全 文 ：农业环境科学学报 2008,27(3):1066-1071
JournalofAgro-EnvironmentScience
摘 要:为了解 Zn对长柔毛委陵菜耐受 Cd的影响,通过营养液培养并采用差速离心技术和化学试剂逐步提取法研究了 Zn对长
柔毛委陵菜(Potentillagriffithiivar.velutina)体内Cd的亚细胞分布和化学形态的影响。结果表明,长柔毛委陵菜体内72%～95%的Cd
分布在细胞壁和可溶组分中,这表明 Cd主要分布在长柔毛委陵菜体内的细胞壁和可溶组分中,而在叶绿体、细胞核和线粒体中分
布较少。同时,随Cd或Zn处理浓度的增加,细胞壁对Cd的固持作用增强。长柔毛委陵菜体内的Cd以不同化学形态存在:对照中
73%～93%的 Cd以水提取态和乙醇提取态存在,在其他处理中主要以氯化钠提取态、水提取态和乙醇提取态为主,三者占总量的
86%～96%;其中在Zn/Cd复合处理中氯化钠提取态是含量最高的形态,所占比例为42%～78%;而醋酸提取态、盐酸提取态和残留态
的含量在所有处理中分布都较低,只占总量的3%～14%。另外,随Cd或Zn处理浓度的增加,活性较强的水提取态和乙醇提取态的
分配比例总和减少,而氯化钠提取态所占比例却增加,这表明Cd向活性较弱的化学形态转移。因此,细胞壁固持、可溶组分的液泡
区隔化和向活性较弱的结合形态转移可能是长柔毛委陵菜耐 Cd的主要机制。
关键词:长柔毛委陵菜;亚细胞分布;化学形态;镉
中图分类号:X503.233文献标识码:A 文章编号:1672-2043(2008)03-1066-06
收稿日期:2007-08-09
基金项目:国家自然科学基金项目(40571144);广东自然科学基金重点项目(05101824);广东省自然科学基金团队项目(06202438);教育部“新世纪优
秀人才支持计划”项目(NCET-04-0790);985二期“环境与污染控制技术创新平台”
作者简介:周小勇(1976—),男,博士生,主要研究方向为重金属污染修复工程。E-mail:dhszxy@hotmail.com
通讯作者:仇荣亮 E-mail:eesqrl@mail.sysu.edu.cn
锌对长柔毛委陵菜体内镉的亚细胞分布和
化学形态的影响
周小勇 1,仇荣亮 1,2,应蓉蓉 1,邹晓锦 1,胡鹏杰 1,李清飞 1,于方明 1,赵 璇 1
(1.中山大学环境科学与工程学院,广东 广州 510275;2.广东省环境污染控制与修复技术重点实验室,广东 广州 510275)
EffectsofZnonSubcellular DistributionandChemicalFormsofCdinPotentilla griffithiivar.velutina
ZHOUXiao-yong1,QIURong-liang1,2,YINGRong-rong1,ZOUXiao-jin1,HUPe g-jie1,LIQing-fei1,YUFang-ming1,ZHAOXuan1
(1. School ofEnvironmental Science and Engineering, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510275, China; 2. GuangdongProvincial Key
LaboratoryforEnvironmentalPollutionControlandRemediationTechnology,Guangzhou510275,China)
Abstract:Usingthedifferentialcentrifugationtechniqueandsequentialchemicalextractionmethods,effectsofZnonsubcellulardistribution
andchemicalformsofCdundernutrientsolutionculturewerestudiedtounderstandtheinfluenceofZnonCdtoleranceinZnhyperaccumu-
latorPotentillagriffithiivar.velutina.Theresultsshowedthat72%～95%oftotalCdw reboundtocellwallandsolublefractionintheplant,
andonlyasmallquantityofCddistributedinchloroplast, karyonandmitochondrion, whichsuggestedthatcellwallandsolublefractionin
theplantweremajorstoragesitesforCd. Moreover, cellwallbindingCdfractionincreasedwiththeincreasingofCdorZnconcentrationsin
thenutrientsolution.AstoCdchemicalforms,73%～93%oftotalCdexistedaswater- andethanol-extractableformsintheplantsunderthe
control,and86%～96%oftotalCdexistedasNaCl-,water- andethanol-extractableCdformsinothertreatments.WhereasNaCl-extractable
form, accountingfor42%～78%oftotalCd, wasdominantin Zn/Cd compound treatments. The percentage ofNaCl-extractable Cd formin-
creasedbutthoseofethanol- andwater-extractableCdformsdecreasedwiththeincreasingofCdorZnconcentration, whichindicatedthat
Cd or Zn addition facilitated the transferringofCd fromrelativelyhigher active chemical forms toless active ones. The results mentioned
aboveindicatethatcellwallbinding,vacuolarcompartmentalizationinthesolublefractionandtransferringtoloweractivechemicalformsare
maintolerancemechanismsforCdinPotentillagriffithiivar.velutina.
Keywords:Potentillagriffithiivar.velutina;subcellulardistribution;chemicalform;cadmium
第27卷第3期 农 业 环 境 科 学 学 报
植物耐受重金属可以通过选择性吸收、金属排
泄、根部滞留、细胞壁固定、植物络合素络合和酶系统
的特殊耐性等不同策略来实现[1、2]。超富集植物富集重
金属的特殊能力与其在细胞和亚细胞水平上对有毒
金属的区隔化密切相关[3],因此亚细胞分布可为植物
对重金属的解毒和生物富集机制提供必要信息[4]。目
前,人们就植物对重金属Cd的亚细胞分布进行较多
研究,其研究表明 Cd主要富集在植物细胞的液泡
中[5、6]或细胞壁中[7、8]或两者兼而有之[6、9~11]。同时植物体
内重金属结合形态的研究对揭示植物对重金属的毒
理和耐性也有重要意义[12、13]。以往的研究多集中在单
金属的耐性方面[3、5、8、10],而重金属之间对彼此的亚细
胞和化学形态影响的研究却鲜见报道。
长柔毛委陵菜(Potentilla griffithii var. velutina)是
新发现的Zn超富集植物[14];同时它对Cd也具有较强
的吸收和富集能力,其叶片、叶柄和根在水培时分别
富集Cd达到1604、6145和7671mg·k-1。而Cd不
是植物所需元素,即使在相对低浓度下也会对植物产
生严重的危害[9],这预示着长柔毛委陵菜体内存在一
些Cd的解毒机制。前期曾对长柔毛委陵菜耐 Zn机
理作过报道[15],但至今未对其富集 Cd的耐性机理进
行研究。同时,Zn与Cd属于周期表中同族元素,化学
性质相似,Zn对超富集植物体内Cd的亚细胞分布和
化学形态是否有影响,目前研究甚少。本研究采用差
速离心技术和化学试剂逐步提取法研究长柔毛委陵
菜体内 Cd的分布和结合形态以及 Zn对其影响,以
揭示长柔毛委陵菜耐Cd机理。
1 材料与方法
1.1植物培养
供试植物为Zn超富集植物长柔毛委陵菜。用采
自云南铅锌矿区的种子在营养土中萌发,生长100d
后,选择长势良好和生长一致的植株,用自来水洗净
后移至Hogland全营养液培养 (其中 ZnSO4·7H2O换
成同浓度的 Zn(NO3)2·6H2O),在温室预培养 4d后进
行Cd和Zn处理。单Cd设置3个处理(mg·L-1):0(对
照)、5和 20;Zn/Cd设置 4个处理 (mg·L-1):10 Zn+5
Cd、10 Zn+20 Cd、100 Zn+5 Cd和 100 Zn+20 Cd;Cd
和Zn分别以 CdCl2·2.5H2O和 Zn(NO3)2·6H2O的形式
加入营养液中。每个处理3个重复,每个重复3株苗,
连续通气,每4d更换1次营养液;每天用0.1mol·L-1
HCl或NaOH调节pH至5.6左右,21d后收获。植株
根系先用自来水冲洗,再用 20mmol·L-1Na2-EDTA
交换 20min,去除根系表面吸附的 Cd2+和 Zn2+,最后
用去离子水洗净,吸干表面水分,保存于-20℃冰箱
内备用。每个处理的植物样品先分成叶片、叶柄和根
3个部位,每个处理的植物样品分成3部分,分别用于
测定亚细胞分布、化学形态和重金属全量。
1.2植物亚细胞组分的分离
采用差速离心法分离不同的细胞组分。在Weigel
等[5]、Gabbrielli等[16]和吴箐等[15]的方法基础上加以改
进:准确称取鲜样 0.5000g,加入 20mL提取液[0.25
mol·L-1蔗糖+50mmol·L-1Tris-HCl缓冲液 (pH7.5)+1
mmol·L-1二硫赤鲜糖醇],研磨匀浆,匀浆液在冷冻离
心机300×g下离心30s,沉淀为细胞壁组分(F1);上清
液在2000×g下离心15min,沉淀为细胞核和叶绿体
组分(F2);上清液在 10000×g下离心 20min,沉淀为
线粒体组分(F3);上清液为含核糖体的可溶组分(F4)。
全部操作在4℃下进行。
1.3植物体内的化学形态分析
采用化学试剂逐步提取法[12],具体操作如下:准
确称取鲜样0.5000g,加入20mL提取剂研磨匀浆后
转入 50 mL的塑料离心管,在 25℃恒温振荡 22 h
后,5000r·min-1离心 10min。倒出上清夜,再加入
10mL的提取剂,25℃恒温振荡 1h,5000r·min-1离
心10min,倒出上清液。合并两次上清液。采用下列5
种提取剂依次逐步提取:80%乙醇(FE),去离子水(FW),
1 mol·L-1NaCl溶液(FNaCl), 2% HAc (FHA), 0.6 mol·L-1
HCl(FHCl),最后为残留态(FR)。
1.4重金属含量的测定
以提取剂作为空白,上清液直接用HITACHI公
司生产的原子吸收分光光度计(Z-5000)测定Zn和Cd
含量;沉淀和残渣部分用去离子水多次冲洗转入l00
mL三角瓶中,于电热板上蒸干,与测定植物重金属全
量一样采用 HNO3-HClO4法,消煮至澄清,用去离子
水定容后测定。采用SPSS11.5软件对数据进行方差
分析,用 Dunan新复极差法(SSR)在显著水平 0.05时
作多重比较分析。
2 结果与分析
2.1 Cd在长柔毛委陵菜中的亚细胞分布
在长柔毛委陵菜各部位的亚细胞组分分离过程
中,Cd的回收率达 89%～102%(表 1),说明差速离心
法能较好地用于Cd的亚细胞水平分布研究。
从表 1可知,在叶片的亚细胞分布中,单 Cd处
理的Cd主要分布在可溶组分F4中,占总量的56%～
1067
2008年5月
注:F1-细胞壁组分,F2-细胞核和叶绿体组分,F3-线粒体组分,F4-可溶组分,表中Cd含量为植株鲜重含量;表中数据为平均值±标准差(n=3),
同一行的各组分的Cd含量中不同字母表示有显著差异(P<0.05)。
Note:F1-cellwallfraction;F2-nucleusandchlorophyllfraction;F3-motochondrionfraction;F4-solublefraction.ThecontentofCdinthetableisbased
onfreshweightofplant,valuesaremeans±SD(n=3),differentlettersinthesamerowdenotesignificantdifference(P<0.05).
73%,其次为含细胞壁的 F1组分,占总量的 21%～
35%;在 Zn/Cd复合处理中,Zn的添加使叶片中 Cd
在F1组分的分配比例升至55%～65%,而F4组分降
至19%～36%。在叶柄和根的亚细胞分布中,单Cd处
理的叶柄和根的Cd主要分布在F1和F4组分中,两
者含量占总量的72%～93%;而在Zn/Cd复合处理中,
Zn的添加使叶柄和根中的 Cd主要分布在 F1组分
中,其分配比例分别达到50%～61%和45%～49%,其
次为F4组分,其分配比例分别为 22%～30%和 36%～
43%,两个组分的含量占总量的76%～90%。上述结果
表明长柔毛委陵菜各部位的 Cd主要富集在细胞壁
和以液泡为主的可溶组分,其他两个组分的分布较
少。同时,在Zn/Cd复合处理中,根中 Cd在 F1组分
的分配比例比叶片和叶柄低3%～18%,而使F4组分
所占比例则比叶片和叶柄高7%～17%,这说明根中更
多的Cd富集在可溶组分。
从表1还可知,在单Cd处理中,Cd在植物各部
位的F1组分的分配比例随Cd处理浓度的增加而增
加,而在F4组分的分配比例则减少。在Zn/Cd复合处
理中,Zn的添加使低Cd处理(5mg·L-1)的植物各部位
和高Cd处理(20mg·L-1)的叶片中的F1和F4组分的
分配比例出现与单 Cd处理相同的变化趋势;但 Zn
的添加使高 Cd处理的叶柄和根的 F1和 F4组分的
分配比例都增加。这表明随Cd或Zn处理浓度的增
加,细胞壁对Cd的滞留作用在增强。
2.2 Cd在长柔毛委陵菜中的化学形态分布
在提取 Cd的化学形态过程中,Cd的回收率为
80%～99%(表2),说明化学试剂逐步提取法能较好地
用于Zn化学形态分布的研究。
由表 2可知,在叶片中,单 Cd处理的植物叶片
中的Cd都以水提取态的含量最高,占总量的44%～
59%,对照中乙醇提取态居其次;而在低 Cd和高 Cd
处理中,氯化钠提取态升至第二位。在Zn/Cd复合处
理中,Zn的添加使Cd的氯化钠提取态的分配比例增
加10%～37%,而Cd的水提取态所占比例下降 18%～
42%,即氯化钠提取态取代水提取态成为分配比例最
表1 Cd在长柔毛委陵菜叶片、叶柄和根中的亚细胞分布
Table1 SubcellulardistributionofCdinleaves,leafstalksandrootsofPotentillagriffithiivar.velutina
周小勇等:锌对长柔毛委陵菜体内镉的亚细胞分布和化学形态的影响1068
第27卷第3期 农 业 环 境 科 学 学 报
表2 Cd在长柔毛委陵菜叶片、叶柄和根中的化学形态分布
Table2 Cddistributionofchemicalformsinleaves,leafstalksandrootsofPotentillagriffithiivar.velutina
注:FE-乙醇提取态,FW-水提取态,FNaCl-氯化钠提取态,FHAc-醋酸提取态,FHCl-盐酸提取态,FR-残留态;表中Cd含量为植株鲜重含量;表中数据
为平均值±标准差(n=3),同一行中不同的字母表示有显著差异(P<0.05)。
Note:FE-ethanol-extractableform; FW-wa erextractableform; FNaCl-N C ext actableform; FHAc-HAcext actableform; FHCl-HClextractableform; FR-
residualform. ThecontentofCdinthetableisbasedonfreshweightofplant, valuesaremeans±SD(n=3), di f rentlet ersinthes merowd note ignificant
difference(P<0.05).
高的形态(42%~57%),它们与乙醇提取态一起成为优
势形态,三者占总量的91%～94%。在叶柄和根中,对
照中的Cd都以乙醇提取态的含量最高,分别占总量
的47%和55%,其次为水提取态,两种形态的含量占
总量的84%和73%;低Cd和高Cd处理使Cd的氯化
钠提取态所占比例较对照增加25%～58%,即占总量
的39%～64%,取代乙醇提取态成为含量最高的形态;
在Zn/Cd复合处理中,叶柄和根中的Cd以氯化钠提
取态的含量最高,占总量的51%～78%,乙醇提取态和
水提取态居其次,三者所占比例达86%～96%。在所有
处理中,Cd的醋酸提取态、盐酸提取态和残留态所占
比例都较低,三者只占总量的3%～14%。
同时,在单Cd处理中,长柔毛委陵菜的叶片、叶
柄和根中的水提取态和乙醇提取态的分配比例总和
随 Cd处理浓度的增加而显著减少,分别由对照的
93%、84%、73%下降到低Cd处理的75%、54%、58%,
直至高Cd处理的56%、29%、26%,而各部位的氯化
钠提取态的分配比例则随 Cd处理浓度的增加而大
幅增加;与此类似,在Zn/Cd复合处理中,植物各部位
Cd的水提取态和乙醇提取态的分配比例总和基本上
也随Zn处理浓度的增加而减少。上述结果说明,随
Cd或 Zn处理浓度的增加,Cd在植物各部位中活性
较强的结合形态所占比例在减少,更多的 Cd结合成
活性较弱的形态。
3 讨论
细胞壁固持和液泡区隔化可能在植物对重金属
的解毒、耐性和超富集方面起着主要作用[9、17]。超富集
植物 Thlaspi caerulescens和 Arabidopsis halleri中的
Cd主要富集在根部表皮的细胞壁和叶肉细胞的液泡
中[9、18];超富集植物东南景天(Sedumalfredii)中的 Cd
也主要分布在细胞壁,其次在可溶部分中[10]。非超富
集植物大麦地上部、根部和玉米叶片中的 Cd主要分
布于细胞壁和可溶部分[6、11]。本结果与上述研究结果
1069
2008年5月
类似,长柔毛委陵菜叶片、叶柄和根中72%～95%的
Cd分布在细胞壁和可溶部分中,即Cd在细胞核、叶
绿体和线粒体等细胞器中只分布5%～28%,这表明细
胞壁和可溶组分中的液泡是长柔毛委陵菜的储存Cd
的两个最重要位点。同时,除Zn的添加使高Cd处理
的叶柄和根中的 Cd在细胞壁和可溶组分的分配比
例都增加外;其他处理中,植物叶片、叶柄和根中的
Cd在细胞壁的分配比例都随Cd或Zn处理浓度的增
加而增加,而Cd在可溶组分的所占比例却减少。这
些结果说明随Cd和Zn/Cd复合胁迫的增加,长柔毛
委陵菜各部位的细胞壁对Cd的滞留作用在增强,以
阻止更多的Cd进入细胞内部,从而导致可溶组分中
Cd的含量减少。细胞壁被认为是保护原生质体免受
重金属毒害的第一道屏障,尤其在重金属低浓度和短
时间的处理时[18]。因为细胞壁的果胶酸、多糖和蛋白
质等成分为结合重金属提供了大量的离子交换点,可
将重金属固定而使其失去活性[18、19];并且通过细胞壁
延迟Cd经过膜进入细胞内,以激活细胞内对Cd的
解毒机制[20]。即当细胞壁的结合位点达到饱和时,进
入细胞内的大部分重金属被转运到液泡中,与其中的
柠檬酸、苹果酸和草酸等有机酸络合而达到区隔化作
用[21]。这就是高Cd处理时Zn的添加使叶柄和根中的
Cd在细胞壁和以液泡为主的可溶组分的分配比例增
加的原因。其他研究也得出相似结果,如农作物豆、豌
豆和玉米细胞壁中Cd的分配比例随Cd处理浓度增
加而增加[6、7、22];Zn的添加能显著降低Cd处理的大麦
地上部可溶部分的Cd含量,而增加根部细胞壁的含
量[11]。因此,Cd在细胞壁固持和可溶组分的液泡区隔
化可能是长柔毛委陵菜耐Cd的机制之一。
采用乙醇、去离子水、氯化钠、醋酸和盐酸等不同
提取剂,顺序性提取重金属离子在植物组织中的结合
形态,随着上述提取剂极性的增强,所提取出的重金
属在植物体内的活性、毒性和迁移能力不断降低[12、 3]。
不同提取剂提取不同形态的化合物[24]:去离子水主要
提取重金属与水溶性物质结合的形态如水溶性有机
酸盐和一代磷酸盐等;80%乙醇提取以硝酸盐、氯化
物为主的无机盐和氨基酸盐等;1 mol·L-1NaCl溶液
提取果胶酸盐和与蛋白质结合态或呈吸附态的重金
属等;2% HAc提取难溶于水的重金属磷酸盐;0.6
mol·L-1HCl提取草酸盐等。有研究表明小麦和水稻
的叶、根中的Cd都以氯化钠提取态为主[12];大麦根部
的Cd主要以醋酸提取态和盐酸提取态占优势,而地
上部以氯化钠提取态和醋酸提取态为主要形态[11];水
生植物黑藻(Hydrillaverticillat)和青菜中的Cd也主要
以氯化钠提取态和醋酸提取态存在[23、25]。从上面的结
果可知,非超富集植物中的Cd主要以活性较低的氯
化钠提取态、醋酸提取态或盐酸提取态为主导形态,
而活性较强的乙醇提取态和水提取态含量都很低。这
与本研究的结果有所不同:虽然长柔毛委陵菜各部位
中大多以氯化钠提取态为首要形态,但是活性较强的
乙醇提取态和水提取态所占比例也较高,而醋酸提取
态、盐酸提取态和残留态的分配比例都较低。这说明
Cd的化学形态分布与植物种类有关,也表明长柔毛
委陵菜对Cd有较强的耐性。同时,对照中植物各部
位的Cd都以水提取态和乙醇提取态占优势,这可能
与植物体内Cd的绝对含量很低有关,即低含量的Cd
对植物不会造成毒害。而低Cd和高Cd处理中,植物
叶片中的Cd主要以水提取态占优势,并且乙醇提取
态所占比例较高,这可能与叶片中的 Cd主要分布在
可溶组分有关。超富集植物T.caerulescens叶肉中的
Cd是和水通过蒸腾作用从维管迁移到叶片表皮和气
孔中[18]。这说明单Cd处理的长柔毛委陵菜叶片中的
Cd可能主要以活性和迁移能力较强的有机酸盐的形
态迁移到叶片,并储存于液泡中。此外,植物各部位中
的水提取态和乙醇提取态的分配比例总和基本上随
Cd或Zn处理浓度的增加而减少,而氯化钠提取态所
占比例则增加。这是因为Cd对蛋白质或其他有机化
合物中的SH和蛋白质的侧链有很强的亲合力 [26],所
以导致更多的 Cd2+与果胶酸和蛋白质等配位基团络
合,滞留在植物的细胞壁中,这可能是随Cd或 Zn处
理浓度的增加导致细胞壁固持作用增强的原因,以此
降低细胞内活性较强的结合形态的含量,减轻 Cd对
植物的毒害[27、28]。这也可能是长柔毛委陵菜耐 Cd的
另一机制。
4 结论
(1)长柔毛委陵菜体内的 Cd主要分布在细胞壁
和可溶组分中,而在细胞核、叶绿体和线粒体中分布
较少;细胞壁对Cd的滞留作用随Cd或Zn处理浓度
的增加而增强。
(2)长柔毛委陵菜体内的 Cd以不同的化学形态
存在:植物各部位的Cd在对照中以水提取态和乙醇
提取态占优势;在其他处理中以氯化钠提取态、水提
取态和乙醇提取态为主;其中在Zn/Cd复合处理中,
氯化钠提取态所占比例最高,而醋酸提取态、盐酸提
取态和残留态的分配比例在所有处理中都较低。同
周小勇等:锌对长柔毛委陵菜体内镉的亚细胞分布和化学形态的影响1070
第27卷第3期 农 业 环 境 科 学 学 报
时,随Cd或Zn处理浓度的增加,水提取态和乙醇提
取态的分配比例总和在减少,而氯化钠提取态所占比
例却增加,导致Cd向活性较弱的结合形态转移。
参考文献:
[1]BarcelóJ, Poschenrieder C. Respuestas de las plantas a la contami-
naciónpormetalespesados[J].SueloPlanta,1992,2:345-361.
[2]SanitádiToppiL,GabbrielliR.Responsetocadmiuminhigherplants[J].
EnvironmentalandExperimentalBotany,1999,41:105-130.
[3]KüpperH,ZhaoFJ, McGrathSP. Cellularcompartmentationofzincin
leavesofthehyperaccumulatorThlaspicaerulescens[J].PlantPhysiolo-
gy,1999,119:305-311.
[4]LiuDH, KottkeI. Subcellularlocalizationofcopperintherootcellsof
Alliumsativumbyelectronenergylossspectroscopy(EELS) [J]. Biore-
sourceTechnology,2004,94:153-158.
[5] Weigel H J, J&ger H J. Subcellular distribution and chemical form of
cadmiuminbean[J].PlantPhysiology,1980,65:480-482.
[6]LozanoE, HernándezLE, BonayP, et al. Distribution ofcadmiumin
shoot and root tissues of maize and pea plants: physiological distur-
bances[J].JournalofExperimentalBotany,1997,48:123-128.
[7]LindseyPA, LinebergerRD. Toxicity, cadmiumaccumulation and ul-
trastructural alterations induced byexposure of Phaseolus seedlings to
cadmium[J].HorticulturalScience,1981,16:434.
[8]RamosI,EstebanE,LucenaJJ, etal. Cadmiumuptakeandsubcellular
distribution in plants ofLactuca sp. Cd-Mn interaction [J]. Plant Sci-
ence,2002,162:761-767.
[9]KüpperH, LombiE, ZhaoFJ, etal. Cellularcompartmentationofcad-
mium and zinc in relation to other elements in the hyperaccumulator
Arabidopsishalleri[J].Planta,2000,212:75-84.
[10] Ni CY, Chen YX, Lin Q, et al. Subcellular localization ofcopper in
tolerantandnon-tolerantplant[J]. JournalofEnvironmentalSciences,
2005,17(3):452-456.
[11]WuFB,DongJ,QianQQ,etal.Subcellulardistributionandchemical
formof Cd and Cd-Zn interaction in different barley genotypes [J].
Chemosphere,2005,60:1437-1446.
[12]许嘉琳,鲍子平,杨居荣,等.农作物体内铅、镉、铜的化学形态研
究[J].应用生态学报,1991,2(3):244-248.
XUJL, BAOZP, YANGJR, etal. ChemicalformsofPb, CdandCu
incrops[J].ChineseJournalofAppliedEcology,1991,2(3):244-248.
[13]杨居荣,鲍子平,张素芹.镉、铅在植物体细胞内的分布和可溶性
结合形态[J].中国环境科学,1993,1 (4):263-268.
YANGJR,BAOZP,ZHANGSQ.ThedistributionandbindingofCd
and Pb in plant cell[J]. China Environmental Science, 1993, 13(4):
263-268.
[14]QiuRL, FangXH, TangYT, etal. Zinchyperaccumulationandup-
takebyPotentillagriffithiihook[J].InternationalJournalofPhytoreme-
diation,2006,8(4):299-310.
[15]吴 箐,杜锁军,曾晓雯,等.锌在长柔毛委陵菜细胞内的分布和化
学形态研究[J].生态环境,2006,15(1):40-44.
WUQ, DUSJ, ZENGXW, etal. Subcellulardistribution and chemi-
cal form of Potentilla griffithii hook[J]. Ecology and Environment,
2006,15(1):40-44.
[16] Gabbrielli R, Panddfini T, VergnanoO, et al. Comparison oftwoser-
pentine species with different nickel tolerance strategies[J]. Plant and
Soil,1990,22:271-277.
[17] CosioC, Martinoia E, Keller C. Hyperaccumulation ofCadmiumand
ZincinThlaspicaerulescensandArabidopsishalleriattheleafcellular
level[J].Pla tPhysiology,2004,134:716-725.
[18] Wójcik M, Vangronsveld J, D′Haen J, et al. Cadmium tolerance in
Thlaspi caerul scensⅡ. Local zation f admium in Thlaspi caerul-
e c ns [J]. Environmental and Experimental Botany, 2005, 53: 163-
171.
[19]AllenDL,JarrellWM.Protonandcopperabsorptiontomaizeandsoy-
beanrootcellwalls[J].PlantPhysiology,1989,89:823-832.
[20]NedelkoskaTV, DoranPM. Hyperaccumulationofcadmiumbyhairy
roots of Thlasp caerulescens[J]. Biotechnology and Bioengineering,
2000,67:607-615.
[21]Kr&me U. Cadmiumforallmeals-plantswithanunusualappetite[J].
NewPhytologist,2000,145:1-3.
[22]KhanDH, DuckettJG, FranklandB, etal. AnX-raymicroanalytical
stu yofthedistributionofcadmiuminrootsofZeamaysL [J]. Plant
Physiology,1984,115:19-28.
[23]王学锋,杨艳琴.重金属镉锌铜在蔬菜体内的形态分布研究[J].环
境科学与技术,2005,28(1):34-35.
WANGXF,YANGYQ.Chemicalformanddistributionofsomeheavy
metalsinvegetables[J].EnvironmentalScienceandTechnology,2005,
28(1):34-35,60.
[24]周建民,党 志,陈能场,等.NTA对玉米体内 Cu、Zn的积累及化
学形态的影响[J].农业环境科学学报,2007,26(2):453-457.
ZHOUJN,DANGZ,CHENNC,etal.InfluenceofNTAonaccumula-
tionandchemicalformofcopperandzincinmaize[J].JournalofAgro-
EnvironmentScience,2007,26(2):453-457.
[25]徐勤松,施国新,周耀明,等.镉在黑藻叶细胞中的亚显微定位分
布及毒害效应分析[J].实验生物学报,2004,37(6):461-468.
XUQS,SHIGX,ZHOUYM,etal.Distributionandtoxicityofcadmi-
uminHydrillaverticillata(L.F.)royle[J].ActaBiologiaeExperimental-
isSiniea,2004,37(6):461-468.
[26]BraudeGL. Cadmiumandleadcontentofsoybeanproducts[J]. Jour-
nal fFoodScie ce,1980,45:1187.
[27]RauserWE.Phytochelatinsandrelatedpeptides[J]. PlantPhysiology,
1995,109:1141-1149.
[28] Schm(ger ME V, Oven M, Grill E. Detoxification ofarsenic byphy-
tochelatinsi plants[J].Plan Physiology,2000,122:793-801.
1071