全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2017，32(1)∶109 ～ 110
* 经验交流*
基金项目:贵阳市科技局现代药业计划(筑科合同［2012204］号)
作者简介:孟小夏(1987—) ，女，贵州贵阳，硕士，从事中药药物制剂及生物活性的研究工作。Email:mxx0515@ 163． com
* 通信作者，Email:xiuligao@ hotmail． com
龙血竭和蜘蛛香体外联用的抗菌作用研究
孟小夏1，张 硕1，张 敏1，王鹏娇1，张荣平2，高秀丽1*
(1．贵州医科大学药学院，贵州 贵阳 550025;2．昆明医科大学，云南 昆明 650500)
摘要:目的 研究体外联用龙血竭和蜘蛛香对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌和白色念珠菌的抗菌效应。方法
采用棋盘格法设计，以固体培养基连续稀释法测定药物单独应用和最佳组合效应时对各实验菌的最低抑菌浓度(MIC) ，计
算部分抑菌浓度(FIC)指数，判定联合抑菌效应。结果 龙血竭和蜘蛛香联合用药后，对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白
色念珠菌的 FIC指数分别为 0． 75、0． 5、0． 625;试验浓度的龙血竭对大肠埃希菌的抑菌效果均较差，与蜘蛛香联合用药后，其
MIC = 2 mg·mL －1，FIC ＜ 1。结论 龙血竭与蜘蛛香联合用药对 4 株供试菌均具有良好的协同抗菌作用，可为临床用药提供参
考。
关键词:龙血竭;蜘蛛香;联合抗菌;最低抑菌浓度;部分抑菌浓度指数
中图分类号:Ｒ96 文献标志码:B 文章编号:1006 － 0103(2017)01 － 0109 － 02
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2017． 01． 034
抗生素的不合理应用使临床耐药菌株不断增
加，从中药中筛选并获得具有抗菌作用的成分已成
为研发新型抗菌药物的方向之一，如双黄连注射液
对多药耐药铜绿假单胞菌的抑制作用［1］。龙血竭
是百合科剑叶龙血树的含脂木材经提取得到的树
脂，具有抗炎、镇痛、抗菌、抗氧化、抗血小板聚集等
多种生理活性［2］。龙血竭胶囊对金黄色葡萄球菌、
铜绿假单胞菌均有抑制作用，对真菌具有明显的抗
菌活性［3］。蜘蛛香为败酱科缬草属蜘蛛香的干燥
根及根茎，其挥发油是抗菌、抗病毒、抗细胞毒及抗
肿瘤的主要活性成分［4］。现对龙血竭和蜘蛛香的
联合抗菌作用进行了研究，可为临床用药配伍提供
参考依据。
1 实验部分
1. 1 仪器、试药与菌株
超净工作台 SW － CJ － 1F(苏净集团安泰公
司) ;压力蒸汽灭菌器 YXQ － SG46 － 280SA(上海博
讯实业有限公司医疗设备厂) ;超临界流体萃取仪
(北京化工集团)。营养琼脂培养基(上海盛思生化
科技有限公司) ;沙保氏培养基(英国 Oxoid) ;二甲
基亚砜(DMSO，天津科密欧化学试剂有限公司) ;龙
血竭(西双版纳版纳药业有限责任公司) ;蜘蛛香
(贵 州 省 药 材 市 场)。金 黄 色 葡 萄 球 菌
(ATCC25112)、枯草芽孢杆菌(ATCC6051)、大肠埃
希菌(ATCC25922)、白色念珠菌(ATCC10231) (中
国药品生物制品检定研究院) ，活化培养 16 ～ 24 h
后，用比浊法测定并调菌液浓度为 1． 5 × 106 CFU·
mL －1。
1. 2 方法和结果
1. 2. 1 药物的配制 取龙血竭药材粉碎，过 100 目
筛，称取 5 g 粉末，置 50 mL 量瓶中，用 60% DMSO
30 mL溶解，再用无菌生理盐水稀释并定容，得 100
mg·mL －1龙血竭药液;取蜘蛛香药材，用超临界流体
萃取，取 5 g 萃取物，置 50 mL 量瓶中，用 60%
DMSO 30 mL溶解后，再用无菌生理盐水稀释并定
容，得 100 mg·mL －1蜘蛛香提取物药液;另用 60%
DMSO作为空白对照。
1. 2. 2 最低抑菌浓度(MIC)的测定［5］ 取龙血竭
药液，按照二倍稀释法分别用无菌生理盐水稀释成
100、50、25、12． 5、6． 25、3． 125、1． 5625、0． 7812、
0. 3906 mg·mL －1的龙血竭供试液，另设不含药的空
白对照。取 0． 5 mL上述药液，置 65 mm平皿中，加
营养琼脂培养基 4． 5 mL，轻摇混匀，放冷，接种配制
好的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌菌
液，标记，于 37 ℃恒温培养 24 h，观察记录，以无菌
生长的最高药物的稀释度作为 MIC。另取 0． 5 mL
上述药液，置 65 mm 平皿中，加沙保氏培养基 4． 5
mL，轻摇混匀，放冷，接种配制好的白色念珠菌，标
记，于 37 ℃恒温培养 24 h，观察并记录其 MIC。同
法测定蜘蛛香提取物对上述 4 种菌株的 MIC(表
1)。按照棋盘格法测定两种药物联用后的 MIC。分
别按照上述稀释法配制龙血竭和蜘蛛香提取物浓度
均为 12． 5、6． 25、3． 125、1． 5625、0． 7812、0． 3906 mg·
mL －1的药液，用于金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌
的抗菌试验，另分别配制龙血竭和蜘蛛香提取物浓
度均为 100、50、25、12． 5、6． 25、3． 125 mg·mL －1的药
液，用于大肠埃希菌和白色念珠菌的抗菌试验。分
别取不同浓度的龙血竭和蜘蛛香提取液药液各 0． 5
mL，加入 4 mL 培养基(金黄色葡萄球菌、枯草芽孢
杆菌和大肠埃希菌用营养琼脂培养基，白色念珠菌
用沙保氏培养基)中，摇匀，放冷，接种相应菌株，于
37 ℃恒温培养 24 h，观察并记录联合用药后的 MIC
(表 1)。
1. 2. 3 部分抑菌浓度(FIC)指数的计算与结果分
析［6］ 根据两种药物单用和联用时的 MIC，计算 FIC
指数(MICA药联用 / MICA药单用 + MICB药联用 / MICB药单用)。
当 FIC指数≤0． 75 时，表明两者具有协同作用;当
0. 75 ＜ FIC指数≤1 时，表示两者有累加作用;当 1 ＜
FIC指数≤2 时，表示两者无关;当 FIC 指数 ＞ 2 时，
表示两者拮抗。龙血竭和蜘蛛香提取物的 MIC 值及
两者联合用药后的 FIC指数见表1。单独使用龙血竭
和蜘蛛香提取物时，对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆
菌具有良好的抗菌活性，两者联合后呈现协同作用;
单独使用两者时，对白色念珠菌的抗菌活性均较差，
表 1 龙血竭和蜘蛛香提取物单用及联用后的 MIC 值及 FIC 指数
(n =3)
菌株
MIC /mg·mL －1
龙血竭
联用
龙血竭
单用
蜘蛛香
联用
蜘蛛香
单用
FIC指数
金黄色葡萄球菌 0． 1562 0． 3125 0． 1562 0． 625 0． 75
枯草芽孢杆菌 0． 0781 0． 3125 0． 0781 0． 3125 0． 5
大肠埃希菌 5 ＞ 10 1． 25 2． 5 ＜ 1
白色念珠菌 1． 25 10 2． 5 5 0． 625
但联合用药后呈现协同作用;龙血竭对大肠埃希菌
的抑菌效果较弱，在试验浓度下几乎无抗菌活性，但
与蜘蛛香提取物联用后，其抗菌作用明显增强，且可
提高蜘蛛香提取物的抗菌效果。
2 讨论
近年来，由于抗生素的滥用使很多细菌产生了
耐药性，因此，抗菌中药逐步成为研究热点。但单味
中药的抗菌作用较弱，且使用剂量也较大，应合理配
伍使用，以增强其抗菌效果。龙血竭与蜘蛛香联合
用药对 G +菌的抗菌效果较好且具有良好的协同作
用，对 G －菌和真菌的抗菌效果较差，但仍具有良好
的累加作用和协同作用。中药的成分及作用机制均
较复杂，真正具抗菌作用的有效成分的含量往往较
低。因此，要对其作用机制进行研究就必须对中药
的全组分进行分离及纯化。
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收稿日期:2015 － 04 － 29
011 华 西 药 学 杂 志 第 32 卷