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珍珠梅提取物对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的保护作用



全 文 :RO丑o x 23 4 B 5e i ji ng 1 03 0 02, C h l n a
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8 53 8 1893
Em ial : w叼 d@ p l l bl记bat n et cn w w w
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W O r ld ( ! h i n J D i g e sot l
,
20 02 Ju ly ; 10 (7 )
: 78 3

786
世界华人消化杂志 IS s N 100 9 一 30 79 C N 14 一 126 0瓜
20 0 2 年版权归世界胃肠病学杂志社
· 老东石出毛开乡匕 B A S IC R E S EA R C H 。
珍珠梅提取物对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的保护作用
金海玲 , 张学武 , 赵 红 , 柳明沫 , 陈丽艳 , 尹宗柱
金海玲 . 张学武 , 柳明沫 . 陈丽艳 , 尹宗柱 , 延边大学 医学院生物化学教研室 吉林省延吉市 1 5 3 0 0。赵红 , 延边大学医学院墓础 医学部 吉林省延吉市 1 3 3 0 0 0
金海玲 , 女 , 19 4 9一 01 ~ 05 生 , 副研究员 , 吉林省龙并市人 , 朝鲜族 .
主要从事中草药开发 、 肿瘤生化研究工作 , 己发表论文 50 篇 ,
项目负责人 张学武 , 13 30 0 , 延边大学医学院生物化学教研室 , 吉林
省延吉市局子街 12 1 号 . 2 1 : 2 9 13 8 35 @S i n a · C o m
电话 : 0 4 33 一2 6 60 5 8 8 传真 : 0 4 3 3一 2 6 5 9 7 95
收稿日期 2 0 0 2一0 3一 1 5 接收日期 20 0 2一 04 一2 8
in t he t r e a t m e n t g r o u P w e r e h ig h e r t ha n t h o s e in m o d e l
g r o u P
.
T h e Co n t e n t s o f M D A ( 1
.
3士 0 . 6& 1 . 8士 0 . 7 巧 2 . 7土
0
.
8 , P < 0
.
0 5 ; 1
.
3土 0 . 4&4
.
0士 1 . 7 vs 6
.
9士 1 . 1 , 尸 < 0 . 0 5声 0 . 8士
0
.
2& 2
.
4土 2 . 2 嗒 5 . 1士 1 . 7 , P < 0 . 0 1 ) in t h e t r e a tm e n t g r o u P
w e er lo w e r t h a n t h o s e in m o d e l g or u P
.
C O N C L U T IO N : OS
r ba ir a so br ifo lia e Xt ar tC ha s Por 帕tC iVe e伟改朽
o n ar t a e u et h e aP tj e inj u yr in d u c曰 by ca r比 n t以 ar c h lo ir de .
J in HL
,
Z ha n g X W
,
Zh a o H
,
L iu M Z
,
C h e n 以节 n 2 . P r o te tC iv e e fe tCS o f
S o rb a r ia s o rb ifo iia e x t ra tC o n ca rb o
n te tra e h l
o ir d e in d u ce d
a e u t e h e P a t ie
inl u ry in ra ts
.
S h ij ie H u a re
n X ia o h u a Z a z h i 2 0 0 2 ;1 0 (7 )
: 7 8 3

7 86
pm te tC ive e角鱿匕 Of OS r ba rf a so 由 ifo lia
e X t r a C t o n C a r b o n t e t r a C h lo r id G
in d u eC d a c u te h e阳石e inj u ry in ra ts
摘要
目的 : 研究珍珠梅乙酸乙醋提取物对 C 1C 4 所致大鼠急性
肝损伤的保护作用 .
Ha i

Lin g J in
,
X u e

W u Z h a n g
,
Ho n g Zh a o
,
M in g

Z h u Li u
,
Li一 n Ch e n , OZ n g 一Z h u Y i n
肋 j一 Ll7j g ] 117, XU e 一即口 hZ a n .g 何 j n g . Zh u L IU, Lj一 sY n hC e l7,而门 9 . 21 , u iy7I 产 口已闪厂口77en t 口 f 日l’O hc e m污奴 aY n b白n nU ive 巧i妙
co l’ 习e of 何氏icf 角 e aY inj 13 3 0.0 ij il , 两刀iVn ce, C力加 a肋门夕动刁 q 决’8P沈 m e n亡 of B旨 s七 产触 d几刁 / 反密门“ 场 aY n b白 n
nU iVe rSJ yrt OC lE g
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C o r r e s Po n d e n e e t o: Zh a n g X u e

W u
,
D e Pa rt m e n t o f B io e h e m is t yr,
aY n b ia n Un jv e rs iyt OC llge
e o f Me d ie in e
.
N u m be r 121
, 」u z i 鱿er t, aY nj i
133000
,
JIIin P『o v in ce , Ch in a
.
2 12 29 138 35@ s in a
.
e o m
R ec e iv e d 200 2

03

1 5 A c c e Pt e d 20 02

04

28
方法 : 给 动 物 ig 给 药 , 用 C 1C 4 造 大 鼠急性 肝 损 伤
模型 , 用 比色分析法测定大 鼠血清天 冬氨酸转氨酶
(a sp a rt a t e t r a n as l n l l l a se
,
A L T )
、 丙氨酸转氨酶 (a l a n i n e
tr a ns a~
a se
,
A S )T 的活性 ; 在大鼠血清 、 肝匀浆 、 肝线
粒体测定超氧化歧化酶 (su 详or 龙 de id s m u at se , S O )D 、 谷
胧甘肤过氧化物酶 (gl ut at 址o ne 详 ir o五da se , G SH 一 PX)
的活性 , 丙二醛 (m a l o n id a ld e h y d e , M D A )的含量 ; 在
肝线粒体测定唬拍酸脱氢酶 (su c in at e de h y d or ge n a se ,
S D H )的活性 .
A b st ar Ct
A IM : OT 咖 dy ht e P or 拢Ct Ne e币笙st of 50 1加 iar so ibr fol ia 已由ar ct
o n ca l七o n t e it刁山#o ir de in du C曰 a Q tJ e he 阳七C inj u yr in 旧 st .
M E T H O D S : S o r b a r ia s o r b ifo lia w a s a d m in is t r a t e d 19 t o
t h e r a t s w it h i n d u e e d a e u t e h e P a t i e in j u r y b y e a r b o n
t改 ra C h lo r i d e . C o lo r im改 r iC m改h o d w a s u s e d t o m e a s u r e
t h e a e t iv it ie s o f a s P a r t a t e t r a n s a m in a s e ( A S T )
;
a la n i n e
t ar n s a m in a s e (ALT )
,
s u Pe ro x id e d js m u怕 s e (S O D) ; s u e e in a t e
d e h y d r o g e n a s e ( S D H ) a n d g i u t a t h j o n e P e r io x id a s e
(G SH

PX )
, a n d t h e co n et n t of m a lo n d ia ld e h yd e (M DA)
.
RE s U LT s
: S o r ba r ia s o r b ifo lia e Xt ar ct s ig n i行e a n t ly er d u e e d
a e u t e h e P a t ie j n ju r y jn d u e e d by e a r b o n t e t r a e h lo r i d e
,
w it h i n e r e a s in g s e r u m ALT ( 3 0 0士 5 0& 1 6 17土 2 6 7 vs 4 7 5 1
士 4 5 1 , P < 0 . 0 1 ) a n d A S T ( 5 3 3士 2 0 0& 1 7 6 7土 2 1 7 vs 3 8 0 0士
3 8 3
,
P < 0
.
0 1 )
,
a n d in c er a s ed t h e a ct iv iyt o f d e e r e a s in g S D H
( 10 4土 18& 4 7士 10 vs 7士 2 , P < 0
.
0 5 ) i n liv e r m ig o e s o n d r ia
.
T h e a ct jv it ie s o f SO D (4 0士 2& 2 5士3 vs 1 4土 6 , P < 0
.
0 5 ; 5 0士
8& 3 1士 9 vs 2 0土 6 , P < 0
.
D5 ; 6 0土 8& 3 4士6 峪 2 2士 9 , P < 0 . 0 5 )
a n d G S H

PX ( 7 3士 2 1& 5 9士 1 4 vs 4 5土 1 6 , P < 0
.
0 5二 1 2 6土
39& 13 5士 4 9 吓 8 9士 2 1 , P < 0 . 0 5二 2 0 6士 3 9& 19 3士 50 vs 1 1 7士
6 0
,
P < 0
.
0 5 )i n s e r u m
,
Iiv e r h o m o g e n a t e a n d m jt o e h o n d r ia
结果 : 珍珠梅能显著降低因 C C 14所致急性肝损伤大鼠血
清 A L T (30 0 士 50& 16 17 土 26 7 vs 4 7 5 1士4 5 1 , 尸< 0 . 0 1) 、
A S T ( 5 33 士 20 0& 17 6 7 士2 17 vs 3 80 0 士 3 83 , 尸< 0 . 0 1) 的
升高 ; 明显 回升 C C 14所致肝损伤大鼠肝线粒体 S D H ( 104
士 18 & 4 7 士 10 vs 7 士2 , 尸< 0 . 0 5 )活性的降低 ; 对急性肝
损伤大鼠血清 、 肝匀浆 、 肝线粒体 SO (D 40 士 2& 25 土 3 vs
14 士 6 , 尸< 0 . 0 5 ; 5 0士 8& 3 1士 9 vs 2 0士 6 , 尸< 0 . 0 5 ; 6 0
士 8& 34 士 6 vs 2 2士 9 , 尸< 0 . 0 5 ) 、 G SH一P X (7 3士 2 1& 5 9
士 14 vs 4 5士 16 , 尸< 0 . 0 5 ; 1 26 士 3 9& 13 5士 4 9 vs 89 士
2 1
, 尸< 0 . 0 5 ; 2 0 6士 3 9& 19 3士 50 vs 1 17 士6 0 , 尸< 0 . 0 5 )
的活性有 明显 的升高作用及降低 M D A ( 1 . 3 士0 . 6& 1 . 8
士 0 . 7 ” 2 . 7士 0 . 8 , 尸< 0 . 0 5 ; 1 . 3士 0 . 4 & 4 . 0 土 1 . 7 vs
6
.
9士 1 . 1 , 尸< 0 . 0 5 ; 0 . 8士 0 . 2& 2 . 4 士2 . 2 vs 5 . 1士 1 . 7 ,
尸< 0 . 01 )的含量 .
结论 : 珍珠梅乙酸乙醋提取物对 C C L 所致大鼠急性肝损
伤有保护作用 .
金海玲, 张学武 , 赵红 , 柳明深 陈丽艳 , 尹宗柱 . 珍珠梅提取物对四氯化
碳所致友鼠急 }绷干铡为蒯呆护作用 . 世界华月肖化杂志 2以犯 ; 10 ⑦ : 7i83a 786
O 引言
珍珠梅 (s 口厂加na s口r Z对动 )’a )属蔷薇科植物 , 又称山
高粱 、 八木条 、 珍珠杆 , 广泛分布于 云南 、 贵州 、
四川 、 湖北 、 甘肃 、 宁夏及东北 , 有活血化疲 、 消
肿止痛 , 治骨折 、 跌打损伤的作用 , 19 80 年代初期
四四以叹珍门e 乙co m
8 74 I SN 10 0 9

30 N 7 9 C 14

2 16 0 /R
研究发现珍珠梅水提物有抗缺氧作用 . 我们研究珍珠
梅乙酸乙醋提取物对 C C4 1所致大鼠急性肝损伤的保
护作用 .
, 材料和方法
1
.
1 材料 珍珠梅茎 、 叶 、 花 , 采集于吉林省延吉市
市郊 . 乙酸乙醋提取物 : 乙酸乙醋分 3 次浸泡珍珠
梅 , 温度为 40 ℃ , 每次 12 h , 合并三次滤液 , 用旋转
蒸发器减压浓缩 , 获珍珠梅乙酸乙醋提取物浸膏 ( lg
珍珠梅有效成分相当于 3 . 3 9 生药 ) . 硫代巴比妥酸 、 2 ,
6
一 二氯酚靛酚为 M ER C K 公司产品 , 吩嗦二甲醋硫酸盐是
F L U K A 公司产品 , SO D 、 M D A 、 G S H 一P X 、 双缩脉试
剂盒购置南京建成生物工程研究所 , A L T 、 A S T 试
剂盒购置北京北化康泰临床试剂有限公司 , 其他试剂
均为国产分析纯 . W is t ar 罕大鼠 , 质量为 1 8 0一20 09 ,
由延边大学医学院动物科提供 . C e nt ir k o n 一 10 5 5 型超
速离心机 瑞士产 , L X J一64 一 10 型离心机 上海手术器
械十厂 , C S S 一2 0 0 型超声波粉碎机山东济宁无线电仪
器厂 , 72 型分光光度计 中国厦门分析仪器厂 , 旋
转蒸发仪 上海荣亚生化仪器厂 , 电热恒温水浴箱 北
京市长凤仪器仪表公司 .
1
.
2 方 法 取 W is t ar 大 鼠 30 只 , 随机 分 为 正 常
组 、 模型组 、 给药组 3 个组 . 给药组按 13 . 2 g . k g 一 ,
剂量灌胃 sd , 正常组 、 模型组以等体积生理盐水灌
胃 . 第 4 天 , 模型组和给药组按 5 . om L . kg 一`剂量背
部皮下注射 C 1C 4 , 正常组背部皮下注射等体积生理
盐水 . 皮下注射 C CI ; 24 h 后 , 摘眼球取血 , 分离
血清 . 大鼠处死后 , 迅速取出肝脏 , 称取 1 . 09 放人
置有冰冷的匀浆递质 ( p H = 7 . 5 , 。 . 25 m ol . L 一` 蔗糖 ,
0
.
0 0 5m o l
.
L
一` T ir s

H C I
,
0
.
0 0 1m o l
.
L
一` ED T A ) 的玻
璃匀浆器中 , 在冰浴中制成 10 0 9 . L 一 , 匀浆 , 在 2 00 9
离心 10 m in , 取上清液 , 为肝匀浆 ; 用低温超速离
心机以 16 0 09 离心 20 m in , 取其沉淀部分 , 即为线
粒体 . 再加人匀浆递质 (p H刀 . 5 , 0 . 25 m ol . L 一 , 蔗糖 ,
0
.
0 05m o l
.
L

, T ir s

H C l
,
0
.
OO l m ol
.
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一`E D T A ) 2m l
,
世界华人消化杂志 20 2 年 7 月 15 日 第 10 卷 第 7 期
用超声波打碎线粒体膜性结构 , 制成线粒体悬浮液 .
参照试剂盒的说明书检测血清 A L T 、 A S T 的活性 ,
检测血清 、 肝匀浆 、 线粒体中 SO D 、 G S H 一 P X 的活
性 , M D A 含量 ; 参照姜妙娜报道的方法进行线粒体
S D H 测定 ; 蛋白质含量按双缩脉法测定 .
统计学处理 数据以 又 士 s 表示 , 应用 SP SS 一 10 . 0
统计软件进行方差分析 .
2 结果
2
.
1 血清 ALT 、 AST 及 SDH 的影响 珍珠梅 乙酸乙
醋提取物明显降低 CCI ; 所致急性肝损伤大鼠血清 A LT 、
A S T 的升高 沪 < 0 . 01 ) , 明显升高 C 1C 4 所致大鼠肝
线粒体 S D H 的降低 (P < 0 . 05 , 表 1) .
表 1珍珠梅乙酸乙醋提取物对 C C 14所致急性肝损伤大
鼠血清 A L下 、 A S丁及肝线粒体 5 0日的影响 ( x 士 : )
分 组 刀 C CI
(m L k g

)
A L T
(: : k a土/ L )
A S T
(n k a t / I )
S D H
( n Ka土/ g )
正常组
模型组
给药组
3 0 0士 5 a0
4 7 5王士 4 5 1
1 6 17士 26勺 a
5 3 3士 20于
3 8 0 士 3 8 3
1 76 7士 Z I 7 a
10 4 士 18匕
7士 2
4 7士 10于·
aP < 0
.
0 1
, 毕 < 0 . 05 峪 模型组
2
.
2 血清 、 肝匀浆 、 肝线粒体 SOD 、 GSH一pX 、 MDA 的
影响 珍珠梅乙酸乙酷提取物明显升高 C C玩所致急
性肝损伤大鼠血清 、 肝匀浆 、 线粒体 S O D 、 G S H 一P X
的活力 (P < 0 . 0 5 ) , 降低 M D A 的含量 (P < 0 . 01 或
P ( 0
.
0 5
, 表 2 ) .
3 讨论
目前 , 公认 C 1C 4 引起肝损伤的机制系 C CI ; 在肝微
粒体细胞色素 P 45 。激活下生成自由基 C C13 · 及 lC · , 这
些 自由基可与肝细胞内大分子发生共价结合 , 也可
攻击膜下不饱和脂质 , 引起脂质过氧化 , 使肝细胞
表 2 珍珠梅乙酸乙醋提取物对 CC !; 所致急性肝损伤大鼠血清 、 肝匀浆 、 线粒体 SD o 、 GSH 尹 x 、 MD A 的影响 (戈士 : )
G S H一 P X M D A
分组 n C C I`
(m L
,
kg
一 `
)
血清
(k N U / L )
肝匀浆
( k N U / g )
线粒体
(K N U / g )
血清
土水 a t
肝匀浆
n k a t / g )
线粒体
(瓜a t / g )
血清
(
n m o 丫L )
肝匀浆
(孜N U / g )
线粒体
(k N U / g )
正常组 10 4 0 士 Za 5 0士 s a 6 0士 s a 7 3土 Z l a 12 6 土 3 9a 2 06 士 39 a 1 . 3 士 o . 6a 1 . 3 士 0 . 4 a 0 . 8 士 0 . 2 七
模型组 9 14 士 6
2 5 士 3a
2 0土 6 2 2士 9 4 5 士 16 89 士 2 1 1 17士 6 0 2 7 士 0 . 8 6 . 9士 1
.
1 5
.
1士 1 . 7
给药组 9 3 1士 g a 34 士 6a 59 士 14 a 13 5 土 4 9 a 19 3士 5宁 1 . 8士 0 . 7a 4 . 0 士 1 . 7 a 2 . 4 士 2 . 2 b
ǎ曰éO
:
气一
aP < 0
.
05
, 沙 < o . 01 vs 模型组
w w 以叹坦门.et c o m
金海玲 , 等 . 珍珠梅提取物对四氯{咙撕致大鼠急幽干损伤蝴呆护作用 7 85
_ —一一 ~一- - ~一~ - - -一~ ~ ~ — 一损伤 , 细胞质内谷 A L T 、 A S T 渗人血液 , 结果血清A L T 、 A s T 活性升高 口` ,’ l , 而给予珍珠梅乙酸乙醋提取物对 C CI ; 所致大鼠血清 A L T 、 A S T 的升高有明显降低作用 . 线粒体是生物氧化的主要结构 , 当细胞受到损害时 , 线粒体反应最早 , 变化最明显 , S D H是其标志酶 。 4 一 , 8 } , 给药组 s D H 的活性明显高于模型组 , 说明珍珠梅乙酸乙醋提取物对 C C14 所致肝线粒体的损伤有一定的保护作用 . 自由基是人体正常生化过程的中间产物 , 在机体正常及病理过程中都存在 , 同时机体在进化过程中获得了灭活氧自由基的一些酶 , 如 S O D 、 G S H 一 P X 等 . 因此 , 只有当自由基产生过多或者机体内的酶系统过少时才导致疾病 . 氧
自由基可促使不饱和脂肪自由基形成 , 脂质 自由基
可引起细胞膜的流动性 、 通透性和完整性的破坏 , 进
而使其双层结构发生断裂 , 引起膜镶嵌的一系列酶
。的排列紊乱 , 功能丧失 , 细胞的能量产生系统瘫痪 .
S O D

G S H

P X 的变化可以间接地反应疾病情况下
自由基的变化 . S O D 为高效的清道夫 , 可抑制自由基
启动的脂质过氧化 , G S H 一 P X 是重要的催化过氧化氢
分解的酶 , 他特异地催化还原性 G S H 对过氧化氢的
还原反应 , 从而起到保护细胞膜结构与功能的完整作
用 . M D A 是脂质过氧化的最终产物 , 可严重破坏细
胞膜的结构 , 导致细胞肿胀 、 坏死 , 其含量反映了组
织过氧化的损伤程度 日9一到 . 本实验中给药组血清 、 肝
匀浆 、 肝线粒体 SO D 、 G S H 一 P X 较模型组显著升高 ,
而 M D A 含量显著降低 , 这说明珍珠梅乙酸 乙醋提取
物的保肝机制与其对抗自由基脂质过氧化密切相关 .
4 REF ERENC E S
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Zh a n g J
,
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IS N 1009一 3 0 79 C N 14 一 126 0 / R 20() 2 年版权归世界胃肠病学杂志社
. 消 息 .
中国科技期刊走向世界的步伐正在加快
截止到 20 02 年 7 月 , 中国被著名检索系统 S CI 收录的科技期刊数从 63 种增加到了 67 种 . 从制作 S CI 的美国 151 (美国科学情
报所 ) 发布的 J C R (期刊引证报告 ) 上的数据看 , 有指标数据的 59 种我国科技期刊中 , 80 % 以上的期刊影响因子 1呈上升趋
势 ; 约 90% 的总被引频次 2 都提高了 .
在 20 01 年的 J C R 中 , 总被引频次超过 10 0 次的中国科技期刊有 4 个 , 他们是 《高等学校化学学报》 ( 中文版 ) ( 19 59 次 ) ,
《科学通报》 ( 1628 次 ) , 《物理学报》 (中文版 ) ( 122 7 次 ) , 《中国物理快报》 ( 12巧 次 ) .
首次有两个中国科技期刊的影响因子超过 1 , 他们是 《细胞研究》 (2 . 10 2) 和 《世界胃肠病学杂志》 ( 1 . 44 5 ) , 这两种期刊
均为中国英文版科技期刊 .
从期刊影响因子在本学科的排位看 , 进人 5 C IE 的我国科技期刊 , 有 8 个期刊排在本学科的中上水平 , 他们是 《力学学报》 、
(高等学校化学学报}) (中文版 ) 、 ( 中国物理 } 、 《中国物理快报》 、 《科学通报》 、 《中国科学 B 》 、 ( 中国科学 E》 、 《中国有色金属
学报》 .
在本学科国际期刊中 , 我国有 10 个期刊被引频次位于中上水平的 . 他们是 : 《科学通报》 、 《高等学校化学学报》 (中文版 ) 、
《中国科学 A 》 、 《物理学报》 (中文版 ) 、 《中华医学杂志》 、 《化学学报》 ( 中文版 ) 、 《中国物理快报》 、 《中国有色金属学报》 (英
文版 ) 、 《中国科学 B》 、 《中国药理学报》 .
在 5 C l 网络版收录的中国科技期刊中 , 有 25 个期刊是由中国科学出版社出版的 , 其中在 J C R 中有指标的期刊有 18 个 .
另外 , 除 S CI 系统外 , 中国科技期刊被其他几个重要国际检索系统收录的数量也呈上升趋势 . 例如 , 在反映工程技术论文
的历史超百年的检索系统 《E l 》 (工程索引 ) 中 , 中国被收录的科技期刊从最少时的 40 种 , 增加到了 2 0 0 年的 104 种 . 这也
直接反映了我国科技期刊被国际认可的程度 .
国家科技部中国科技信息研究所 , 每年对我国科技期刊在国内的情况做出统计分析 , 定期出版 《中国科技期刊引证报告》 .
以 2 00 0 年数据看 , 我国科技期刊的平均影响因子由上一年的 0 . 2 08 上升到 0 , 2 40 , 其中影响因子超过 l 的有 20 个 ; 总被引频
次的平均值达到了 19 2 . 2 次 , 总被引频次超过 10 0 次的期刊有 25 个 , 其中 《科学通报》 的总被引频次达到了 29 79 次 .
目前 , 我国科技期刊数量已达到 46 0 余种 , 已经形成了一定的规模 , 而且门类相对齐全 , 为我国基础研究的发展和科研
成果转化为生产力做出了重要的贡献 , 但我们承认中国的科技期刊发展水平与世界发达国家之间存在较大的差距 . 随着中国加
入 W T O , 对于中国的科技期刊 , 既是机遇又是挑战 . 我们相信 , 通过我国学术界和编辑部门的共同努力 , 一定会在不远的将
来产生一批具有国际水准的科技期刊 .
川“ 净忆呵卯 e 亡。 刃刀