全 文 ：综述与专论
生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2010年第 3期
转基因植物在环境污染监测中的应用
于典司 郭长虹
(哈尔滨师范大学 分子细胞遗传与遗传育种黑龙江省重点实验室,哈尔滨 150025 )
摘 要: 在通常情况下, 污染物的存在很难被发现。它们对环境和人类的潜在危害就更加难以估计。在众多生物监测
体系中, 转基因植物监测系统脱颖而出。综述了几种成功应用于污染物质遗传毒性监测的转基因植物系统, 并对今后生产高
效率转基因植物监测体系的关键问题进行了探讨。
关键词: 生物监测 同源重组 点突变 转基因植物 环境污染
The Application of Transgenic Plants for the EnvironmentalM onitoring
Yu D ians i Guo Changhong
(Ky e Laboratory of M o lecular and Cy togenetics, H eilongjiang P rovince, H arbin N ormal University,H arbin 150025)
Abstrac:t The presence o f env ironm enta l contam ination is d ifficult to assess. It is mo re difficult to eva luate the po tentia l dange r of
contam inants to the env ironm ent and humans. Am ong m any b iomon itoring system s, the transgen ic p lants are espec ia lly prom is ing. This
paper summ arized the va rious transgenic plant mode ls that had been successfully used in biom onitor ing geno tox ic po llutants, and dis
cussed the key po in ts fo r the future generation o f effic ient transgen ic b iomon itor.
Key words: B iomon ito ring H omo logous recomb ination Po intm utation T ransgen ic plants Env ironm ental po llution
收稿日期: 20091130
基金项目:人事部留学回国人员科技项目,教育部博士点基金 ( 20070231001 ),哈尔滨师范大学青年骨干教师科研项目 ( 08KXQ05 ) ,黑龙江省
国际合作项目
作者简介:于典司,男,硕士,专业方向:植物遗传学; Ema i:l yd s. b io@ hotm ai.l com
通讯作者:郭长虹,女,教授, Em ai:l k aku2008@ hotm ai.l com
近年来,环境问题被人们广泛关注。在大多数
情况下,环境中存在的污染物很难被发现,需要使用
专门的装置才能够探测到。但是, 没有任何一种监
测装置可以评估有毒污染物的潜在毒性和诱变性。
当一种新的化学物质释放到环境中时, 它对环境和
人类的潜在危害更加难以估计。因此, 利用生物敏
感性进行环境污染监测和遗传毒理学分析十分
重要。
1986年, Ames等 [ 1]最早建立了利用生物敏感
性检测环境污染的实验室方法,该方法是利用细菌
检验体系来分析诱变性化合物对真核生物的影响,
由于细菌细胞对多种污染物敏感性不强, 导致检测
的准确性和灵敏性并不高。因此又出现了利用真核
细胞对有毒污染物进行检测的新方法。通常通过分
析植物 DNA的损伤对污染物的诱变性进行检测,该
检测是对洋葱 [ 2]、蚕豆 [ 3]和玉米 [ 4]染色体的异常进
行分析,其中洋葱染色体畸变试验对毒性作用反应
迅速。在动物方面,目前比较完整的动物模型有基
于隐性眼色突变隔代遗传的黑腹果蝇系统 [ 5] ; 利用
无活性 LacI基因作为靶基因的转基因斑马鱼分
析 [ 6] ; 以及鼠类模型 [ 7- 11 ]。然而, 由于动物非固着
的生活方式导致以上动物模型还存在很多问题, 不
利于实验研究和实践应用。
随着转基因植物研究的深入,一些实验室开始
尝试利用转基因植物对环境污染进行监测。在这些
转基因植物体系中,首先通过分子生物学手段改造
一个标记基因,使其转入目标植物,当目标植物受到
环境污染胁迫时, 该标记基因发生重组或突变, 利用
被植物放大的生物学信号,如 GUS, LUC,荧光蛋白来
指示环境污染物的诱变性。这些转基因监测体系能
够在分子水平灵敏、高效地反应出污染物对生物体
的遗传学效应。重点对监测环境污染的转基因植物
生物技术通报 B iotechnology Bulletin 2010年第 3期
体系做一综述。
1 同源重组转基因植物系统
同源重组分析是基于生物体基因之间发生同源
重组后影响基因功能的原理而建立的。Lebe l等 [ 12]
最早建立了能够检测同源重组水平的转基因植物系
统。他们设计了含有两个重叠无卡那霉素活性基因
组成的结构,用其转化烟草。植物受到胁迫时发生
同源重组导致卡那霉素抗性恢复, 通过对转基因烟
草原生质体对卡那霉素的抗性记录来统计重组频
率。植物体细胞内染色体同源重组频率不是一个常
数,它受到多种细胞外因素的影响。试验中自发同
源重组率可以达到 9 10- 5 - 19 10- 5。电离辐
射、丝裂霉素 C和热击可以显著增加染色体内重组
频率。低剂量的 X射线也可以提高重组频率, 大约
是自发重组的两倍。
Sw oboda利用转基因拟南芥探测同源重组, 其
重组区包含两个重复无功能缺失突变的 葡萄糖
苷酶基因 ( uidA )。在转基因位点的重组会导致uidA
( GUS)基因功能恢复, 以及 葡萄糖苷酶的合成。
通过组织化学染色, 能够对整株转基因植物染色体
内重组进行数量检验 (图 1)。在植物生长的不同时
期都可以观测到这种重组现象的发生过程, 并且不
同的转基因系重组频率不同。试验表明, 经过紫外
光照射, u idA 基因重组频率增加 [ 13] , 经过 X射线和
甲基磺酸甲酯 (MMS)处理后会产生多种 DNA损伤
应答 [ 14]。
图 1 同源重组和点突变分析转基因植物系统的原理
同源重组转基因植物已成功地应用于探测土壤
和水质中的放射性污染。例如,利用转基因拟南芥
和烟草进行大规模的环境监测试验, 可检测出某地
区不同污染区域土壤样本真实的遗传毒性, 且高浓
度污染物表现为同源重组的高频率应答。以植物作
为生物指示器来计算拟南芥对辐射的吸收剂量 (包
括内部剂量和外部剂量 ) , 使得重组频率与土壤污
染程度和吸收剂量相关。利用植物的这种敏感性可
以区分出生长在微量污染的 !洁净 ∀土壤 ( 22 Bq /
kg)和生长在污染程度在 1. 5- 3. 3 C i/km2 ( 188 -
575 Bq /kg )的土壤中植物的同源重组频率的差
异 [ 15]。
2 点突变转基因植物系统
Kova lchuk
[ 16]设计转基因拟南芥系统分析点突
变, 在 GUS ( uidA )基因 5#末端通过取代单一核苷
( G∃ T或 G∃ A)引入终止密码子或替换氨基酸, 导
致 GU S基因完全失活, 经组织化学染色后呈白色;
只有恢复到初始核苷 ( T /A∃ G )才能恢复酶的活
性, 经组织化学染色后显示蓝色 (图 1)。这种转基
因拟南芥系统对多种诱变物质 ( UVC, X 射线,
MM S, )表现出强烈应的应答反应。
Auwera
[ 17]在 Kova lchuk等的试验基础上, 报告
了大肠杆菌中 5个错义突变和 1个 GUS编码基
因重组, 并且在转基因拟南芥中利用无性系失活
GU S基因的复性检测突变和重组。设计错义突变
用来在对称序列中寻找 C%G ∃ T %A的置换突变。
拟南芥中 C%G∃ T%A的置换起始于特定对称 CpG
或 CpNpG位置甲基胞嘧啶的去氨基化。同时,设计
GU S与 GFP融合能够在转基因植物中产生强烈的
GFP信号。通过使用 EMS和 UVC对植物进行诱变
处理,以确定利用这些结构测量植物在非生物胁迫
下的突变和重组频率以及不同遗传背景的应答。重
金属、茉莉酸甲酯、水杨酸以及热击没有明显的应
答。EMS引起突变水平比之前 K ovalchuk等报道
的高。
3 其它转基因植物系统
若要获得生物体的突变频率,就需要有强大的
报告系统,才能将转基因植物的突变频率信号转化
为可用的统计学信号。K ovalchuk等 [ 18]最先设计了
这种报告系统,即 GUS基因改造。A zaiez设计了另
外一个转基因拟南芥报告系统。通过在 5#端 AUG
密码子后直接引入微卫星标记, 使得植物基因组携
带的 GUS报告基因失活 [ 19]。在获得或丢失一个或
几个微卫星后基因功能恢复。由于微卫星通常有较
高的突变频率,植物上蓝斑的数量较多,这样就能用
更少的植物对环境中有毒物质的潜在诱变性进行
18
2010年第 3期 于典司等 :转基因植物在环境污染监测中的应用
分析。
另外, 设计一个具有阻遏物检验功能的标记基
因,将其导入植物中, 这样有活性的阻遏物结合到启
动子序列上从而阻碍报告基因的表达。常用的阻遏
物为四环素,任何突变都会使四环素阻遏物失活,恢
复启动子功能, 激活报告基因。携带这种结构的植
物在基因被激活后可以大量表达该转基因。通过设
计这个转基因系,可以使用更少数量的植物来获得
更有利的统计分析数据。但是这个设计的缺点在于
它需要阻遏物紧密结合。此外,被测试植物通过突
变确定单拷贝阻遏物失活的结构必须是杂合的。
引入单一移码突变也可以破坏基因活性。任何
突变, 删除或插入都可以恢复读码框以激活转基因。
另外, 还可以通过产生携带无活性翻译的抗生素或
除草剂抗性基因来设计转基因体系, 从培养在抗生
素或除草剂的植物中筛选抗性植株, 这一方法用来
探测可遗传的自发或诱发突变。但是它需要更长时
间来对环境的影响进行评估,并且需要大量的筛选
后代植株。Kova lchuk等 [ 15]最近设计的植物携带有
双重重组标记:基于荧光色素酶和磺胺抗生素的可
见标记。基于荧光素酶标记可以检测体细胞分裂和
减数分裂, 基于磺胺药物标记只能检测减数分裂。
初步数据已经显示该系统的高效性。
其它的转基因系统还包括胁迫调节或者特异代
谢物调节启动子。胁迫调节启动子对特定化学药
品、特异物理因素和大部分普通类型的胁迫都具有
活性。 Saidi等 [ 20]应用该方法, 生产出在胁迫诱导
启动子 hsp17. 3B控制下表达 GUS报告的转基因球
蒴藓, 将其暴露在造纸和染色工业的污染物中,通过
追踪荧光产物,它表现出对氯酚,重金属和磺酸蒽醌
的特异性反应。
4 转基因植物监测系统的敏感性和应用
在转基因植物监测系统相关文献报道的众多数
据中, 由于测试参数的不同,这些系统的数据不能够
直接比较。Kova lchuk等 [ 21]发现提高重金属铅离子
或镉离子浓度可以提高转基因植物突变和同源重组
频率, 但是在 Auwera等 [ 17]的试验中并没有表现出
该结果,在 Kovalchuk等 [ 22]之后的文章中也没有再
提到铅对重组频率的影响。
由于操作方法上的不同以及所选择测试植物的
内在差异会造成这种结果上的差异, 但是值得肯定
的是,转基因植物监测系统对多种重金属诱变性的
检验要比其它可用的检验系统灵敏度高。目前, 只
有少数几个监测系统才有能力检测低于 0. 05 mg /L
的 Cd2+的诱变性。暴露在相同或者更低 Cd2+浓度
条件下, Kova lchuk等 [ 21]的转基因植物监测系统可
以检测到突变和重组水平增加两倍以上,检测到暴
露在镉、铜、镍、铅和砷的毒性作用最低分别可以达
到 0. 001, 0. 05, 0. 1, 0. 5以及 0. 05 mg /L, 这一结果
比个别无脊椎动物检测体系的最小值还要低。
转基因拟南芥和烟草监测系统被应用于检测土
壤、水质和空气中其它诱变因子。转基因植物监测
系统最成功地应用是探测土壤和水质的放射性污
染。Kova lchuk等 [ 23 ]曾经研究放射性污染物在水体
中潜在遗传毒性, 他们从切尔诺贝利事故遭受污染
的居住区水井中获取水样。由于存留的放射性核辐
射活性浓度要比可探测的限度低, 放射性分析没有
在水样中检测到任何137C s或 90Sr活性的存在。但是
在相关转基因植物监测系统的检测中,生长在污染
水质的拟南芥同源重组频率有所增加,可以推测重
组频率的增加可能是由于低水平的污染物造成的。
有报道说日本的研究小组成功培育了用于环境污染
物监测的转基因马鞭草, 这种马鞭草通过合成色素
报告土壤污染程度。同样, 转基因植物在除草剂、
UVB辐射、以及高温胁迫和生物胁迫的诱变性分析
中都比较敏感。
5 展望
随着工农业生产和科学技术水平的迅速发展,
诱变性污染物不断增加, 导致了环境污染的进一
步加剧。转基因植物监测系统可以灵敏地探测污
染物的诱变性, 可能成为今后监测环境污染的有
效方法。
当然, 目前在转基因植物中实际突变频率还非
常低,为了得到统计学上有意义的数据,通常每组试
验要应用千株或者更多的植株。要想提高监测的效
率, 还要开发更敏感的转基因植物系统,以便能用更
少的植物进行诱变性分析, 提高分析效率。Aza iez
等 [ 24]已经在做这方面的尝试, 在 5#端 AUG密码子
后直接引入微卫星标记, 植物通过获得或丢失一个
或几个微卫星从而恢复基因功能。由于微卫星通常
19
生物技术通报 B iotechnology Bulletin 2010年第 3期
有较高的突变频率,植物上蓝斑的数量也很多。报
告基因的表达使转基因植物监测结果更容易观察。
目前, 在植物中广泛使用的是 GUS、荧光素酶基因
LUC以及荧光蛋白 ( FPs)中的 GFP。这 3种报告基
因在植物中都有不同的探测灵敏性。GFP基因标记
可能是最简单便宜的一种, 它只要在 UV光源或者
能放射蓝色可见光的灯下就可以看到。但是最大的
问题在于它是最不敏感的, 即需要最高的表达才能
探测。其次是 GU S标记, 通过组织化学染色就可以
显示, 但其最大的缺点是需要进行破坏性的组织化
学染色来观测突变的发生, 因而它只能在植物生长
周期中的特定时间检测, 并且只能做一次。 LUC基
因是报告基因中最敏感的, 只要通过光度计就可以
活体观察到荧光素酶裂解荧光素散发出的荧光,缺
点是价格昂贵。所以开发既经济又灵敏的报告基因
系统也是下一步要重点研究的课题。
环境中的污染物是在不断变化的,所以对环境
污染水平的监测是一项需要恒心和毅力的工作。新
的转基因植物环境监测系统将会成为环境污染的报
警器, 在环境出现重大生态损伤之前即可预告其可
能存在的风险,同时还可以对污染地区修复效率做
出评估。随着转基因技术的不断发展, 利用转基因
植物监测环境污染将拥有更广阔的前景。
参 考 文 献
[ 1] L evin DE, Am es BN. C lass ify ing mu tagen s as to their poss ib le speci
ficity in causing the s ix possib le tran sitions and tran sversions: a s im
p le an alysis us ing the Salmonella mu tagen icity assay. Environ Mu ta
gen, 1986, 8: 928.
[ 2] M a TH, Cab rera GL, Ow en s E. G enotoxic agen ts detected by p lan t
b ioassays. Rev Environ H ealth, 2005, 20: 113.
[ 3] Kanaya N, G ill B, G rover I, et a.l V icia faba chrom osomal aberrat ion
assay. Mu tat Res, 1994, 310: 231247.
[ 4] G ran tWF, Ow ens ET. Zea mays assays of ch em ical / rad iat ion geno
tox icity for the s tudy of environm en talm utagens. M utat Res, 2006,
613: 1764.
[ 5 ] G reenM, Todo T, Ryo H, et a.l Gen et icm olecu lar basis for a sim p le
D rosophila m elanoga ster som atic system that detects environm ental
mu tagens. P roc Nat lAcad S ciU SA, 1986, 83: 66676671.
[ 6] Am anum a K, Takeda H, Am anum a H, et a.l T ransgen ic zeb rafish for
detecting m u tat ion s caused by com pounds in aquatic env ironm en ts.
Nature B iotechno,l 2000, 18: 6265.
[ 7] Mu rtiR, Sch im en tiK, Sch im en ti J. A recomb in at ionbased transgen ic
m ou se sys tem for genotoxicity test ing. M utat Res, 1994, 307: 583
595.
[ 8] S accoMG, Zecca L, Bagnasco L, et a.l A tran sgen icm ouse m odel for
the detection of cellular stress induced by toxic inorgan ic com
pounds. Natu re B iotechno,l 1997, 15: 13921397.
[ 9] M ayer C, K lein RG,W eschH, et a.l N ickel subsu lf ide is genotox ic in
vi tro bu t show s no m utagen ic potent ial in respiratory tract t issues of
B igB lue rats and M uta M ou se m ice in v ivo after inhalat ion. Mu tat
Res, 1998, ( 13) 420: 8598.
[ 10] H end ricks CA, E ngelw ard BP. R ecom bom ice: the past, p resen t, and
fu ture of recomb inat iondetect ion in m ice. DNA Repair ( Am st ),
2004, 3: 12551261.
[ 11] Rugo RE, A lm eida KH, H endricks CA, et a.l A single acu te expo
su re to a chem otherapeu t ic agen t induces hyp errecomb inat ion in
d istant ly descendan t cells and in th eir n eighbors. On cogene, 2005,
24: 50165025.
[ 12] Lebel EG, M asson J, Boguck iA, et a.l S tressinduced in trach rom o
somal recomb in at ion in p lan t som atic cells. Proc Nat l A cad S ci
USA, 1993, 90: 422426.
[ 13] Sw oboda P, G al S, H ohn B, et a.l In trachrom osom al hom ologou s re
com b ination in w hole plants. Embo J, 1994, 13: 484489.
[ 14] Puch ta H, Sw oboda P, H ohn B. Induct ion of hom ologous DNA re
com b ination in w hole plants. Plant J, 1995, 7: 203210.
[ 15] K ovalchuk O, Kovalchuk I, T itov V, et a.l Rad iation hazard caused
by th e Chernobyl acciden t in inh ab ited areas ofU kra ine can b em o
n itored by transgen ic p lants. M utat Res, 1999, 446: 4955.
[ 16] K ovalchuk I, Kovalchuk O, H ohn B. Genom ew id e variat ion of the
somat ic m utation frequen cy in tran sgen ic p lan ts. Em bo J, 2000, 19:
44314438.
[ 17] Van der Auw era G, Bau te J, B auw ens M, et a.l Developm en t and
appl icat ion of novel constru cts to score C%GtoT%A transit ion s and
homo logous recom b ination inA rabid op sis. Plan tPhysio,l 2008, 146:
2231.
[ 18 ] Kovalchuk O, Arkh ipov A, Barylyak I, et a.l P lan ts experien cing
chron ic internal exposure to ion izing radiation exh ib it h igh er fre
quen cy of hom ologous recomb inat ion than acu tely irrad iated plants.
Mu tat Res, 2000, 449: 4756.
[ 19] A zaiezA, Bouchard EF, JeanM, et a.l Length, orientation, and p lant
host inf luence th e m utation frequ ency in m icrosatell ites. G enom e,
2006, 49: 136673.
[ 20] S aid iY, Dom in iM, Choy F, et a.l Activat ion of the h eat shock re
spon se in p lants by ch lorophenols: transgen icP hyscom itrella pa tens
as a sens itive b iosensor for organ ic pollu tan ts. Plant Cell E nviron,
2007, 30: 75363.
(下转第 24页 )
20
生物技术通报 B iotechnology Bulletin 2010年第 3期
参 考 文 献
[ 1] Loon LC van, StrienEA van, et a.l The fam ilies ofp athogenesisrelat
ed p rote ins, their activ it ies, and com parat ive analys is of PR1 type
p rote ins. Physio lM ol Plant Patho,l 1999, 55( 2) : 8597.
[ 2] E gorov TA, Od instova T I, Pukh alsky U, G risk in EV. D ivers ity of
w heat ant im icrob ial pept ides. Pept ides, 2005, 26: 20642073.
[ 3] C hanYL, Prasad V, San jaya, et a.l T ransgen ic tom ato p lants express
ing anArabidopsis th ion in ( Th i2. 1) d riven by fru itin active prom ot
er b at tle against phytopathogen ic attack. Planta 2005, 221 ( 3 ) :
386393.
[ 4] T eeter MM, Ma XQ, Rao U, W hit low M. Crystal stru cture of a pro
teintoxin c~ lpuroth ion in at 2. 5 A and a com parison w ith p red ic
tedm odels. P roteins S tructu re Function Genet, 1990, 8: 118132.
[ 5 ] W h it low M, T eeter MM. Energy m in im ization for tertiary structure
p red ict ion of h omo logous proteins: c~ lpuroth ion in and V iscotoxin
A3 m odels from C ramb in. J B iom olS tructDynam, 1985, 2: 831848.
[ 6] C olilla FJ, Rocher R, M endez E. Puroth ion in s: am ino acid sequ ence
of tw o polypept ides of a new fam ily of th ion in s from wheat endo
sperm. FEBS L ett, 1990, 270: 191194.
[ 7] Thomm a BPH J, Thevissen K, C amm ue BP. P lan ts defensin s. Planta
2002, 216: 193202.
[ 8] A lm eida MS, Cab ral KM, Ku rtenbach E, et a.l S olut ion structu re of
Pisum sat ivum defens in 1 by h igh reso lut ion NMR: p lan t defen sin s, i
den tical backbone w ith d ifferen t m ech an ism s of action. M ol B io,l
2002, 315: 74957.
[ 9] B loch Jr C, PatelSU, B aud F, et a.l HNMR stru cture of an an tifungal
th ion in protein SI 1: S im i larity to scorp ion tox ins. Proteins, 1998,
32: 334349.
[ 10 ] Terras FR, Eggermont K, Kovaleva V, et a.l Sma ll cysteinerich an
t ifungal proteins from rad ish: their role in host defen se. Plant C el,l
1995, 7: 573588.
[ 11] Thev issen K, Cammue BPA, Lem aire K, et a.l A gene encod ing a
sph ingolip id b iosyn th es is enzym e determ ines th e sen sitivity ofSac
cha rom yce s cerev isiae to an ant ifunga l p lan t defen sin from dah lia
(D ah liam erckii ) . Proc Natl Acad SciUSA, 2000, 97: 95319536.
[ 12] ThevissenK, FerketKK, Francois IE JA, C amm ue BPA. Interact ions
of an t ifungal plant defens ins w ith fungal m em brane components.
Pept ides, 2003, 24: 17051712.
[ 13] Thev issen K, Ghazi A, De Sam b lanx GW, et a.l Fungalm em brane
respon ses indu ced by p lant defens ins and th ion ins. J B iol Chem,
1996, 271: 1501815025.
[ 14] Florack DE, St iek em aW J. Th ion ins: prop erties, poss ible b iolog ical
roles andm echan ism s of act ion. PlantM ol B io,l 1994, 26: 2537.
[ 15] H ugh es P, Denn is E, Wh itecrossM, L lew ellyn D, G age P. The cyto
toxic plan t protein, betapuroth ion in, form s ion channels in lip id
m em bran es. J B iolCh em, 2000, 275: 823827.
[ 16] L iSS, Gu llbo J, L indholm P, et a.l L igatoxin B, a new cytotoxic p ro
tein w ith a n ovel helixturnhelix DNAb ind ing dom a in from the
m is tletoe Phoradend ron liga. B iochem J, 2002, 366: 405413.
[ 17] S tein GM, Pfu ller U, Sch ietzelM, Bu ssing A. Toxic p roteins from
European m ist letoe ( Viscum album L. ) : increase of intracellu lar
IL4 bu td ecrease of IFNgamm a in apop tot ic cel ls. Ant icancer Res,
2000, 20: 16731678.
[ 18] Carm ona M J, M olina A, Fernand ez JA, et a.l Expression of the al
phath ion in gene from barley in tobacco con fers enhanced res istan ce
to bacterial pathogen s. P lan t J, 1993, 3: 457462.
[ 19] Iw ai T, K aku H, H onku ra R, et a.l Enhanced resistance to seed
tran sm it ted b acteria l diseases in transgen ic rice plan ts overprodu
cing an oat cellw allb ound th ion in. Mo l P lant M icrobe In teract,
2002, 15: 515521.
[ 20] K aw ata M, Nakaj ima T, Yam am oto T, et a.l Gen et ic engineering for
d isease resistance in rice ( Oryza sativa L. ) u sing an tim icrob ial
p ept ides. JARQ, 2003, 37: 7176.
(上接第 20页 )
[ 21 ] Kovalchuk O, T itov V, H ohn B, et a.l A sen sitive transgen ic plant
system to detect toxic inorgan ic com pounds in the environm ent. N at
B iotechno,l 2001, 19: 568572.
[ 22 ] Kovalchuk I, T itov V, H ohn B, et a.l T ranscriptom e p rofiling reveals
s im i larit ies and d ifferences in p lant respon ses to cadm ium and lead.
M utat Res, 2005, 570: 149161.
[ 23 ] Kovalchuk O, T elyuk P, Kovalchuk L, et a.l Novelp lant b ioassays for
m on itoring the genotoxicity of drink ing w ater from th e inh ab ited are
as of th e Ukraine affected by th e C hernobyl acciden t. Bu ll E nviron
C on tam Tox ico,l 2003, 70: 847853.
[ 24 ] Azaiez A, Bouchard EF, JeanM, Belzile FJ. Length, orien tat ion, and
p lan t host in flu ence th e m utation frequ ency in m icrosatel lites. Ge
nom e, 2006, 49: 136673.
24