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维药香青兰滴丸质量标准的研究
何承辉1， 邢建国1， 王新春2，3* ， 于 宁1， 王云飞1
(1.新疆维吾尔自治区药物研究所，新疆 乌鲁木齐 830004;2. 石河子大学医学院一附院，新疆 石河子
832008;3.石河子大学药学院，新疆 石河子 832002)
收稿日期:2010-11-14
基金项目:国家科技重大专项课题新药创制(2009ZX09103-448)
作者简介:何承辉(1974 －)，女，硕士，从事中药新剂型与新制剂的研究与开发。Tel:(0991)2318172
* 通讯作者:王新春，博士，主任药师，硕士生导师。Tel:(0993)2855827 E-mail:cwjwxc@ 163. com
关键词:香青兰滴丸;香青兰;田蓟苷;木犀草素;质量标准
摘要:目的:建立维药香青兰滴丸质量标准。方法:采用薄层色谱法进行定性色谱鉴别，采用 C18柱，流动相分别为乙腈-
0. 5%甲酸(20 ∶ 80)、甲醇-0. 4%磷酸(47 ∶ 53)，检测波长分别为 324 nm 及 350 nm 测定样品中田蓟苷和木犀草素的含
量。结果:薄层鉴别的色谱斑点清晰，阴性对照无干扰;田蓟苷浓度在 10. 1 ～ 101. 0 μg /mL范围内呈良好线性关系，平均
回收率为 98. 95%，RSD为 2. 21%，木犀草素在 9. 88 ～ 98. 8 μg /mL范围内呈良好线性关系，平均回收率为 99. 10%，RSD
为 0. 56%。结论:本方法可准确用来定性、定量检测，具有简便、准确及专属性强的特点，可用于香青兰滴丸的质量控制。
中图分类号:R927. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2011)02-0272-05
Quality standard of Xiangqinglan Dripping Pill
HE Cheng-hui1， XING Jian-guo1* ， WANG Xin-chun2，3* ， YU Ning1， WANG Yun-fei1
(1. Xinjiang Institute of Materia Medica，Urumqi 830004，China;2. The First Hospital Affiliated to Medical College，Shihezi University，Xinjiang
832008，China;3. Pharmaceutical College of Shihezi University，Shihezi 832002，China)
KEY WORDS:Xiangqinglan Dripping Pill;Dracocephalum moldavia;luteolin;quality standard
ABSTRACT:AIM:To establish a method for quality control of Xiangqinglan Dripping Pill(Dracocephalum mol-
davia). METHODS:Dracocephalum moldavica was identified by TLC and the contents of tilianin and luteolin in
dripping pills were determined by RP-HPLC with C18 column and the mobile phase consisted of acetone-0. 5%
HCOOH(20 ∶ 80)and methanol-0. 4% phosphoric acid solution(47 ∶ 53)，detection wavelength was set at 324 and
350 nm，respectively. RESULTS:The herbs could be identified by TLC. The calibration curves of tilianin and
luteolin were in a good linearity over the ranges of 10. 1-101. 0 μg /mL，9. 88-98. 8 μg /mL;and the average recov-
eries of tilianin and luteolin were 98. 95%，99. 10% with RSD of 2. 21%，0. 56%，respectively. CONCLU-
SION:The method is simple，accurate and can be applied to the quality control of Xiangqinglan Dripping Pill.
香青兰［1］滴丸是由香青兰单味药材制成的中
药新制剂，具有补益心脑，活血化淤，通络开窍等功
能，是治疗冠心病、心绞痛、心肌缺血等疾病的有效
药物［2］。处方被收载于维吾尔古典医籍《阿里卡
农》中，至今已有 800 多年的历史［1］。田蓟苷为香
青兰中含量较高的主要药效成分之一［3-6］。为了有
效控制制剂质量，本试验建立了定量测定有效成分
田蓟苷及木犀草素的高效液相色谱法和定性鉴别田
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蓟苷的薄层色谱法，结果所建立的方法准确、可靠、
专属性强，可有效控制香青兰滴丸的质量，为香青兰
滴丸质量标准的研究提供了实验依据。
1 仪器与试剂
SPD-10AVP型高效液相色谱仪(日本岛津);
BP211D型十万分之一电子天平(sartorius);Milli-
pore simplicity-185 超纯水器(美国密理博公司);
KQ-100DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器
有限公司);紫外分析摄影仪(武汉药科新技术开发
公司)。田蓟苷对照品(批号:20070408，新疆药物
研究所制备，纯度 > 98%)，木犀草素对照品(批号
111520-200504)由中国药品生物制品检定所提供。
乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为超纯水。香
青兰滴丸新疆药物研究所制备。
2 方法与结果
2. 1 香青兰定性鉴别 取本品 0. 5 g，研细，加甲醇
10 mL，超声处理 10 min，离心，取上清液作为供试品
溶液。另取缺香青兰阴性样品，同供试品溶液的制
备方法制成阴性对照品溶液。另取香青兰药材 5 g，
加入 40%乙醇 100 mL，回流提取 3 h，离心，取上清
液作为药材溶液。另取田蓟苷对照品适量，加入甲
醇制成每 1 mL含 0. 3 mg 的田蓟苷溶液，作为对照
品溶液。照薄层色谱法试验［7］，分别吸取上述 3
种溶液各3μL，点于同一硅胶HF254薄层板上，分别
以三氯甲烷-甲醇(8. 5 ∶ 1. 5)和甲苯-甲酸甲酯-甲
酸(5 ∶ 4 ∶ 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光
灯(254 nm)下检视。结果，供试品色谱在与对照品
色谱相应的位置上显相同颜色的斑点;阴性对照无
干扰。见图 1 和图 2。
图 1 香青兰 TLC 鉴别
(三 氯 甲 烷-甲 醇
(8. 5∶ 1. 5)为展开
剂)
图 2 香青兰 TLC 鉴别
(甲苯-甲酸甲酯-甲
酸(5 ∶ 4 ∶ 2)为展
开剂)
1.田蓟苷对照品 2.香青兰药材 3-5. 3 批样品 6.阴性对照
2. 2 田蓟苷的含量测定［8-9］
2. 2. 1 色谱条件 色谱柱:Shim-pack VP-ODS(4. 6
mm ×250 mm，5 μm);流动相:乙腈-0. 5%甲酸(20
∶ 80);检测波长:324 nm;流速:1. 0 mL /min;柱温为
35 ℃，进样量:10 μL。理论塔板数按田蓟苷计不应
低于 3 000。色谱图见图 3。
图 3 田蓟苷 HPLC图
A.田蓟苷对照品 B.样品 C.阴性样品
2. 2. 2 标准曲线的制备 取田蓟苷对照品约 10
mg，精密称定，置 50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释
至刻度，摇匀，即得 202 μg /mL 的田蓟苷对照品贮
备液。精密吸取对照品贮备液 0. 5、1. 0、2. 0、3. 0 及
5. 0 mL，分别置 10 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，
摇匀。按上述色谱条件分别进行测定，以对照品浓
度(C)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲
线，得田蓟苷线性方程:A = 509 212 C(r = 0. 999 8)，
田蓟苷在 10. 1 ～ 101. 0 μg /mL 范围内与峰面积线
性关系良好。
2. 2. 3 供试品溶液的制备 取本品适量，研细，取
约 0. 1 g，精密称定，置 50 mL 量瓶中，加甲醇约 25
mL，超声提取 30 min，冷却后用甲醇稀释至刻度，摇
匀，静置，滤过，取续滤液，即得。
2. 2. 4 阴性样品 取按处方比例及制法制备的不
含香青兰药材的滴丸约 0. 1 g，按 2. 2. 3 项下供试品
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溶液的制备方法制备阴性对照溶液，依法测定，结果
阴性对照无干扰。
2. 2. 5 精密度考察 精密吸取同一份田蓟苷对照
品溶液，按 2. 2. 1 项下色谱条件重复进样 6 次，测
定，计算田蓟苷峰面积值的 RSD 为 0. 65%，标明精
密度良好。
2. 2. 6 稳定性考察 精密吸取同一份供试品溶液
10 μL，每隔 2 h按 2. 2. 1 项下色谱条件测定，共测
定 6 次，计算供试品溶液中田蓟苷峰面积值的 RSD
为 1. 08%，表明供试品溶液在 12 h内稳定。
2. 2. 7 重复性考察 取同一批号的香青兰滴丸的
细粉 5 份，各约 0. 1 g，按供试品溶液的制备项下处
理，按 2. 2. 1 项下色谱条件进行含量测定，计算供试
品溶液中田蓟苷峰面积值的 RSD为 0. 65%。
2. 2. 8 加样回收率试验 取供试品细粉 9 份，每份
约 0. 05 g(含田蓟苷约 1. 4 mg)，精密称定，分别置
50 mL量瓶中，分别精密加入田蓟苷对照品溶液，照
2. 2. 3 项下供试品溶液的制备方法处理，制备高、
中、低 3 浓度的供试溶液，测定，计算回收率，结果见
表 1。平均回收率为 98. 95%，RSD为 2. 21%。
表 1 田蓟苷加样回收率实验结果
称样量 /mg 加样量 /mg 实测量 /mg 回收量 /mg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD /%
1. 401 1 0. 57 1. 971 1 0. 562 3 98. 65
1. 392 0. 57 1. 962 0 0. 561 5 98. 51
1. 376 6 0. 57 1. 946 6 0. 576 5 101. 15
1. 365 6 1. 368 2. 733 6 1. 346 9 98. 46
1. 336 1 1. 368 2. 704 1 1. 314 7 96. 10 98. 95 2. 21
1. 354 9 1. 368 2. 722 9 1. 338 9 97. 88
1. 391 8 2. 052 3. 443 8 2. 057 1 100. 25
1. 445 6 2. 052 3. 497 6 2. 113 7 103. 01
1. 313 6 2. 052 3. 365 6 1. 981 6 96. 57
2. 2. 9 样品含量测定 分别取 3 批香青兰滴丸样
品，按供试品溶液制备方法处理，按上述色谱条件下
测定，外标法求得香青兰滴丸样品中田蓟苷的含量。
结果见表 2。每丸含田蓟苷的平均值为 0. 805 6 mg
(n = 9)。
表 2 3 批样品测定结果(n =3)
批号 田蓟苷 /(mg /g) RSD /%
081020 23. 439 1. 06
081024 23. 515 0. 97
081028 22. 988 2. 13
2. 3 木犀草素的含量测定［10-11］
2. 3. 1 色谱条件 色谱柱:Shim-pack VP-ODS(4. 6
mm ×250 mm，5 μm);流动相:甲醇-0. 4%磷酸(47:
53);检测波长:350 nm;流速:1. 0 mL /min;柱温为
35 ℃，进样量:10 μL。理论塔板数按木犀草素计不
应低于 2 500。色谱图见图 4。
2. 3. 2 标准曲线的制备 取木犀草素对照品约 25
mg，精密称定，置 25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释
至刻度，摇匀，制成988 μg /mL的木犀草素对照品贮
备液。分别精密木犀草素对照品贮备液 0. 1、0. 3、
0. 5、0. 7 及 1. 0 mL，分别置 10 mL量瓶中，加甲醇稀
释至刻度，摇匀，即得。精密吸取 10 μL，注入液相
色谱仪，按上述色谱条件分别进行测定。以对照品
浓度(C)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标绘制标准
曲线，得木犀草素线性方程为:A = 40 215 C(r =
0. 999 8)，木犀草素在 9. 88 ～ 98. 8 μg /mL范围内与
峰面积线性关系良好。
图 4 木犀草素 HPLC图
A.木犀草素对照品 B.样品 C.阴性样品
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2. 3. 3 供试品溶液的制备 取香青兰滴丸适量，研
细，取细粉约 0. 1 g，精密称定，置 25 mL 量瓶中，加
甲醇约 15 mL，超声提取 20 min，冷却后用甲醇稀释
至刻度，摇匀，静置，滤过，取续滤液，即得。
2. 3. 4 阴性样品 取不含香青兰药材制备的滴丸
约 0. 1 g，按 2. 3. 3 项下供试品溶液制备方法制备香
青兰阴性对照溶液，依法测定，结果阴性样品无干
扰。
2. 3. 5 精密度考察 精密吸取同一份木犀草素对
照品溶液 10 μL，连续进样 6 次，按 2. 3. 1 项下色谱
条件测定，计算木犀草素峰面积值的 RSD 为
0. 48%，表明方法精密度良好。
2. 3. 6 稳定性考察 精密吸取供试品溶液 10 μL，
每隔 2 h按 2. 3. 1 项下色谱条件测定，共测定 6 次，
结果供试品中木犀草素峰面积值 RSD为 1. 21%，表
明供试液 12 h内稳定。
2. 3. 7 重复性考察 取供试品细粉 5 份，各约 0. 1
g，照 2. 3. 3 项下供试品溶液制备方法处理，按2. 3. 1
项下色谱条件进行测定，结果供试品木犀草素峰面
积值 RSD为 0. 75%。
2. 3. 8 加样回收率试验 取供试品细粉 9 份，每份
约 0. 03 g(含木犀草素约 0. 2 mg)，各精密称定，分
别置 25 mL量瓶中，各精密加入木犀草素对照品溶
液，照 2. 3. 3 项下供试品溶液的制备项下处理，使成
高、中、低 3 浓度供试液，按 2. 3. 1 项下色谱条件进
行测定，测定，计算回收率，结果见表 3。平均回收
率为 99. 10%，RSD为 0. 56%。
表 3 木犀草素加样回收率实验结果
称样量 /mg 加样量 /μg 实测量 /μg 回收量 /μg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD /%
0. 210 9 174. 1 413. 2 173. 2 99. 5
0. 200 6 174. 1 411. 6 171. 6 98. 6
0. 209 5 174. 1 412. 8 172. 8 99. 3
0. 202 1 217. 6 456. 1 216. 1 99. 3
0. 200 2 217. 6 455. 2 215. 2 98. 9 99. 10 0. 56
0. 206 8 217. 6 453. 1 213. 1 97. 9
0. 201 2 261. 1 500. 3 260. 3 99. 7
0. 203 4 261. 1 499. 8 259. 8 99. 5
0. 200 7 261. 1 498. 6 258. 6 99. 0
2. 3. 9 样品含量测定 取 3 批香青兰滴丸样品，按
2. 3. 3 项下供试品溶液制备方法处理，在 2. 3. 1 项
下色谱条件测定，外标法计算每批样品中木犀草素
的含量及 RSD。结果见表 4。每丸含木犀草素的平
均值为 0. 24 mg(n = 9)。
表 4 3 批样品测定结果(n =3)
批号 木犀草素 /(mg /g) RSD /%
081020 6. 967 1. 15
081024 6. 974 1. 07
081028 6. 955 1. 23
4 讨论
4. 1 展开剂的选择 在香青兰的 TLC 鉴别研究过
程中，分别考察了甲苯-乙酸乙酯-甲酸(4 ∶ 2 ∶
0. 1)、甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5 ∶ 4 ∶ 2)、氯仿-甲醇(9
∶ 1)、氯仿-甲醇(8. 5 ∶ 1. 5)等展开系统，结果表明，
氯仿-甲醇(8. 5 ∶ 1. 5)的 Rf 值较合适，效果较好。
4. 2 流动相的选择 有关 HPLC 测定田蓟苷含量
的文献尚未见报道，在流动相考察过程中，先后比较
了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-磷酸、乙腈-磷酸等多种流
动相，结果，以乙腈-0. 5%甲酸(20 ∶ 80)为流动相，
田蓟苷的分离效果和峰形均为最佳，由此确定了本
研究含量测定的流动相。
4. 3 样品处理方法的选择 在样品处理方法的研
究中，主要比较了超声、回流两种提取方法对田蓟苷
和木犀草素提取率的影响，结果两种提取方法对田
蓟苷和木犀草素的提取率相当，考虑超声提取方法
方便简单的特点，最终样品处理方法选择为超声提
取法，超声提取时间考察结果表明田蓟苷提取 0. 5
h，木犀草素提取 20 min为宜。
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SPE-HPLC法测定胃肠宁片中 3 种生物碱的含量
丘明明， 黄玉华
(广西食品药品检验所，广西 南宁 530021)
收稿日期:2010-07-15
作者简介:丘明明(1958 －)，女，副主任中药师，从事中药质量标准研究。Tel:(0771)2611653 E-mail:mingming. q5885@ 163. com
关键词:固相萃取;高效液相色谱法;胃肠宁片;盐酸小檗碱;盐酸巴马汀;盐酸药根碱
摘要:目的:建立 SPE-HPLC法测定胃肠宁片(布渣叶，辣蓼，番石榴叶，火炭母，功劳木)中盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐
酸小檗碱 3 种生物碱的含量。方法:选用WCX弱阳离子交换柱用于固相萃取，HPLC采用 Hvydro-RP 80A C18柱(250 mm
×4. 6 mm，5 μm)，乙腈-0. 05 mol /L 磷酸二氢钠溶液(磷酸调 pH2. 8)(27:73)为流动相，柱温为 35 ℃，流速:1. 0 mL /
min，检测波长为 265 nm。结果:盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱分别在 3. 443 7 ～ 6. 887 4 ng(r = 1. 000 0)、2. 306 ～
23. 060 ng(r = 1. 000 0)和 2. 361 3 ～ 23. 613 5 ng(r = 0. 999 7)范围内线性关系良好，回收率分别为 99. 71%(RSD 为
0. 85%)、100. 32%(RSD为 0. 98%)和 100. 32%(RSD为 1. 09%)(n = 9)。结论:该方法操作简便，准确性、重复性好，可
用于胃肠宁片中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱的含量测定。
中图分类号:R927. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2011)02-0276-04
Determination of three alkaloids in Weichangning Tablet by SPE-HPLC
QIU Ming-ming， HUANG Yu-hua
(Guangxi Institute for Food and Drug Control，Nanning 530021，China)
KEY WORDS:solid phase extraction;HPLC;Weichangning Tablet;jatrorrhizine hydrochloride;palmatine
hydrochloride;berberine hydrochloride
ABSTRACT:AIM:To establish a solid-phase extraction with high-performance liquid chromatography (SPE-
HPLC)method for the determination of jatrorrhizine hydrochloride，palmatine hydrochloride and berberine hydro-
chloride in Weichangning Tablet(Microctis Folium，Polygoni salicifolii Herba，Guajavae Folium，Polygoni Chinen-
sis Herba，Mahoniae Caulis). METHODS:WCX weak cation exchange column was used to SPE. The Hvydro-RP
80A C18 column (250 mm ×4. 6 mm，5 μm)was used at 35 ℃ with acetonitrile － 0. 05 mol /L sodium dihydrogen
phosphoric acid(pH2. 8)(27 ∶ 73)as the mobile phase，1. 0 mL /min as the flow rate，265 nm as the detective
wavelength. RESULTS:The linear ranges were 3. 443 7-6. 887 4 ng(r = 1. 000 0)for jatrorrhizine hydrochloride，
2. 306-23. 060 ng(r = 1. 000 0)for palmatine hydrochloride and 2. 361 3-23. 613 5 ng(r = 0. 999 7)for berberine
hydrochloride. The average recoveries were 99. 71% (RSD was 0. 85%)，100. 32% (RSD was 0. 98%)and
100. 32%(RSD was 1. 09%)，respectively. CONCLUSION:This method is simple，accurate and reproducible.
It can be used for the determination of jatrorrhizine hydrochloride，palmatine hydrochloride and berberine hydro-
chloride in Weichangning Tablet.
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2011 年 2 月
第 33 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2011
Vol. 33 No. 2