY n b : a n 肠 : i v e r s i勺, : aY , u i 1 3 3 0 0 0 , J艺12 , , , jlC i l , a )
A B S T R A C T : O双了E C IT V E T o i n v e s t ig a t e t h e i n h ib i t o r y a e t io n o f e t h y l a e e t a t e e x t r a e t io n o f L o n i e e ar e a e r u lea
L
.
Va
r
.
e d u l i s T u r e z
.
xE eH dr (
E E L C ) o n b e a r i n g s a r e o m a 18 0 ( 5 18 0 ) i n m i e e
, a n d t o s t u d y t h e e f f e e t s o f
s u p e r o x i d e d is m u t a s e ( S O D )
, n i t r i c o x i d e S y n t h a s e ( N O S )
, C o n t e e t S o f m a lo n d i a l d e h y d e ( M D A ) a n d n i t r ie o x i d e
( N O ) in t h e s e r u m o f b e a r i n g 5 1 8 0 S a r e o m a i n m ie e
.
M E T H O D S T h e m i e e o f b e a r i n g S a r C O l l l a 、 V e r e
a dm i n is t e r e d o r a l ly E E L C
, a n d t h e t u m o r in h i b i t i n g a e t io n o n b e a r i n g 5 1 5 0 s a r e o m a In l】1 1 C e o b s e r v e d
.
T h e
a e t i v i t i e s o f S O D a n d N O S a n d t h e e o n t e n t s o f M D A a n d N O w e r e d e t e e t e d b y e o lo r im e t r y
.
R E S I少L ST 丁
’
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g
r o w t h o f s o li d t u m o r o f b e a r i n g 5 1 80 i n m i e e o b v i o u s l y i n h i b i t e d b y E E L C
.
In t h e g r o u p o f h ig h
,
m id d le a n d lo w
d o s a g e E E L C g r o u p
, t h e t u m o r i n h i b i t i o n r a t e o f b e a r i n g 5 2 5 0 i n m i e e w e r e 5 0
.
9 9 %
,
3 9
.
4 5 % a n d 2 7
.
8 4 %
r e s p e e t i v e l y
.
T h e S O D a e t i v i t y o f b e a
r i n g S x s o in m i e e b lo o d s e r u m w a s i n e r e a s e d
, a n d t h e a e t i v i t y o f N O S a n d
t h e e o n t e n t s o f M D A a n d N O w e r e d e e r e a s e d b y E E L C
.
C O N C L US OI N E E L C h
a s in h i b i t o r y e f f e e t s o n t u m o r
g or w t h o f be a r i n g s a r e o nr a 5 1 5 0 i n m i e e
.
K e y w o r d s : s a r e o m a ; p l a n t s
,
m e d i e i n a l ; s u p e
r o v u la t i o n ; m a lo n d ia ld e h y d e ; m i e e
[收稿 日期 〕
【作者简介 〕
20 05
一
05
一
2 3
杨恩月 ( 1 9 7 7一 ) , 女 (朝鲜族 ) , 助教 , 硕 士 , 研
究方向为肿瘤 药理 学 .
Jon r u al ofMe d ic al S e ien e e Y an b i an Un ive r sity S e p
.
5 2 0 0V
o
l
.
2 8 N
o
肿瘤是机体自身细胞在各种内外致癌因
素作用下发生恶性转化而产生的 , 蓝靛果是
忍冬科忍 冬属植 物 , 主 要 成分为黄酮 类物
质 [ `〕 , 具 有 降 低 血 压 、 血 脂 及 抑 菌 等 作
用 [ 2一 4 〕 . 本文研究 了蓝靛 果 乙酸 乙酷萃取物
(
e t h y l a e e t a t e e x t r a e t i o n o f L o n i c e ar ca
e r u l ea
L
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Va
:
·
ed
u 八: uT cr z
.
ex eH dr
,
E E L C )又寸小
鼠 51 8。实体瘤的抑制作用及对血清生物化学
指标的影响 .
材料
1
.
1 动物及瘤种 取纯系昆明种雄性小鼠 ,
体重为 18 一 2 9 , 由延 边大学医学部实验动
物科提供 ; 5 18。实体瘤种购 自吉林省肿瘤医院
肿瘤研究所 .
1
.
2 药物 及试剂 将蓝靛果鲜果捣碎 , 用
95 0 m L几 乙醇回流提取 ,滤液减压 回收得浸
膏 , 将其溶解为混悬液 , 分别用石油醚 、 乙酸
乙醋及正丁醇溶剂梯度萃取 , 取 乙酸 乙醋萃
取部分 , 回收溶剂得 乙 酸 乙醋萃取物 , 置 于
4 ℃冰箱备用 ; S O D , M D A , N O , N O S 试剂盒
为南京建成生物工程研究所产品 .
右腋下接种 0 . 2 m L . 接种成功后将小 鼠随机
分为 4 个组 , 即 E E L C 大 、 中 、 小剂量组及阴
性对照组 ;将未进行处理的 10 只小鼠列人正
常组 . E E L C 大 、 中 、 小剂量组小 鼠分别灌 胃
给 予 E E L C 4 . 0 , 2 . 0 , 1 . 0 9瓜 g ( 按 生 药 量
计 ) , 正常组及阴性对照组小鼠灌胃给予等体
积蒸馏水 ,每组均连续给予 10 d . 于接种第 1
日称取体重 , 眼球采血致死 , 剖取肿瘤称取质
量 ,并按公式计算肿瘤抑制率 . 结果示 , E E L C
大 、 中 、 小 剂 量 组 的 肿 瘤 抑 制 率 分 别 为
5 0
.
9 9 %
,
3 9
.
4 5 % 及 2 7 . 8 4 % ; E E L C 大 、 中 、
小剂量组小 鼠肿瘤质量均降低 , 与 阴性对照
组 比 较 均有 显 著 性 差 异 ( 尸 < 0 . 05 , 尸 <
0
.
0 1 ) ;见表 1 .
表 1 E E L C 对 51 8。实体瘤肿瘤抑制作用 (厕 士 DS )
组别 剂量
( g k/ g )
肿瘤质量
( g )
肿瘤抑制率
(% )
阴性对照组
E E L C小剂量组
E E L C中剂量组
E E L C大剂量组
1O
1 0
3
.
40 士 0 . 55
.
4 5士 0 . 7 4 粉 2 7 . 8 4
l 0
l 0
2
.
0 6士 0 . 5 4
1
.
6 6 士 0 . 4 7
3 9
.
4 5
5 0
.
99
与阴性对照组相比较 , , 尸 < 0 . 05 , , , 尸 < 0 . 01
2 方法与结果
2
,
1 统计学处理 所有数据以平均数 士标
准偏差 (至士 S D )表示 ,用 S P S S 软件中单因素
方差 分析 处 理数 据 (均为 双侧 检 验 , Q =
0
.
0 5 )
.
2
.
2 E E L c 对小鼠 51 80 实体瘤的抑制作用
取 50 只小鼠 , 在无菌条件下给其 中的 4 0 只
接种培养第 7 日的 51 8。实体瘤小鼠腹水 , 方
法为用生理盐水以 1 : 3 的比例将腹水稀释为
2 x 10 “ 个 /m L 的肿瘤细胞混悬 , 向每只小 鼠
2
.
3 E E L c 对 51 80 实体瘤小 鼠血清生物化学
指标的影响 接种瘤种 、分组及 给药方法同
2
.
1 项下 . 接种第 n 日眼球采血 , 血液静置
3 0 m i n
, 以 2 0 0 0 r m/ i n 分离血清 , 取上清液置
于 一 20 ℃ 冰箱 备 用 . 用 比 色 法 测 定 血 清
S O D
,
N O S 活性及 M D A , N O 含量 . 结果示 ,
E E L C 各剂量组小鼠血清 S O D 活性均明显提
高 , M D A , N O , N O S 值均降低 , 与阴性对照组
比较具有显著性差异 ( P ( 0 . 0 5 , P ( 0 . 0 1 ) ,
见表 2 .
延边大学医 学学报 0 0 2 5年 9月 第 2 8卷 第 3期
表 2 E E Lc对 5 1 8。 实体瘤小鼠血清生物化学指标的影响
组别 动物数 ( 只 )剂量 (g k /g )O S D( U / L)O N S( U /m L)NO( 样m o l/ L)
5 82 )沁双 0 3
正常组
阴性对照组
E E C L小剂量组
E E LC中剂量组
E E C L大剂量组
10
lO
1O
O 1
10
331
27 4
0 6士 1 3.0 8
1
.
0
2
.
0
,
6 士 2 0 . 6 7 # #
, .
4 士 30 . 95 拼
22 士 30
.
2 5
著 #
29 士 32 . 0 5 普 粉
M D A ( “ m o lL/ )
9
.
02 士 0 . 95 苦 圣
1 2
.
51 土 1 . 32 # #
1 1
.
24 士 1 . 28 奋 # #
10
.
8 士 1 . 65 份 #
10
.
01 土 0 . 87 份 赞
30
.
09 士 3 . 02 考 首
39
.
75 士 2
.卯# #
38
.
5 9 士 2 . 86 #
34
.
12 土 4 . 42 苦 份
3
.
17 士 3 . 92 份 势
32
.
98 士 2 . 26 份 妥
68
.
1 1士 14 . 42 并 #
48
.
0 1士 1 1 . 1 1 苍
47
.
03 士 8 . 31 备
46
.卯士 8 . 11 赞
与阴性 对照组相 比较 , * 尸 < 0 . 05 , * * 尸 < 0 . 0 1 ;与正常组相 比较 , # P < 0 . 0 5 , # 材 尸 < 0 . 01
3 讨论
国内外大量研究结果表明 , 肿瘤的发生
发展与宿 主 的 自由基水平及其代谢产物有
关〔5〕 . 氧可在生物体内代谢过程 中产生大量
的活性氧 , 主要包括超氧阴离子 、 单线氧态 、
过氧化氢及经 自由基等 , 这些有害的活性氧
可直接损伤 D N A , 也可通 过脂质过氧化间接
损伤 D N A , 最终引起癌变 〔“ 〕 . 许多文献报道 ,
恶性肿瘤患者血清中 S O D 的活性降低 , 且与
肿瘤的分级及分期相关 〔7 , ”〕 , 这 与本实验结果
相符 . 本实验中观察到 , 肿瘤模型组小鼠血清
S O D 活性均显著低于正常组 , 而脂质过氧化
物的含 量 明显 高于 正 常组 . E E L C 可 提高
S O D 的活性且随剂量的增加其抗氧化活性亦
增强 . E E L C 对 5 18。实体瘤小鼠的肿瘤生长具
有抑制作用 , 其机制可能是通过抗氧化作用
实现的 . 在一些原发性肿瘤组织中 , N O S 的
活性与肿瘤的恶性程度呈正相关【”〕 . 实验研
究发现 , 移植性肿瘤动物体 内肿瘤细胞可持
续释放 N O , 而 N O S 的活性也增强 ,但其活性
比可产生细胞毒作用和凋亡作用 的酶的活性
至少低 l 一 2 个数量级 〔`” 〕 . 本实验结果示 , 蓝
靛果 乙酸乙醋萃取物可显著降低实体瘤小鼠
血清 N O S 活性和 N O 含量 , 提示减少肿瘤血
液供应及抑制肿瘤血管形成可能是 E E L C 抗
肿瘤活性 的机制 之一 综上 所述 , E E C L 对
5
1 8。实体瘤小 鼠的肿瘤生长具有 明显的抑制
作用 .
〔参 考 文 献」
〔1〕 洪淳赞 , 金胜日 , 姜哲 , 等 . 蓝靛果中总黄酮含量测定方
法的探讨【J〕. 延边 大学医 学学报 , 20 0 , 23 ( 1 ) : 41 .
【2了 郎杰 , 隋政 , 高慧英 . 蓝靛果降压作用的研究 〔J J . 中医
药信 息 , 1 9 96 , 1 3 ( 1 ) : 4 5 .
〔3〕 金光 ,杨恩 月 , 洪淳赞 . 蓝靛果 乙醇提取物对大鼠高脂
血症的治疗作用 【J〕 延 边大学 医 学学报 , 20 4 , 27 ( 2) :
1 0 9
.
〔4 」 姚月梅 , 张英艳 , 邹 立化 . 发酵蓝靛果汁抑菌作用 的实
验研究 [J〕 . 中国微 生 态学杂志 , 20 02 , 1 4 ( 4 ) : 2 1 6 .
【5〕 E m e r i t 1 . R e a e t i v e o x y g e n s p e e ie s 。 h r o m淤m e m u t a t io n
a n d e a n e e r 因s s ib le r o le o f e la s t o g e n ie f a e t o sr in e a r e in o -
g e n e s is [J」. F er R a d : ( 一 B i o l M ed , 1 9 94 , 1 6 : 9 9 .
【6 」 丁克祥 . SO D 临床研究集 〔M 〕 . 北京 : 原 子 能 出版社 ,
1 992
.
2
.
【7」 郭辉 , 杨惠玲 ,刘秀琴 , 等 . 实体瘤 51 8。小鼠血清中丙二
醛和超氧化歧化酶水平 及 蛇毒对其影 响 〔J〕. 癌 症 ,
2 000
,
1 9 ( 1 0 )
: 8 87
.
【8 〕 徐勇 . 超氧化物歧化酶与膀眺癌分级分期的研究【J] .
中华泌尿外科杂志 , 19 9 6 , 1 7 ( 1 0 ) : 6 1 2 .
【9 」 肠 bb s C S , B r a n m a n JE , lA d a p e K D . E x p r es s io n o f n it r ie
o x i d
e s y n t h
a s e in h u m
a n e e n t r a l n e r v o u s s y s t em t u m o r s
[J了. aC n ce : R es , 1 99 5 , 5 5 : 7 2 7 .
[ 1 0 ) J
e n k in s D C
,
C h a r le S IG
.
T h o m s e n L L
.
R
o l e : o f n i t r ie
o x id
e in t u m o : g r o w t h 仁J〕 . 尸 (r ,。 aN t z A o a “ 凡 1 U S A ,
1 99 5
,
9 2
: 4 39 2
. 回