全 文 ：杏香兔耳风提取物基本理化性质研究
徐 兰1， 何双凤2， 孙勇兵2， 张武岗2， 苏 丹2， 何 雁1， 罗晓健1，2*
(1. 江西中医学院，江西 南昌 330006;2. 中药固体制剂国家工程研究中心，江西 南昌 330006)
收稿日期:2011-11-01
基金项目:十一五“重大新药创制”科技重大专项 (2009ZX09103)
作者简介:徐 兰 (1987—) ，女，硕士研究生，研究方向:中药新剂型。Tel:15970674342，E-mail:xulan2005112056@ 126. com
* 通信作者:罗晓健，男，教授，硕士研究生导师，研究方向:中药新剂型。Tel: (0791)87119619，E-mail:luoxj98@ 126. com
摘要:目的 以绿原酸、3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸和 4，5-二咖啡酰基奎宁酸为指标，考察杏香
兔耳风提取物的表观溶解度、表观油水分配系数及在高温高湿强光照射条件下的稳定性。方法 采用 HPLC法及摇瓶
法分别测定 4 个指标成分的质量浓度和表观油水分配系数，重量法测定提取物的溶解度和表观油水分配系数。结果
37 ℃下，介质的 pH值越大，提取物和 4 个指标成分的表观溶解度越大，但表观油水分配系数越小。绿原酸的水溶性
最好，而 4，5-二咖啡酰基奎宁酸的脂溶性最好。高温高湿强光照射条件下，4 个指标成分均不稳定，由此可推测该提
取物对光湿热较敏感。结论 建立的方法可准确测定杏香兔耳风提取物及其指标成分的表观溶解度和表观油水分配系
数，为杏香兔耳风提取物的剂型设计以及其他药学研究提供理论依据。
关键词:杏香兔耳风提取物;绿原酸;3，4-二咖啡酰基奎宁酸;3，5-二咖啡酰基奎宁酸;4，5-二咖啡酰基奎宁酸;表观
溶解度;表观油水分配系数
中图分类号:R284． 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2012)06-1061-07
Basic physicochemical properties of Ainsliaea fragrans Champ． extract
XU Lan1， HE Shuang-feng2， SUN Yong-bing2， ZHANG Wu-gang2， SU Dan2， HE Yan1， LUO
Xiao-jian1，2*
(1． Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanchang 330006，China;2． National Pharmaceutical Engineering Center for Solid Preparation
in Chinese Herbal Medicine，Nanchang 330006，China)
KEY WORDS:Ainsliaea fragrans Champ extract;chlorogenic acid;3，4-dicaffeoylquinic acid;3，5-dicaf-
feoylquinic acid;4，5-dicaffeoylquinic acid;apparent solubility;apparent partition coefficient
杏香兔耳风提取物是通过一系列分离纯化工艺
得到的菊科植物杏香兔耳风 Ainsliaea fragrans
Champ． 的精制品，酚酸类化合物是其主要成分，
其中绿原酸 (Chlorogenic acid)、3，4-二咖啡酰基
奎宁酸 (3，4-dicaffeoylquinic acid)、3，5-二咖啡酰
基奎宁酸 (3，5-dicaffeoylquinic acid)和 4，5-二咖
啡酰基奎宁酸 (4，5-dicaffeoylquinic acid，结构如
图 1)等化合物含有量较高。杏香兔耳风提取物具
有较强的药理活性，有抑制出血、镇痛、活血等功
效，对苯酚所致的大鼠宫颈炎有较好疗效，其酚酸
类成分有抗菌、抗病毒、抗炎和抗氧化应激等
药效［1-5］。
中药提取物溶解性能的测定方法主要有沉淀
法、指标成分溶解量法、粒径测定法等。沉淀法为
常用的溶解量测定方法，能全面反应出中药提取物
在各溶剂中的溶解情况。指标成分溶解量法为定量
测定常用方法，该法主要通过测定中药提取物中指
标成分在不同溶剂中的溶解量，但无法全面客观反
应整个中药提取物的溶解量［6-9］。本实验以绿原酸
3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸和
4，5-二咖啡酰基奎宁酸为指标，同时测定了杏香兔
耳风提取物和指标成分的表观溶解度以及表观油水
分配系数，并对提取物进行了稳定性影响因素试
验，以期为杏香兔耳风提取物剂型的开发以及其他
药学研究提供参考。分子结构见图 1。
1 仪器与材料
1601
2012 年 6 月
第 34 卷 第 6 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
June 2012
Vol． 34 No． 6
图 1 指标成分的分子结构
Fig． 1 Chemical structures of caffeoylquinic acids
1. 绿原酸 2． 3，4-二咖啡酰基奎宁酸 3． 3，5-二咖啡酰基奎宁酸
4． 4，5-二咖啡酰基奎宁酸
1. chlorogenic acid 2． 3，4-dicaffeoylquinic acid 3． 3，5-dicaffeoylquinic acid
4． 4，5-dicaffeoylquinic acid．
LC—10AT 高效液相色谱仪，SPD—M10A vp
紫外检测器，LC—10AT vp 泵，CLASS—VP 色谱
工作站 (日本 Shimadzu) ;AL104—01 电子天平
(梅特勒-托利多仪器 (上海)有限公司) ;AUW—
220D型电子分析天平 (日本岛津公司) ;PB—10
型 pH 酸度计 (赛多利斯公司) ;KQ—250E 型超
声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司) ;TG16—
WS台式高速离心机 (长沙湘仪离心机仪器有限公
司) ;SHZ—82 气浴恒温振荡器 (常州国华电器有
限公司) ;LRH—250—S恒温恒湿培养箱 (广东医
疗器械厂) ;LS—2000A 低温恒温光照仪 (上海黄
海药检所) ;101—3—BS—Ⅱ电热恒温鼓风干燥箱
(上海跃进医疗器械厂)。
绿原酸对照品 (中国药品生物制品检定所，
批号 110753-200401) ;3，4-二咖啡酰基奎宁酸对照
品 (中药固体制剂国家工程研究中心，批号 1383-
101215) ;3，5-二咖啡酰基奎宁酸对照品 (中药固
体制剂国家工程研究中心，批号 1384-101215) ;
4，5-二咖啡酰基奎宁酸对照品 (中药固体制剂国家
工程研究中心，批号 1385-101215) ;杏香兔耳风
提取物 (自制，含绿原酸 10. 03%、3，4-二咖啡酰
基奎 宁 酸 7. 22%、 3，5-二 咖 啡 酰 基 奎 宁 酸
12. 46%、4，5-二咖啡酰基奎宁酸 8. 04%) ;甲醇、
乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，配制溶液所
用水均为双重蒸馏水。
2 方法与结果
2. 1 绿原酸、3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖
啡酰基奎宁酸和 4，5-二咖啡酰基奎宁酸的定量
测定
2. 1. 1 色谱条件 色谱柱为 Waters Symmetry C18
(250 mm × 4. 6 mm，5 μm，沃特世科技 (上海)
有限公司) ，C18保护柱;流动相为乙腈 (A)-
0. 2% 磷酸水 (B) ，0 min: (15 ∶ 85) ;10 min:
(18 ∶ 82) ;27 min: (30 ∶ 70) ，体积流量为 1 mL /
min;柱温 30 ℃;测定波长 328 nm;进样量
10 μL。
2. 1. 2 对照品贮备液的制备 分别精密称取绿原
酸对照品 8. 10 mg、3，4-二咖啡酰基奎宁酸对照品
8. 66 mg、3，5-二咖啡酰基奎宁酸对照品 7. 44 mg、
4，5-二咖啡酰基奎宁酸对照品 11. 91 mg 于 25 mL
量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得分
别含绿原酸质量浓度为 320. 8 μg /mL、3，4-二咖啡
酰基奎宁酸为 346. 4 μg /mL、3，5-二咖啡酰基奎宁
酸为 297. 2 μg /mL、4，5-二咖啡酰基奎宁酸为
476. 4 μg /mL的对照品贮备液。
2. 1. 3 专属性试验 取绿原酸、3，4-二咖啡酰基
奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸、4，5-二咖啡酰基
奎宁酸对照品混合溶液和杏香兔耳风提取物溶液，
依法测定，色谱图见图 2。绿原酸、3，4-二咖啡酰
基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸和 4，5-二咖啡酰
2601
2012 年 6 月
第 34 卷 第 6 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
June 2012
Vol． 34 No． 6
图 2 对照品混合溶液 (A)和杏香兔耳风提取物溶液 (B)的 HPLC色谱图
Fig． 2 HPLC chromatograms of standard compounds and Ainsliaea fragrans Champ． extract.
1. 绿原酸 2． 3，4-二咖啡酰基奎宁酸 3． 3，5-二咖啡酰基奎宁酸 4． 4，5-二咖啡酰基奎宁酸
1. chlorogenic acid 2. 3，4-dicaffeoylquinic acid 3. 3，5-dicaffeoylquinic acid 4. 4，5-dicaffeoylquinic acid
基奎宁酸的保留时间分别为 5. 7、20. 9、21. 8、
24. 2 min，各成分之间在此色谱条件下互不干扰测
定，提取物溶液主峰保留时间与对照品溶液一致。
2. 1. 4 线性关系的考察 取适量绿原酸对照品贮
备液于 10 mL量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，
配制成质量浓度分别为 81. 00、40. 50、27. 00、
13. 50、10. 13、8. 10 μg /mL 的系列溶液，过 0. 45
μm微孔滤膜，取续滤液，于上述色谱条件下进样
10 μL，以质量浓度 (C，μg /mL)对峰面积 (A)
进行线性回归，得绿原酸的回归方程为 A =
15. 042C + 13. 893，r = 0. 999 9，表明绿原酸在
8. 10 ～ 81. 00 μg /mL线性关系良好。参照上述方法
分别绘制 3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基
奎宁酸和 4，5-二咖啡酰基奎宁酸的回归方程，得
3，4-二咖啡酰基奎宁酸的回归方程为 A = 26. 690C
－ 158. 100，r = 0. 999 9，表明 3，4-二咖啡酰基奎
宁酸在 8. 66 ～ 86. 6 μg /mL 线性关系良好;得 3，5-
二咖啡酰基奎宁酸的回归方程为 A = 15. 568C +
1. 483，r = 0. 999 8，表明 3，5-二咖啡酰基奎宁酸
在 7. 43 ～ 74. 30 μg /mL 线性关系良好;得 4，5-二
咖啡酰基奎宁酸的回归方程为 A = 38. 037C －
303. 010，r = 0. 999 8，表明 4，5-二咖啡酰基奎宁
酸在 11. 91 ～ 119. 10 μg /mL线性关系良好。
2. 1. 5 精密度试验 精密吸取绿原酸质量浓度分
别为 320. 8、32. 1、6. 4 μg /mL 的对照品溶液 10
μL，按 2. 1. 1 项下色谱条件连续进样 6 次，记录
峰面积，计算 RSD。参照上述方法分别计算 3，4-
二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸和 4，5-
二咖啡酰基奎宁酸的 RSD。绿原酸高、中、低质
量浓度的 RSD 分别为 0. 19%、0. 30%、0. 46%，
3，4-二咖啡酰基奎宁酸高、中、低质量浓度的 RSD
分别为 0. 26%、0. 77%、0. 67%，3，5-二咖啡酰基
奎宁酸高、中、低质量浓度的 RSD分别为 0. 18%、
0. 39%、0. 86%，4，5-二咖啡酰基奎宁酸高、中、
低质量浓度的 RSD 分 别 为 0. 26%、0. 11%、
1. 52%，表明该方法的精密度良好。
2. 1. 6 加样回收率试验 精密量取已知 4 个成分
含量的杏香兔耳风提取物溶液 6 份，分别加入 4 种
对照品溶液适量，得到含 4 个指标成分的对照品溶
液，按 2. 1. 1 项下色谱条件进样 10 μL，进行
HPLC分析，将得到的药物峰面积代入相应的药物
标准回归方程，计算药物的质量浓度及回收率。绿
原酸、3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎
宁酸和 4，5-二咖啡酰基奎宁酸的加样回收率平均值
分别为 100. 63%、103. 79%、102. 13%、102. 04%，
RSD分别为 1. 94%、0. 51%、0. 54%和 1. 69%。
2. 2 杏香兔耳风提取物和指标成分在不同介质中
的表观溶解度实验 在 10 mL 离心筒中分别加入 9
mL 以下介质:水、0. 1 mol /L HCl 溶液、pH 3、
pH 4、pH 5、pH 5. 5 磷酸盐缓冲液和无水乙醇。
取过量杏香兔耳风提取物加入离心筒中，放置于
(37 ± 1)℃恒温培养振荡器中振摇 96 h，于 24 h、
48 h、72 h、96 h分别取适量上清液 1. 5 mL，0. 45
μm微孔滤膜滤过，精密移取续滤液 1 mL 置恒质
量坩埚内，干燥至恒质量，精密称质量，记为
m总。另外取续滤液按照下述色谱条件进样分析，
计算各个时间段杏香兔耳风 4 个指标成分的质量浓
度，超过线性范围的样品用原溶剂适当稀释后注入
3601
2012 年 6 月
第 34 卷 第 6 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
June 2012
Vol． 34 No． 6
HPLC。另精密移取 1 mL pH 3、pH 4、pH 5、pH
5. 5 空白磷酸盐缓冲液置恒质量坩埚内，干燥至恒
质量，精密称量，记为 m盐，则提取物的质量等于
m总 减 m盐。
杏香兔耳风提取物和 4 个指标成分在不同介质
中的表观溶解度见表 1，质量浓度与时间图见图 3。
如图所示，样品振摇 96 h 后，杏香兔耳风提取物
和 4 个指标成分的溶解度达到平衡，而且介质的
pH值越大，表观溶解度越大。在水相介质中，4
个指标成分的表观溶解度大小顺序为:绿原酸 ＞ 3，
5-二咖啡酰基奎宁酸 ＞ 3，4-二咖啡酰基奎宁酸 ＞ 4，
5-二咖啡酰基奎宁酸，表明绿原酸水溶性最好，而
在乙醇中 3，5-二咖啡酰基奎宁酸的表观溶解度最
大。提取物在乙醇中的表观溶解度为 8. 45 mg /mL，
按中国药典 2010 年版关于溶解度名词术语的定义，
杏香兔耳风提取物属于 “微溶”。
表 1 指标成分和杏香兔耳风提取物在不同介质中的表观溶解度 (x ± s，n =3)
Tab． 1 Apparent solubility of chlorogenic acid，3，5-dicaffeoylquinic acid and Ainsliaea fragrans Champ extract in different
solvents at 96 h (x ± s，n =3)
介质
表观溶解度 /(mg·mL －1)
绿原酸 3，4-二咖啡酰基奎宁酸 3，5-二咖啡酰基奎宁酸 4，5-二咖啡酰基奎宁酸 杏香兔耳风提取物
0. 1 mol /L HCl
pH 3
pH 4
pH 5
pH 5. 5
乙醇
0. 46 ± 0. 02
0. 50 ± 0. 02
0. 54 ± 0. 01
0. 68 ± 0. 03
0. 68 ± 0. 01
0. 81 ± 0. 02
0. 12 ± 0. 01
0. 19 ± 0. 01
0. 24 ± 0. 01
0. 36 ± 0. 03
0. 42 ± 0. 02
0. 71 ± 0. 11
0. 22 ± 0. 02
0. 29 ± 0. 01
0. 43 ± 0. 03
0. 53 ± 0. 09
0. 66 ± 0. 04
1. 08 ± 0. 12
0. 12 ± 0. 01
0. 14 ± 0. 01
0. 21 ± 0. 02
0. 34 ± 0. 05
0. 38 ± 0. 02
0. 56 ± 0. 05
4. 93 ± 0. 05
4. 47 ± 0. 01
4. 87 ± 0. 01
6. 98 ± 0. 01
7. 40 ± 0. 03
8. 45 ± 0. 08
图 3 绿原酸 (A)、3，4-二咖啡酰基奎宁酸 (B)、3，5-二咖啡酰基奎宁酸 (C)、4，5-二咖啡酰基奎宁酸 (D)和杏香兔
耳风提取物 (E)在不同介质中的表观溶解度
Fig． 3 Solubility curve of chlorogenic acid (A)，3，4-dicaffeoylquinic acid (B)，3，5-dicaffeoylquinic acid (C)，4，5-
dicaffeoylquinic acid (D)and Ainsliaea fragrans Champ (E)extract in different mediums
2. 3 杏香兔耳风提取物和指标成分在不同介质中 的表观油水分配系数实验 将蒸馏水与正辛醇混合
4601
2012 年 6 月
第 34 卷 第 6 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
June 2012
Vol． 34 No． 6
后室温搅拌 24 h，静置过夜，分层后得水饱和的正
辛醇和正辛醇饱和的水。取适量杏香兔耳风提取物
粉末溶解于被水饱和的正辛醇中，制成药物的正辛
醇溶液 (精密吸取 1 mL 药物的正辛醇溶液置恒质
量坩埚内，干燥至恒定质量，精密称定质量，记为
m总)。精密吸取上清液 4 mL 于 45 mL 离心筒中，
分别加入正辛醇饱和的水、0. 1 mol /L HCl 溶液
(pH 1. 34)、pH 3、pH 4、pH 5、pH 5. 5 磷酸盐缓
冲液各 30 mL，封口膜封口后，于 37 ℃恒温振荡
器中振摇 48 h，离心 (5 000 r /min，15 min)后取
下层水相，0. 45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液按照
下述色谱条件进样分析，计算杏香兔耳风 4 个指标
成分的质量浓度。吸取上层正辛醇液置恒质量坩埚
内，干燥至恒质量，精密称质量，记为 m正。
精密移取 1 mL药物的正辛醇溶液，氮气吹干，
加 10 mL甲醇，涡旋 5 min，离心 (5 000 r /min，10
min)后取上清液过微孔滤膜，取续滤液注入
HPLC，按外标法以峰面积计算杏香兔耳风 4 个指标
成分的质量浓度，即为各成分的初始质量浓度 ρ。
按下列方程式计算绿原酸、3，4-二咖啡酰基奎
宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸和 4，5-二咖啡酰基奎
宁酸的表观油水分配系数 (Papp) :
Papp = (ρυ － ρwυw) /ρwυw
ρ为绿原酸和 3，5-二咖啡酰基奎宁酸在正辛醇
中的初始质量浓度 (μg /mL) ;υ 为被水饱和的正
辛醇体积 (即 4 mL) ;ρw 为药物分配平衡时在水
相中测得的绿原酸和 3，5-二咖啡酰基奎宁酸的质
量浓度 (μg /mL) ;υw 为水相体积 (即 30 mL)。
按下列方程式计算杏香兔耳风提取物的表观油
水分配系数 (Papp)。
Papp = 4m总 / (4m总 －m正)
其中，m总 为 1 mL 药物的正辛醇溶液恒质后，
杏香兔耳风提取物的质量 (g) ;m正 为样品中正辛
醇层杏香兔耳风提取物的质量 (g)。
杏香兔耳风提取物和 4 个指标成分在正辛醇 －
不同介质中的 log P见表 2，图 4。如图 4 所示，37
℃下，水相介质的 pH值越大，提取物中 4 个指标
成分的 log P 值越小。绿原酸和提取物的 log P 值
在 pH大于 3 的介质中无显著性差异，而 3，4-二咖
啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸和 4，5-二咖
啡酰基奎宁酸的 log P 值随 pH 值增大而减小。各
指标成分的 log P 值大小顺序为:4，5-二咖啡酰基
奎宁酸 ＞ 3，5-二咖啡酰基奎宁酸 ＞ 3，4-二咖啡酰基
奎宁酸 ＞绿原酸 ＞提取物。
表 2 绿原酸、3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸、4，5-二咖啡酰基奎宁酸和杏香兔耳风提取物在正辛醇-不同
介质中的表观油水分配系数
(x ± s，n =3)
Tab． 2 Partition coefficient of chlorogenic acid，3，4-dicaffeoylquinic acid，3，5-dicaffeoylquinic acid，4，5-dicaffeoylquinic
acid and Ainsliaea fragrans Champ． extract in n-octanol-buffer with water and various pH system (x ± s，n =3)
介质
log P
绿原酸 3，4-二咖啡酰基奎宁酸 3，5-二咖啡酰基奎宁酸 4，5-二咖啡酰基奎宁酸 杏香兔耳风提取物
0. 1mol /L HCl
pH 3
pH 4
pH 5
pH 5. 5
水
1. 04 ± 0. 05
0. 44 ± 0. 02
0. 42 ± 0. 01
0. 40 ± 0. 02
0. 41 ± 0. 01
0. 71 ± 0. 03
2. 37 ± 0. 07
1. 13 ± 0. 03
0. 69 ± 0. 02
0. 46 ± 0. 03
0. 41 ± 0. 01
1. 12 ± 0. 05
3. 41 ± 0. 04
1. 64 ± 0. 01
0. 92 ± 0. 03
0. 55 ± 0. 03
0. 51 ± 0. 02
1. 30 ± 0. 07
3. 20 ± 0. 03
1. 93 ± 0. 05
1. 25 ± 0. 04
0. 68 ± 0. 02
0. 54 ± 0. 01
1. 36 ± 0. 06
0. 51 ± 0. 03
0. 34 ± 0. 01
0. 33 ± 0. 01
0. 33 ± 0. 01
0. 34 ± 0. 01
0. 38 ± 0. 01
2. 4 杏香兔耳风提取物稳定性影响因素试验 参
照 2010 年中国药典第二部附录ⅪⅩC 中关于原料
药稳定性试验指导原则对杏香兔耳风提取物进行影
响因素试验。
杏香兔耳风提取物中 4 个指标成分在高温、高
湿、强光照射环境中的含有量变化见表 3。样品在
高温条件下放置 10 d 后，绿原酸的含有量显著升
高，而其他 3 个成分的含有量则明显下降，说明该
提取物对温度较为敏感。杏香兔耳风提取物粉末在
相对湿度 90%和 75%的环境中，于第 5 天和第 10
天取样时，绿原酸的含有量先明显下降又显著上
升，3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁
酸和 4，5-二咖啡酰基奎宁酸的含有量均下降，4，5-
二咖啡酰基奎宁酸含有量下降幅度最大，且这种趋
势随着相对湿度的增加更加明显。另外试验发现在
相对湿度为 90%时提取物由棕色粉末状变成黑色
黏稠状，在相对湿度为 75%时变成黑色坚硬块状，
说明该提取物的稳定性受相对湿度影响明显。在强
光照射条件下，提取物的外观无明显变化，绿原
酸的含有量稍有增加，但其他3个成分的含有量下
5601
2012 年 6 月
第 34 卷 第 6 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
June 2012
Vol． 34 No． 6
图 4 绿原酸、3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖
啡酰基奎宁酸、4，5-二咖啡酰基奎宁酸和杏
香兔耳风提取物的 log P-pH图
Fig． 4 Log P-pH chart of chlorogenic acid，3，4-
dicaffeoylquinic acid，3，5-dicaffeoylquinic
acid、4，5-dicaffeoylquinic acid and Ainsli-
aea fragrans Champ． extract
降明显，说明该提取物对光敏感。
3 讨论
3. 1 本实验结合沉淀法和指标成分溶解量法，同
时测定了提取物和指标成分的溶解度，可减小误
差，操作方便快捷，能较好地反映提取物和指标成
分的溶解性能。在进行预实验时发现，杏香兔耳风
提取物中 4 个指标成分在 pH 6 及以上的偏碱性条
件下会发生降解，在酸性条件下较稳定，故本实验
选用 0. 1 mol /L HCl溶液、pH 3、pH 4、pH 5、pH
5. 5 的磷酸盐溶液作为水相介质。杏香兔耳风提取
物在水溶液中 72 h达到溶解平衡，在 96 h 质量浓
度无显著变化，因此在本试验中，提取物在 37
℃恒温振荡器中振摇96h达到溶解平衡后再进行测
表 3 绿原酸、3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸 和 4，5-二咖啡酰基奎宁酸在高温高湿强光照射条件下的含
有量变化 (x ± s，n =3)
Tab． 3 Variation of chlorogenic acid，3，4-dicaffeoylquinic acid，3，5-dicaffeoylquinic acid and 4，5-dicaffeoylquinic acid
content in high temperature high moisture and bright light conditions (x ± s，n =3)
条件
第 5 天降解残存百分率 /%
绿原酸 3，4-二咖啡酰基奎宁酸 3，5-二咖啡酰基奎宁酸 4，5-二咖啡酰基奎宁酸
40 ℃ 112. 20 ± 1. 13 80. 81 ± 1. 03 79. 22 ± 2. 01 88. 07 ± 0. 96
60 ℃ 110. 10 ± 1. 04 79. 83 ± 0. 92 83. 05 ± 0. 53 89. 17 ± 0. 74
相对湿度 75% 87. 83 ± 0. 49 90. 10 ± 0. 81 70. 63 ± 0. 59 82. 21 ± 0. 67
相对湿度 90% 81. 79 ± 0. 68 82. 40 ± 0. 88 64. 95 ± 0. 74 77. 68 ± 0. 43
强光 103. 06 ± 0. 66 72. 13 ± 0. 76 76. 99 ± 1. 23 82. 10 ± 0. 78
条件
第 10 天降解残存百分率 /%
绿原酸 3，4-二咖啡酰基奎宁酸 3，5-二咖啡酰基奎宁酸 4，5-二咖啡酰基奎宁酸
40 ℃ 110. 56 ± 0. 56 81. 42 ± 0. 58 75. 84 ± 0. 65 83. 76 ± 0. 79
60 ℃ 108. 34 ± 0. 49 79. 34 ± 0. 51 77. 15 ± 0. 88 84. 53 ± 0. 63
相对湿度 75% 99. 31 ± 0. 91 82. 64 ± 0. 45 73. 93 ± 0. 52 62. 65 ± 0. 59
相对湿度 90% 96. 02 ± 0. 78 72. 00 ± 0. 33 66. 41 ± 0. 42 55. 25 ± 0. 40
强光 102. 52 ± 0. 95 71. 15 ± 0. 59 73. 16 ± 0. 36 80. 88 ± 0. 67
定。按提取物在 72 h和 96 h 固体溶解的量折算成
各指标成分的理论质量浓度均大于溶液中的实际质
量浓度，并且各指标成分的质量浓度不再增加，说
明提取物和各指标成分均达到溶解平衡。
3. 2 Stefanie等发现具有低的 log D值 (正辛醇-缓
冲溶液分配系数)吸收较差，而当 log D 大于 1 时
化合物表现出满意的吸收，因此可预测 4 个指标成
分在水和较强酸性的环境中会有较好的吸收，而且
pH值越大，吸收较差，但提取物的 log D 值不受
缓冲液 pH 值的影响，且脂溶性比各指标成分差。
Camenisch等讨论了使用 log D 作为预测参数可能
会过高预测药物的膜渗透性，特别是相对分子质量
大于 500 (绿原酸的相对分子质量为 354，3，4-二
咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸和 3，5-二
咖啡酰基奎宁酸的相对分子质量均为 516)的化合
物［10］，有待于进一步实验研究。本试验同时测定
了杏香兔耳风提取物和 4 个指标成分的表观油水分
配系数，可为该提取物的吸收药动学、代谢研究以
及其他药学研究提供更全面的参考。
3. 3 从图 1 可以看出，绿原酸含一个酯键，而
3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸和
4，5-二咖啡酰基奎宁酸含两个酯键，3，4-二咖啡酰
基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸和 4，5-二咖啡酰
基奎宁酸可降解成绿原酸和其他咖啡酸，这可能是
在高温试验和高湿试验中，杏香兔耳风提取物中绿
原酸的含有量显著升高，其他 3 个成分的含有量明
显下降的主要原因。在强光照射条件下，杏香兔耳
风提取物中绿原酸的含有量稍有增加，但其他三个
成分的含有量下降明显。杏香兔耳风提取物中除含
有这 4 个指标成分外，还有较多其他未知成分，
6601
2012 年 6 月
第 34 卷 第 6 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
June 2012
Vol． 34 No． 6
3，4-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸和
4，5-二咖啡酰基奎宁酸又是同分异构体，稳定性有
差别，其原因有待于进一步研究。
参考文献:
［1］ 熊国裕． 杏香兔耳风总酚酸提取物及其制备方法:中国，
200810111902［P］． 2008-12-31．
［2］ 李祖晟，朱志安． 二咖啡酰奎宁酸药理实验研究进展［J］．
医学综述，2004，10(4) :249-250．
［3］ 易剑锋． 杏香兔耳风对宫颈炎大鼠宫颈黏膜 PEG2 及外周血
T淋巴细胞亚群表达的影响［J］． 中华中医药杂志(原中国
医药学报) ，2007，22(11) :806-808．
［4］ Wang Y F，Liu B． Preparative isolation and purification of dicaf-
feoylquinic acids from the Ainsliaea fragrans Champ by high-
speed counter-current chromatography［J］． Phytochem Anal，
2007，18(5) :436-440．
［5］ Wang W，Hao HP，Wang G J，et al． Simultaneous quantitation
of dicaffeoylquinic acids in rat plasma after an intravenous admin-
istration of mailuoning injection using liquid chromatography-mass
spectrometry［J］． J Chromatogr Sci，2009，47(3) :216-222．
［6］ 张霄潇，莫荣喜，管咏梅，等． 中药提取物溶解性能的几种
考察方法比较［J］． 时珍国医国药，2007，18 (12) :
2996-2997．
［7］ 丁克敏，刘 力，程雪梅，等． 骆驼蓬总生物碱提取物溶解
性能表征方法的探讨［J］． 中国中药杂志，2010，35(17) :
2250-2252．
［8］ 管咏梅，张霄潇，朱卫丰，等． 雷公藤提取物溶解性能的研
究［J］． 中成药，2008，30(4) :501-504．
［9］ 廖正根，梁新丽，平其能，等． 桂枝茯苓双层缓释片处方设
计和优化研究［J］． 中草药，2009，40(4) :40:554．
［10］ Dressman J B，Lennernas H． Oral drug absorption:prediction
and assessment［M］． Marcel Dekker，Inc． 2000:51-72．
7601
2012 年 6 月
第 34 卷 第 6 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
June 2012
Vol． 34 No． 6