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生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2011 年第 7 期
RNAi技术应用的研究进展
张俐
(云南省科学技术情报研究院，昆明 650051)
摘 要: RNAi(RNA interference) ，即 RNA 干扰是由与靶基因同源的内源或外源双链 RNA(double stranded RNA，dsR-
NA)所引发的一种在动植物中普遍存在的基因沉默现象。它最早在植物体中被发现，现在已发展成为一种生物技术，并成为
了后基因时代的重要研究手段。对 RNAi技术在生物基础、医学、药学和植物学等领域的研究成果进行综述。
关键词: RNAi 后基因组 功能基因组
Research Progress and Application of RNA Interference
Zhang Li
(Yunnan Academy of Scientific and Technical Information，Kunming 650051)
Abstract: RNA interference(RNAi) ，caused by endogenous or exogenous double-stranded RNA(dsRNA)with the same source as
target genes，refers to phenomenon of gene silencing widely existing in animals and plants． It is originally found in bodies of plant． Now
it has developed into a kind of biology technology and an important research instrument in post-genome era． This paper summarized the
achievements of studies on RNAi technology in biology，medicine，pharmacy，botany，and other fields．
Key words: RNA interference Post-genome Function genes group
收稿日期:2011-01-06
作者简介:张俐，女，硕士研究生，助理研究员，研究方向:科技查新及项目申请管理;E-mail:24872537@ qq． com
1 RNAi的发现
1989 年，Matzke等［1］首次报道了启动子介导的
序列同源性基因共转染烟草，可引起转基因表达发
生沉默的现象。1990 年，Napoli 等［2］把已知色素基
因置于强启动子后，导入矮脚牵牛花中，试图加深牵
牛花的颜色，结果却发现花的颜色全部或部分变白。
该现象在当时被称为“共抑制”(co-suppression) ，即
导入基因后，该基因和牵牛花内源的着色基因都被
抑制了。1995 年，康奈尔大学的 Guo 等［3］尝试用反
义 RNA去阻断线虫的 par-1 基因表达，结果发现反
义 RNA的确能阻断目的基因的表达，但作为对照的
正义 RNA，虽不能与活性 RNA 结合，也照样能引发
抑制。1998 年，Fire［4］将双链 RNA(dsRNA)———正
义链与反义链的混合物注入线虫后，结果出现了比
单独注入单链要强得多的沉默，并且导致子一代同
源基因的沉默。这种现象被称为“RNA 干扰”(即
RNAi，RNA interference)。同时，这也是人们第一次
对 RNAi技术的应用。随后的研究发现，RNAi 现象
在多种生物中存在，如线虫、果蝇、斑马鱼、真菌以及
植物等，生物体可利用 RNAi 来抵御病毒的感染，阻
断转座子的作用［5］。
2 RNAi的定义
目前对 RNAi 的定义有很多种，不同的资料对
其定义的侧重点也不尽相同，如果将 RNAi 看作一
种生物学现象，可以有以下定义: (1)RNAi 是由双
链 RNA介导的、由特定酶参与的特异性基因沉默现
象，它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基
因的表达; (2)RNAi 是有 dsRNA 参与指导的，以外
源和内源 mRNA为降解目标的转基因沉默现象，具
有核苷酸序列特异性的自我防御机制，是一种当外
源基因导入或病毒入侵后，细胞中与转基因或入侵
病毒 RNA 同源的基因发生共同基因沉默的现象。
RNAi这种现象已被证实在植物中广泛存在，它可能
是生物的发育调控及抗外源或内源侵染的一种普遍
机制。2002 年，该发现被 Science杂志评为十大科技
突破之一。
2011 年第 7 期 张俐:RNAi技术应用的研究进展
如果将其作为一门生物技术，则可以定义为:
(1)RNAi是指通过反义 RNA与正链 RNA形成双链
RNA特异性地抑制靶基因的现象，它通过人为地引
入与内源靶基因具有相同序列的双链 RNA(正义
RNA和反义 RNA) ，从而诱导内源靶基因的 mRNA
降解，达到阻止基因表达的目的; (2)RNAi 是指体
外人工合成的或体内的 dsRNA 在细胞内特异性的
将与之同源的 mRNA 降解成 21 － 23 nt 的小片段，
使相应的基因沉默的技术; (3)RNAi 是将与靶基因
的 mRNA同源互补的 dsRNA导入细胞，特异性地降
解该 mRNA，从而产生相应的功能表型缺失的技术，
属于转录后水平的基因沉默(post-transcriptional gene
silence，PTGS)。
各种不同定义虽然说法不同，但所描述的事实
是大体相同的，即 RNAi 就是指由 dsRNA 介导的基
因沉默现象。
3 RNAi的分子机制
目前研究认为，RNAi的过程可能包括起始和效
应两个阶段。在起始阶段，加入的小分子 RNA被切
割为 21 － 23 nt长的小分子干扰 RNA片段(small in-
terfering，RNAs，siRNAs) ，其中一个称为 Dicer 的酶，
是 RNaseⅢ家族中特异识别双链 RNA 的一员，它能
以一种 ATP依赖的方式逐步切割由外源导入或者
由转基因、病毒感染等各种方式引入的双链 RNA，
将 RNA降解为 19 － 21 bp 的双链 RNAs(siRNAs) ，
每个片段的 3端都有 2 个碱基突出。在 RNAi 效应
阶段，siRNA双链结合一个核酶复合物从而形成所谓
RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing com-
plex，RISC)［5］。激活 RISC 需要一个 ATP 将小分子
RNA解双链的过程，激活的 RISC 通过碱基配对定
位到同源 mRNA转录本上，并在距离 siRNA 3端 12
个碱基的位置切割 mRNA［6］。尽管切割的确切机制
尚不明了，但每个 RISC 都包含一个 siRNA 和一个
不同于 Dicer的 RNA酶。另外，还有研究表明，含有
启动子区的 dsRNA在植物体内同样被切割成 21 －
23 nt 长的片段，这种 dsRNA 可使内源相应的 DNA
序列甲基化，从而使启动子失去功能，使其下游基因
沉默。
4 RNAi技术的应用现状
近年来，作为一种高效、特异性强的基因阻断技
术，RNAi 技术发展迅速，在生物学基础、医学、药学
和植物学等很多领域的研究均得到较大发展。
4. 1 RNAi在基础学方面的研究
4. 1. 1 真核细胞基因功能的研究 随着基因测序
技术和生物信息学的不断发展，果蝇、线虫、水稻、小
鼠和人类基因组测序已经完成，而基因功能的研究
步伐却相对缓慢。与传统的基因功能研究方法(如
基因敲除、反义 RNA 技术等)相比，RNAi 技术是一
种高效、特异、快捷和成本相对低廉的基因功能研究
手段。利用 RNAi技术，可以在 RNA 水平部分阻断
某基因的表达，获得功能性丧失，进一步研究相关基
因的功能。Dunn 等［7］利用 RNAi 技术针对海葵肌
动蛋白和半胱氨酸蛋白酶这两个基因，用原位杂交
的方法证实这两个基因的表达均受到抑制，进而研
究该基因的功能。
4. 1. 2 信号转导通路的研究 利用 RNAi 技术可
以容易地确定复杂的信号转导途径中相关基因的上
下游关系及其作用。James 等［8］应用 RNAi 技术研
究了果蝇细胞系中胰岛素的信号传导途径，取得了
与已知胰岛素信号通路完全一致的结果。另外，基
因组范围的 RNAi表型筛选已成为研究基因在特殊
细胞功能和生物活性中作用的一种有效方法，但对
于相关基因之间的相互关系还是不能确定。
4. 1. 3 其他基础研究 除了以上两个主要应用方
面外，RNAi 技术还被应用于生理学、生长发育过程
等方面的基础研究中。Palmer 等［9］利用 RNAi 技术
进行动物细胞离子通道生理学的研究和应用。
4. 2 RNAi在医学方面的研究
4. 2. 1 利用 RNAi 建立疾病模型 传统的建立人
类疾病动物模型是利用基因敲除和 Cre-LoxP sys-
tems方法，但是如果目的基因是小鼠发育必需基因
的话，这些方法就会受到很大的限制。RNAi技术将
是建立转基因动物模型的新的工具，随着该技术的
发展，它可以通过使组织特异的基因功能灭活，不再
需要条件定向小鼠和组织特异重组小鼠，因而转基
因动物将是使用更加广泛的生物研究工具［10］。
遗传基因工程小鼠已被广泛用于建立人类癌症
模型，模型小鼠模拟人类癌症相应的形态学，组织病
理学、表型和基因型。这样的疾病模型对于分析特
殊癌症基因和修饰基因的作用、评价常规癌症治疗
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生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2011 年第 7 期
和新药、鉴定癌症肿瘤生长标记、分析肿瘤微环境对
肿瘤形成的影响、定义潜伏期和肿瘤发展分期等都
优于传统的转基因的疾病模型。目前，乳腺、胰腺、
肠、结肠和前列腺癌症的基因工程小鼠模型已经构
建，而脑、卵巢、颈和皮肤癌症模型正处于研究的初
期阶段［11］。RNAi除了被用于建立癌症疾病模型外，
也用于其他疾病模型的建立和保护方面。Shcherbata
等［12］利用遗传和 RNAi 诱导果蝇细胞激化和肌营
养不良表型;Kim 等［13］构建重组体慢病毒将 shR-
NAs定向转移到保守的柯萨奇肠道病毒序列中，用
于防治病毒性心肌炎，提高病毒性心肌炎动物模型
的成活率。但是利用 RNAi建立的疾病动物模型的
性状持续时间不太长，而且不一定能被稳定遗传，还
有其他问题有待继续研究。
4. 2. 2 RNAi抗病毒治疗 目前，RNAi在抗病毒中
的研究主要是设计相应的 siRNA，诱发特异的 mR-
NA降解，从而发挥有效的抗病毒作用。美国麻省
理工大学(MIT)的 Novina最早开展了利用 RNAi 抗
HIV的研究，开启了利用 RNAi 治疗病毒性疾病的
先河。随后，又有学者参与到这个研究中来，他们针
对 HIV生活周期的不同阶段设计了多种 siRNA，针
对 HIV病毒 gag、tat、rev和 nef等基因的 siRNA可用
以控制病毒复制。研究证实针对病毒基因组的 gag
区域的 siRNA可以有效的将病毒的基因“沉默”，抑
制 HIV病毒的复制能力［13，15，16］。此外，还有人开展
了 RNAi 针对其他病毒，如呼吸道合胞病毒、SARS
病毒、脊髓灰质炎病毒等的作用的研究，如用脊髓灰
质炎病毒基因组的 siRNA 处理人类和鼠的细胞，可
明显减少子代病毒的数量，并能促进病毒从感染细
胞中清除的速度［17］。
4. 2. 3 RNAi在肿瘤治疗中的研究 RNAi 技术具
有高效沉默特定靶基因的特点，在确定单个基因在
肿瘤发生发展中的作用以及探索肿瘤的基因治疗方
面是一种强有力的研究工具，因此其应用十分广泛。
原癌基因的活化和 /或抑癌基因的失活会导致
肿瘤的发生，基于 RNAi 技术在单基因研究中的优
势，利用 RNAi抑制肿瘤细胞内的癌基因和抑癌基
因的功能表达，分析其表型变化，有利于揭示肿瘤发
生发展的分子机制，从而为肿瘤的诊断和治疗提供
标记物和治疗靶点。Wang等［18］用 RNAi干扰 HeLa
细胞中 CML66 的表达后发现 HeLa 细胞的增殖、侵
袭和转移能力受抑，进一步研究其机制发现 CML66
表达受抑后 cathepsin L、MMP15、uPAR、VEGF、COX-
2、S100A4、MUC1、MDM2 和 RAC1 均下调，从而推断
出 CMI 66 作为致癌基因通过多途径促进肿瘤的增
殖、侵袭和转移。
应用 RNAi技术对肿瘤侵袭与转移的发生机制
及有关基因的改变进行研究，有助于加深理解恶性
肿瘤的生物学本质。Shin 等［19］通过 RNAi 技术敲
除 eaveolin-1 表达，从而调节血管细胞黏附分子 1
(VCAM-1)的表达，使得依赖于 VCAM-1 的肿瘤细
胞的黏附显著受抑;Tsuchiya 等［20］通过 RNAi 制备
Id1、Id3(Inhibitor of DNA binding proteins，Id)双倍敲
除的胃癌细胞系 MKN45，证实 Id1、Id3 的敲除显著
抑制胃癌细胞腹膜转移。Jiang 等［21］通过 RNAi 抑
制 MDA-MB-231 和 MCF-7 中 MTA1 基因的表达，从
而下调 ERα的表达，结果使这两株乳腺癌细胞的侵
袭活性下降。
另外，Wang等［22］设计了针对目前所知的最强
的凋亡抑制因子———生存素(survivin)表达的
RNAi，导入人食管鳞状上皮细胞癌细胞系 KYSE510
中，证实下调 survivin 可以强烈抑制体内和体外癌
细胞生长，推测这种抑制可能是通过诱导凋亡的增
强。该研究可加深对食管癌发生机制的了解，而且
说明 survivin 可能是治疗食管癌潜在的靶位点，
RNAi具有潜在的治疗价值。目前国内利用 RNAi
抑制 survivin 的表达在胰腺癌、宫颈癌、肺癌、大肠
癌、神经母细胞癌、骨肉瘤细胞和白血病细胞中均有
研究，不过大部分还停留在体外研究阶段。
4. 3 RNAi在药学方面的研究
利用 RNAi进行药物研究利用 RNAi 能够特异
高效地抑制基因表达，获得去基因功能表型，能够在
短时间内大规模筛选靶点，从而实现了在细胞水平
和动物水平筛选药靶和评定药靶［23］。Hamami-
chi［24］利用 RNA 干扰，系统屏蔽帕金森病模型中将
近 900 个候选基因和通路，找到了两个帕金森病遗
传易感性位点和治疗靶点，从而为该疾病的治疗奠
定基础。
RNAi在被广泛应用于功能基因组研究确定了
大量潜在的药物作用靶点的同时，也被证实其作为
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新一代基因治疗药物的可能性。2006 年，美国 Acu-
ity制药公司生产的用于治疗湿性老年黄斑病变的
RNAi 药物———Bevasiranib 在 RNAi 临床试验方面
取得成功，它在疗效、安全性方面都优于常规药物。
除 Acuity制药公司外，另有两家公司也在进行 RNAi
药物的开发，一是 Alnylam Pharmaceuticals，他们开
发的 RNAi药物用来治疗呼吸道合胞病毒、流行性
感冒、帕金森病和高胆固醇血症等;二是 Sirna Ther-
apeutics，他们开发治疗 ADM 的 RNAi 药物 Sirna-
027 已经进入 I 期临床。其他方面的应用如治疗
Huntington病和哮喘以及 COPD 也进入临床前研究
阶段。但是 RNAi 药物仍存在如给药途径、使用安
全性等方面的问题(信息来源于互联网 http:/ /
www． ganbaobao． com． cn /html /33 / t-339333． html)。
4. 4 RNAi在植物学方面的研究
RNAi现象首先是在植物研究中发现的，因此
RNAi技术在植物方面的应用研究也比较深入，包括
植物功能基因组的研究、植物生长发育的研究、植物
抗病性方面的研究和植物改良方面的研究等多个
领域［25］。
4. 4. 1 植物功能基因组的研究 随着后基因组时
代的到来，人们越来越需要大规模、高通量地研究基
因的功能。由于 RNAi具有高度的序列专一性和有
效的干扰活力，可以特异地使某些基因沉默，从而获
得功能丧失或降低突变。因此，它可以作为研究基
因组学的一种有效工具。
在 2002 年 11 月，欧洲第五计划(the Arabidopsis
genomic RNAi knock-out line analysis，AGRIKOLA)就
已准备用 RNAi 技术来研究拟南芥所有基因(约
25 000个)的功能，方法是利用拟南芥所有基因片段
构建组成型和诱导型 RNAi 载体，通过农杆菌介导
转化拟南芥获得 4 000 多个组成型 hpRNA植株［26］。
另外，Travella 等［27］在构建的 PDS-RNAi 和 EINI-
RNAi的六倍体小麦转基因作物中，成功地抑制了目
的基因。Lawrence 等［28］也曾用拟南芥着丝点甲基
化相关的 dsRNA，对拟南芥的四倍体进行 RNA 干
扰，发现拟南芥的四倍体中对应的与甲基化有关的
mRNA含量水平剧减。这些都可以证明 RNAi 技术
是多倍体植物功能缺失突变很好的工具。
4. 4. 2 植物生长发育及新品种培育的研究 雄性
不育是高等植物生命活动的一个常见现象，在农业
上有巨大的应用价值。Cigan 等［29］利用 RNAi 技术
直接沉默玉米的花粉囊基因表达的启动子 MS45，从
而抑制花粉囊的形成，形成玉米的雄性不育株。利
用 RNAi技术可以创造一些优良的不育材料。Mori-
toh等［30］观察 OSGEN-L-RNA 的水稻植株，发现一
部分育性很低，一部分水稻雄性不育，找到了水稻的
雄性不育材料。
经济作物的作用成分含量增加或降低，可以提
高作物的经济价值和利用效率。张银波等［31］利用
RT-PCT技术克隆了油菜 PEP 基因片段并构建了对
应于 PEPASE基因的 RNAi载体，以利用 RNAi技术
抑制 PEPASE基因的表达，使代谢流偏向油脂合成，
从而提高油菜籽粒中的油脂含量。另外，还有采用
果实特异启动子结合 RNAi技术抑制番茄内源光形
态，建成调节基因 DET 的表达，结果使再生植株中
DET1 的表达下降，类胡萝卜和类黄酮含量明显升
高，而果实的其他品质参数没有发生大的改变。这
些均表明利用器官特异基因的沉默可以改善植物营
养价值。另外，Shinjiro等［32］利用 RNAi技术对控制
咖啡因合成的基因进行抑制，使材料中的咖啡因含
量降低了 50% －70%。
RNAi技术可针对植物的一些表型进行改良，这
为人们生活增添了许多乐趣，也增加了一些植物更
多经济价值;从另一层次来说，该技术丰富了植物的
品种，尤其是对花卉品质的改良。日本生物研究所
使用 RNAi技术诱导花色和类黄酮生物合成的关键
酶查尔酮合成酶(CHS)基因沉默，成功地将花由原
来的蓝色变为白色和粉色，创造了新的商品花卉。
澳大利亚和日本的研究者通过去除玫瑰中 DRF 基
因，培育出了世界上唯一的蓝玫瑰［33］。这些都显示
了 RNAi技术在调节花卉的花色等观赏器官方面所
具有的独特的经济价值。
4. 4. 3 植物抗病性研究 利用 RNA介导的抗病性
机制，采用表达病毒来源的 dsRNA是目前得到抗病
性转基因植株很有效的方法。许多研究者正通过此
技术进行植物抗病毒方面的研究，而其中应用最多
的是利用农杆菌介导的转化将 dsRNA 整合到植物
基因组中，然后检测转化体对病毒的抗性，或利用农
杆菌瞬时转化系统，在 dsRNA瞬时表达期间对植物
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生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2011 年第 7 期
体进行病毒感染检测，以确定 dsRNA介导的病毒抗
性的有效性。
当前已有大量关于 RNAi 技术用于植物病毒防
治方面的报道，但技术还不是太成熟。首先，并不是
所有的 RNA序列都比较容易接近 siRNA被识别、切
割，有些可能藏在高度折叠区而不易被 siRNA 识
别。其次，病毒复制过程易发生突变，抗体往往无法
长期对其发挥作用。另外，还需解决遗传稳定性方
面的问题。所以，RNAi在植物病毒防治方面还应进
行更深入细致地研究。
5 小结
总之，RNAi不仅能大大推动人类后基因组计划
(蛋白组学)的发展，还在基因治疗、新药开发等医
学和药学研究领域，以及植物品种改良，丰富物种多
样性及提升植物经济价值等领域产生深远影响。尽
管目前对 RNAi的研究还不够深入，RNAi 技术还不
够完善，但 RNAi 现象作为一种自然界普遍存在的
生命现象，由其发展而来的 RNAi 技术必将在生命
科学应用领域发挥重要的作用，其应用前景将十分
广阔。
参 考 文 献
［1］Matzke MA，Primig M，Trnovsky J，et al． Reversible methylation and
inactivation of marker genes in sequentially transformed tobacco
plants． EMBO，1989，8:643-649．
［2］Napoli C，Lemieux C，Jorgenson R. Introduction of a chimeric chal-
cone synthase gene in petunia results in reversible co-suppression of
homologous genes in trans． Plant Cell，1990，2(4) :279-289．
［3］Guo S，Kemphues KJ． par-1，a gene requiredfor establishing polariry
in C． elegans embryos，encodes a putative Ser /Thr kinase that is a-
symmetrically distributed． Cell，1995，81(4) :611-20．
［4］Fire A，Xu S，Montgomery MK，et al． Potent and specific genetic in-
terference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans． Na-
ture，1998，391:806．
［5］Zamore PD，Tuschl T，Sharp PA，et al． RNAi:double-stranded RNA
directs the ATP-dependent cleavage of mRNA at 21 to 23 nucleotide
intervals． Cell，2000，101(1) :25．
［6］ Bass B． Double-stranded RNA as a template for gene silenceing．
Cell，2000，101:235-238．
［7］ Dunn SR，Phillips WS，Green DR，et al． Knockdown of actin and
caspase gene expression by RNA interference in the symbiotic anem-
one Aiptasia pallida． Biol Buu，2007，212(3) :250-258．
［8］ James CC，Carolyn AW，Nancy SL，et al． Use of double-stranded
RNA interference in Drosophila cell lines to dissect signal transduc-
tion pathways． RNAs，2000，97:6499-6503．
［9］Palmer ML，Fahrenkrug SC，O’Grady SM. RNA interference and ion
channel physiology． Cell Biochem Biophys，2006，46(2) :175-191．
［10］Ristevski S. Making better transgenic models:conditional，temporal，
and spatial approaches． Mol Biotechnol，2005，29(2) :153-163．
［11］Szymanska H. Genetically engineered mice:mouse models for canc-
er research． Postepy Hig Med Dosw，2007，61:639-645．
［12］Shcherbata HR，Yatsenko AS，Patterson L，et al． Dissecting muscle
and neuronal disorders in a Drosophila model of muscular dystro-
phy． EMBO J，2007，26(2) :481-493．
［13］Novina CD． Murray MF，Dykxhoom DM． et al． siRNA directed inhi-
bition of HIV-1 infection． Nat Med，2002，8(7) :681-686．
［14］Kim YJ，Ahn J，Jeung SY，et a1． Recombinant lentivirus-delivered
short hairpin RNAs targeted to conserved eoxsackievirus sequences
protect ag ainst viral myocarditis and improve survival rate in an an-
imal model． Virus Genes，2008，36(1) :141-14．
［15］Capadici J，Kariko K，Weissman D. Inhibition of H1V infection by
small interfering RNA mediated RNA interference． Immunol，2002，
169(11) :5196．
［16］ Jacque JM，Triques K，Stevenson M. Modulation of HIV replication
by RNA interference． Nattire，2002，418(6896) :435-8．
［17］康洁，刘福林． RNAi 的抗病毒作用及其机制． 现代免疫学，
2004，24(5) :439-441．
［18］Wang Q，Li M，Wang Y，et al． RNA interference targeting CM L66，
a novel tumor antigen，inhibits proliferation，invasion and metastasis
of HeLa cells． Cancer Lett，2008，269(1) :127-38．
［19］Shin J，Kim J，Ryu B，et al． Caveolin-l is associated with VCAM-1
dependent adhension of gastric cancer cells to endothdial cells． Cell
Physiol Biochem，2006，17(5 － 6) :211．
［20］Tsuchiya T，Okaji Y，Tsuno NH，et a1． Targeting Idl and Id3 inhib-
its peritoneal metastasis of gastric cancer． Cancer Sci，2005，96
(11) :784-90．
［21］ Jiang QM，Zhang H，Zhang P，et al． Alteration of ERalpha expres-
sion and tumor invasion by RNA interference against metastasis as-
sociated-1 gene in human breast cancer cells． Zhonghua Bing Li
Xue Za Zhi，2008，37(2) :118-23．
［22］Wang Y，Zhu H，Quan L，et al． Downregulation of survivin by RNAi
inhibits the growm of esophageal carcinoma cells． Cancer Biol Ther，
2005，4(9) :974-8．
［23］Brummelkamp TR，Bernards R. New tools for functional mammalian
cancer genetics． Nat Rev Cancer，2003，3(10) :781-789．
［24］Hamamichi S，Rivas RN，Knisht AL，et al． Hypothesis-based RNAi
screening identifies neuroprotective genes in a Parkinson’s disease
model． Proc Nail Acad Sci USA，2008，105(2) :728-733．
［25］张相锋，闫万理． RNAi在植物中的研究进展． 伊利师范学院学
报:自然科学版，2009(3) :42-46．
85
2011 年第 7 期 张俐:RNAi技术应用的研究进展
［26］陈李淼，赵琳，郝迪萩，等． 植物中 RNA 干扰技术的研究与应
用．东北农业大学学报，2009(10) :122-128．
［27］ Travella S，Klimm TE，Keller B. RNA Interference-based gene si-
lencing as all efficient tool for functional genomics in hexaploid
bread wheat． Plant Physiology，2006，142:6-20．
［28］Lawrence RJ，Craig S. Transgene-induced RNA inferference:a strat-
egy for overcoming gene redundancy in polyploids to generate loss
offunction mutations． Plant，2003，36:114-121．
［29］Cigan AM，Unger-Wallace E，Haug-Collet K，et al． Transcriptional
gene silencing as a tool for uncovering gene function in maize．
Plant，2005，43:929-940．
［30］Moritoh S，Miki D，Akiyama M，et al． RNAi-mediated silencing of
OsGEN-L(OsGEN-like) ，a new member of the RAD2 /XPG nucle-
ase family，cause male sterility by defect of microspore development
in rice． Plant Cell Physiology，2005，46:699-71．
［31］张银波，江木兰，胡小加． 油菜 PEPase 基因的克隆及其对应
RNAi载体的构建．中国油料作物学报，2005，27(1) :1-4．
［32］Ogita S，Uefuji H，Yamaguchi Y，et al． Producing decaffeinated cof-
fee plants． Nature，2003，423(6942) :823．
［33］杨小二． RNA技术及其在植物分子生物中的应用．分子植物育
种，2005，3(4) :571-574．
(责任编辑 狄艳红
櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧
)
(上接第 53 页)
［43］刘文华，王义良，徐安龙，等．玫瑰红绿海葵触手 cDNA 表达文
库的构建和初步分析．生物工程学报，2002，18(6) :749-752．
［44］成岩．重组海葵毒素在毕赤酵母中表达的研究［D］．吉林:吉林
大学，2007:6-8．
［45］于华华，刘希光，李鹏程，等．水母毒素的研究现状．海洋科学，
2003，27(11) :27-29．
［46］高健．水母毒素的提取工艺分析．化工时刊，2007，21(9) :11-13．
［47］陈慧萍，吴文言，徐安龙．海洋肽类活性物质的研究概况．海洋
科学，2001，25(11) :25-31．
［48］苏秀榕，杨春，黄晓春，等．两种海蜇毒素的分子标记研究．海洋
与湖沼，2006，37(3) :206-210．
［49］阎红．白棘三列海胆的化学成分及药理活性研究［D］．吉林:吉
林农业大学，2008:5-6．
［50］Sea Urchin Genome Sequencing Consortium，et al． The Genome of
the Sea Urchin Strongylocentrotus purpuratus． Science，2006，314
(5801) :941-952．
(责任编辑 狄艳红)
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